• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    辣椒溶桿菌NF87-2防治瓜類蔬菜蔓枯病的研究

    2021-02-23 05:33:40張心寧喬俊卿李玥蓉劉永鋒劉郵洲
    中國生物防治學報 2021年6期
    關鍵詞:芽胞發(fā)酵液孢子

    左 楊,張心寧,喬俊卿,李玥蓉,劉永鋒,劉郵洲*

    (1. 江蘇省農業(yè)科學院植物保護研究所,南京 210014;2. 江蘇省睢寧縣農業(yè)農村局,睢寧 221225;3. 南京工業(yè)大學生物與制藥工程學院,南京 211816)

    由亞隔孢殼屬瓜類黑腐球殼菌Didymella bryoniae引起的蔓枯病是世界范圍內的一種真菌土傳病害,可危害多種葫蘆科作物,如甜瓜、西瓜、黃瓜、哈密瓜等,嚴重影響瓜類蔬菜的產量和品質[1]。據報道,西甜瓜蔓枯病田間發(fā)病率一般為15%~25%,嚴重時高達60%~80%,減產可達30%以上[2]。病原菌以分生孢子器或子囊殼在宿主殘骸中越冬,亦可存活在種子中,一般帶菌率為 5%~30%,病菌在種子上可存活18個月以上[3]。蔓枯病在瓜類蔬菜的整個生育期都能危害,植株各部位均可受害,其中以葉片、莖蔓和果實受害為主,引起葉片、莖蔓枯死和果實腐爛。高濕及晝夜溫差大有利于蔓枯病的發(fā)生,在田間溫度20 ℃~25 ℃、相對濕度85%以上時,病原菌能夠迅速侵染寄主組織并大量繁殖,可在短時間內導致大量藤蔓枯死,造成嚴重的經濟損失[4]。

    國內有關瓜類蔬菜蔓枯病的防治研究起步較晚,目前并無良好的高抗品種。生產上采取的防治方法主要是化學防治,長期、大量使用化學藥劑不僅增加農產品有毒化學物質殘留,影響農產品安全和人類健康,而且造成生態(tài)環(huán)境嚴重污染,病原菌易產生抗藥性等[5]。生物防治對人畜安全、環(huán)境兼容性好、病菌不易產生抗藥性,越來越受到人們的重視,并初見成效[6]。目前國內外對蔓枯病菌研究和應用較多的生防真菌主要是木霉菌[7,8],生防細菌主要有芽胞桿菌屬Bacillus和假單胞菌屬Pseudomonas等[9-12],利用辣椒溶桿菌Lysobacter capsici防治蔓枯病尚未見報道。此外,煙管菌Bjerkandera adustaM1對西瓜蔓枯病菌有較好的抑制作用,溫室盆栽防效高達74.3%,在掃描電鏡下觀察到煙管菌M1能夠直接穿透西瓜蔓枯病菌菌絲[6]。撕裂蠟孔菌Ceriporia lacerateHG2011的發(fā)酵液能防治黃瓜蔓枯病,降低發(fā)病率和病情指數,同時還可以提高土壤酶活性,促進黃瓜幼苗吸收養(yǎng)分、健康生長[13]。

    本研究以蔓枯病菌DB-20為靶標菌,通過平板對峙、種子發(fā)芽、幼苗生長和溫室盆栽防治試驗,篩選出理想的拮抗細菌有效防治瓜類蔬菜蔓枯病,為開發(fā)防治瓜類蔬菜蔓枯病的生物殺菌劑提供理論依據。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 供試菌株 拮抗細菌-辣椒溶桿菌Lysobacter capsiciNF87-2、枯草芽胞桿菌Bacillus subtilisPTS-394、綠針假單胞菌Pseudomonas chlororaphisYL-1、萎縮芽胞桿菌Bacillus atrophaeusYL3、貝萊斯芽胞桿菌Bacillus velezensisYL21和短小芽胞桿菌Bacillus pumilusZR3-2,病原真菌-蔓枯病菌Didymella bryoniaeDB-20均由本實驗室保存并提供。

    1.1.2 植物材料 西瓜品種:K3(感病品種,江蘇省農業(yè)科學院蔬菜研究所提供),京欣一號和早佳8424(市售常見品種);黃瓜品種:研四黃瓜(市售常見品種)。

    1.1.3 培養(yǎng)基及營養(yǎng)液 蔓枯病菌的培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar , PDA)培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、水1000 mL;拮抗細菌的培養(yǎng)基為LB ( Luria-Bertani )培養(yǎng)基:胰蛋白胨10 g、酵母粉5 g、NaCl 10 g、水1000 mL。

