加溫飼養(yǎng)和定時(shí)飼喂對(duì)斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)和腸道發(fā)育的影響

張彩云 ，劉德穩(wěn) ，趙彩艷 ，林樹伯 ，高天增 ，李繼良 ，王鳳來

（1.河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，河南 鄭州 450052；2.德州學(xué)院，山東 德州 253023；3.河南廣安生物科技股份有限公司，河南 鄭州 450002；4.天津市寧河原種豬場(chǎng)，天津 301504；5.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，北京 100193）

飼養(yǎng)溫度對(duì)豬的體感舒適度、動(dòng)物福利、生產(chǎn)性能和腸道健康水平都有著直接的影響[1]。小腸是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要部位，腸道黏膜形態(tài)在很大程度上反映了仔豬對(duì)各種養(yǎng)分的消化吸收能力。腸道絨毛高度、隱窩深度以及腸壁厚度是衡量腸道健康和腸道發(fā)育的重要指標(biāo)。有關(guān)仔豬小腸絨毛生長(zhǎng)發(fā)育的研究證實(shí)，仔豬的斷奶應(yīng)激（Cera等，1988；）[2]、日糧更換（王猛等，2007）[3]和腸道環(huán)境等因素影響仔豬小腸絨毛高度和形態(tài)。斷奶仔豬的腸道黏膜形態(tài)與其消化機(jī)能有著密切關(guān)系，斷奶應(yīng)激對(duì)仔豬小腸絨毛和隱窩形態(tài)的影響，包括小腸絨毛萎縮，脫落，長(zhǎng)度減少，隱窩加深，從而引起消化吸收功能下降、造成仔豬生長(zhǎng)受阻。飼養(yǎng)管理因素影響斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)方面的研究相對(duì)較少，陳代文[4]的研究表明每天飼喂5 次對(duì)仔豬腸道損傷最輕。因此，仔豬斷奶后采用適宜的飼養(yǎng)溫度和飼喂模式可能是減緩仔豬斷奶后的應(yīng)激影響，促進(jìn)消化道的發(fā)育，增強(qiáng)腸道消化吸收養(yǎng)分的能力，從而促進(jìn)仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育的有效途徑。試驗(yàn)旨在研究對(duì)早期斷奶仔豬床進(jìn)行加溫處理以及采用定時(shí)飼喂的模式能否改善仔豬不同腸段的絨毛高度、隱窩深度和腸壁厚度，從而找出有利于斷奶仔豬腸道消化功能的適宜的飼養(yǎng)溫度和飼喂模式。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用2×2 因子設(shè)計(jì)（見表1）。飼養(yǎng)溫度的2 個(gè)因子為：1）28～30℃的加溫處理組，除爐火加溫外另有紅外線加熱器和電熱板加熱；2）23～25℃的低溫對(duì)照組（爐火暖氣管道舍內(nèi)加熱）；為爐火加溫。飼喂模式的2 個(gè)因子為別為每天6 次定時(shí)飼喂組和自由采食組。研究仔豬床加溫處理和和定時(shí)飼喂模式對(duì)斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)的影響。加溫處理組預(yù)試期2 d，正式試驗(yàn)期為14 d。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和日糧

21 日齡體重相近的斷奶仔豬240 頭（杜長(zhǎng)大），公母各半，隨機(jī)分配到4 個(gè)處理組，每個(gè)處理6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 頭仔豬，每個(gè)重復(fù)組飼養(yǎng)于同一欄。試驗(yàn)日糧的組成成分及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

封閉式豬舍，漏縫地板，環(huán)境條件良好。試驗(yàn)豬舍在舍的中間懸掛溫度計(jì)，每日早、中、晚3 次檢測(cè)舍內(nèi)環(huán)境溫度和相對(duì)濕度，保持溫度恒定。自由采食組料槽中不斷料。定時(shí)飼喂的時(shí)間為：6：00、9：00、12：00、15：00、18：00、21：00。飲水器自由飲水。做好豬舍徹底消毒、豬只驅(qū)蟲等工作。遵循其他常規(guī)的飼養(yǎng)管理程序，豬舍濕度及通風(fēng)等均滿足要求。環(huán)境衛(wèi)生條件良好。

1.4 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早晨9：00 屠宰取樣（屠宰前正常飼喂）。從試驗(yàn)處理組的各重復(fù)組中隨機(jī)抽取1 頭仔豬。頸靜脈放血處死，打開腹腔，立即結(jié)扎胰腺管、幽門瓣和回盲瓣，迅速取出胰腺、胃和小腸。胰腺和胃稱重后放入液氮中速凍。小腸被分為三段：十二指腸、空腸和回腸，它們分別被結(jié)扎后稱重（腸重+食糜）。在十二指腸近端、空腸近端、空腸遠(yuǎn)端1/4 處、回腸中段用利剪取下近1 cm 腸段，迅速放入備用的固定液中（甲醛100 mL；蒸餾水900 mL；NaH2PO44 g；Na2HPO46.5 g），擺勻，待做組織切片。

