杜仲葉水提物對(duì)湘西土雞生長發(fā)育及免疫功能的影響

宋金秋，燕麗娜，李 暉*，李中波

（1.湘西民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南吉首 416000；2.中國科學(xué)院植物園，湖北武漢 430000；3.懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南懷化 418000）

杜仲是我國的傳統(tǒng)中藥材，富含的活性物質(zhì)具有抗菌、消炎、提高免疫力的作用，且對(duì)種植環(huán)境要求不高，湘西地區(qū)的氣候較適合種植杜仲，因此，杜仲也可用于畜禽養(yǎng)殖中。杜仲皮是傳統(tǒng)中草藥中最為常見的藥材，而杜仲植株的其他部分往往被丟棄，但有研究表明，杜仲葉含有與杜仲樹皮非常相似的活性物質(zhì)（吳紅艷和彭呈軍，2019），杜仲葉中含有的綠原酸比杜仲樹皮更為豐富，綠原酸對(duì)提高動(dòng)物體抗老化能力和免疫力具有積極促進(jìn)作用，將杜仲葉提取物作為畜禽飼料添加劑具有綠色、安全、環(huán)保、低成本等優(yōu)點(diǎn)（左昕怡等，2019）。但目前關(guān)于杜仲葉提取物的研究多集中在對(duì)其功能性的探索方面，將其作為畜禽飼料添加劑的研究較少。因此，本試驗(yàn)選取湘西地區(qū)常見的土雜雞為研究對(duì)象，研究杜仲葉提取物在提高生產(chǎn)性能方面的作用，并探討其在湘西土雞日常飼料中的最適添加比例，以期為推進(jìn)杜仲葉提取物的廣泛應(yīng)用，發(fā)展湘西地區(qū)土雞養(yǎng)殖業(yè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與試劑從湘西自治州雞苗孵化場(chǎng)購買一批1日齡湘西土雞苗（300只）；EDTA抗凝劑；免疫球蛋白測(cè)定試劑盒。

1.2 主要設(shè)備高速冷凍離心機(jī)（型號(hào)：5810R）；普通離心機(jī)（型號(hào)：5430型）；日立生化分析儀（型號(hào)：7600）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（型號(hào)：RE-52AARE）

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 杜仲葉提取物的制備 將新鮮的杜仲葉研磨成泥，用超純水按1∶20倍體積稀釋，0.45 μm 微膜過濾，反復(fù)1次，得濃度為0.2 g/mL的濾液2000 mL；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)干燥濃縮，最終得到400 g杜仲葉水提物粉末，4℃保存。

1.3.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組 選取1日齡土雜雞苗300只，隨機(jī)分為5組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞，組I～I(xiàn)V為處理組，V組為對(duì)照組，分別按0.05%、0.1%、0.15%、0.2%的比例向處理組土雜雞日糧中添加杜仲葉提取物粉末，對(duì)照組只喂飼基礎(chǔ)日糧。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能 在飼養(yǎng)過程中，生長性能在試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱量各個(gè)重復(fù)湘西土雜雞體重，統(tǒng)計(jì)采食量，計(jì)算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2 免疫器官指數(shù) 在第21和42時(shí)別從每組隨機(jī)挑選3只雞，取其胸腺、法氏囊、脾臟等免疫器官，清洗干凈后進(jìn)行稱重、記錄，從而得到相應(yīng)的免疫器官指標(biāo)，根據(jù)免疫器官的重量與雞的體重計(jì)算出免疫器官指數(shù)。

1.4.3 血清中抗體 在飼養(yǎng)試驗(yàn)第21、42天早晨每組隨機(jī)挑選3只體征良好、體重相當(dāng)?shù)耐岭s雞，空腹?fàn)顟B(tài)下進(jìn)行翅靜脈采血。室溫環(huán)境靜置1～2h，然后在3000 r/min離心10 min，分離血清，采用免疫比濁法對(duì)血清中的IgA、IgM、IgG進(jìn)行測(cè)定，記錄結(jié)果。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示，用EXCEL和SPSS（20.0）軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雞生長性能的影響由表1可知，處理組的初始體重、終末體重、平均日采食量與對(duì)照組相比均差異不顯著（P＞0.05），但與對(duì)照組相比，0.15%處理組土雜雞平均日增重顯著提高13.14%（P＜0.05），料重比顯著降低2.97%（P＜0.05）。結(jié)果說明，飼料中添加杜仲葉水提物可提高湘西土雜雞的日增重，降低料重比，提高飼料轉(zhuǎn)化率。