    1.1.4 拮抗細菌發(fā)酵液和次生代謝產物的制備 挑取拮抗細菌的新鮮菌苔接種于100 mL LB液體培養(yǎng)基中,28 ℃、150 r/min搖培36 h,得到拮抗菌發(fā)酵液,用空白LB培養(yǎng)液調至菌含量109CFU/mL(下同),備用。采用酸沉淀法[14],將芽胞桿菌發(fā)酵液于4 ℃、10000 r/min離心15 min,上清液用6 mol/L HCl調pH至2.0,4 ℃沉淀12 h,10000 r/min離心20 min,棄上清液,收集沉淀,得到的沉淀加入2 mL甲醇(MeOH)后用1 mol/L NaOH調節(jié)pH至7.0,獲得芽胞桿菌脂肽類化合物的粗提物,放?20 ℃保存?zhèn)溆?。采用乙酸乙酯萃取法[15],將辣椒溶桿菌NF87-2發(fā)酵液于4 ℃、10000 r/min離心15 min,上清液用6 mol/L HCl調pH至3.0,以等體積乙酸乙酯進行萃取,上層萃取液以旋轉蒸發(fā)儀蒸干濃縮,以2 mL甲醇-水溶液(MeOH-H2O,體積比2:1)溶解,獲得辣椒溶桿菌NF87-2發(fā)酵液的代謝產物粗提物,放?20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.1.5 蔓枯病菌的培養(yǎng)和孢子懸液的配制 蔓枯病菌在PDA平板上28 ℃培養(yǎng)7 d 后,用滅菌的打孔器打孔直徑5 mm的圓形菌塊,隨后用滅菌手術刀在新鮮黃瓜上去除同等大小面積的表皮后放置圓形菌塊,室溫放置5~7 d。待蔓枯病菌的分生孢子長出后,用滅菌毛刷蘸取少量無菌水,輕輕將表面孢子刮下,放至無菌水中。血球計數板檢測孢子數目,配置成105孢子/mL的懸浮液。

    1.2 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制試驗

    蔓枯病菌DB-20在PDA平板28 ℃培養(yǎng) 7 d 后,沿菌落邊緣用直徑 5 mm 打孔器打孔,將菌塊置于PDA 平板中央。培養(yǎng)皿四周呈“十”字形(距培養(yǎng)皿中心 30 mm)滴加拮抗菌發(fā)酵液(平板水平線,菌含量109CFU/mL)和清水對照(平板豎直線)各 5 μL。每處理重復3皿。28 ℃恒溫培養(yǎng),待對照處理病原菌菌落長滿平板時測量各處理菌落生長半徑,計算抑制率,抑制率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)×100。

    將5 mm的蔓枯病菌菌塊置于PDA 平板中央。培養(yǎng)皿四周呈“十”字形(距培養(yǎng)皿中心 30 mm)打孔,孔徑為5 mm。孔內分別滴加清水對照 10 μL、溶劑對照(甲醇或甲醇水)10 μL、拮抗菌代謝產物 5和10 μL,共計4個處理,每處理重復3皿。28 ℃恒溫培養(yǎng)4 d后,測量各處理病原菌菌落生長半徑。

    1.3 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制試驗

    試驗共設7個處理:3株拮抗細菌NF87-2、PTS-394和YL21的發(fā)酵液、代謝產物和清水對照。在滅菌凹玻片中分別滴加40 μL的拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(菌含量108CFU/mL)、代謝產物和清水(或甲醇),隨后加入40 μL的蔓枯病菌DB-20孢子液,混勻。將凹玻片放置含有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中,25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h。當清水(或甲醇)對照處理的孢子萌發(fā)率達到90%以上時,調查各處理孢子萌發(fā)情況,計算孢子萌發(fā)抑制率,抑制率(%)=(對照孢子萌發(fā)數-拮抗細菌發(fā)酵液或代謝產物處理后孢子萌發(fā)數)/對照孢子萌發(fā)數×100,調查孢子總數設定為300個。每個處理重復3次。

    1.4 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響

    采用培養(yǎng)皿中放置保濕濾紙進行發(fā)芽試驗。選取3個西瓜品種,每個品種選取500粒飽滿的種子,每個處理100粒,分別浸于無菌水(CK水)、DB-20孢子懸浮液+無菌水(體積比1:1)(CK?。┖虳B-20孢子懸浮液+拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(體積比1:1,菌含量108CFU/mL)中,共計5個處理,24 h后取出,將種子分別擺放在直徑為15 cm的培養(yǎng)皿上,28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),3和7 d后分別調查種子發(fā)芽率。試驗重復3次。值得注意的是,拮抗細菌發(fā)酵液的菌含量如果過高(>108CFU/mL)會影響西瓜種子正常的發(fā)芽和出苗,因此本研究中均采用拮抗細菌發(fā)酵液10倍稀釋液(菌含量108CFU/mL)。發(fā)芽率(%)=(發(fā)芽種子粒數/供試種子總粒數)×100。

