MyoG基因多態(tài)性與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析

楊德鳳 李維 劉洋 張蕓 龔俞 張藍(lán)藝 陳穎 林家棟 張福平 唐繼高

摘要：【目的】探究肌細(xì)胞生成素基因（MyoG）多態(tài)性與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)性，從分子標(biāo)記角度對(duì)瑤山雞進(jìn)行選育，更好地保護(hù)和開(kāi)發(fā)利用瑤山雞，同時(shí)為家禽MyoG基因研究提供參考依據(jù)?！痉椒ā恳?50日齡出欄的健康瑤山雞為研究對(duì)象，通過(guò)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序?qū)Μ幧诫uMyoG基因多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)，利用DNAStar對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析以確定MyoG基因SNP位點(diǎn)，通過(guò)RNAfold對(duì)瑤山雞MyoG基因突變前后的mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)，并以SPSS 18.0分析SNP位點(diǎn)與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的相關(guān)性?！窘Y(jié)果】在瑤山雞MyoG基因第3外顯子上發(fā)現(xiàn)1個(gè)SNP位點(diǎn)（T17C位點(diǎn)），屬于同義突變，存在3種基因型（CC型、CT型和TT型）;T為優(yōu)勢(shì)等位基因，CT為優(yōu)勢(shì)基因型;有效等位基因數(shù)（Ne）接近2.00;多態(tài)信息含量（PIC）為0.35，呈中度多態(tài)（0.25<PIC<0.50）。在瑤山雞樣本中，除母雞群體的胸寬、腿肌率、胸肌蒸煮損失率和腿肌蒸煮損失率存在基因型差異外，其他大部分性狀指標(biāo)的差異均不顯著（P>0.05）。MyoG基因T17C位點(diǎn)突變致使其mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致其最小自由能由-452.60 kcal/mol降至-465.24 kcal/mol。不同基因型瑤山雞生長(zhǎng)、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)分析結(jié)果顯示，3種基因型瑤山雞在體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)性大部分呈現(xiàn)相同規(guī)律，其中胸寬與胸深在不同基因型瑤山雞中均呈極顯著正相關(guān)（P<0.01）?！窘Y(jié)論】瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)存在3種基因型，屬于同義突變，并未引起氨基酸及其蛋白結(jié)構(gòu)和功能的明顯變化，但其多態(tài)性對(duì)瑤山雞體尺性狀、屠宰性能和肉質(zhì)性狀有一定影響，因此可作為瑤山雞分子選育的候選遺傳標(biāo)記。

關(guān)鍵詞： 瑤山雞;肌細(xì)胞生成素基因（MyoG）;多態(tài)性;體尺性狀;屠宰性能;肉質(zhì)性狀

中圖分類號(hào)：S831.89? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2021）10-2887-09

Abstract：【Objective】To explore the relevance of myogenin （MyoG） gene polymorphism to body size， slaughter? performance and meat traits of Yaoshan chickens. Breeding of Yaoshan chickens with regard to a molecular marker would better protect， develop and utilize Yaoshan chickens， and at the same time provide a reference for MyoG gene research in other chicken breeds. 【Method】The experiment involved 150-day-old healthy Yaoshan chickens， using PCR product direct sequencing technology on the Yaoshan chicken MyoG gene. Polymorphisms were detected， and DNAStar was used to compare and analyze the sequencing results to determine the SNP site of the MyoG gene. SPSS 18.0 was used to analyze the correlations between SNP locus andgrowth， slaughter performance and meat quality， and RNAfold was used to predict the mRNA secondary structure before and after MyoG gene mutation in Yaoshan chickens. 【Result】One SNP （T17C locus） was found in the third exon of the MyoG gene in Yaoshan chickens. It was a synonymous mutation， and there were three genotypes （CC， CT， TT）; T was the dominant allele， and CT was the dominant genotype. The effective allele number （Ne） was close to 2.00， and the polymorphic information content （PIC） was 0.35， showing moderate polymorphism （0.25<PIC<0.50）.In the Yaoshan chicken samples， except for the genotypic differences in breast width， leg muscle rate， chest muscle cooking loss rateand leg muscle cooking loss rate of the hen population， the differences in most other traits were not significant （P>0.05）. The mutation at the T17C site of the MyoG gene changes its mRNA secondary structure， which in turn causes its minimum free energy to change from -452.60 kcal/mol to -465.24 kcal/mol. The results of correlation analysis among growth， slaughter and meat quality traits of different genotypes of Yaoshan chickens showed that most of the correlation analysis results among growth， slaughter and meat quality traits of the three genotypes showed the same trend. Among them，chest width and chest depth showed a very significant positive correlation in different genotypes of Yaoshan chickens （P<0.01）. 【Conclusion】There are three genotypes at the T17C locus of the MyoG gene in Yaoshan chickens， which are synonymous mutations and do not cause significant changes in the structure and function of amino acids and their proteins. However， the polymorphism has animpact on body size， slaughter traits and meat quality of Yaoshan chickens， so it can be used as a candidate genetic marker for molecular breeding of Yaoshan chickens.

