CDX-2、β-catenin、P53的表達與胃癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系

盧麗花 江秋菊

胃癌是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率及死亡率較高，據(jù)調(diào)查顯示，每年約74萬人死于胃癌，病死率位居惡性腫瘤的第2位，嚴重威脅人們的生命[1]。胃癌早期癥狀不明顯，多數(shù)患者確診時已是中晚期，導(dǎo)致其預(yù)后差，因此，尋找與疾病相關(guān)的分子標(biāo)志物，了解胃癌的發(fā)展有助于胃癌的早期診斷，對改善患者預(yù)后具有重要意義。CDX-2是同源異型盒基因家族成員之一，是與人類關(guān)系最為密切的抑癌基因，參與胚胎發(fā)育，還能調(diào)節(jié)腸上皮細胞分化及增殖；β-catenin為Wnt/β-catenin信號通路的關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白，可參與腫瘤調(diào)控，在多種惡性腫瘤中表達異常[2]。已有研究證實，CDX-2、β-catenin在直腸癌發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[3]。P53基因是人體抑癌基因，其失活對腫瘤形成起重要作用[4]。CDX-2、β-catenin、P53均被證實與胃癌關(guān)系密切，但其與胃癌預(yù)后的關(guān)系尚不明確[5]。因此，本研究旨在探討CDX-2、β-catenin、P53的表達與胃癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，為探索新的胃癌預(yù)后指標(biāo)提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月-2021年1月本院收治的134例胃癌患者的組織標(biāo)本進行研究，設(shè)為病例組，并選取同期120例本院行健康體檢胃活檢組織標(biāo)本設(shè)為對照組。參照文獻[6]《胃癌診療規(guī)范》的診斷：伴有腹痛、腹脹等癥狀；嘔吐物為宿食；經(jīng)電子胃鏡檢查與活檢確診。病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）預(yù)計生存期≥3個月；（3）腫瘤未累及臨近臟器；（4）均接受胃癌根治術(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他臟器功能受損；（2）合并先天免疫性疾病；（3）溝通障礙；（4）血流動力學(xué)不穩(wěn)定；（5）哺乳期婦女；（6）近1個月使用糖皮質(zhì)激素；（7）依從性較差；（8）合并凝血功能障礙或血液系統(tǒng)疾病。病例組男70例，女64例；年齡29～73歲，平均（52.61±7.47）歲；賁門43例，胃體49例，胃竇42例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例，未轉(zhuǎn)移85例；根據(jù)預(yù)后情況分為死亡組35例，存活組99例。對照組男69例，女51例；年齡25～70歲，平均（52.39±7.13）歲。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究已獲得醫(yī)院倫理會批準(zhǔn)實施，入組人員均知情同意。

1.2 方法

所有組織標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，全自動脫水機前處理，包埋切片，切片厚度3 μm，65 ℃烤片60 min。經(jīng)充分烤片后的片子按照檢測試劑盒的要求，在Benchmark ULTRA全自動免疫組化儀進行相關(guān)抗原（CDX-2、β-catenin、P53）的檢測，運行結(jié)束后清洗玻片，中性樹膠封片，顯微鏡下觀察。UltraView universal DAB Detection Kit檢測試劑盒，購自羅氏公司；CDX-2（克隆號：EPR2764Y）、β-catenin（克隆號：MX043）、P53（克隆號：MX008）單克隆抗體，購自福州邁新公司。

1.3 觀察指標(biāo)及評價標(biāo)準(zhǔn)

（1）比較兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況。（2）分析CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關(guān)系。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果判斷：細胞質(zhì)或細胞核存在棕黃色顆粒即定義為陽性細胞。在光鏡下觀察，將每一張切片中棕黃色陽性細胞數(shù)＞10%定義為表達陽性，陽性細胞數(shù)≤10%定義表達陰性。（3）比較死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況。（4）進行CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預(yù)后的相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析和處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較

病例組CDX-2的陽性表達率為52.24%（70/134），高于對照組的18.33%（22/120）；β-catenin的陽性表達率為62.69%（84/134），高于對照組患者的9.17%（11/120）；P53的陽性表達率為73.88%（99/134），高于對照組患者的25.83%（31/120），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表1。

表1 兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較[例（%）]

2.2 CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關(guān)系

不同性別、年齡、腫瘤最大徑、腫瘤部位、組織分化程度患者的CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；有侵犯漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型為小腸型患者的CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關(guān)系