1.5 腸黏膜形態(tài)學(xué)指標(biāo)的測(cè)定

將取好的腸道樣品制成腸道組織切片。具體處理程序包括：修剪、水洗、脫水、浸蠟、包埋、切片、貼片、烤片和伊紅染色。將腸道組織切片置于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察、取圖并拍照，放大倍數(shù)為100，在腸道組織切片上選取10 個(gè)典型視野(絨毛完整、走向平直)，觀察腸絨毛和隱窩形態(tài)變化，用Motic Images Advanced 3.0 在40 倍下觀察，用目鏡測(cè)微尺測(cè)量視野最長(zhǎng)絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算兩者比值。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理

數(shù)據(jù)采用SPSS（12.0） 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，用鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析及多重比較。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 舍內(nèi)溫度對(duì)斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)的影響

舍內(nèi)溫度對(duì)斷奶仔豬不同腸段腸道形態(tài)的影響見表3。高溫飼養(yǎng)組（28～30℃）的仔豬空腸中段的絨毛高度顯著高于低溫飼養(yǎng)組（23～25 ℃）的仔豬（P＜0.05）。高溫處理組仔豬空腸中段的絨毛高度比低溫處理組仔豬空腸中段的絨毛高度高大約25%。高溫處理組仔豬十二指腸隱窩深度顯著低于低溫處理組仔豬十二指腸隱窩深度（P＜0.05）。另外，高溫處理組仔豬空腸中段的腸壁厚度極顯著低于低溫處理組仔豬空腸中段的腸壁厚度（P＜0.01）。

由表3 可知：加溫飼養(yǎng)組仔豬空腸中段的絨毛高度顯著高于低溫對(duì)照組。加溫飼養(yǎng)組仔豬十二指腸的隱窩深度顯著低于低溫對(duì)照組（P＜0.05）和加溫飼養(yǎng)組仔豬空腸中段的腸壁厚度極顯著低于低溫對(duì)照組（P＜0.01）。

表2 基礎(chǔ)日糧配方和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

2.2 定時(shí)飼喂對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響

飼喂模式對(duì)斷奶仔豬不同腸段腸道形態(tài)的影響見表4。定時(shí)飼喂飼養(yǎng)的仔豬空腸后段的絨毛高度極顯著高于自由采食飼養(yǎng)的仔豬（P＜0.01）。定時(shí)飼喂組仔豬空腸后段的絨毛高度比自由采食組仔豬空腸中段的絨毛高度高大約35%。定時(shí)飼喂組仔豬空腸后段隱窩深度顯著低于自由采食飼養(yǎng)的仔豬十二指腸隱窩深度（P＜0.05）。另外，定時(shí)飼喂組仔豬空腸中段的腸壁厚度顯著低于自由采食組仔豬空腸中段的腸壁厚度（P＜0.05）。

由表4 可知：定時(shí)飼喂飼養(yǎng)的仔豬空腸后段的絨毛高度極顯著高于自由采食對(duì)照組飼養(yǎng)的仔豬（P＜0.01）。定時(shí)飼喂組仔豬空腸中段的腸壁厚度顯著低于自由采食組（P＜0.05）。定時(shí)飼喂的仔豬空腸后段隱窩深度顯著高于自由采食對(duì)照組飼養(yǎng)的仔豬（P＜0.05）。

2.3 加溫飼養(yǎng)和飼喂模式組合因素對(duì)斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)的影響

加溫和飼喂方式對(duì)斷奶仔豬不同腸段腸道形態(tài)的影響見表5。加溫定時(shí)飼喂組飼養(yǎng)的仔豬空腸后段的絨毛高度極顯著高于其他處理組。低溫自由采食組飼養(yǎng)的仔豬空腸后斷的絨毛高度極顯著低于其他處理組（P＜0.01）。低溫定時(shí)飼喂組和高溫自由采食組空腸后斷的絨毛高度差異不顯著。另外，加溫定時(shí)飼喂組的仔豬十二指腸隱窩深度有低于其他處理組的趨勢(shì)（P=0.06）。加溫定時(shí)飼喂組的仔豬空腸中段的腸壁厚度極顯著低于其他處理組（P＜0.01）。

