• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    辣椒溶桿菌NF87-2防治瓜類蔬菜蔓枯病的研究

    2021-02-23 05:33:40張心寧喬俊卿李玥蓉劉永鋒劉郵洲
    中國生物防治學報 2021年6期
    關鍵詞:芽胞發(fā)酵液孢子

    左 楊,張心寧,喬俊卿,李玥蓉,劉永鋒,劉郵洲*

    (1. 江蘇省農業(yè)科學院植物保護研究所,南京 210014;2. 江蘇省睢寧縣農業(yè)農村局,睢寧 221225;3. 南京工業(yè)大學生物與制藥工程學院,南京 211816)

    由亞隔孢殼屬瓜類黑腐球殼菌Didymella bryoniae引起的蔓枯病是世界范圍內的一種真菌土傳病害,可危害多種葫蘆科作物,如甜瓜、西瓜、黃瓜、哈密瓜等,嚴重影響瓜類蔬菜的產量和品質[1]。據報道,西甜瓜蔓枯病田間發(fā)病率一般為15%~25%,嚴重時高達60%~80%,減產可達30%以上[2]。病原菌以分生孢子器或子囊殼在宿主殘骸中越冬,亦可存活在種子中,一般帶菌率為 5%~30%,病菌在種子上可存活18個月以上[3]。蔓枯病在瓜類蔬菜的整個生育期都能危害,植株各部位均可受害,其中以葉片、莖蔓和果實受害為主,引起葉片、莖蔓枯死和果實腐爛。高濕及晝夜溫差大有利于蔓枯病的發(fā)生,在田間溫度20 ℃~25 ℃、相對濕度85%以上時,病原菌能夠迅速侵染寄主組織并大量繁殖,可在短時間內導致大量藤蔓枯死,造成嚴重的經濟損失[4]。

    國內有關瓜類蔬菜蔓枯病的防治研究起步較晚,目前并無良好的高抗品種。生產上采取的防治方法主要是化學防治,長期、大量使用化學藥劑不僅增加農產品有毒化學物質殘留,影響農產品安全和人類健康,而且造成生態(tài)環(huán)境嚴重污染,病原菌易產生抗藥性等[5]。生物防治對人畜安全、環(huán)境兼容性好、病菌不易產生抗藥性,越來越受到人們的重視,并初見成效[6]。目前國內外對蔓枯病菌研究和應用較多的生防真菌主要是木霉菌[7,8],生防細菌主要有芽胞桿菌屬Bacillus和假單胞菌屬Pseudomonas等[9-12],利用辣椒溶桿菌Lysobacter capsici防治蔓枯病尚未見報道。此外,煙管菌Bjerkandera adustaM1對西瓜蔓枯病菌有較好的抑制作用,溫室盆栽防效高達74.3%,在掃描電鏡下觀察到煙管菌M1能夠直接穿透西瓜蔓枯病菌菌絲[6]。撕裂蠟孔菌Ceriporia lacerateHG2011的發(fā)酵液能防治黃瓜蔓枯病,降低發(fā)病率和病情指數,同時還可以提高土壤酶活性,促進黃瓜幼苗吸收養(yǎng)分、健康生長[13]。

    本研究以蔓枯病菌DB-20為靶標菌,通過平板對峙、種子發(fā)芽、幼苗生長和溫室盆栽防治試驗,篩選出理想的拮抗細菌有效防治瓜類蔬菜蔓枯病,為開發(fā)防治瓜類蔬菜蔓枯病的生物殺菌劑提供理論依據。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 供試菌株 拮抗細菌-辣椒溶桿菌Lysobacter capsiciNF87-2、枯草芽胞桿菌Bacillus subtilisPTS-394、綠針假單胞菌Pseudomonas chlororaphisYL-1、萎縮芽胞桿菌Bacillus atrophaeusYL3、貝萊斯芽胞桿菌Bacillus velezensisYL21和短小芽胞桿菌Bacillus pumilusZR3-2,病原真菌-蔓枯病菌Didymella bryoniaeDB-20均由本實驗室保存并提供。

    1.1.2 植物材料 西瓜品種:K3(感病品種,江蘇省農業(yè)科學院蔬菜研究所提供),京欣一號和早佳8424(市售常見品種);黃瓜品種:研四黃瓜(市售常見品種)。

    1.1.3 培養(yǎng)基及營養(yǎng)液 蔓枯病菌的培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar , PDA)培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、水1000 mL;拮抗細菌的培養(yǎng)基為LB ( Luria-Bertani )培養(yǎng)基:胰蛋白胨10 g、酵母粉5 g、NaCl 10 g、水1000 mL。