表1 杜仲葉提取物對(duì)湘西土雞生長性能的影響

2.2 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雞免疫器官指標(biāo)的影響由表2可知，在第21、42天，處理組土雜雞的法氏囊、胸腺指標(biāo)隨杜仲葉提取物濃度的增加表現(xiàn)出先升高再降低的現(xiàn)象（P＜0.05），0.1%處理組土雞法氏囊指標(biāo)與對(duì)照組相比存在顯著差異，第21天時(shí)上升比例為6.68%，第41天時(shí)上升比例為20.3%（P＜0.05），而脾臟指標(biāo)無顯著差異（P＞0.05），0.15%處理組的土雜雞胸腺指標(biāo)在試驗(yàn)期間相比其他處理組差異性最顯著，在第21天時(shí)胸腺指標(biāo)上升8.84%（P＜0.05），第42天到達(dá)峰值，上升比例高達(dá)17.55%（P＜0.05）。

表2 杜仲葉提取物對(duì)湘西土雜雞免疫器官指標(biāo)的影響 g/kg

2.3 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雜雞血清中免疫球蛋白的影響由表3可知，不同處理組土雜雞血清中IgA和IgM含量與對(duì)照組相比無顯著差異（P＞0.05）。第21天時(shí)，與對(duì)照組相比，0.15%處理組土雜雞血清中IgG濃度上升最高，升高27.05%（P＜0.05），0.05%和0.1%處理組土雜雞IgG分別提高10.82%和15.01%（P＜0.05）；第42天時(shí)，0.05%和0.1%處理組土雜雞血清中IgG濃度相比對(duì)照組均有所升高，但無顯著差異（P＞0.05），0.15%處理組土雜雞血清中IgG第42天達(dá)到峰值，升高32.67%（P＜0.05）。添加0.20%處理組土雜雞血清中IgG濃度在第21、42天時(shí)表現(xiàn)出濃度下降情況（P＜0.05）。

表3 杜仲葉提取物對(duì)湘西土雞血清免疫球蛋白含量的影響

3 討論

3.1 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雞生長性能的影響研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，杜仲葉水提物不能明顯提高湘西土雞的平均日采食量，與陳玉敏等（2015）的研究結(jié)果相一致，也符合李燕舞等（2019）的研究。

3.2 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雞免疫器官指標(biāo)的影響目前常以胸腺、脾臟及法氏囊的重量作為衡量動(dòng)物免疫功能強(qiáng)弱的直接指標(biāo)，從試驗(yàn)數(shù)據(jù)看，不同比例杜仲葉水提物均能提高雞法氏囊和胸腺指標(biāo)，但比例為0.1%和0.15%杜仲葉水提物的促生長作用更強(qiáng)；此外，研究還發(fā)現(xiàn)在整個(gè)試驗(yàn)期，不同比例杜仲葉水提物均能提高雞脾臟指標(biāo)，但各組之間幾無差異，這表明杜仲葉水提物雖能在一定程度上提高雞的免疫力，但提升效果不顯著。上述結(jié)果與呂錦芳等（2010）研究結(jié)果相吻合，卻與其復(fù)方杜仲口服液可提高肉雞脾臟指數(shù)相悖。

3.3 杜仲葉水提取物對(duì)湘西土雜雞血清中免疫球蛋白的影響 動(dòng)物血清中的抗體水平直接反映動(dòng)物免疫功能水平，其中IgG、IgM是機(jī)體非常重要的免疫球蛋白。本試驗(yàn)結(jié)果表明，杜仲葉水提物對(duì)IgA、IgM的提升效果不顯著，但0.15%杜仲葉水提物能顯著提高IgG的含量，與丁浩軒和黃林（2020）提出的杜仲可有效改善黃羽肉雞免疫功能的研究結(jié)果相一致，也與上述不同比例杜仲葉水提物顯著提升土雞胸腺和法氏囊指數(shù)的結(jié)果相符，同樣暗示0.15%杜仲葉水提物能顯著提高湘西土雞免疫力。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同比例杜仲葉水提物對(duì)湘西土雞體重、免疫器官的發(fā)育及免疫力均有一定促進(jìn)和提高作用，但以添加0.15%的效果最好，但杜仲水提物促進(jìn)湘西土雞生長及提高其免疫功能的機(jī)制需進(jìn)一步研究。