仔豬各組的空腸后段黏膜形態(tài)見圖1、圖2、圖3、圖4。

3 討論

隨著養(yǎng)豬生產(chǎn)集約化程度的不斷提高，仔豬早期斷奶已經(jīng)成為現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)中重要的生產(chǎn)技術(shù)。但是早期斷奶仔豬腸道發(fā)育尚未完善，易造成仔豬消化功能和屏障功能紊亂，腸道絨毛高度下降，隱窩深度加深，因而造成仔豬消化道消化吸收面積減少，進(jìn)而影響仔豬生長(zhǎng)性能及腸道健康（徐春蘭和汪以真，2004）[5]。絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和腸壁厚度反映了小腸的消化和吸收功能狀態(tài)，絨毛變短表示營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力降低，隱窩深度反映了小腸上皮更新的速度，更新過程減慢，則隱窩變淺。隱窩變淺表明腸上皮細(xì)胞成熟率上升，分泌功能增強(qiáng)。腸壁變薄有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。斷奶應(yīng)激和飼料抗原引起的過敏反應(yīng)導(dǎo)致仔豬腸道形態(tài)發(fā)生的負(fù)面變化，直接或間接造成仔豬消化和吸收功能紊亂（Pluske等，1997；Li 等1990，1991）[6-8]。Li 等[9]研究證明，斷奶后1 周的仔豬飼喂豆粕組的絨毛高度顯著低于奶粉組(P＜0.05)。通過電鏡掃描觀察發(fā)現(xiàn)，斷奶后1 周豆粕組的仔豬絨毛短而寬，而奶粉組絨毛，圓而且較細(xì)。隨著仔豬日齡的增長(zhǎng)，這種不正常的腸道變化會(huì)逐漸得到改善。Li 等[10]同時(shí)也發(fā)現(xiàn)，仔豬在斷奶后5 周(56 日齡)時(shí)，豆粕組和奶粉組仔豬腸道形態(tài)差異并不顯著。仔豬腸道形態(tài)的變化特別是小腸黏膜表面絨毛及微絨毛的形態(tài)變化直接反映了動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收的能力。小腸正常的絨毛結(jié)構(gòu)能有效地保障腸道的吸收表面積，在腸道長(zhǎng)度和直徑相同的情況下，絨毛越長(zhǎng)，密度越大，則吸收表面積也越大。腸道隱窩是腸細(xì)胞分裂最活躍的地方，腸絨毛頂部脫落的上皮細(xì)胞即由隱窩細(xì)胞向上移位而代替。隱窩變淺，表明細(xì)胞的成熟率上升，分泌功能強(qiáng)[9]。徐凱等[10]發(fā)現(xiàn)：持續(xù)低溫會(huì)降低斷奶仔豬的飼料養(yǎng)分消化率和生產(chǎn)性能并增加腹瀉率。因此持續(xù)低溫可能會(huì)對(duì)仔豬腸道的發(fā)育和消化機(jī)能有不良影響。

表4 不同飼喂方式對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響 μm

表5 加溫和飼喂模式組合因素對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響 μm

圖1 高溫定時(shí)飼喂空腸后段黏膜形態(tài)

圖2 高溫自由采食空腸后段黏膜形態(tài)

圖3 低溫定時(shí)飼喂空腸后段黏膜形態(tài)

圖4 低溫自由采食空腸后段黏膜形態(tài)

研究表明，23～25 ℃的舍內(nèi)溫度對(duì)于斷奶仔豬來說屬于低溫應(yīng)激。導(dǎo)致腸道發(fā)生了應(yīng)激反應(yīng)，使小腸結(jié)構(gòu)和功能將發(fā)生了損傷性變化，出現(xiàn)絨毛萎縮、隱窩加深現(xiàn)象，這將會(huì)影響?zhàn)B分的消化吸收并可能出現(xiàn)腹瀉。適宜的舍內(nèi)溫度和飼喂模式將有助于降低腸道應(yīng)激，維持好的腸道黏膜形態(tài)，保持腸道的健康，促進(jìn)仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，降低腹瀉率，提高生產(chǎn)性能。

4 結(jié)論

23～25 ℃較低的舍內(nèi)飼養(yǎng)溫度能引起斷奶仔豬腸道發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致腸黏膜損傷，腸道功能障礙。而28～30℃加溫飼養(yǎng)則能夠促進(jìn)斷奶仔豬腸道黏膜的生長(zhǎng)發(fā)育。每天進(jìn)行6 次定時(shí)飼喂的斷奶仔豬比自由采食仔豬更能維持較好的腸道黏膜形態(tài)。適宜的飼養(yǎng)溫度和飼喂模式有利于改善斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)，維持腸道健康。為斷奶仔豬提供適宜的環(huán)境溫度條件和合適的飼喂模式將改善仔豬的消化性能從而促進(jìn)仔豬生產(chǎn)性能和抗病力。