鄒婕,黃爍丹,丘建斌,莊宇嫦,王文芳,熊蓉,陳靜
(梅州市婦女兒童醫(yī)院,廣東 梅州 514021)
根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的最新數(shù)據(jù),超過全世界總?cè)丝诘?%,也就是4.66億人是殘疾性聽力障礙患者(其中成人占4.32億,兒童占3400萬)。耳聾患者大多有極重度聽力障礙,即基本或完全聽不見,按照是否合并有其他系統(tǒng)的病變,分為綜合征型耳聾和非綜合征型耳聾(non-syndrome hearing loss,NSHL)。NSHL大多為單基因遺傳病,以單個基因上的雙等位基因突變致聾為主,遺傳方式多種多樣,其中,常染色體隱性遺傳為最主要的遺傳方式,在遺傳性耳聾中的比例占80%[1]。目前,在42個常染色體隱性非綜合征型聽力損失(ARNSHL)患者的基因中,發(fā)現(xiàn)超過700個不同的突變。按遺傳性基因突變位點及病癥發(fā)展情況,遺傳性耳聾可以分為先天性耳聾、藥物性耳聾和遲發(fā)性耳聾。
研究對象為2017年10月-2018年10月梅州地區(qū)出生,在經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準,自愿進行遺傳性耳聾基因檢測的6629例新生兒,納入標準:①父母雙方民族均為漢族;②監(jiān)護人簽署知情同意書;③新生兒無凝血功能障礙。排除標準:①家族有其他遺傳病史;②新生兒伴有其他嚴重先天疾??;③新生兒先天發(fā)育異常或缺陷。男3502例,女3127例,男女比例為1:12。調(diào)查6629例新生兒遺傳病家族史和有關(guān)信息。監(jiān)護人簽署知情同意書后,進行新生兒足跟血液采集與耳聾基因檢測。
基因檢測 基因擴增儀、分子雜交儀及耳聾基因診斷試劑盒(廣東凱普生物科技股份有限公司)。
對6629例新生兒填寫采血卡并登記信息,完整而準確地填寫采血卡上的新生兒采血信息,確保所提供的聯(lián)系地址及電話是有效的。用一次性采血針采集足跟血前,須先對針刺部位消毒,采集時將血液充滿采血卡上方的3個直徑1cm大的濾紙圈。血樣采集后,裝于特制塑料袋內(nèi)及時送達梅州市婦女兒童醫(yī)院醫(yī)學(xué)遺傳中心。
采用統(tǒng)計軟件對本次研究所取得的數(shù)據(jù)進行分析,計數(shù)資料采用χ2檢驗,計量資料采取t檢驗,以均數(shù)±標準差()的形式對數(shù)據(jù)進行表示,以P<0.05代表有統(tǒng)計學(xué)意義。
梅州地區(qū)新生兒耳聾基因突變率最高的是GJB2基因的235delC位點,突變率為1.52%。其次是SLC26A4 (PDS)基因的c.IVS7-2 A>G位點,突變率為1.00%。第三是線粒體DNA 12S rRNA基因的1555 A>G位點,突變率為0.38%。第四是GJB2基因的c.299-300delAT位點,突變率為0.27%。第五是GJB3基因的c.538 C>T位點、SLC26A4基因的c.1229 C>T位點,突變率均為0.14%。其余SLC26A4基因的c.2168 A>G位點突變率為0.09%,GJB2基因的c.176-191del16bp、12S rRNA基因的m.1494 C>T、tRNASer(UCN)基因的m.7445 A>G,它們均為0.02%。另外,發(fā)現(xiàn)4例GJB2基因的c.235delC復(fù)合SLC26A4基因的c.IVS7-2 A>G雙重雜合突變,突變率為0.06%、1例GJB2基因的c.235delC復(fù)合SLC26A4 基因的c.1229 C>T雙重雜合突變,突變率為0.02%。詳見表1。
表1 6629例新生兒耳聾基因檢出情況
耳聾是一種病因復(fù)雜且嚴重的健康問題,研究表明新生兒的耳聾發(fā)病率約為1/1000,由于遺傳因素導(dǎo)致的耳聾約占50%~60%[2]。在我國,常見的遺傳性耳聾致病基因主要為GJB2、GJB3、SLC26A4、線粒體DNA。