Key words：Yaoshan chicken; myogenin gene （MyoG）; polymorphism; body measurements; slaughter performance; meat traits

Foundation item：Guizhou Science and Technology Plan Project （QKHZC〔2017〕2533-1）

0 引言

【研究意義】瑤山雞又稱瑤雞，原產(chǎn)于貴州省荔波縣，是由瑤山鄉(xiāng)的本土品種改良培育而來(lái)，其成年公雞體重可達(dá)2.45 kg，母雞體重可達(dá)2.05 kg?，幧诫u具有外表亮麗、生長(zhǎng)速度快、耐粗飼放養(yǎng)、骨骼粗壯及背腰寬平等特點(diǎn)（林家棟等，2018），且中等體型，肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩，深受廣大消費(fèi)者的青睞。肌細(xì)胞生成素（Myogenin，MyoG）基因是生肌調(diào)節(jié)因子（Myogenic regulatory factors，MRFs）家族中的重要成員，是繼生長(zhǎng)激素和胰島素生長(zhǎng)因子之后新發(fā)現(xiàn)的功能性基因（欒兆進(jìn)等，2015）。畜禽產(chǎn)肉能力與肌纖維的數(shù)量和生長(zhǎng)速度密切相關(guān)，肌纖維是構(gòu)成骨骼肌的基本單位，而MyoG基因在肌纖維生成過(guò)程中的作用尤為突出，屬于肌肉生成的正調(diào)控因子（白俊艷等，2020）。因此，分析MyoG基因外顯子多態(tài)性對(duì)深入探究畜禽的體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀均具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】Wright等（1989）最先報(bào)道生肌決定因子MyoD家族（MyoD、MyoG、Myf-5和Myf-6）中的MyoG，在結(jié)構(gòu)和功能上與MyoD家族的其他3個(gè)因子相關(guān)，進(jìn)化上屬于保守的堿性螺旋—環(huán)—螺旋肌肉特異性轉(zhuǎn)錄因子（Dasarathy et al.，2004;Berkes and Tapscott，2005;葉恒振，2018）。在肌肉形成的整個(gè)過(guò)程中，MyoG促使中胚層細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞，進(jìn)而融合為肌纖維，從肌纖維形成及前體肌細(xì)胞的增殖和定型，到個(gè)體自身出生后的功能完善及成熟，均有MyoG基因參與（Pas and Visscher，1994;Hughes and Schiaffino，1999;周國(guó)利等，2005），可激活與肌肉生成相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，并提高肌肉細(xì)胞分化（Sabourin et al.，1999;田佳，2014）。劉紅麗等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，MyoG基因5'端非編碼區(qū)（5'-UTR）序列多態(tài)性與瀘寧雞的肝臟重、屠宰率及胸肌率等屠宰性能指標(biāo)均存在一定關(guān)聯(lián)性;郭賽（2019）研究表明，MyoG基因多態(tài)性與藏雞的腿肌和胸肌呈顯著關(guān)聯(lián)，即MyoG基因可作為藏雞肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的候選基因。一般認(rèn)為屠宰率在80%以上及全凈膛率在60%以上時(shí)，其肉用性能良好（賈汝敏等，2005）。趙振華等（2012）、李乃賓等（2014）、蘇紅衛(wèi)等（2014）研究表明，多項(xiàng)體尺指標(biāo)與屠宰性能存在顯著或極顯著相關(guān)性。蔣會(huì)梅等（2015）研究威寧雞體尺與屠宰性能間的相關(guān)性時(shí)發(fā)現(xiàn)，威寧雞的體尺性狀存在性別差異。韓順順等（2016）通過(guò)分析彭縣黃雞體尺性狀與屠宰性能的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)彭縣黃雞體尺性狀與絕大多數(shù)屠宰性能呈顯著相關(guān)?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】MyoG基因是控制肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的一個(gè)關(guān)鍵基因（Jia et al.，1992;李莉鑫等，2019），但至今有關(guān)瑤山雞MyoG基因多態(tài)性與其肌肉形成的相關(guān)性鮮見(jiàn)研究報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以MyoG基因?yàn)楹蜻x基因，尋找其編碼區(qū)（CDS）序列SNP位點(diǎn)，分析MyoG基因多態(tài)性與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)性，從分子標(biāo)記角度對(duì)瑤山雞進(jìn)行選育，以期更好地保護(hù)和開(kāi)發(fā)利用瑤山雞，同時(shí)為家禽MyoG基因研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