    1.1.4 拮抗細菌發(fā)酵液和次生代謝產物的制備 挑取拮抗細菌的新鮮菌苔接種于100 mL LB液體培養(yǎng)基中,28 ℃、150 r/min搖培36 h,得到拮抗菌發(fā)酵液,用空白LB培養(yǎng)液調至菌含量109CFU/mL(下同),備用。采用酸沉淀法[14],將芽胞桿菌發(fā)酵液于4 ℃、10000 r/min離心15 min,上清液用6 mol/L HCl調pH至2.0,4 ℃沉淀12 h,10000 r/min離心20 min,棄上清液,收集沉淀,得到的沉淀加入2 mL甲醇(MeOH)后用1 mol/L NaOH調節(jié)pH至7.0,獲得芽胞桿菌脂肽類化合物的粗提物,放?20 ℃保存?zhèn)溆?。采用乙酸乙酯萃取法[15],將辣椒溶桿菌NF87-2發(fā)酵液于4 ℃、10000 r/min離心15 min,上清液用6 mol/L HCl調pH至3.0,以等體積乙酸乙酯進行萃取,上層萃取液以旋轉蒸發(fā)儀蒸干濃縮,以2 mL甲醇-水溶液(MeOH-H2O,體積比2:1)溶解,獲得辣椒溶桿菌NF87-2發(fā)酵液的代謝產物粗提物,放?20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.1.5 蔓枯病菌的培養(yǎng)和孢子懸液的配制 蔓枯病菌在PDA平板上28 ℃培養(yǎng)7 d 后,用滅菌的打孔器打孔直徑5 mm的圓形菌塊,隨后用滅菌手術刀在新鮮黃瓜上去除同等大小面積的表皮后放置圓形菌塊,室溫放置5~7 d。待蔓枯病菌的分生孢子長出后,用滅菌毛刷蘸取少量無菌水,輕輕將表面孢子刮下,放至無菌水中。血球計數板檢測孢子數目,配置成105孢子/mL的懸浮液。

    1.2 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制試驗

    蔓枯病菌DB-20在PDA平板28 ℃培養(yǎng) 7 d 后,沿菌落邊緣用直徑 5 mm 打孔器打孔,將菌塊置于PDA 平板中央。培養(yǎng)皿四周呈“十”字形(距培養(yǎng)皿中心 30 mm)滴加拮抗菌發(fā)酵液(平板水平線,菌含量109CFU/mL)和清水對照(平板豎直線)各 5 μL。每處理重復3皿。28 ℃恒溫培養(yǎng),待對照處理病原菌菌落長滿平板時測量各處理菌落生長半徑,計算抑制率,抑制率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)×100。

    將5 mm的蔓枯病菌菌塊置于PDA 平板中央。培養(yǎng)皿四周呈“十”字形(距培養(yǎng)皿中心 30 mm)打孔,孔徑為5 mm。孔內分別滴加清水對照 10 μL、溶劑對照(甲醇或甲醇水)10 μL、拮抗菌代謝產物 5和10 μL,共計4個處理,每處理重復3皿。28 ℃恒溫培養(yǎng)4 d后,測量各處理病原菌菌落生長半徑。

    1.3 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制試驗

    試驗共設7個處理:3株拮抗細菌NF87-2、PTS-394和YL21的發(fā)酵液、代謝產物和清水對照。在滅菌凹玻片中分別滴加40 μL的拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(菌含量108CFU/mL)、代謝產物和清水(或甲醇),隨后加入40 μL的蔓枯病菌DB-20孢子液,混勻。將凹玻片放置含有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中,25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h。當清水(或甲醇)對照處理的孢子萌發(fā)率達到90%以上時,調查各處理孢子萌發(fā)情況,計算孢子萌發(fā)抑制率,抑制率(%)=(對照孢子萌發(fā)數-拮抗細菌發(fā)酵液或代謝產物處理后孢子萌發(fā)數)/對照孢子萌發(fā)數×100,調查孢子總數設定為300個。每個處理重復3次。

    1.4 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響

    采用培養(yǎng)皿中放置保濕濾紙進行發(fā)芽試驗。選取3個西瓜品種,每個品種選取500粒飽滿的種子,每個處理100粒,分別浸于無菌水(CK水)、DB-20孢子懸浮液+無菌水(體積比1:1)(CK?。┖虳B-20孢子懸浮液+拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(體積比1:1,菌含量108CFU/mL)中,共計5個處理,24 h后取出,將種子分別擺放在直徑為15 cm的培養(yǎng)皿上,28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),3和7 d后分別調查種子發(fā)芽率。試驗重復3次。值得注意的是,拮抗細菌發(fā)酵液的菌含量如果過高(>108CFU/mL)會影響西瓜種子正常的發(fā)芽和出苗,因此本研究中均采用拮抗細菌發(fā)酵液10倍稀釋液(菌含量108CFU/mL)。發(fā)芽率(%)=(發(fā)芽種子粒數/供試種子總粒數)×100。

    1.5 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜出苗的影響

    選取3個西瓜品種,每個品種選取出芽且芽長基本一致的500粒種子,每個處理100粒,分別浸于無菌水(CK水)、DB-20孢子懸浮液+無菌水(體積比1:1)(CK病)和DB-20孢子懸浮液+拮抗菌發(fā)酵液10倍稀釋液(體積比1:1,菌含量108CFU/mL)中,共計5個處理,30 min后取出,播于育秧盤中,常規(guī)管理,7 d后調查出苗情況。試驗重復3次。

