通用流感疫苗的研究進(jìn)展

江湖大川，金鵬飛綜述，朱鳳才審校

1.江蘇省疾病預(yù)防控制中心疫苗臨床評(píng)價(jià)所，江蘇 南京 210009；2.江蘇省疾病預(yù)防控制中心國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)腸道病原微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室南京醫(yī)科大學(xué)全球健康中心，江蘇 南京 210009

流行性感冒（簡(jiǎn)稱流感）給全球公共衛(wèi)生造成嚴(yán)重疾病負(fù)擔(dān)，接種疫苗是預(yù)防流感的最佳手段。由于流感病毒重要蛋白突變導(dǎo)致的抗原漂移，使該病毒能逃避目前疫苗引起的特異性免疫，因此，季節(jié)性流感疫苗的保護(hù)型別有限，需每年接種不斷更新的疫苗［1］。目前已上市季節(jié)性流感疫苗的保護(hù)效果僅有40%～60%［2］。開(kāi)發(fā)一種通用疫苗，可預(yù)防多種流感病毒株及其引起的全球大流行是最終的目標(biāo)。近兩年，美國(guó)眾議員和比爾及梅琳達(dá)·蓋茨基金會(huì)提出要加大對(duì)通用流感疫苗研發(fā)的財(cái)政支持和基金投入。

通用流感疫苗是一種覆蓋所有甲型及乙型流感病毒株，且不依賴于抗原漂移或血凝素（hemagglutinin，HA）／神經(jīng)氨酸酶（neuraminidase，NA）亞型的疫苗，包括目前已認(rèn)知的18種HA、11種NA亞型的甲型、Yamagata／Victoria系乙型流感病毒譜系及未來(lái)可能發(fā)生漂移的病毒株［3］。美國(guó)國(guó)家過(guò)敏和傳染病研究所（National Institute of Allergy and Infectious Diseases，NIAID）于2017年6月在題為“研制通用流感疫苗的途徑”的研討會(huì)中，提出通用流感疫苗的合理目標(biāo)是為全人群罹患由甲型流感病毒組1（H1、H2、H5、H6、H8、H9、H11 ～ H13、H16 及 H17）、組 2（H3、H4、H7、H10、H14 及 H15）引起的有癥狀流感提供至少12個(gè)月且≥75%的保護(hù)效力［4］?；诮陙?lái)在病毒免疫學(xué)、單克隆抗體、結(jié)構(gòu)生物學(xué)及蛋白質(zhì)工程學(xué)等科學(xué)領(lǐng)域的研究，開(kāi)發(fā)一種廣譜、提供持續(xù)免疫并針對(duì)多種流感病毒的通用疫苗是可行的［5-6］。

目前，通用流感病毒疫苗的幾個(gè)靶點(diǎn)主要包括HA 的保守莖部、基質(zhì)蛋白 2（matrix protein 2，M2）離子通道的胞外域（M2e）、核蛋白（nucleoprotein，NP）和基質(zhì)蛋白 1（matrix protein 1，M1）［3］。進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的通用流感疫苗見(jiàn)表1。本文對(duì)基于流感病毒不同結(jié)構(gòu)的通用疫苗種類、免疫原性、安全性及保護(hù)效力作一綜述，旨在為通用流感疫苗的進(jìn)一步研發(fā)提供臨床前及臨床理論依據(jù)。

表1 進(jìn)入臨床試驗(yàn)的通用流感疫苗一覽表Tab.1 Universal influenza vaccines in clinical trial

1 基于流感病毒HA莖部的通用疫苗

HA是流感病毒包膜上一種刺突，其結(jié)構(gòu)極不穩(wěn)定，易發(fā)生變異，可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。HA為一種三聚體，每個(gè)單體由更容易變異的球形頭部區(qū)域HA1和更為保守的莖部區(qū)域HA2組成［7］。近年來(lái)，針對(duì)HA莖部區(qū)域廣譜中和抗體（broad neutralizing antibody，bnAb）的通用流感疫苗是研究熱點(diǎn)。但HA頭部區(qū)域相對(duì)莖部區(qū)域更占免疫優(yōu)勢(shì)地位，這是誘導(dǎo)bnAb的阻礙因素之一［8］。目前針對(duì)HA莖部的通用流感疫苗主要有去頭HA和嵌合HA兩種策略。