隨機(jī)抽取60羽150日齡出欄的健康瑤山雞，公母各半，由貴陽(yáng)綠源禽業(yè)有限公司提供，為相同條件下全價(jià)飼養(yǎng)的同批次瑤山雞。Mixture溶液、Ezup柱式血液動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒、DL2000 DNA Marker、GoldView染料及瓊脂糖等試劑購(gòu)自生工生物工程（上海）股份有限公司;ddH2O和TBE緩沖液由高原山地動(dòng)物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室自制。主要儀器設(shè)備：Thermo NANODROP 2000紫外分光光度計(jì)（賽默飛世爾科技有限公司），DYCZ-24F電泳儀（北京六一儀器廠），BioSens SC 710凝膠成像系統(tǒng)（上海山富科技儀器有限公司），Bio-Rad C1000 TouchTM Thermal Cycler PCR儀（美國(guó)Bio-Rad公司），C-LM型肌肉嫩度計(jì)和pH測(cè)定儀[漢鈉儀器（上海）有限公司]。

1. 2 指標(biāo)測(cè)定

于瑤山雞翅下靜脈采血，肝素鈉抗凝，編號(hào)后 -20 ℃保存;屠宰性能按《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法》進(jìn)行測(cè)定。

式中，M1為蒸前重，M2為蒸后重，W1為壓前重，W2為壓后重。

1. 3 DNA提取

采用Ezup柱式血液動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒提取DNA，以紫外分光光度計(jì)測(cè)定其濃度和純度，其濃度在25～170 ng/μL，OD260/OD280在1.70～1.86。1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果如圖1所示。

1. 4 引物設(shè)計(jì)與合成

參照NCBI已公布的家雞MyoG基因CDS序列（GenBank登錄號(hào)NC_006113.4），利用Primer Premier 5.0分別對(duì)MyoG基因的3個(gè)外顯子（MyoG-1、MyoG-2和MyoG-3）設(shè)計(jì)引物，并委托賽默飛世爾科技有限公司合成，引物序列信息見(jiàn)表1。

1. 5 MyoG基因外顯子PCR擴(kuò)增

PCR反應(yīng)體系20.0 μL：2×Taq PCR Master Mix 12.0 μL，DNA模板2.0 μL，上、下游引物各1.5 μL，ddH2O 3.0 μL。擴(kuò)增程序見(jiàn)表2，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物以1.0%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。

1. 6 PCR產(chǎn)物測(cè)序分析

將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至賽默飛世爾科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。以NCBI已公布的雞全基因組為參照，采用DNAStar對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，并根據(jù)測(cè)序分析結(jié)果確定MyoG基因SNP位點(diǎn)。

1. 7 mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

通過(guò)RNAfold（http：//rna.tbi.univie.ac.at/cgi-bin/RNAfold.cgi/）在線預(yù)測(cè)瑤山雞MyoG基因mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)。

1. 8 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 18.0對(duì)各測(cè)定指標(biāo)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA）及相關(guān)分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 瑤山雞MyoG基因外顯子PCR擴(kuò)增結(jié)果

選用設(shè)計(jì)的3對(duì)引物對(duì)瑤山雞基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，結(jié)果（圖2）表明，PCR擴(kuò)增片段大小與預(yù)期結(jié)果一致，說(shuō)明設(shè)計(jì)的3對(duì)引物特異性良好。

2. 2 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序分析結(jié)果

由于以MyoG-1和MyoG-2為引物的PCR擴(kuò)增片段中未發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)，因此未進(jìn)行測(cè)序分析。以MyoG-3為引物的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至賽默飛世爾科技有限公司測(cè)序，并將測(cè)序結(jié)果與家雞MyoG基因CDS序列（NC_006113.4）進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果在瑤山雞MyoG基因第3外顯子T17C處發(fā)現(xiàn)3種基因型（圖3），即CC型、CT型和TT型，且此SNP位點(diǎn)為同義突變，并未引起編碼的氨基酸改變。