表2（續(xù)）

2.3 死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較

死亡組CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率分別為91.43%、85.71%、94.29%，均高于存活組的38.38%、54.55%、66.67%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 3。

表3 死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較[例（%）]

2.4 CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預(yù)后的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示，CDX-2、β-catenin、P53與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型及預(yù)后均呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表4 CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預(yù)后的相關(guān)性分析

3 討論

胃癌起源于胃黏膜上皮，位居上消化道惡性腫瘤的首位，發(fā)病率高，主要與飲食習(xí)慣、幽門螺桿菌感染、遺傳等有關(guān)。目前臨床治療胃癌的主要手段為手術(shù)、放化療等，但由于胃癌早期癥狀不明顯，多數(shù)患者確診時已是中晚期，且胃癌易向周圍組織、淋巴結(jié)等轉(zhuǎn)移，病情進展迅速，導(dǎo)致治療效果不理想，影響患者預(yù)后[7]。有研究顯示，侵襲和轉(zhuǎn)移被認為是胃癌致死的主要原因，而腫瘤轉(zhuǎn)移是一個多因素、多階段發(fā)展過程，涉及多種分子的改變[8]。因此，尋找能準(zhǔn)確預(yù)測胃癌預(yù)后的生物標(biāo)志物對改善患者預(yù)后具有重要意義。

CDX-2為同源異型盒基因家族的重要成員，可調(diào)節(jié)腸上皮細胞分化增殖，表達于正常腸黏膜上皮細胞，能維持腸黏膜的正常發(fā)育，在腸癌中發(fā)揮抑癌細胞的作用，有研究顯示，CDX-2在結(jié)腸癌中表達上調(diào)，且可隨細胞分化程度降低、腫瘤直徑增大而增強[9]。本研究結(jié)果顯示，病例組CDX-2的陽性表達率為52.24%（70/134），高于對照組18.33%（22/120），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型為小腸型患者的CDX-2陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。死亡組CDX-2陽性表達率均高于存活組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。CDX-2與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型及預(yù)后之間均呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)果表明，CDX-2在胃癌患者中表達較高，分析其原因可能是因為CDX-2過度表達能誘導(dǎo)了胃黏膜腸上皮化生的發(fā)生，從而調(diào)節(jié)腫瘤細胞增殖分化。

β-catenin是一種多功能蛋白，能維持機體正常生理平衡，在正常情況下，β-catenin蛋白存在于正常細胞的胞膜，基因突變后導(dǎo)致細胞核內(nèi)堆積，被認為是原癌基因，可導(dǎo)致癌性突變。有研究顯示，β-catenin參與胃癌的發(fā)生，參與胃癌細胞周期調(diào)控，促進細胞增殖[10]。本研究結(jié)果顯示，病例組β-catenin的陽性表達率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型為小腸型患者的β-catenin陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。死亡組β-catenin陽性表達率高于存活組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。進一步相關(guān)分析β-catenin與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型及預(yù)后呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)果表明，β-catenin在胃癌中呈高表達，與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。

P53屬于細胞調(diào)控基因，在細胞受到損傷時，P53可誘導(dǎo)細胞周期阻滯，使細胞在新的周期得到修復(fù)，從而抑制腫瘤的發(fā)生[11]。近年來被發(fā)現(xiàn)在多種癌癥腫瘤組織中呈高表達，廣泛參與細胞凋亡、分化和增殖等病理生理過程[12-13]。本研究結(jié)果顯示，胃癌患者P53的陽性表達率為73.88%（99/134），高于對照組患者的25.83%（31/120），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型為小腸型患者的P53陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果表明，P53在胃黏膜癌變過程中表達上調(diào)，分析其原因可能是因為胃癌的發(fā)生可使P53蛋白基因發(fā)生突變，通過加強細胞轉(zhuǎn)化從而加快惡化，從而參與胃癌的發(fā)生與發(fā)展。本研究結(jié)果還顯示，死亡組P53陽性表達率均高于存活組，且P53與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Lauren分型及預(yù)后之間均呈正相關(guān)，說明P53表達與胃癌預(yù)后有密切關(guān)系[14-15]。

綜上所述，胃癌組織中CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率升高，可能協(xié)同參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展，可作為評估胃癌患者預(yù)后的參考指標(biāo)，CDX-2、β-catenin、P53可成為新的胃癌治療靶點。