王 洲,王 權(quán),王建國(guó),林阿朋,劉美劍,齊富剛
(江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇泰州 225300)
鱈魚(yú)是一種冷水魚(yú),由于肉質(zhì)鮮美深受消費(fèi)者的喜愛(ài),因此,了解其生命階段的營(yíng)養(yǎng)需求對(duì)發(fā)展和改進(jìn)養(yǎng)殖技術(shù)至關(guān)重要。迄今為止,大多數(shù)關(guān)于鱈魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)研究都集中在早期飼養(yǎng)階段,如通過(guò)早期使用干微顆粒飼料進(jìn)行人工飼養(yǎng),減少了勞動(dòng)強(qiáng)度(Jensen等,2011)。然而,早期階段飼料過(guò)于昂貴,成本效益不高,因此,了解飼料利用率對(duì)衡量生產(chǎn)成本至關(guān)重要(葉文紅,2019)。該階段飼喂以海洋類高蛋白為主的飼料可以改善鱈魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng),但在后續(xù)階段對(duì)生長(zhǎng)性能無(wú)顯著改善作用。因此,隨著鱈魚(yú)飼養(yǎng)制度的優(yōu)化,有必要評(píng)估日糧配方中的新成分,以促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育,減少魚(yú)粉使用。魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)學(xué)家對(duì)大豆蛋白質(zhì)來(lái)源飼料非常有興趣,因?yàn)樗鼈兒懈咚降牡鞍踪|(zhì),并能提供相對(duì)平衡的氨基酸,同時(shí)大豆蛋白也是許多魚(yú)類的一種魚(yú)粉替代蛋白原料,但未經(jīng)加工的大豆含有大量的抗?fàn)I養(yǎng)因子,會(huì)對(duì)某些物種的營(yíng)養(yǎng)、解剖和生理產(chǎn)生負(fù)面影響(吳玉波,2014)。因此,大豆加工精制物和生物加工混合物在作為魚(yú)粉替代品加入到魚(yú)飼料中時(shí)顯示了良好的生長(zhǎng)性能(段晶等,2019)。此外,有研究發(fā)現(xiàn),加工大豆蛋白成分可刺激固有免疫系統(tǒng),改變遠(yuǎn)端腸道微生物群的組成來(lái)影響?zhàn)B殖魚(yú)類生長(zhǎng)(李杰,2017)。但目前有關(guān)不同的大豆蛋白對(duì)鱈魚(yú)的研究信息有限,因此,本研究旨在評(píng)估日糧添加不同處理方式的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)生長(zhǎng)性能、體成分及免疫學(xué)指標(biāo)的影響。
1.1 日糧配方及動(dòng)物分組試驗(yàn)將體重一致的576條鱈魚(yú)隨機(jī)分配到4組,每組144條,分別飼養(yǎng)在4個(gè)水族箱中(36條/個(gè))。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(25%魚(yú)粉),處理組分別用20%的豆粕、大豆?jié)饪s蛋白和發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉。
表1 不同處理方式大豆替代魚(yú)粉日糧組成 及營(yíng)養(yǎng)水平
1.2 飼養(yǎng)管理在為期13周的試驗(yàn)中,水族箱的水溫維持在(23±1.5)℃,溶解氧維持在(7.0±0.8)mg/L。每天記錄飼料投喂量,試驗(yàn)結(jié)束后稱量體重。參考方衛(wèi)東等(2016)的方法計(jì)算生長(zhǎng)性能指標(biāo)和體成分。每個(gè)重復(fù)選擇5條魚(yú)進(jìn)行屠宰,分離肝臟、脾臟、內(nèi)臟脂肪和內(nèi)臟,稱重,計(jì)算器官重量與活體重的百分比,用于表示器官指數(shù)。
1.3 樣品采集及分析采集血液用于血液生化指標(biāo)分析,同時(shí)將分離的腎臟用于提取mRNA,樣品用于測(cè)定白細(xì)胞介素-8(IL-8)和TLR-22受體基因表達(dá)(Bakkemo等,2011)。
1.4 統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS軟件對(duì)試驗(yàn)分組進(jìn)行單因素方差分析,采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 不同處理方式的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)生長(zhǎng)性能及器官指數(shù)的影響由表2可知,日糧用20%不同加工方式的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)相對(duì)生長(zhǎng)率、外型指數(shù)、存活率和脾臟指數(shù)的影響無(wú)顯著差異(P>0.05)。豆粕組鱈魚(yú)的末重顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組(P<0.05),同時(shí),豆粕組和發(fā)酵豆粕組采食量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而對(duì)照組和豆粕組特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率顯著高于發(fā)酵豆粕組(P<0.05)。豆粕組鱈魚(yú)臟指數(shù)顯著高于其他組(P<0.05),而豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組內(nèi)臟指數(shù)及內(nèi)臟脂肪指數(shù)均顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組(P<0.05)。