    1.6 拮抗細菌和代謝產物防治黃瓜蔓枯病的溫室盆栽試驗

    將長至兩片真葉的健康黃瓜幼苗移栽至裝有200 g無菌土的花盆中(1棵/盆),緩苗15 d,共計240盆。試驗設8個處理:40 mL無菌水(CK水),同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL無菌水(CK?。?,同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL拮抗菌發(fā)酵液(3株拮抗菌NF87-2、PTS-394和YL21,菌含量109CFU/mL),同時接種20 mL DB-20孢子懸浮液+20 mL拮抗菌代謝產物(3株拮抗菌NF87-2、PTS-394和YL21)。每個處理10株黃瓜幼苗,試驗重復3次。各處理液用噴壺均勻噴施在黃瓜植株的莖和葉片上,7 d后再噴施拮抗菌發(fā)酵液或代謝產物一次。14 d后調查病情指數,計算防效。分級標準[6]:0級:植株健康,莖葉處無病斑,或發(fā)病葉小于1%;1級:莖葉有小塊病斑。發(fā)病葉為1%~25%;2級:莖葉有大塊病斑,發(fā)病葉為26%~50%;3級:莖葉有大量病斑,枯萎卷曲,發(fā)病葉為51%~75%;4級:植株有大量病斑,發(fā)病葉片為76%~90%;5級:發(fā)病葉片占到90%以上或全株病死。病情指數=Σ(病級數×該病級植株數)/(最大病級數×植株總株數)×100,防治效果(%)=(對照組病情指數-處理組病情指數)/對照病情指數×100。

    1.7 數據統(tǒng)計與分析

    采用Excel 2010和DPS 7.05軟件進行統(tǒng)計分析,采用鄧肯氏新復極差法進行差異顯著性檢驗。

    2 結果與分析

    2.1 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌菌素生長的室內抑制作用

    試驗結果表明(圖1,表1),6株拮抗菌對蔓枯病菌菌絲生長均表現出一定的抑制作用,但不同細菌的抑制能力有所不同。辣椒溶桿菌NF87-2的抑菌效果最好,可以形成明顯的抑菌帶,抑制率為 81.6%;其次是貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394,抑制率分別為56.5%和55.5%;其余3株拮抗細菌的抑制率為 38.4%~42.6%,6株拮抗菌對蔓枯病菌菌絲生長的抑制率由低到高是 ZR3-2<YL3<YL-1<PTS-394<YL21<NF87-2。選取效果良好的辣椒溶桿菌 NF87-2、枯草芽胞桿菌 PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21開展后續(xù)試驗。

    圖1 拮抗細菌對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Fig. 1 Inhibition efficacy of six antagonistic bacteria on D. bryoniae

    拮抗細菌代謝產物對蔓枯病菌的平板對峙生長試驗結果表明(圖2,表1),辣椒溶桿菌NF87-2用乙酸乙酯提取的代謝產物、芽胞桿菌PTS-394和YL21酸沉淀提取的脂肽類粗提物對蔓枯病菌菌絲生長均具有抑制作用,清水對照和溶劑對照均無抑制作用。當對照處理的病原菌生長半徑達30 mm時,拮抗菌代謝產物處理的病原菌生長半徑為11.0~12.1 mm。各菌株代謝產物5 μL處理和10 μL處理的病原菌生長半徑基本無差異。

    表1 拮抗細菌及代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Table 1 Inhibition efficacy of antagonistic strains and secondary metabolites against D. bryoniae in vitro

    圖2 3株拮抗細菌代謝產物對蔓枯病菌菌絲生長的室內抑制作用Fig. 2 Inhibition efficacy of secondary metabolites produced by three antagonistic bacteria on D. bryoniae

    2.2 拮抗細菌和代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用

    清水對照處理6 h后,幾乎所有的蔓枯病菌孢子均正常萌發(fā),形成細長芽管,萌發(fā)率為95.3%。3株拮抗細菌發(fā)酵液10倍稀釋液處理均對蔓枯病菌的孢子萌發(fā)表現出一定的抑制作用,其中辣椒溶桿菌NF87-2處理的抑制作用最強,蔓枯病菌孢子萌發(fā)率僅為38.7%,抑制率為59.4%;枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理后,蔓枯病菌孢子萌發(fā)率分別為69.3%和71.7%,抑制率分別為27.3%和24.8%(表2)。

    甲醇溶劑處理后,蔓枯病菌的孢子萌發(fā)率為 90.3%,略低于清水對照處理。3株拮抗細菌分泌的次生代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用較強,與各自對應的發(fā)酵液相比,孢子萌發(fā)均呈下降趨勢。辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21代謝產物處理后,蔓枯病菌的孢子萌發(fā)抑制率分別為67.2%、37.3%和35.8%(表2)。

    表2 3株拮抗細菌及其代謝產物對蔓枯病菌孢子萌發(fā)的抑制作用Table 2 Inhibition efficacy of three antagonistic bacteria and secondary metabolites on spore germination of D. bryoniae