    1.5 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜出苗的影響

    選取3個西瓜品種,每個品種選取出芽且芽長基本一致的500粒種子,每個處理100粒,分別浸于無菌水(CK水)、DB-20孢子懸浮液+無菌水(體積比1:1)(CK病)和DB-20孢子懸浮液+拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(體積比1:1,菌含量108CFU/mL)中,共計5個處理,30 min后取出,播于育秧盤中,常規(guī)管理,7 d后調查出苗情況。試驗重復3次。

    1.6 拮抗細菌和代謝產物防治黃瓜蔓枯病的溫室盆栽試驗

    將長至兩片真葉的健康黃瓜幼苗移栽至裝有200 g無菌土的花盆中(1棵/盆),緩苗15 d,共計240盆。試驗設8個處理:40 mL無菌水(CK水),同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL無菌水(CK?。?,同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL拮抗菌發(fā)酵液(3株拮抗菌NF87-2、PTS-394和YL21,菌含量109CFU/mL),同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL拮抗菌代謝產物(3株拮抗菌NF87-2、PTS-394和YL21)。每個處理10株黃瓜幼苗,試驗重復3次。各處理液用噴壺均勻噴施在黃瓜植株的莖和葉片上,7 d后再噴施拮抗菌發(fā)酵液或代謝產物一次。14 d后調查病情指數,計算防效。分級標準[6]:0級:植株健康,莖葉處無病斑,或發(fā)病葉小于1%;1級:莖葉有小塊病斑。發(fā)病葉為1%~25%;2級:莖葉有大塊病斑,發(fā)病葉為26%~50%;3級:莖葉有大量病斑,枯萎卷曲,發(fā)病葉為51%~75%;4級:植株有大量病斑,發(fā)病葉片為76%~90%;5級:發(fā)病葉片占到90%以上或全株病死。病情指數=Σ(病級數×該病級植株數)/(最大病級數×植株總株數)×100,防治效果(%)=(對照組病情指數-處理組病情指數)/對照病情指數×100。

    1.7 數據統(tǒng)計與分析

    采用Excel 2010和DPS 7.05軟件進行統(tǒng)計分析,采用鄧肯氏新復極差法進行差異顯著性檢驗。

    2 結果與分析

    2.1 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌菌素生長的室內抑制作用

    試驗結果表明(圖1,表1),6株拮抗菌對蔓枯病菌菌絲生長均表現出一定的抑制作用,但不同細菌的抑制能力有所不同。辣椒溶桿菌NF87-2的抑菌效果最好,可以形成明顯的抑菌帶,抑制率為 81.6%;其次是貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394,抑制率分別為56.5%和55.5%;其余3株拮抗細菌的抑制率為 38.4%~42.6%,6株拮抗菌對蔓枯病菌菌絲生長的抑制率由低到高是 ZR3-2<YL3<YL-1<PTS-394<YL21<NF87-2。選取效果良好的辣椒溶桿菌 NF87-2、枯草芽胞桿菌 PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21開展后續(xù)試驗。

    圖1 拮抗細菌對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Fig. 1 Inhibition efficacy of six antagonistic bacteria on D. bryoniae

    拮抗細菌代謝產物對蔓枯病菌的平板對峙生長試驗結果表明(圖2,表1),辣椒溶桿菌NF87-2用乙酸乙酯提取的代謝產物、芽胞桿菌PTS-394和YL21酸沉淀提取的脂肽類粗提物對蔓枯病菌菌絲生長均具有抑制作用,清水對照和溶劑對照均無抑制作用。當對照處理的病原菌生長半徑達30 mm時,拮抗菌代謝產物處理的病原菌生長半徑為11.0~12.1 mm。各菌株代謝產物5 μL處理和10 μL處理的病原菌生長半徑基本無差異。

    表1 拮抗細菌及代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Table 1 Inhibition efficacy of antagonistic strains and secondary metabolites against D. bryoniae in vitro

    圖2 3株拮抗細菌代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Fig. 2 Inhibition efficacy of secondary metabolites produced by three antagonistic bacteria on D. bryoniae

    2.2 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用

    清水對照處理6 h后,幾乎所有的蔓枯病菌孢子均正常萌發(fā),形成細長芽管,萌發(fā)率為95.3%。3株拮抗細菌發(fā)酵液10倍稀釋液處理均對蔓枯病菌的孢子萌發(fā)表現出一定的抑制作用,其中辣椒溶桿菌NF87-2處理的抑制作用最強,蔓枯病菌孢子萌發(fā)率僅為38.7%,抑制率為59.4%;枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理后,蔓枯病菌孢子萌發(fā)率分別為69.3%和71.7%,抑制率分別為27.3%和24.8%(表2)。

    甲醇溶劑處理后,蔓枯病菌的孢子萌發(fā)率為 90.3%,略低于清水對照處理。3株拮抗細菌分泌的次生代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用較強,與各自對應的發(fā)酵液相比,孢子萌發(fā)均呈下降趨勢。辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21代謝產物處理后,蔓枯病菌的孢子萌發(fā)抑制率分別為67.2%、37.3%和35.8%(表2)。