1.1 去頭HA的通用疫苗 2015年，ANTONIETTA等［5］基于 H1N1 A／Brisbane／59／2007流感病毒亞型的HA序列設(shè)計(jì)了穩(wěn)定的三聚體HA莖部抗原mini-HA，該抗原可引發(fā)與組1（H1、H5及 H9）及組2（H3及H7）病毒HA高度結(jié)合的抗體，并可對(duì)抗同型或異型H5流感病毒的攻擊。在此基礎(chǔ)上，JOAN等［9］于2018年將mini-HA與H1亞型的全長(zhǎng)HA對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種，并對(duì)小鼠進(jìn)行異型H5及H1病毒的攻擊。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，mini-HA可誘導(dǎo)針對(duì)H1N1及H5N1病毒的保護(hù)，接種最適劑量103 nmol／L mini-HA的小鼠對(duì)H1N1及H5N1攻擊的存活率分別約為75%和80%，生存率及生存時(shí)間（21 d）均顯著高于接種H1亞型的全長(zhǎng)HA的小鼠，且mini-HA誘導(dǎo)的HA莖部特異性抗體滴度顯著高于H1亞型的全長(zhǎng)HA的小鼠。2015年，YASSIEN等［10］基于6個(gè)迭代化設(shè)計(jì)（Gen1～Gen6）合成連續(xù)缺乏免疫頭部的H1 HA 穩(wěn)定莖（H1 HA stabilized-stem，HA-ss），并將該構(gòu)建體融合至細(xì)菌鐵蛋白中，形成納米顆粒，構(gòu)建出更穩(wěn)定的HA莖部抗原（HA-ss nanoparticles，HA-SS-np）。其在小鼠及雪貂體內(nèi)可產(chǎn)生針對(duì)H1、H2、H3、H4、H7 及 H9 的抗體，由 H1-SS-np 引發(fā)的對(duì)HA莖部的抗體反應(yīng)強(qiáng)于三價(jià)滅活流感疫苗。接種H1-SS-np且受致死劑量異型H5N1流感病毒攻擊的小鼠及雪貂的存活率均為100%。VALKENBURG等［11］于2016年通過(guò)細(xì)菌表達(dá)多肽的設(shè)計(jì)，將HA莖部折疊成三聚體，模仿H5流感病毒HA莖部的預(yù)融合構(gòu)象，研究發(fā)現(xiàn)，接種基于此三聚體疫苗的小鼠對(duì)致死劑量H5、H1及H3病毒攻擊的存活率分別約為80%、60%和60%，且該疫苗可誘導(dǎo)異型H5、H1、H3及H7病毒的抗體，通過(guò)微量中和試驗(yàn)測(cè)定抗體滴度為1∶160～1∶640。無(wú)頭HA抗原的主要缺陷在于缺乏重要的構(gòu)象表位，若去除HA頭部而未進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾以穩(wěn)定殘余分子可能導(dǎo)致HA莖部天然構(gòu)象及bnAb結(jié)構(gòu)表位的丟失［12-13］，也有學(xué)者提出，無(wú)頭HA疫苗可能不適用于甲型流感組2病毒株及乙型流感病毒［8］。