    2.3 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響

    3個西瓜品種清水對照處理無差異,3 d后發(fā)芽率為46%~49%,7 d后發(fā)芽率為78%~82%。蔓枯病菌孢子液處理西瓜種子后,發(fā)芽率明顯下降,3和7 d后發(fā)芽率分別為15%~20%和31%~48%(表3)。

    拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對種子發(fā)芽有明顯的影響,其中辣椒溶桿菌NF87-2處理后7 d,感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為69%、83%和75%,與病原菌DB-20處理組相比,發(fā)芽率提高了122.6%、72.9%和70.5%(表3)。

    貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394處理組的種子發(fā)芽率相當,處理后3 d感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為23%~25%、36%~38%和30%~32%,處理后7 d感病品種K3、京欣一號和早佳8424的發(fā)芽率分別為49%、66%~69%和59%~61%,與病原菌處理組相比,發(fā)芽率提高了58.1%、37.5%~43.8%和34.1%~38.6%(表3)。

    表3 3株拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜種子發(fā)芽的影響Table 3 Seed germination rate after inoculated with antagonistic strains and D.bryoniae

    2.4 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜出苗的影響

    感病品種K3清水對照處理組的出苗率為83%,但接種蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液后,發(fā)病非常嚴重,出苗率僅為6%,即使施用辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理,出苗率仍然較低,分別為21%、11%和8%(圖3)。

    京欣一號品種試驗中清水對照處理組的出苗率為89%,蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液處理組的出苗率為38%,顯著低于對照處理。辣椒溶桿菌NF87-2與蔓枯病菌同時接種處理組的出苗率為82%,與清水對照處理效果相當,枯草芽胞桿菌PTS-394與蔓枯病菌同時接種處理的出苗率和貝萊斯芽胞桿菌YL21處理組相當,分別為53%和51%,比病原菌處理組分別提高了39.5%和34.2%(圖3)。

    早佳8424品種清水對照處理組的出苗率為88%,蔓枯病菌DB-20孢子懸浮液處理組的出苗率下降為30%,3株拮抗細菌(辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21)與蔓枯病菌接種處理后,西瓜幼苗的出苗率明顯提高,分別為76%、48%和43%,比病原菌處理組分別提高了153.3%、60.0%和43.3%(圖3)。

    圖3 拮抗細菌與蔓枯病菌同時接種處理對西瓜幼苗生長的影響Fig. 3 Seedling growth after inoculated with antagonistic strains and D. bryoniae at the same time

    2.5 拮抗細菌和代謝產物對黃瓜蔓枯病的盆栽防治效果

    3株拮抗細菌發(fā)酵液處理對黃瓜蔓枯病具有明顯的防治效果,空白培養(yǎng)基對照處理的病情指數較低,第2次施藥后14 d的病情指數為0.8,單獨接種蔓枯病菌孢子液的黃瓜苗發(fā)病嚴重,第2次施藥后14 d的病情指數為 39.3。辣椒溶桿菌 NF87-2發(fā)酵液處理后的防效最好,病情指數顯著低于病原菌處理,防治效果為81.6%,貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394發(fā)酵液處理的防治效果相當,分別為71.4%和67.4%;辣椒溶桿菌NF87-2、貝萊斯芽胞桿菌YL21和枯草芽胞桿菌PTS-394分泌的次生代謝產物對黃瓜蔓枯病也有一定的防治效果,但均比各自的發(fā)酵液防治效果低,分別是66.5%、57.2%和54.8%(表4、圖4)。

    圖4 辣椒溶桿菌NF87-2、枯草芽胞桿菌PTS-394和貝萊斯芽胞桿菌YL21及其代謝產物對黃瓜蔓枯病的防治效果Fig. 4 Control effects of three antagonistic strains and their secondary metabolites on cucumber gummy stem blight in pot experiment

    表4 3株拮抗細菌發(fā)酵液及其代謝產物對黃瓜蔓枯病的溫室盆栽防效試驗Table 4 Control effects of three antagonistic strains and their secondary metabolites on cucumber gummy stem blight in pot experiment

    3 討論

    溶桿菌屬是20世紀70年代末新建立的一個屬,屬于黃單胞科Xanthomonadaceae,γ-變形菌門Gramma proteobacteria。革蘭氏陰性細菌,無芽胞,菌體桿狀,無鞭毛。該屬的細菌一般都能產生黃色至黃褐色色素,細菌基因組中G+C含量很高,一般為65%~70%[16]。這類細菌能產生胞外酶、抗生素及表面活性物質,對許多微生物包括真菌、細菌及線蟲等都表現出拮抗活性[17]。目前研究應用較多的菌株包括產酶溶桿菌L. enzymogenes[18-20]、膠狀溶桿菌L. gummosus[21]、抗生素溶桿菌L. antibioticus[22,23]和辣椒溶桿菌[24-27]。前期研究結果表明,辣椒溶桿菌 NF87-2可以很好地抑制多種病原真菌菌絲生長,并且對辣椒猝倒病有很好的田間防效[15]。本文室內外抑菌試驗的結果表明,菌株NF87-2能有效防控瓜類蔬菜蔓枯病,是一株非常有應用前景的生防菌。