    表2 3株拮抗細菌及其代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用Table 2 Inhibition efficacy of three antagonistic bacteria and secondary metabolites on spore germination of D. bryoniae

    2.3 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響

    3個西瓜品種清水對照處理無差異,3 d后發(fā)芽率為46%~49%,7 d后發(fā)芽率為78%~82%。蔓枯病菌孢子液處理西瓜種子后,發(fā)芽率明顯下降,3和7 d后發(fā)芽率分別為15%~20%和31%~48%(表3)。

    拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對種子發(fā)芽有明顯的影響,其中辣椒溶桿菌NF87-2處理后7 d,感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為69%、83%和75%,與病原菌DB-20處理組相比,發(fā)芽率提高了122.6%、72.9%和70.5%(表3)。

    貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394處理組的種子發(fā)芽率相當,處理后3 d感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為23%~25%、36%~38%和30%~32%,處理后7 d感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為49%、66%~69%和59%~61%,與病原菌處理組相比,發(fā)芽率提高了58.1%、37.5%~43.8%和34.1%~38.6%(表3)。

    表3 3株拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響Table 3 Seed germination rate after inoculated with antagonistic strains and D.bryoniae

    2.4 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜出苗的影響

    感病品種K3清水對照處理組的出苗率為83%,但接種蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液后,發(fā)病非常嚴重,出苗率僅為6%,即使施用辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理,出苗率仍然較低,分別為21%、11%和8%(圖3)。

    京欣一號品種試驗中清水對照處理組的出苗率為89%,蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液處理組的出苗率為38%,顯著低于對照處理。辣椒溶桿菌NF87-2與蔓枯病菌同時接種處理組的出苗率為82%,與清水對照處理效果相當,枯草芽胞桿菌PTS-394與蔓枯病菌同時接種處理的出苗率和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理組相當,分別為53%和51%,比病原菌處理組分別提高了39.5%和34.2%(圖3)。

    早佳8424品種清水對照處理組的出苗率為88%,蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液處理組的出苗率下降為30%,3株拮抗細菌(辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21)與蔓枯病菌接種處理后,西瓜幼苗的出苗率明顯提高,分別為76%、48%和43%,比病原菌處理組分別提高了153.3%、60.0%和43.3%(圖3)。

    圖3 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜幼苗生長的影響Fig. 3 Seedling growth after inoculated with antagonistic strains and D. bryoniae at the same time

    2.5 拮抗細菌和代謝產物對黃瓜蔓枯病的盆栽防治效果

    3株拮抗細菌發(fā)酵液處理對黃瓜蔓枯病具有明顯的防治效果,空白培養(yǎng)基對照處理的病情指數較低,第2次施藥后14 d的病情指數為0.8,單獨接種蔓枯病菌孢子液的黃瓜苗發(fā)病嚴重,第2次施藥后14 d的病情指數為 39.3。辣椒溶桿菌 NF87-2發(fā)酵液處理后的防效最好,病情指數顯著低于病原菌處理,防治效果為81.6%,貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394發(fā)酵液處理的防治效果相當,分別為71.4%和67.4%;辣椒溶桿菌NF87-2、貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394分泌的次生代謝產物對黃瓜蔓枯病也有一定的防治效果,但均比各自的發(fā)酵液防治效果低,分別是66.5%、57.2%和54.8%(表4、圖4)。

    圖4 辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21及其代謝產物對黃瓜蔓枯病的防治效果Fig. 4 Control effects of three antagonistic strains and their secondary metabolites on cucumber gummy stem blight in pot experiment

    表4 3株拮抗細菌發(fā)酵液及其代謝產物對黃瓜蔓枯病的溫室盆栽防效試驗Table 4 Control effects of three antagonistic strains and their secondary metabolites on cucumber gummy stem blight in pot experiment

    3 討論

    溶桿菌屬是20世紀70年代末新建立的一個屬,屬于黃單胞科Xanthomonadaceae,γ-變形菌門Gramma proteobacteria。革蘭氏陰性細菌,無芽胞,菌體桿狀,無鞭毛。該屬的細菌一般都能產生黃色至黃褐色色素,細菌基因組中G+C含量很高,一般為65%~70%[16]。這類細菌能產生胞外酶、抗生素及表面活性物質,對許多微生物包括真菌、細菌及線蟲等都表現出拮抗活性[17]。目前研究應用較多的菌株包括產酶溶桿菌L. enzymogenes[18-20]、膠狀溶桿菌L. gummosus[21]、抗生素溶桿菌L. antibioticus[22,23]和辣椒溶桿菌[24-27]。前期研究結果表明,辣椒溶桿菌 NF87-2可以很好地抑制多種病原真菌菌絲生長,并且對辣椒猝倒病有很好的田間防效[15]。本文室內外抑菌試驗的結果表明,菌株NF87-2能有效防控瓜類蔬菜蔓枯病,是一株非常有應用前景的生防菌。