1.2 嵌合HA（chimeric HA，cHA）的通用疫苗 cHA由各型流感病毒的莖部結(jié)構(gòu)域與外來(lái)流感病毒株的頭部結(jié)構(gòu)域（大多數(shù)的禽類毒株）組成。通過(guò)用具有不同頭部區(qū)域但相同莖域的cHAs進(jìn)行連續(xù)接種，將免疫應(yīng)答集中至免疫亞優(yōu)勢(shì)的莖部區(qū)域，從而打破頭部結(jié)構(gòu)的優(yōu)勢(shì)，增強(qiáng)針對(duì)保守莖部區(qū)域的免疫反應(yīng)［12］。2013 年，KRAMMER 等［14］用不同流行季甲型H1N1流感病毒的H1莖部進(jìn)行嵌合，再分別用H5、H6及H9流感病毒頭部與該嵌合莖部構(gòu)建出cHAs疫苗，研究顯示，連續(xù)接受該疫苗免疫的小鼠在H5N1、H6N1及H7N9等多種病毒攻擊后存活率均為100%，顯著高于其各對(duì)照組，且產(chǎn)生了高滴度的莖部反應(yīng)性抗體。該研究結(jié)果在另一小鼠實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)［15］。KRAMMER 等［16］在雪貂的實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)cHA策略為通用流感疫苗的開(kāi)發(fā)提供了可行性。其團(tuán)隊(duì)先后用頭部為H9、H5、H6的cHA對(duì)雪貂進(jìn)行免疫，在接種頭部為H5、H6的cHA后，雪貂體內(nèi)對(duì)大流行的H1N1病毒的血清反應(yīng)性分別較前1次提高4和8倍。用A／Netherlands／602／09H1N1病毒對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行攻擊，在感染的第4天，疫苗組雪貂嗅球、鼻甲、鼻洗液中的病毒滴度顯著低于對(duì)照組。

基于HA莖部通用疫苗的缺陷之一在于對(duì)HA莖部抗體的誘導(dǎo)受限制，其原因可能與預(yù)先存在的莖部抗體引起的表位隱蔽有關(guān)［17］。這些抗體識(shí)別不相關(guān)的莖部抗原表位后，干擾對(duì)莖部表位中和抗體的誘導(dǎo)。也有學(xué)者認(rèn)為，莖部抗體與病毒粒子的HA親和力較低，導(dǎo)致抗原抗體結(jié)合率降低［18］。目前還有其他提高HA莖部免疫暴露的措施，如病毒樣顆粒的表面移植、自組裝納米顆粒、異源-初免加強(qiáng)策略等［5，19］。

2 基于M2e的通用疫苗

M2為跨膜蛋白，在病毒侵染細(xì)胞時(shí)，充當(dāng)離子通道，M2e為其胞外區(qū)［20］。M2e特異性抗體可與病毒感染宿主細(xì)胞上表達(dá)的M2e結(jié)合，通過(guò)補(bǔ)體或抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）機(jī)制殺死被感染的肺上皮細(xì)胞來(lái)減少病毒復(fù)制。M2e抗體不能中和病毒，但能刺激巨噬細(xì)胞，使其吞噬與抗體結(jié)合的流感病毒［20］。目前，國(guó)外已有公司研制出針對(duì)M2e的疫苗并進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，其中由Vaxinnate公司生產(chǎn)的重組M2e-鞭毛蛋白流感疫苗（VAX102）于2008年完成了Ⅰ期臨床試驗(yàn)（NCT00603811）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，0.3及1.0 μg的劑量可誘導(dǎo)抗M2e IgG滴度，在人體內(nèi)抗體水平提高了4倍［21］。但M2e候選疫苗作為單獨(dú)靶點(diǎn)的進(jìn)一步臨床開(kāi)發(fā)已經(jīng)停止，主要原因是M2e特異性血清抗體滴度在人體內(nèi)快速下降［22］。

3 重組蛋白的通用疫苗

重組通用疫苗的目標(biāo)蛋白主要指流感病毒的保守蛋白，包括NP及M1。這兩種蛋白均為流感病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白，較少發(fā)生變異，是人體發(fā)生細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞（cytotoxic T cell，CTL）反應(yīng)的主要靶點(diǎn)，可增強(qiáng)T細(xì)胞交叉反應(yīng)。由于活化的CD8+T細(xì)胞可攻擊被病毒感染的細(xì)胞并增強(qiáng)病毒清除，因此，誘導(dǎo)CTL反應(yīng)的疫苗可降低疾病嚴(yán)重程度及死亡率，但不能預(yù)防感染［23］。由于NP及M1引發(fā)的抗體無(wú)中和病毒能力，因此基于該部位的通用疫苗可能需與能產(chǎn)生由HA誘導(dǎo)的抗體的疫苗結(jié)合使用［24］。