    蔓枯病作為危害瓜類蔬菜的一種重要病害,當前研究大部分集中在病原菌鑒定、簡單的抗病遺傳規(guī)律、抗病材料篩選和防治方法等方面[4]。通過觀察、試驗、模擬、定性或定量分析,探明不同環(huán)境下寄主—病原菌相互作用而形成的時空動態(tài)規(guī)律,可有助于實現病害的準確預測和綜合治理[28]。Punja等[11]研究發(fā)現,蔓枯病的藥劑防治時間很重要??莶菅堪麠U菌QST713制劑能夠有效防治黃瓜蔓枯病,如果先接種蔓枯病菌,24 h后噴施枯草芽胞桿菌發(fā)酵液,黃瓜蔓枯病發(fā)生嚴重,防效幾乎為0;反之,如果先接種枯草芽胞桿菌發(fā)酵液,24 h后接種蔓枯病菌孢子液,則發(fā)病率明顯下降。Santos等[28]研究發(fā)現,蔓枯病菌對濕度有很強的敏感性,建議生產上避開雨季種植西甜瓜,可以有效防治蔓枯病的發(fā)生。Rennberger等[29]研究了蔓枯病菌子囊孢子在空氣中的傳播動力學,發(fā)現西瓜植株接種蔓枯病菌后,292~313 d后在植株殘余組織上仍然可以檢測到子囊孢子;平板上的子囊孢子7 d后釋放了90%,蔓枯病的發(fā)病率隨著接種源地理位置距離的增加而下降??傊莶【淖幽益咦邮窃摬『α餍械闹饕ぞ?,葫蘆科作物的殘余組織可以作為其長期存活的介體,因此在生產上應該及早、徹底地清除或燒毀殘余組織,阻斷蔓枯病菌的生存條件[29]。本文的研究結果表明,蔓枯病菌在植物生長的全生育期都應該注意防控,首先是種子處理,帶菌種子的發(fā)芽率僅為48%,菌株NF87-2同時接種處理后種子發(fā)芽率提高為83%,與清水對照相當;其次在苗床階段,接種蔓枯病菌后西瓜出苗率僅為38%,而用菌株NF87-2同時接種處理后可以明顯減緩發(fā)病率,出苗率提高為82%;黃瓜幼苗移栽后,菌株NF87-2和蔓枯病菌同時接種處理,防效顯著。上述的試驗結果對于生產上開發(fā)利用辣椒溶桿菌NF87-2,確定其最佳防治時間、使用劑量和防治效果提供數據支撐。

    前人研究結果表明,蔓枯病菌脅迫下,西甜瓜體內的防御酶-苯丙氨酸解氨酶 PAL、多酚氧化酶 PPO和過氧化物酶POD會發(fā)生明顯變化,并且這種變化與西甜瓜品種的抗性直接相關[30]。除此之外,西甜瓜品種內源激素含量的變化及其相關基因的表達也與其對蔓枯病的抗病能力是相關的,比如抗蔓枯病甜瓜抗源PI420145葉片中低濃度的乙烯以及高濃度的茉莉酸和水楊酸提高了其對蔓枯病的抗病能力,葉片中EIN 2、PDF1.2、EDS 5和NPRI在接種早期的高表達促使其比感蔓枯病甜瓜“白皮脆”(對照)更早一步對蔓枯病菌的侵染作出反應[31]。任海英等[32]研究發(fā)現,對蔓枯病抗性不同的甜瓜品種感染蔓枯病后 APX的轉錄水平發(fā)生顯著變化,與對照相比,有的抗性品種APX轉錄水平升高,但是有的抗性品種APX轉錄水平降低,推測APX在甜瓜與蔓枯病菌的互作過程中可能與其他多種信號網絡交叉互作。Ruangwong等[8]發(fā)現木霉菌PSU-P1對西甜瓜蔓枯病有很好的防效,同時發(fā)現木霉菌處理后,寄主體內的POD、PPO、幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶均明顯提高,這可能與防御反應直接相關。本文中菌株NF87-2分泌的次生代謝產物室內抑制蔓枯病菌孢子萌發(fā)的效果優(yōu)于菌株發(fā)酵液,表明菌株NF87-2分泌的次生代謝產物是其發(fā)揮抑菌活性所必須的。但在盆栽試驗中,菌株NF87-2發(fā)酵液對蔓枯病的防效比其次生代謝產物高,呈顯著性差異,這其中是否也包含菌株NF87-2處理后,引起寄主植株體內防御酶系、激素的變化,從而激發(fā)了寄主的抗病性?后續(xù)將研究拮抗細菌代謝產物對西瓜種子發(fā)芽和出苗的影響,同時監(jiān)測拮抗細菌或代謝產物與病原菌同時接種處理后西瓜種子、幼苗或植株體內各種防御酶系、激素的變化,為闡明拮抗細菌的作用機制提供理論依據。