GJB2基因突變而致聾的比例占50%~70%,是最為常見的遺傳性耳聾基因[3]。該基因編碼的蛋白包含266個氨基酸殘基構(gòu)成的縫隙連接蛋白,該蛋白和鄰近細胞的縫隙連接蛋白共同構(gòu)成一個完整的縫隙連接通道,為第二信使和小分子代謝物質(zhì)的重要通道,這些通道在物質(zhì)交換和信息傳導(dǎo)中具有重要作用。大多數(shù)高加索人群中,c.35delG突變是最常見的致病變異,約占GJB2突變的70%[4]。歐洲人群中的c.35delG攜帶率差異顯著,其中歐洲東南部最高。本研究對梅州地區(qū)新生兒耳聾基因進行調(diào)查研究顯示,未發(fā)現(xiàn)有c.35delG突變。據(jù)研究報道顯示[5],在日本人群中c.235delC是主要突變位點,占所有GJB2突變的比例高達73%。流行病學(xué)顯示,在中國和日本,最常見的GJB2突變主要為編碼區(qū)的c.235delC、c.35delG、c.176-191del16bp和c.299-300delAT 4個突變或缺失位點,占GJB2突變的比例高達80%。廣東省韶關(guān)市婦幼保健院新生兒耳聾基因檢測結(jié)果顯示,GJB2基因突變主要為c.235delC雜合突變和c.299-300delAT雜合缺失,GJB2基因雜合突變率為1.83%[6]。我們的研究結(jié)果顯示,在梅州地區(qū)新生兒GJB2基因的突變或缺失以c.235delC和c.299-300delAT雜合突變?yōu)橹鳎蛔兏怕史謩e為1.52%和0.27%。另外有1例c.176-191del16bp位點雜合突變,突變概率為0.02%,GJB2基因的總突變檢測率為1.81%。這一研究結(jié)果與韶關(guān)新生兒的數(shù)據(jù)較為接近,提示GJB2基因的突變類型和突變率在粵北和粵東(梅州)類似。
眾所周知,線粒體遺傳性耳聾的特征表現(xiàn)為母系遺傳,也被稱為母系遺傳性耳聾,在藥物性耳聾的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著非常重要的作用。在全球范圍內(nèi),可發(fā)現(xiàn)線粒體12S rRNA基因上m.1555 A>G 和m.1494 C>T的突變,并與NSHL和氨基糖甙類抗生素藥物致聾相關(guān)。據(jù)報道,我國人群的線粒體12S rRNA基因突變主要位點為m.1555 A>G和m.1494C>T,兩個位點總攜帶率在0.18%~0.40%[7]。我院6629例新生兒人群中m.1555 A>G位點突變攜帶率為0.38%,m.1494C>T位點突變攜帶率為0.02%,總突變檢測率為0.39%。梅州地區(qū)人群線粒體12S rRNA基因突變攜帶率符合全國流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)[8]。據(jù)報道[9],線粒體tRNA Ser(UCN)基因上的m.7445 A>G、tRNAHis基因上的m.12201 T>C與NSHL相關(guān)。這些突變會導(dǎo)致tRNA結(jié)構(gòu)和功能的變化。目前,發(fā)現(xiàn)的與NSHL相關(guān)的線粒體tRNA原發(fā)突變主要集中在tRNA Ser(UCN)基因[10]。本研究中發(fā)現(xiàn)1例攜帶tRNA Ser(UCN)m.7445 A>G突變,該突變會對tRNA Ser(UCN)前體的加工產(chǎn)生影響。
綜上所述,通過對梅州地區(qū)新生兒耳聾易感基因的篩查,我們發(fā)現(xiàn)梅州地區(qū)新生兒耳聾易感基因突變率為3.65%,其中主要以GJB2和SLC26A4兩個基因突變頻率最高,這一結(jié)果與我國其他地區(qū)耳聾易感基因突變類似。通過耳聾易感基因篩查,了解新生兒耳聾易感基因攜帶情況,為先天性耳聾兒童的診治提供完善的治療方案,為遲發(fā)性耳聾患者提供有效的干預(yù)措施。同時,通過篩查-遺傳咨詢等一系列的措施,對降低新生兒出生缺陷和提高我國人口素質(zhì)將大有裨益。