3.1 MVA-NP+M1疫苗 由A／Panama／2007／99 H3N2病毒的NP和M1組成，并插入改良痘苗病毒安卡拉（modified vaccinia virus Ankara，MVA）的 MVANP+M1疫苗于2009年進(jìn)入Ⅰ期臨床試驗(yàn)（NCT00-942071）［25］。28名志愿者隨機(jī)分成3組，分別接種5×107、5×107及2.5×108pfu劑量的疫苗。在Ⅱ期臨床試驗(yàn)中（NCT00993083），27名50～85歲志愿者隨機(jī)接受單次肌內(nèi)注射1.5×108pfu疫苗或安慰劑，第30天均接受A／Wisconsin／67／2005病毒鼻內(nèi)給藥［26］。通過(guò)IFNγ ELISpot試驗(yàn)測(cè)定T細(xì)胞反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組在第29天中位響應(yīng)值為627 SFU／106外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC），顯著高于對(duì)照組，且活性更強(qiáng)。試驗(yàn)組流感患者癥狀較輕，其病毒脫落時(shí)間為0.45 d，對(duì)照組為1.09 d。其安全性與其他MVA載體疫苗相當(dāng)，未報(bào)告嚴(yán)重的全身不良事件。該研究首次證明了基于T細(xì)胞的通用流感疫苗的臨床療效，闡明該疫苗在促進(jìn)T細(xì)胞反應(yīng)及減少實(shí)驗(yàn)室確診的流感的有效性，提供了疫苗效力的初步證據(jù)，使受試者實(shí)驗(yàn)室確診流感發(fā)病率降低60%。MVA-NP+M1疫苗將進(jìn)一步開(kāi)展臨床研發(fā)。

3.2 ChAdOx1-NP+M1疫苗 ChAdOx1-NP+M1疫苗是將A／Panama／2007／99 H3N2病毒的NP和M1插入至黑猩猩腺病毒載體制成，于2014年完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)（NCT01623518）［27］。試驗(yàn)結(jié)果顯示安全性良好，5 × 108、5 × 109、2.5 × 1010及 5 ×1010vp劑量組第14天的IFNγ值與基線值相比分別增加了3、6、7和4倍。選擇2.5×1010vp的劑量用于ChAdOx1 NP+M1的進(jìn)一步研究。在同一臨床試驗(yàn)中，用ChAdOx1-MVA進(jìn)行初免-加強(qiáng)免疫，結(jié)果顯示，用ChAdOx1為載體的疫苗進(jìn)行初次免疫，用MVA為載體的疫苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫，可顯著增強(qiáng)疫苗的免疫原性。

3.3 Multimeric-001（M-001）疫苗 M-001疫苗是由以色列BiondVax公司開(kāi)發(fā)的一種重組蛋白疫苗，含甲型H1N1、H3N2及乙型流感病毒株的HA、NP和M1的9個(gè)保守表位。在首次人體試驗(yàn)中（NCT008-77448），60名18～49歲的健康志愿者分為5組，分別接受 2 次 250 μg 無(wú)佐劑、250 μg 含佐劑、500 μg無(wú)佐劑、500 μg含佐劑的M-001及安慰劑的肌肉注射，42 d后，接種500及250 μg含佐劑疫苗的人群對(duì)M-001蛋白的IgG滴度分別增加了50和37倍。接受500 ug劑量的人群PBMC對(duì)甲型 H1N1、H3N2及乙型流感病毒均產(chǎn)生70%以上的增殖反應(yīng)，并觀察到IL-2、IFNγ細(xì)胞因子的增長(zhǎng)［28］。一項(xiàng)在中老年群體中開(kāi)展的多中心Ⅱ期臨床試驗(yàn)中（NCT014-19925），120名志愿者按 1∶1∶1∶1隨機(jī)分成 4組，分別接受2次無(wú)佐劑、單次無(wú)佐劑、單次含佐劑的500 mcg M-001或單次安慰劑，在末次注射后檢測(cè)了11種異性流感病毒（3種H1亞型、5種H3亞型及3種乙型）的HI抗體轉(zhuǎn)化率，結(jié)果顯示，疫苗組對(duì)所有病毒的HI抗體轉(zhuǎn)化率均高于對(duì)照組，其中4種病毒顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。試驗(yàn)還使受試者體外暴露于甲型H1N1、H3N2及乙型流感病毒抗原，觀察M-001誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生IFNγ的CD4+和CD8+T細(xì)胞顯著增多。表明M-001在體液及細(xì)胞免疫反應(yīng)中對(duì)流感病毒株均具有交叉保護(hù)作用，且安全性良好［29］。該疫苗于2019年4月完成Ⅲ期臨床（NCT03450915）的志愿者招募，預(yù)計(jì)2020年可獲得Ⅲ期臨床結(jié)果。