    猜你喜歡
    芽胞發(fā)酵液孢子
    單細胞分析研究二氧化氯對殺蚊細菌球形賴氨酸芽胞桿菌芽胞的影響
    一種簡單高效的芽胞純化方法及其效果評價
    高壓熱殺菌技術滅活細菌芽胞機理研究進展
    連翹內生真菌的分離鑒定及其發(fā)酵液抑菌活性和HPLC測定
    桑黃纖孔菌發(fā)酵液化學成分的研究
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:03
    鯽魚黏孢子蟲病的診斷與防治
    制作孢子印
    無所不在的小孢子
    石頭里的孢子花粉
    生物進化(2014年2期)2014-04-16 04:36:34
    芽胞結構的研究進展
    日韩三级伦理在线观看| 一级二级三级毛片免费看| 干丝袜人妻中文字幕| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 伦理电影大哥的女人| 免费高清在线观看视频在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| 国产激情偷乱视频一区二区| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日韩伦理黄色片| a级毛色黄片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 熟女电影av网| 日本黄色片子视频| 深夜a级毛片| 国产激情偷乱视频一区二区| 三级毛片av免费| 免费看美女性在线毛片视频| 麻豆国产97在线/欧美| 高清欧美精品videossex| 中文天堂在线官网| 一级黄片播放器| 五月伊人婷婷丁香| 色网站视频免费| 日韩欧美一区视频在线观看 | 亚洲国产欧美人成| 日本黄大片高清| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久久网色| 日韩大片免费观看网站| 亚洲精品,欧美精品| 国产成人freesex在线| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲精品自拍成人| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 嫩草影院入口| 91av网一区二区| 免费观看在线日韩| 国产69精品久久久久777片| 一个人免费在线观看电影| 嫩草影院精品99| 亚洲最大成人av| 亚洲第一区二区三区不卡| 99久久人妻综合| 51国产日韩欧美| 日韩av在线大香蕉| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产成人aa在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| kizo精华| 午夜老司机福利剧场| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲色图av天堂| 春色校园在线视频观看| 中文资源天堂在线| 国产淫片久久久久久久久| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 一级爰片在线观看| 亚洲av成人av| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 我的老师免费观看完整版| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美高清性xxxxhd video| 国产av在哪里看| 丝瓜视频免费看黄片| 久久午夜福利片| 免费电影在线观看免费观看| 身体一侧抽搐| 国产91av在线免费观看| 国产精品久久视频播放| 免费看美女性在线毛片视频| 精品国产三级普通话版| 啦啦啦韩国在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 在线观看一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区四那| 一级a做视频免费观看| 日韩人妻高清精品专区| 乱码一卡2卡4卡精品| 水蜜桃什么品种好| 精品久久国产蜜桃| 久久精品人妻少妇| 欧美日本视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 一边亲一边摸免费视频| 久久久a久久爽久久v久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品一区二区性色av| 九色成人免费人妻av| av.在线天堂| 夫妻性生交免费视频一级片| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 一级毛片久久久久久久久女| 成人特级av手机在线观看| 热99在线观看视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产高清有码在线观看视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 免费看不卡的av| av线在线观看网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 激情 狠狠 欧美| 麻豆国产97在线/欧美| 国产亚洲5aaaaa淫片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 插逼视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 男人狂女人下面高潮的视频| 观看美女的网站| 亚洲乱码一区二区免费版| 黄色一级大片看看| av线在线观看网站| 2021少妇久久久久久久久久久| 国模一区二区三区四区视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 女人被狂操c到高潮| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 91在线精品国自产拍蜜月| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| av.在线天堂| 国产成人aa在线观看| 国产极品天堂在线| 亚洲性久久影院| 免费看日本二区| 97热精品久久久久久| 少妇丰满av| 精品一区二区三区人妻视频| 99久久精品一区二区三区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 一区二区三区免费毛片| 久久久久久久久大av| 1000部很黄的大片| 亚洲av免费在线观看| 伦理电影大哥的女人| 亚洲在线自拍视频| 简卡轻食公司| 久久久色成人| 色视频www国产| 少妇人妻精品综合一区二区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 在线观看一区二区三区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲av日韩在线播放| 波野结衣二区三区在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 最近的中文字幕免费完整| 少妇人妻精品综合一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网 | 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美精品国产亚洲| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 婷婷色麻豆天堂久久| av天堂中文字幕网| 伦理电影大哥的女人| 国产探花极品一区二区| kizo精华| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 丰满少妇做爰视频| 久久久色成人| 久久久久久久国产电影| 精品一区二区三卡| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日本一二三区视频观看| 一本久久精品| 91精品国产九色| 成人一区二区视频在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产淫语在线视频| 日韩一区二区视频免费看| 欧美高清成人免费视频www| 欧美人与善性xxx| 亚洲色图av天堂| 寂寞人妻少妇视频99o| 