表2 不同處理方式的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)生長(zhǎng)性能及器官指數(shù)的影響
2.2 不同處理方式的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)體成分的影響由表3可知,日糧用20%豆粕、大豆?jié)饪s蛋白和發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)機(jī)體總能、蛋白質(zhì)、水分和粗灰分含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。豆粕組鱈魚(yú)的體脂肪含量較大豆?jié)饪s蛋白組和發(fā)酵豆粕組顯著提高44.53%和41.85%(P<0.05),但與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表3 不同處理方式大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)體 成分的影響
2.3 不同處理方式大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)血液學(xué)及免疫指標(biāo)的影響由表4可知,日糧添加不同處理的大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量及血球容積的影響無(wú)顯著差異(P>0.05)。發(fā)酵豆粕組血液溶菌酶活性最高(P<0.05),豆粕和大豆?jié)饪s蛋白組其次,對(duì)照組最低(P<0.05)。對(duì)照組、豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組腎臟IL-8基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著高于發(fā)酵豆粕組(P<0.05),而豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組腎臟TLR-22基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組(P<0.05)。
表4 不同處理方式大豆替代魚(yú)粉對(duì)鱈魚(yú)血液生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響
本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),以20%豆粕替代魚(yú)粉時(shí)鱈魚(yú)的飼料效率表現(xiàn)最佳,這與Hansen等(2007)報(bào)道的結(jié)果一致,其結(jié)果也顯示出鱈魚(yú)對(duì)植物蛋白的耐受性,具有良好的蛋白質(zhì)消化率。Colburn等(2012)發(fā)現(xiàn),用不同比例的豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代50%的魚(yú)粉適合于幼大西洋鱈魚(yú)的生產(chǎn)。在本研究中,用20%發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉,鱈魚(yú)的飼料效率和特定生長(zhǎng)率均不佳。豆粕組鱈魚(yú)肝臟和內(nèi)臟脂肪指數(shù)顯著高于對(duì)照組,提示內(nèi)臟組織器官的發(fā)育得到改善。
由于與消化相關(guān)的酶在魚(yú)的整個(gè)生命階段都可能發(fā)生變化,因此,使用經(jīng)過(guò)測(cè)試的大豆成分對(duì)日糧配方進(jìn)行改進(jìn)是可能的。考慮到鱈魚(yú)由于這些因素的營(yíng)養(yǎng)吸收相對(duì)復(fù)雜,有必要進(jìn)一步評(píng)估這些大豆成分在鱈魚(yú)體內(nèi)的消化率,以更好地解釋生長(zhǎng)結(jié)果。因此,可以優(yōu)化添加水平以提高生長(zhǎng)性能(Aksnes等,2006)。盡管本研究未評(píng)估鱈魚(yú)對(duì)各種原料消化率的影響,但豆粕組鱈魚(yú)體脂肪含量顯著高于其他兩組大豆蛋白源。
血液生化指標(biāo)顯示,血球容積、血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板數(shù)量無(wú)顯著差異,這與Hansen等(2007)報(bào)道的結(jié)果一致。豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組溶菌酶活性無(wú)顯著差異,其中對(duì)照組最低,這可能與鱈魚(yú)本身血清溶菌酶活性很低有關(guān)。本研究還檢測(cè)了腎組織內(nèi)IL-8和TLR-22基因mRNA表達(dá)水平。IL-8是一種對(duì)白細(xì)胞具有趨化活性的促炎細(xì)胞因子,已被發(fā)現(xiàn)與大西洋鱈魚(yú)的應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)(Caipang等,2008),而TLR-22是一種先天性免疫受體,與dsRNA和細(xì)菌病原體識(shí)別有關(guān)(Paria等,2018)。基于豆粕組鱈魚(yú)腎臟中這兩種基因mRNA相對(duì)表達(dá)量提高,提示免疫和應(yīng)激反應(yīng)有所改善。
用20%豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代魚(yú)粉可以改善鱈魚(yú)生長(zhǎng)性能,對(duì)體成分和血液學(xué)指標(biāo)無(wú)負(fù)面影響,同時(shí)可提高TLR-22基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平??偟膩?lái)說(shuō),用豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代魚(yú)粉可以降低飼料成本。