4 合成多肽疫苗

4.1 FLU-v疫苗 由英國(guó)SEEK公司生產(chǎn)的一種由人及動(dòng)物甲型、乙型流感病毒的NP、M1和M2的高度保守區(qū)域合成的多肽通用疫苗FLU-v經(jīng)Ⅰ期臨床試驗(yàn)（NCT01181336）后［30］，選定劑量為 500 μg的疫苗進(jìn)入Ⅰb期試驗(yàn)（NCT01226758）［31］。2017 年 7月，F(xiàn)LU-v疫苗Ⅱb期試驗(yàn)（NCT02962908）完成，222名18～60歲健康志愿者按2∶2∶1∶1隨機(jī)分為FLU-v＋鹽水組、FLU-v＋佐劑組、2劑鹽水組及安慰劑＋佐劑組，分別于第0及21天接種相應(yīng)劑量的疫苗，觀察第42及180天的Th1免疫應(yīng)答。在2016-2017年流感季節(jié)期間，所有志愿者通過(guò)網(wǎng)絡(luò)調(diào)查問(wèn)卷記錄流感發(fā)病情況，進(jìn)一步評(píng)估該疫苗的安全性及免疫原性［32］。在Ⅱb期試驗(yàn)FLU-v＋佐劑組中，42及180 d PBMC分泌的IFNγ較第0天至少增加2倍的受試者比例分別為95.46%和93.02%，均顯著高于安慰劑組，且每組FLU-v受試者在第42及180天的IgG抗體滴度均顯著高于安慰劑組［33］。另一項(xiàng)關(guān)于FLU-v疫苗的隨機(jī)、三盲、安慰劑對(duì)照Ⅱb期臨床試驗(yàn)（NCT03180801）于2017年5月完成，旨在研究該疫苗在健康人群的甲型H1N1流感模型中的效力；123名志愿者隨機(jī)分成1劑FLU-v組、2劑FLU-v組及安慰劑對(duì)照組，第0天用含2009年甲型H1N1流感病毒的PBS懸液對(duì)每位志愿者進(jìn)行鼻噴霧器給藥，監(jiān)測(cè)受試者輕度至中度流感的發(fā)病情況［33］。在Ⅱb期流感模型的效力試驗(yàn)中，兩組FLU-v受試者及對(duì)照組中輕度至中度流感發(fā)病率分別為32.5%、32.6%和54.8%［34］。以上研究公開(kāi)發(fā)表的結(jié)果及Clinical Trial臨床試驗(yàn)平臺(tái)公布的數(shù)據(jù)表明［31，33-34］，F(xiàn)LU-v疫苗在健康成年人中的安全性及耐受性均良好，大多數(shù)不良反應(yīng)報(bào)告為輕度至中度，未發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)事件。在500 μg劑量的FLU-v受試者中，均誘導(dǎo)了特異性FLU-v細(xì)胞免疫。FLU-v疫苗將進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。