22中文网久久字幕| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲av男天堂| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产亚洲91精品色在线| av一本久久久久| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲精品影视一区二区三区av| 免费观看无遮挡的男女| 婷婷色综合www| 人妻少妇偷人精品九色| 国产在视频线精品| 在线观看美女被高潮喷水网站| 中文欧美无线码| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩欧美三级三区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产中年淑女户外野战色| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲欧美日韩东京热| 老司机影院毛片| 国产不卡一卡二| 久久这里只有精品中国| 久久精品久久精品一区二区三区| 精品久久久精品久久久| 特大巨黑吊av在线直播| 人妻一区二区av| 美女大奶头视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 日韩国内少妇激情av| 亚洲成色77777| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 我的女老师完整版在线观看| 日日撸夜夜添| 2018国产大陆天天弄谢| 99热网站在线观看| 九色成人免费人妻av| 久久韩国三级中文字幕| 免费看美女性在线毛片视频| 日本一二三区视频观看| 高清欧美精品videossex| 简卡轻食公司| 亚洲国产最新在线播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 婷婷色综合www| 久久精品久久精品一区二区三区| 超碰av人人做人人爽久久| or卡值多少钱| 亚洲欧美精品专区久久| 日本与韩国留学比较| 亚洲乱码一区二区免费版| 一区二区三区高清视频在线| 久久久久精品久久久久真实原创| 男人舔女人下体高潮全视频| 五月伊人婷婷丁香| 黄片无遮挡物在线观看| ponron亚洲| 少妇高潮的动态图| 国产成人精品久久久久久| 欧美日韩综合久久久久久| 免费观看av网站的网址| 日本-黄色视频高清免费观看| 国内精品美女久久久久久| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久国产乱子免费精品| 黑人高潮一二区| 99热网站在线观看| 国产成年人精品一区二区| 国产精品一区二区三区四区久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日本欧美国产在线视频| 超碰97精品在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 超碰97精品在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 在线观看一区二区三区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久久久久久久中文| 成年女人看的毛片在线观看| 精品国产三级普通话版| 日韩制服骚丝袜av| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲美女视频黄频| 精品熟女少妇av免费看| 日韩欧美精品v在线| 亚洲内射少妇av| 大片免费播放器 马上看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美区成人在线视频| 久久精品国产自在天天线| 天堂√8在线中文| 色播亚洲综合网| 又爽又黄无遮挡网站| 夜夜爽夜夜爽视频| av在线亚洲专区| 日韩人妻高清精品专区| 97超视频在线观看视频| 国产男人的电影天堂91| 一夜夜www| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 亚洲性久久影院| 日本黄大片高清| 欧美日韩精品成人综合77777| 天堂√8在线中文| 亚洲欧美清纯卡通| 水蜜桃什么品种好| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产美女午夜福利| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美最新免费一区二区三区| 99久久精品热视频| 亚洲欧美清纯卡通| 国产精品久久久久久久久免| 精品一区二区三卡| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久99精品国语久久久| 色吧在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产亚洲一区二区精品| 久久草成人影院| 久久久久久久久中文| 国产精品1区2区在线观看.| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产高清国产精品国产三级 | 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲人与动物交配视频| 免费看日本二区| 联通29元200g的流量卡| 联通29元200g的流量卡| ponron亚洲| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 永久免费av网站大全| 久久久久久伊人网av| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲精品国产av成人精品| 日本一二三区视频观看| 久久久久性生活片| 日本一二三区视频观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 天堂俺去俺来也www色官网 | 国产人妻一区二区三区在| 51国产日韩欧美| 亚洲无线观看免费| 成年女人在线观看亚洲视频 | 国产精品一区二区性色av| 日本与韩国留学比较| 久久久久久久久久黄片| 黑人高潮一二区| 国产精品久久久久久av不卡| 熟女人妻精品中文字幕| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久精品免费免费高清| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲无线观看免费| 少妇的逼水好多| 黄色配什么色好看| 久久99热这里只有精品18| 大片免费播放器 马上看| 亚洲国产成人一精品久久久| 免费看光身美女| 99视频精品全部免费 在线| av天堂中文字幕网| 三级国产精品欧美在线观看| av免费在线看不卡| 亚洲av一区综合| 别揉我奶头 嗯啊视频| 欧美不卡视频在线免费观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲18禁久久av| 91在线精品国自产拍蜜月| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲欧美清纯卡通| a级毛色黄片| 免费大片黄手机在线观看| 欧美区成人在线视频| 免费观看a级毛片全部| 久久久久久久久中文| 欧美变态另类bdsm刘玥| 少妇高潮的动态图| 街头女战士在线观看网站| 青春草亚洲视频在线观看| 日本一二三区视频观看| 简卡轻食公司| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产永久视频网站| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本与韩国留学比较| 五月伊人婷婷丁香| 久久久国产一区二区| 成人午夜高清在线视频| 97精品久久久久久久久久精品| 高清视频免费观看一区二区 | 熟女电影av网| 中文天堂在线官网| 国产真实伦视频高清在线观看| 欧美一区二区亚洲| 午夜福利视频1000在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 成人欧美大片| 久久久欧美国产精品| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 2018国产大陆天天弄谢| 欧美成人a在线观看| 99热全是精品| 国产在视频线在精品| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99久久精品一区二区三区| 成人亚洲欧美一区二区av| 人人妻人人澡欧美一区二区| 美女国产视频在线观看| 国产精品三级大全| 久久精品夜色国产| 在线观看人妻少妇| 