成人Epstein-Barr 病毒感染患者的EB 病毒相關(guān)抗體、DNA及淋巴細(xì)胞亞群變化分析

馬志民，崔 萍，白偉娜

（北京京煤集團(tuán)總醫(yī)院感染性疾病科 北京 102300）

Epstein-Barr 病毒（EB 病毒）為皰疹病毒家族中的一種，是一種噬人類B 淋巴細(xì)胞的DNA 病毒，是皰疹病毒科γ 皰疹病毒亞科，作為雙鏈DNA 病毒的一種，有泛嗜性特征。相關(guān)文獻(xiàn)提出，EB 病毒大約感染了全球近90%的人，它是引起呼吸道感染、腫瘤的常見病毒，多數(shù)表現(xiàn)是傳染性單核細(xì)胞增多癥，其特征是存在大量單個(gè)核細(xì)胞增生情況，主要是增殖、活化EBV 特異性CD8+細(xì)胞毒性T 細(xì)胞，最主要的傳播途徑為唾液傳播，初始感染部位為鼻咽與口咽部的上皮細(xì)胞[1]。成人在感染EB病毒后，表現(xiàn)差異性較大[2]，多數(shù)屬于潛伏性感染，在特定情況下，可以激活，會(huì)導(dǎo)致患者發(fā)現(xiàn)病毒血癥，會(huì)侵犯淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致全身免疫性損傷發(fā)生。成人EB 病毒感染者可檢測(cè)到EB 病毒相關(guān)抗體。依據(jù)病程進(jìn)展的不同，EB 病毒可分為急性感染、慢性感染等，其中急性感染多表現(xiàn)為呼吸道感染，一般預(yù)后良好，少數(shù)患者可發(fā)展為慢性感染甚至腫瘤，預(yù)后較差?；诖?，本次研究EB 病毒感染患者的臨床特點(diǎn)及不同年齡層次實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化，以充分掌握EB 病毒感染的特點(diǎn)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年7 月—2021 年5 月北京京煤集團(tuán)總醫(yī)院收治的751 例EB 病毒感染患者，其中男472 例，女279 例，年齡18 ～87 歲，平均年齡（55.67±2.74）歲，其中年齡18 ～59 歲的493 例中青年患者納入甲組，年齡≥60 歲的老年患者納入乙組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18 歲；②EB 病毒DNA 檢測(cè)陽性，明確診斷為EB 病毒感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除臨床資料不完整者；②排除合并病毒性肝炎且處于急性期的患者。

1.2 方法

收集患者性別、年齡、合并基礎(chǔ)疾病等基本資料，并進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)、EB 病毒相關(guān)抗體檢測(cè)、EB 病毒DNA 檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

①淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：采用邁瑞流式細(xì)胞分析儀，流式細(xì)胞法檢測(cè)不同T 淋巴細(xì)胞分類含量；②EB 病毒相關(guān)抗體：EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體，采用索靈LIAISON 分析儀以化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，所應(yīng)用的試劑為配套EB 病毒抗體試劑盒；③EB病毒DNA：采用羅氏LightCycler cobas Z480 以實(shí)時(shí)定量PCR 法檢測(cè)EB 病毒DNA，檢測(cè)所應(yīng)用試劑為圣湘EB病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析本次的所有數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用（± s）表示，組間采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，組間采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 EB 病毒感染者伴隨癥狀分析

751 例EB 病毒感染患者中，有407 例患者伴隨發(fā)熱癥狀，占54.19%；有19.57%（147/751）存在淋巴結(jié)腫大；14.11%（106/751）存在脾腫大；10.79%（81/751）存在肝臟腫大；伴隨咽部充血者占8.26%（62/751），伴隨皮疹者占5.73%（43/751）。

2.2 中青年與老年EB 病毒感染者淋巴細(xì)胞亞群對(duì)比

甲組患者的B 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、T 淋巴細(xì)胞總數(shù)絕對(duì)值均較乙組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者NK 細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、CD8+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組EB 病毒感染者淋巴細(xì)胞亞群對(duì)比（± s）

表1 兩組EB 病毒感染者淋巴細(xì)胞亞群對(duì)比（± s）

組別甲組（n = 493） 乙組（n = 258）tP B 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)415.45±14.52 308.62±17.61 88.841 ＜0.001 CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)851.55±22.15 416.82±34.56 209.096 ＜0.001總T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)1 394.93±43.49 1 042.55±36.32 111.387 ＜0.001 NK 細(xì)胞計(jì)數(shù) 374.79±20.83 363.40±19.371.9420.335 CD8+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)754.17±36.87 729.54±39.820.9330.373

2.3 中青年與老年EB 病毒感染者EB 病毒抗體及DNA陽性情況對(duì)比

甲組患者的EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性率、EB 病毒DNA 陽性率分別為81.50%、16.84%、63.08%，乙組分別為79.84%、15.89%、62.79%的，兩組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 中青年與老年EB 病毒感染者EB 病毒抗體及DNA 陽性情況對(duì)比[n（%）]