    蔓枯病作為危害瓜類蔬菜的一種重要病害,當前研究大部分集中在病原菌鑒定、簡單的抗病遺傳規(guī)律、抗病材料篩選和防治方法等方面[4]。通過觀察、試驗、模擬、定性或定量分析,探明不同環(huán)境下寄主—病原菌相互作用而形成的時空動態(tài)規(guī)律,可有助于實現病害的準確預測和綜合治理[28]。Punja等[11]研究發(fā)現,蔓枯病的藥劑防治時間很重要??莶菅堪麠U菌QST713制劑能夠有效防治黃瓜蔓枯病,如果先接種蔓枯病菌,24 h后噴施枯草芽胞桿菌發(fā)酵液,黃瓜蔓枯病發(fā)生嚴重,防效幾乎為0;反之,如果先接種枯草芽胞桿菌發(fā)酵液,24 h后接種蔓枯病菌孢子液,則發(fā)病率明顯下降。Santos等[28]研究發(fā)現,蔓枯病菌對濕度有很強的敏感性,建議生產上避開雨季種植西甜瓜,可以有效防治蔓枯病的發(fā)生。Rennberger等[29]研究了蔓枯病菌子囊孢子在空氣中的傳播動力學,發(fā)現西瓜植株接種蔓枯病菌后,292~313 d后在植株殘余組織上仍然可以檢測到子囊孢子;平板上的子囊孢子7 d后釋放了90%,蔓枯病的發(fā)病率隨著接種源地理位置距離的增加而下降??傊莶【淖幽益咦邮窃摬『α餍械闹饕ぞ?,葫蘆科作物的殘余組織可以作為其長期存活的介體,因此在生產上應該及早、徹底地清除或燒毀殘余組織,阻斷蔓枯病菌的生存條件[29]。本文的研究結果表明,蔓枯病菌在植物生長的全生育期都應該注意防控,首先是種子處理,帶菌種子的發(fā)芽率僅為48%,菌株NF87-2同時接種處理后種子發(fā)芽率提高為83%,與清水對照相當;其次在苗床階段,接種蔓枯病菌后西瓜出苗率僅為38%,而用菌株NF87-2同時接種處理后可以明顯減緩發(fā)病率,出苗率提高為82%;黃瓜幼苗移栽后,菌株NF87-2和蔓枯病菌同時接種處理,防效顯著。上述的試驗結果對于生產上開發(fā)利用辣椒溶桿菌NF87-2,確定其最佳防治時間、使用劑量和防治效果提供數據支撐。

    前人研究結果表明,蔓枯病菌脅迫下,西甜瓜體內的防御酶-苯丙氨酸解氨酶 PAL、多酚氧化酶 PPO和過氧化物酶POD會發(fā)生明顯變化,并且這種變化與西甜瓜品種的抗性直接相關[30]。除此之外,西甜瓜品種內源激素含量的變化及其相關基因的表達也與其對蔓枯病的抗病能力是相關的,比如抗蔓枯病甜瓜抗源PI420145葉片中低濃度的乙烯以及高濃度的茉莉酸和水楊酸提高了其對蔓枯病的抗病能力,葉片中EIN 2、PDF1.2、EDS 5和NPRI在接種早期的高表達促使其比感蔓枯病甜瓜“白皮脆”(對照)更早一步對蔓枯病菌的侵染作出反應[31]。任海英等[32]研究發(fā)現,對蔓枯病抗性不同的甜瓜品種感染蔓枯病后 APX的轉錄水平發(fā)生顯著變化,與對照相比,有的抗性品種APX轉錄水平升高,但是有的抗性品種APX轉錄水平降低,推測APX在甜瓜與蔓枯病菌的互作過程中可能與其他多種信號網絡交叉互作。Ruangwong等[8]發(fā)現木霉菌PSU-P1對西甜瓜蔓枯病有很好的防效,同時發(fā)現木霉菌處理后,寄主體內的POD、PPO、幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶均明顯提高,這可能與防御反應直接相關。本文中菌株NF87-2分泌的次生代謝產物室內抑制蔓枯病菌孢子萌發(fā)的效果優(yōu)于菌株發(fā)酵液,表明菌株NF87-2分泌的次生代謝產物是其發(fā)揮抑菌活性所必須的。但在盆栽試驗中,菌株NF87-2發(fā)酵液對蔓枯病的防效比其次生代謝產物高,呈顯著性差異,這其中是否也包含菌株NF87-2處理后,引起寄主植株體內防御酶系、激素的變化,從而激發(fā)了寄主的抗病性?后續(xù)將研究拮抗細菌代謝產物對西瓜種子發(fā)芽和出苗的影響,同時監(jiān)測拮抗細菌或代謝產物與病原菌同時接種處理后西瓜種子、幼苗或植株體內各種防御酶系、激素的變化,為闡明拮抗細菌的作用機制提供理論依據。