欧美+日韩+精品| 久久久久久久久久久免费av| 国产极品天堂在线| 日韩中字成人| 一级a做视频免费观看| 午夜激情福利司机影院| 久久久久久久亚洲中文字幕| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 精品一区二区免费观看| 免费观看性生交大片5| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人综合一区亚洲| av在线蜜桃| 黑人高潮一二区| 观看美女的网站| av黄色大香蕉| 伦理电影大哥的女人| 美女大奶头视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 成人美女网站在线观看视频| 精品熟女少妇av免费看| 五月玫瑰六月丁香| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 在线观看一区二区三区| 亚洲最大成人av| 少妇熟女欧美另类| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产永久视频网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 丝袜喷水一区| 国产免费福利视频在线观看| 欧美bdsm另类| 日本免费a在线| 亚洲国产精品国产精品| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美潮喷喷水| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲成人av在线免费| 街头女战士在线观看网站| 欧美日本视频| 99视频精品全部免费 在线| 一级毛片 在线播放| 午夜精品在线福利| 又爽又黄无遮挡网站| 我的老师免费观看完整版| 激情五月婷婷亚洲| 插阴视频在线观看视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产视频内射| kizo精华| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av福利一区| 亚洲精品国产av成人精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 男人狂女人下面高潮的视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| av专区在线播放| 一区二区三区高清视频在线| 黑人高潮一二区| 最近中文字幕高清免费大全6| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| www.av在线官网国产| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 一级黄片播放器| 亚洲精品一二三| 午夜日本视频在线| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 免费黄网站久久成人精品| 欧美97在线视频| 国产精品一区二区在线观看99 | 高清毛片免费看| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国精品久久久久久国模美| 日本一本二区三区精品| 国产高潮美女av| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 晚上一个人看的免费电影| 午夜福利高清视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 午夜激情福利司机影院| 色综合色国产| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲国产最新在线播放| 中文字幕av在线有码专区| av国产免费在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲久久久久久中文字幕| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 噜噜噜噜噜久久久久久91| 如何舔出高潮| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产在视频线精品| 天堂影院成人在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 国产成人精品婷婷| 日韩av在线大香蕉| 国产91av在线免费观看| 人妻一区二区av| 人妻一区二区av| 成人毛片60女人毛片免费| 97超视频在线观看视频| 午夜爱爱视频在线播放| 国产有黄有色有爽视频| 男女国产视频网站| 国产中年淑女户外野战色| kizo精华| av在线观看视频网站免费| 视频中文字幕在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 黄色日韩在线| 亚洲成人中文字幕在线播放| 六月丁香七月| 真实男女啪啪啪动态图| 日韩欧美 国产精品| 久久久久久国产a免费观看| 伊人久久国产一区二区| 国产精品1区2区在线观看.| 午夜激情久久久久久久| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 精品国内亚洲2022精品成人| 欧美精品一区二区大全| av一本久久久久| 亚洲成人一二三区av| av专区在线播放| 亚洲av男天堂| 成年人午夜在线观看视频 | 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产熟女欧美一区二区| 欧美精品国产亚洲| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人妻一区二区av| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲av免费在线观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲经典国产精华液单| 在线免费观看的www视频| 国模一区二区三区四区视频| 搞女人的毛片| 热99在线观看视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久久精品免费免费高清| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产老妇伦熟女老妇高清| 看黄色毛片网站| 亚洲国产色片| 波野结衣二区三区在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产 一区 欧美 日韩| 国内精品美女久久久久久| 美女内射精品一级片tv| 亚洲在线自拍视频| 亚洲真实伦在线观看| 麻豆国产97在线/欧美| 色尼玛亚洲综合影院| 日韩av不卡免费在线播放| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久久久久久久久久免费av| 2018国产大陆天天弄谢| 国产精品伦人一区二区| 女人久久www免费人成看片| 校园人妻丝袜中文字幕| av在线老鸭窝| 黄片wwwwww| 亚洲高清免费不卡视频| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 青春草国产在线视频| 九九在线视频观看精品| 一级片'在线观看视频| 久久人人爽人人片av| 99久久九九国产精品国产免费| 免费电影在线观看免费观看| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 性色avwww在线观看| 特级一级黄色大片| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 国产黄片美女视频| 亚洲国产欧美人成| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品视频女| 亚洲av电影不卡..在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产日韩欧美在线精品| 国产成人精品婷婷| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 国产黄色小视频在线观看| 伦理电影大哥的女人| 日韩欧美精品免费久久| 永久免费av网站大全| 一级黄片播放器| 免费观看a级毛片全部| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 成人特级av手机在线观看| av在线亚洲专区|