3.討論

EB 病毒可以通過輸血、唾液傳播，是感染性疾病的一種，臨床應(yīng)對(duì)其加強(qiáng)關(guān)注，分析得出，人體在感染B細(xì)胞之后，會(huì)導(dǎo)致T 細(xì)胞免疫反應(yīng)，患者會(huì)發(fā)生全身免疫功能異常，尤其是細(xì)胞免疫功能異常。外周血的T 淋巴細(xì)胞的免疫紊亂較為嚴(yán)重，過度激活B 淋巴細(xì)胞，下降NK 細(xì)胞數(shù)量以及功能等，可以預(yù)示患者發(fā)生嚴(yán)重EB病毒感染疾病。所有T 細(xì)胞、效應(yīng)T 細(xì)胞、輔助T 細(xì)胞的表面標(biāo)志是CD3、CD4，CD4 細(xì)胞可以對(duì)分化以及增殖B 細(xì)胞、T 細(xì)胞以及其他免疫細(xì)胞產(chǎn)生促進(jìn)作用，CD8 是抑制T 細(xì)胞、細(xì)胞毒T 細(xì)胞的表面標(biāo)志。對(duì)EBV 感染的B 細(xì)胞進(jìn)行清除期間，CD8 可以將重要作用發(fā)揮。分析得出，CD4/CD8 的比例失去平衡，會(huì)導(dǎo)致EBV 相關(guān)疾病發(fā)生。在活化EB 病毒之后，會(huì)將患者B 淋巴細(xì)胞以及T 淋巴細(xì)胞激活，會(huì)轉(zhuǎn)化T 細(xì)胞成為細(xì)胞毒性T 細(xì)胞，進(jìn)一步累及患者肝臟，會(huì)導(dǎo)致肝臟轉(zhuǎn)化、攝取等情況發(fā)生嚴(yán)重功能障礙，加重疾病。對(duì)于EB 病毒感染患者來說，機(jī)體免疫改變顯著，大量產(chǎn)生細(xì)胞因子，會(huì)將NK 細(xì)胞等激活，大量產(chǎn)生病毒性T 淋巴細(xì)胞，可以將導(dǎo)致EB 病毒感染發(fā)生的B 淋巴細(xì)胞起到一定消滅作用，因?yàn)椴《靖腥?，?huì)對(duì)患者體內(nèi)正常細(xì)胞免疫產(chǎn)生抑制，導(dǎo)致患者發(fā)生細(xì)胞免疫功能紊亂，導(dǎo)致免疫失衡。

EB 病毒感染往往具有長(zhǎng)期持續(xù)潛伏感染的特點(diǎn)，在免疫抑制等外界某種因素刺激下，病毒可再次激活，隨著病毒的復(fù)制引發(fā)諸多臨床癥狀[3]。成人感染EB 病毒后，臨床表現(xiàn)往往具有顯著差異性，其中發(fā)熱為最常見的臨床癥狀，部分患者還可表現(xiàn)為肝脾腫大、淋巴結(jié)腫大、皮疹、咽部充血等，產(chǎn)生這些癥狀最主要的原因?yàn)闄C(jī)體首次感染后，EB 病毒在B 淋巴細(xì)胞中以潛伏形式持續(xù)存在，EB 病毒潛伏階段，可逃避機(jī)體免疫攻擊性反應(yīng)，只有在某種因素刺激下，才會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，主導(dǎo)細(xì)胞為CD8+T 淋巴細(xì)胞，免疫反應(yīng)發(fā)生后，被EB 病毒感染的系統(tǒng)、器官、細(xì)胞，均受到了免疫攻擊，導(dǎo)致患者出現(xiàn)臨床癥狀[4]。依據(jù)EB 病毒在機(jī)體的狀態(tài)不同分類，初次感染為急性原發(fā)性感染，主要表現(xiàn)是傳染性的單核細(xì)胞增多癥，病毒潛伏后的再次感染則稱為既往感染，主要表現(xiàn)為慢性活動(dòng)性的EB 病毒發(fā)生感染，發(fā)展至既往感染階段，往往對(duì)機(jī)體器官的損傷作用較為明顯，部分患者還會(huì)發(fā)生相關(guān)惡性腫瘤。

肝功能損傷在EB 病毒感染患者中較為常見，其中約有0.85%的患者表現(xiàn)為不明原因的肝功能受損。對(duì)于EB病毒感染患者來說，若沒有肝臟損傷情況存在，沒有嚴(yán)重的機(jī)體免疫功能失衡情況發(fā)生，可以良好清除病毒，免疫能力可以有效獲取。但是，機(jī)體嚴(yán)重免疫失衡發(fā)生時(shí)，會(huì)激活補(bǔ)體系統(tǒng)，會(huì)大片壞死肝臟細(xì)胞，導(dǎo)致肝臟進(jìn)一步損傷，機(jī)體下降免疫功能時(shí)，會(huì)導(dǎo)致自身免疫反應(yīng)出現(xiàn)，不完全耐受情況誘發(fā)，將嚴(yán)重肝臟損傷形成。因此，若患者存在肝臟損傷，體內(nèi)嚴(yán)重沉積免疫復(fù)合物，會(huì)進(jìn)一步下降患者免疫功能，導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死、凋亡。