    猜你喜歡
    芽胞發(fā)酵液孢子
    單細胞分析研究二氧化氯對殺蚊細菌球形賴氨酸芽胞桿菌芽胞的影響
    一種簡單高效的芽胞純化方法及其效果評價
    高壓熱殺菌技術滅活細菌芽胞機理研究進展
    連翹內生真菌的分離鑒定及其發(fā)酵液抑菌活性和HPLC測定
    桑黃纖孔菌發(fā)酵液化學成分的研究
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:03
    鯽魚黏孢子蟲病的診斷與防治
    制作孢子印
    無所不在的小孢子
    石頭里的孢子花粉
    生物進化(2014年2期)2014-04-16 04:36:34
    芽胞結構的研究進展
    欧美在线黄色| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久久久久大精品| 可以在线观看的亚洲视频| 久久久久久久久免费视频了| 一边摸一边做爽爽视频免费| 美女黄网站色视频| a在线观看视频网站| 老司机福利观看| 亚洲av成人一区二区三| 91字幕亚洲| 亚洲熟妇熟女久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| xxx96com| 日本黄色视频三级网站网址| 五月玫瑰六月丁香| 禁无遮挡网站| 亚洲在线自拍视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久久久久久午夜电影| 免费在线观看成人毛片| 超碰成人久久| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品久久久久久久毛片微露脸| 在线观看日韩欧美| 国产成人精品久久二区二区免费| 免费看a级黄色片| 露出奶头的视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 久久国产乱子伦精品免费另类| 91成年电影在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 99热这里只有是精品50| 一进一出抽搐gif免费好疼| 99精品欧美一区二区三区四区| 日韩高清综合在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲七黄色美女视频| 精品日产1卡2卡| 欧美乱码精品一区二区三区| 最好的美女福利视频网| 最近最新中文字幕大全免费视频| 精品欧美一区二区三区在线| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲,欧美精品.| 91国产中文字幕| 两个人看的免费小视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 变态另类丝袜制服| 免费在线观看亚洲国产| 日本熟妇午夜| 丰满的人妻完整版| 日韩大码丰满熟妇| 免费观看精品视频网站| 日本五十路高清| 天天添夜夜摸| 国产单亲对白刺激| 亚洲一区中文字幕在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 免费人成视频x8x8入口观看| 中文在线观看免费www的网站 | 操出白浆在线播放| 无限看片的www在线观看| 国产成人系列免费观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 精品久久久久久成人av| 日本黄色视频三级网站网址| 99精品欧美一区二区三区四区| 制服诱惑二区| 真人做人爱边吃奶动态| 最好的美女福利视频网| 国产精品 国内视频| 国产成人啪精品午夜网站| 午夜激情av网站| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产男靠女视频免费网站| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日本三级黄在线观看| 麻豆成人av在线观看| 久久精品国产清高在天天线| tocl精华| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 免费在线观看影片大全网站| 国产精品av久久久久免费| 久久草成人影院| 亚洲国产精品合色在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 精品无人区乱码1区二区| 韩国av一区二区三区四区| 成人三级黄色视频| 十八禁人妻一区二区| 91老司机精品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 成人午夜高清在线视频| 亚洲av成人精品一区久久| 999精品在线视频| 床上黄色一级片| 精品无人区乱码1区二区| 无限看片的www在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 午夜福利视频1000在线观看| netflix在线观看网站| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| a在线观看视频网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 一夜夜www| 亚洲男人的天堂狠狠| 日本成人三级电影网站| 久久精品综合一区二区三区| 成熟少妇高潮喷水视频| 少妇粗大呻吟视频| 黄色视频,在线免费观看| 91麻豆av在线| 日本黄色视频三级网站网址| 精品国产乱码久久久久久男人| 少妇的丰满在线观看| 曰老女人黄片| av有码第一页| www.精华液| 午夜两性在线视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 在线播放国产精品三级| 日韩欧美国产一区二区入口| a级毛片在线看网站| 男女那种视频在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 日本一二三区视频观看| 一本综合久久免费| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产成人aa在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 免费在线观看黄色视频的| 韩国av一区二区三区四区| 男女下面进入的视频免费午夜| 桃红色精品国产亚洲av| 9191精品国产免费久久| 免费av毛片视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 无限看片的www在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 激情在线观看视频在线高清| 国产精品日韩av在线免费观看| 成年免费大片在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 变态另类丝袜制服| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲精品在线观看二区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品1区2区在线观看.| АⅤ资源中文在线天堂| 精品久久久久久成人av| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线观看午夜福利视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 午夜影院日韩av| 国产主播在线观看一区二区| 激情在线观看视频在线高清| 免费在线观看影片大全网站| 岛国视频午夜一区免费看| 最近最新免费中文字幕在线| 精品久久蜜臀av无| 欧美日本视频| 91字幕亚洲| 亚洲男人天堂网一区| 一夜夜www| 精品欧美国产一区二区三| 99热6这里只有精品| 欧美最黄视频在线播放免费| 国语自产精品视频在线第100页| 久久精品人妻少妇| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜福利成人在线免费观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产在线观看jvid| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产高清videossex| 757午夜福利合集在线观看| 日本五十路高清| 舔av片在线| 美女 人体艺术 gogo| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产成年人精品一区二区| 