4.2 FP-01.1疫苗 2015年，一種由從人、禽類及豬體內(nèi)分離的H1～H9甲型流感病毒株高度保守蛋白（NP、基質(zhì)蛋白、多聚酶蛋白1、多聚酶蛋白2）合成的廣譜甲型流感疫苗FP-01.1進(jìn)入雙盲、安慰劑對(duì)照臨床試驗(yàn)（NCT01265914）。49名受試者隨機(jī)分成3個(gè)劑量組（50、150和 500 μg／肽）及安慰劑組。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)P-01.1疫苗可誘導(dǎo)CD4+和CD8+T細(xì)胞應(yīng)答，3個(gè)劑量組的IFNγ與免疫前比較均顯著增加，其中150 μg／肽組顯示出最強(qiáng)的免疫原性，第43天中位響應(yīng)值為243 SFC／106PBMC，而對(duì)照組無(wú)人發(fā)生應(yīng)答［35］。為驗(yàn)證疫苗誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞交叉識(shí)別不同流感病毒株H1N1及H3N2，將病毒與A549細(xì)胞（表達(dá)HLA-A2的人肺上皮細(xì)胞系）溫育，發(fā)現(xiàn)疫苗接種后對(duì)H1N1、H3N2的IFNγ及顆粒酶B濃度顯著高于接種前［35］。另外，F(xiàn)P-01.1安全性良好，疫苗接種者的不良事件發(fā)生情況與對(duì)照組相似。

5 問(wèn)題與展望

目前，國(guó)內(nèi)對(duì)通用流感疫苗的研究存在局限性，而國(guó)外近10年開(kāi)展了大量研究。NIAID雖于2017年召開(kāi)了關(guān)于通用流感疫苗研討會(huì)并提出其具體目標(biāo)，但目前關(guān)于通用疫苗臨床終點(diǎn)的判定仍存在爭(zhēng)議。國(guó)外已研制出多種針對(duì)流感病毒不同靶點(diǎn)的候選疫苗，且在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及早期臨床階段均顯示出較好的安全性、耐受性及免疫原性，但迄今尚無(wú)通用疫苗完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)。這可能與流感病毒型別和蛋白多樣、不斷變異、在臨床前與臨床評(píng)價(jià)中的經(jīng)濟(jì)成本、市場(chǎng)監(jiān)管及相關(guān)政策等有關(guān)。因此，通用流感疫苗的進(jìn)一步研發(fā)可考慮針對(duì)流感病毒的所有有效靶點(diǎn)［1］。在疫苗評(píng)價(jià)中，有必要擴(kuò)大研究規(guī)模，繼續(xù)開(kāi)展多中心臨床試驗(yàn)，進(jìn)一步證實(shí)通用疫苗的安全性及免疫原性。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在疫苗臨床前評(píng)價(jià)階段具有重要作用，但動(dòng)物模型具有一定局限性。無(wú)論是雪貂還是小鼠均無(wú)法完全重現(xiàn)人類流感病毒感染的全過(guò)程，其免疫機(jī)制、暴露途徑及易感模式與人類不同，可能導(dǎo)致動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床數(shù)據(jù)的結(jié)果存在差異。另外，無(wú)論在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)還是人體研究中，病毒攻擊是評(píng)價(jià)疫苗免疫效果的有效方法，但病毒模型與自然感染存在本質(zhì)差別。在候選疫苗的評(píng)價(jià)中應(yīng)充分考慮以上因素，標(biāo)準(zhǔn)化流感病毒攻擊株、疾病模型及感染途徑，充分了解動(dòng)物及人針對(duì)不同流感病毒的感染過(guò)程和免疫機(jī)制，將動(dòng)物攻毒模型的數(shù)據(jù)與人自然感染的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元化比較［6］。

在通用流感疫苗臨床評(píng)價(jià)階段，應(yīng)重點(diǎn)考慮兒童、老人、孕產(chǎn)婦及患基礎(chǔ)疾病的免疫力低下者。與年齡或體重相關(guān)的免疫功能變化可能導(dǎo)致流感疫苗效力的下降，因此，在正常人群中開(kāi)展通用疫苗的早期臨床試驗(yàn)結(jié)果可能不適用于高危人群。為保證重點(diǎn)人群對(duì)抗不斷變異流感病毒的長(zhǎng)久有效免疫力，可能還需考慮通用流感疫苗的多次接種［1］。預(yù)計(jì)一些候選通用流感疫苗可在5年內(nèi)進(jìn)行后期臨床試驗(yàn)，一種商業(yè)化的通用流感疫苗可能在8～10年內(nèi)上市［36］。