以往EB 病毒的主要感染人群為兒童，但近年來成人感染病例逐年增多，多數(shù)以發(fā)熱為首發(fā)癥狀，并伴有白細(xì)胞及外周血內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)目的增加，部分患者還可出現(xiàn)異形淋巴細(xì)胞，EB 病毒感染無特異性，與其他類型病毒感染鑒別困難?；诖耍敬窝芯酷槍?duì)我院收治的751 例成人EB 病毒感染患者展開了調(diào)查研究，并分析了EB 病毒感染的臨床特點(diǎn)，以為成人EB 病毒感染的早期診斷及干預(yù)提供依據(jù)。相關(guān)研究顯示：成人EB 病毒感染者中，男性的比例更高[5]，與本次調(diào)查結(jié)果基本相符，可能與多種原因?qū)е旅庖邫C(jī)能下降相關(guān)。成人EB 病毒感染患者臨床表現(xiàn)多無明顯的特異性，病毒入侵人體后，可在B 細(xì)胞內(nèi)潛伏，一旦被激活，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)形成的抗體會(huì)攻擊EB 病毒感染的組織、器官，導(dǎo)致臨床癥狀的出現(xiàn)。本次調(diào)查研究中顯示：發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、脾腫大為EB 病毒感染最主要的臨床特征，分別占54.19%、19.57%、14.11%，此外，部分患者還可表現(xiàn)為咽部充血、皮疹等。進(jìn)一步對(duì)比中青年與老年人群的淋巴細(xì)胞亞群發(fā)現(xiàn)，甲組患者的B 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、總T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)絕對(duì)值均較乙組顯著升高 （P＜0.05）。提示與老年人群比較，青中年人群的免疫反應(yīng)相對(duì)更為活躍，免疫活動(dòng)也更為強(qiáng)烈，但隨著年齡的增加，老年人群免疫功能減退，淋巴細(xì)胞亞群水平明顯降低。

相關(guān)研究顯示，EB 病毒感染是腫瘤、艾滋病等疾病發(fā)生以及發(fā)展的影響因素，很多學(xué)者認(rèn)為，在人體B 淋巴細(xì)胞中潛伏EB 病毒，感染后，這一病毒會(huì)在患者體內(nèi)終身攜帶[6]，因此臨床十分關(guān)注成人EB 病毒感染患者的EB 病毒相關(guān)抗體、EB 病毒DNA 及淋巴細(xì)胞亞群變化。我國(guó)兒童群體中，VCA-IgG 抗體的陽性表達(dá)率很高，在90%及以上。近些年來，這一情況的發(fā)生趨勢(shì)呈現(xiàn)為顯著升高，通過臨床觀察以及總結(jié)得出，成人EB 病毒感染后[7]，異常升高體內(nèi)IgG、IgA，是臨床用于診斷疾病的輔助指標(biāo)。在臨床評(píng)價(jià)EB 病毒感染癥狀表現(xiàn)上，標(biāo)準(zhǔn)并不統(tǒng)一，主要是間歇性以及持續(xù)性發(fā)熱、肝脾腫大、淋巴結(jié)，或者伴隨心肺、神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚等并發(fā)癥情況，患者預(yù)后嚴(yán)重不良，容易死亡[8]。但是，這種嚴(yán)重癥狀限于極少數(shù)病毒感染平衡被破壞、免疫功能被破壞患者。在一般情況下，在發(fā)生EB 病毒感染后，癥狀幾乎沒有很嚴(yán)重，或者將傳染性單核細(xì)胞增多癥引發(fā)，即便輕微癥狀發(fā)生，在數(shù)周后，逐漸減輕至消失[9]。分析EB 病毒感染患者的轉(zhuǎn)歸以及臨床表現(xiàn)，相關(guān)患者機(jī)體免疫功能，且關(guān)系密切，機(jī)體免疫功能改變可能對(duì)患者疾病轉(zhuǎn)歸、預(yù)后產(chǎn)生預(yù)示作用，因此，監(jiān)測(cè)患者免疫功能，在診治EB 病毒感染患者病情中，十分重要，價(jià)值較高[10-12]。

EB 病毒感染后機(jī)體會(huì)對(duì)應(yīng)性產(chǎn)生多個(gè)類型的抗體，其中EB 病毒DNA 是病毒復(fù)制增殖的敏感指標(biāo)，EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性是診斷急性感染的可靠指標(biāo)，本研究對(duì)比了中青年與老年人群在感染EB 病毒后的EB 病毒抗體及DNA 陽性情況，結(jié)果顯示：甲組患者的EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性率，EB 病毒DNA 陽性率分別為81.50%、16.84%、63.08%，與乙組上述指標(biāo)陽性率對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果提示EB 病毒在不同年齡層次感染與病毒復(fù)制方面，差異性不大。

綜上所述，EB 病毒感染患者最常見的臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、脾腫大等，往往無明顯特異性癥狀，目前臨床尚無清除EB 病毒的有效策略，可采取阿昔洛韋抗病毒治療，但其確切療效尚存爭(zhēng)議。