国产午夜精品久久久久久| 黄色视频,在线免费观看| 制服诱惑二区| 怎么达到女性高潮| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲国产精品999在线| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲专区字幕在线| 亚洲电影在线观看av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 1024视频免费在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 国产精品,欧美在线| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 国产午夜福利久久久久久| 国产黄色小视频在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 成人手机av| 一本综合久久免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 好男人在线观看高清免费视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲男人天堂网一区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 免费在线观看影片大全网站| 夜夜爽天天搞| 中文字幕av在线有码专区| 两个人免费观看高清视频| 国产成人aa在线观看| 一级黄色大片毛片| 国产成人精品无人区| 99精品在免费线老司机午夜| 18禁国产床啪视频网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲黑人精品在线| 超碰成人久久| 国产精品九九99| 国产精品久久电影中文字幕| 男女午夜视频在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 久久久久久久久中文| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲成人中文字幕在线播放| 精品国产乱码久久久久久男人| 精品熟女少妇八av免费久了| 黑人欧美特级aaaaaa片| 熟女电影av网| 最好的美女福利视频网| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久九九热精品免费| 精品欧美一区二区三区在线| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产黄色小视频在线观看| 老司机福利观看| 日韩国内少妇激情av| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 免费搜索国产男女视频| 色尼玛亚洲综合影院| av免费在线观看网站| 他把我摸到了高潮在线观看| 中国美女看黄片| 黄色a级毛片大全视频| 午夜福利高清视频| 我要搜黄色片| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲中文av在线| av片东京热男人的天堂| 老司机深夜福利视频在线观看| 精品久久久久久,| 一夜夜www| 欧美一级毛片孕妇| 久久久久亚洲av毛片大全| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 欧美黑人巨大hd| 黄色毛片三级朝国网站| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 午夜福利在线在线| 国产真实乱freesex| 午夜两性在线视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| av在线天堂中文字幕| 99热这里只有精品一区 | 脱女人内裤的视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费观看人在逋| 欧美成人免费av一区二区三区| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 最新美女视频免费是黄的| 亚洲专区字幕在线| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| cao死你这个sao货| 欧美性长视频在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲一区二区三区不卡视频| 中文字幕熟女人妻在线| 午夜日韩欧美国产| 欧美性猛交黑人性爽| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产高清激情床上av| 免费看日本二区| 国产一区二区在线av高清观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲国产看品久久| 欧美色欧美亚洲另类二区| av免费在线观看网站| 色综合亚洲欧美另类图片| 一边摸一边抽搐一进一小说| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品99久久99久久久不卡| 岛国视频午夜一区免费看| 久久香蕉激情| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久亚洲精品不卡| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品av麻豆狂野| 日韩免费av在线播放| 久久精品综合一区二区三区| 高清毛片免费观看视频网站| 成年免费大片在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| av视频在线观看入口| 国产免费男女视频| 天天添夜夜摸| 国产熟女xx| 露出奶头的视频| 99国产精品99久久久久| 久久久国产精品麻豆| 成人欧美大片| 国产三级黄色录像| 色综合婷婷激情| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 免费在线观看日本一区| 国产午夜精品久久久久久| 脱女人内裤的视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 99精品在免费线老司机午夜| 久久久久久久午夜电影| 亚洲av成人精品一区久久| 97碰自拍视频| 一夜夜www| 国产区一区二久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 色哟哟哟哟哟哟| 午夜免费观看网址| 国产精华一区二区三区| 国产亚洲精品一区二区www| 国产在线观看jvid| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 国产91精品成人一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 高清在线国产一区| 亚洲精品在线观看二区| 大型av网站在线播放| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产不卡一卡二| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 午夜影院日韩av| а√天堂www在线а√下载| 国产精华一区二区三区| 久久热在线av| 午夜激情av网站| 一a级毛片在线观看| 欧美黑人巨大hd| 亚洲欧美精品综合久久99| 不卡av一区二区三区| av欧美777| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲成a人片在线一区二区| 女同久久另类99精品国产91| 成在线人永久免费视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲成人久久爱视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 99久久精品热视频| 男女那种视频在线观看| 国产精品九九99| 午夜日韩欧美国产| 一夜夜www| 日韩精品中文字幕看吧| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 国产免费男女视频| 老鸭窝网址在线观看| 婷婷亚洲欧美| 99riav亚洲国产免费| 动漫黄色视频在线观看| 久99久视频精品免费| 欧美+亚洲+日韩+国产| xxxwww97欧美| 在线观看一区二区三区| 国产高清videossex| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产三级黄色录像| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲国产中文字幕在线视频| 18禁国产床啪视频网站| 国产精品野战在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 黄色视频,在线免费观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲国产精品成人综合色| 日本成人三级电影网站| 一级作爱视频免费观看| 国产野战对白在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 国产1区2区3区精品| 嫩草影院精品99| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 啪啪无遮挡十八禁网站| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 午夜福利欧美成人| 九色国产91popny在线| 国产一区二区在线av高清观看| 黑人操中国人逼视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 黄色成人免费大全| 久9热在线精品视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| x7x7x7水蜜桃| 成人特级黄色片久久久久久久| 一级片免费观看大全| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲男人天堂网一区| 色av中文字幕| 国产av在哪里看| 好男人在线观看高清免费视频| 黄色成人免费大全| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产激情偷乱视频一区二区| 欧美午夜高清在线| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲国产精品合色在线| 淫秽高清视频在线观看| 久久久久国内视频| 99国产精品一区二区三区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 精品电影一区二区在线| tocl精华| 老汉色∧v一级毛片| 午夜精品在线福利| 国产av在哪里看| 国产成人啪精品午夜网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲国产欧美网| 狠狠狠狠99中文字幕| 中文亚洲av片在线观看爽| 一进一出抽搐动态| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久久久久久久免费视频了| 99国产综合亚洲精品| 国产精品一区二区精品视频观看| 精品熟女少妇八av免费久了| av国产免费在线观看| www.熟女人妻精品国产| 久久精品综合一区二区三区| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产真人三级小视频在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 深夜精品福利| 国产午夜精品论理片| 久久精品91无色码中文字幕| 久久久久久人人人人人| 精品日产1卡2卡| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一本综合久久免费| 一本久久中文字幕| av中文乱码字幕在线| 日韩欧美在线二视频| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美乱码精品一区二区三区| www.www免费av| 又粗又爽又猛毛片免费看| 精品欧美一区二区三区在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 特级一级黄色大片| 久久九九热精品免费| 国产亚洲精品第一综合不卡| 欧美大码av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 一级黄色大片毛片| 国内精品久久久久久久电影| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 窝窝影院91人妻| 亚洲av熟女| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产69精品久久久久777片 | 两性夫妻黄色片| 村上凉子中文字幕在线| 两个人看的免费小视频| 香蕉丝袜av| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品国产美女av久久久久小说| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 大型av网站在线播放| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 欧美一级毛片孕妇| 九色成人免费人妻av| 欧美激情久久久久久爽电影| 一级作爱视频免费观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产成人精品无人区| 国产高清视频在线播放一区| 国产激情久久老熟女| av有码第一页| 在线观看66精品国产| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲美女视频黄频| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 伊人久久大香线蕉亚洲五| 日本三级黄在线观看| 九九热线精品视视频播放| 在线观看66精品国产| 亚洲欧美激情综合另类| 18禁国产床啪视频网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 1024手机看黄色片| 午夜福利欧美成人| 亚洲在线自拍视频| 久久精品综合一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品免费久久久久久久清纯| 手机成人av网站| 久久久久国内视频| 999精品在线视频| 免费在线观看成人毛片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 午夜福利成人在线免费观看| 婷婷六月久久综合丁香| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 丰满人妻一区二区三区视频av | 日韩免费av在线播放| 在线看三级毛片| 国产一区在线观看成人免费| 国产精品 欧美亚洲| 免费电影在线观看免费观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 天堂√8在线中文| 精品久久久久久久久久免费视频| 岛国视频午夜一区免费看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产一区二区在线av高清观看| 中文字幕av在线有码专区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 99国产精品一区二区三区| av视频在线观看入口| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 高清毛片免费观看视频网站| 久久久久久九九精品二区国产 | 国产爱豆传媒在线观看 | 日本黄大片高清| 久久久久国内视频| 身体一侧抽搐| av片东京热男人的天堂| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产69精品久久久久777片 | 婷婷精品国产亚洲av在线| 女人被狂操c到高潮| 99久久精品热视频| 国产伦在线观看视频一区| 久9热在线精品视频| 国产av一区二区精品久久| 国产熟女xx| 久9热在线精品视频| 两个人免费观看高清视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 草草在线视频免费看| 国产精品亚洲美女久久久| 成人av在线播放网站| 亚洲激情在线av| 亚洲最大成人中文| 美女 人体艺术 gogo| 欧美黑人欧美精品刺激| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 十八禁网站免费在线| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产三级黄色录像| 亚洲电影在线观看av| 国产精品久久电影中文字幕| 丝袜美腿诱惑在线|