2. 3 瑤山雞MyoG基因遺傳學(xué)分析結(jié)果

統(tǒng)計(jì)各基因型的個(gè)體數(shù)，計(jì)算瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)的基因型頻率和基因頻率，結(jié)果（表3）表明，T為優(yōu)勢(shì)等位基因，CT為優(yōu)勢(shì)基因型;有效等位基因數(shù)（Ne）接近2.00;多態(tài)信息含量（PIC）為0.35，呈中度多態(tài)（0.25<PIC<0.50）。卡方（χ2）適合性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。

2. 4 MyoG基因多態(tài)性與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果

2. 4. 1 體尺性狀關(guān)聯(lián)分析 對(duì)瑤山雞群體的體尺性狀指標(biāo)（體斜長(zhǎng)、胸寬、胸深、龍骨長(zhǎng)和脛長(zhǎng)）與MyoG-3基因T17C位點(diǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果（表4）表明：在公雞群體中，所有體尺性狀指標(biāo)的差異均不顯著（P>0.05，下同）;在母雞群體中，胸寬在CC型和CT型的差異不顯著，但顯著高于TT型（P<0.05，下同），其余體尺性狀指標(biāo)的差異均不顯著。在瑤山雞群體中，胸寬和胸深在3種基因型中的表現(xiàn)一致，表現(xiàn)為CC型>CT型>TT型，且CC型顯著高于TT型;其余體尺性狀指標(biāo)的差異均不顯著。

2. 4. 2 屠宰性能關(guān)聯(lián)分析 對(duì)瑤山雞群體的屠宰性能指標(biāo)（屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率）與MyoG-3基因T17C位點(diǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果（表4）表明，僅母雞群體的腿肌率表現(xiàn)為CC型顯著低于CT型和TT型，且CT型與TT型間差異不顯著。

2. 4. 3 肉質(zhì)性狀關(guān)聯(lián)分析 對(duì)瑤山雞群體的肉質(zhì)性狀指標(biāo)（胸肌失水率、胸肌pH、腿肌pH、胸肌蒸煮損失率和腿肌蒸煮損失率）與MyoG-3基因T17C位點(diǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果（表4）表明：在公雞群體中，所有肉質(zhì)性狀指標(biāo)的差異均不顯著;在母雞群體中，胸肌蒸煮損失率表現(xiàn)為CC型顯著高于TT型，而腿肌蒸煮損失率恰好相反，表現(xiàn)為CC型顯著低于TT型，其余肉質(zhì)性狀指標(biāo)在3種基因型間的差異均不顯著。在瑤山雞群體中，腿肌蒸煮損失率表現(xiàn)為T(mén)T型>CT型>CC型，且TT型顯著高于CC型。

2. 5 瑤山雞MyoG基因mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果

通過(guò)RNAfold對(duì)瑤山雞MyoG基因突變前后的mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)，結(jié)果（圖4）表明，MyoG基因T17C位點(diǎn)突變致使其mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)最小自由能降低，由 -452.60 kcal/mol降至-465.24 kcal/mol，影響mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，即突變后穩(wěn)定性增加。

2. 6 不同基因型瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)分析結(jié)果

對(duì)瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)3種基因型分別進(jìn)行體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)分析，結(jié)果顯示，在CC型瑤山雞（表5）中：胸肌pH與半凈膛率、活重與腿肌率、胸寬與胸深均呈極顯著正相關(guān)（P<0.01，下同），對(duì)應(yīng)的相關(guān)系數(shù)依次為0.84、0.90和0.95;腿肌蒸煮損失率與胸深、胸寬與胸肌失水率、胸深與胸肌失水率則呈極顯著負(fù)相關(guān)，對(duì)應(yīng)的相關(guān)系數(shù)依次為-0.86、-0.89和-0.91;胸肌蒸煮損失率與體斜長(zhǎng)、腿肌蒸煮損失率與胸寬均呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)均為-0.79。在CT型瑤山雞（表6）中：胸肌pH與腿肌pH、腿肌蒸煮損失率、活重和腿肌率，腿肌pH與腿肌蒸煮損失率、活重和腿肌率，胸肌蒸煮損失率與龍骨長(zhǎng)，腿肌蒸煮損失率與活重和腿肌率，活重與腿肌率，半凈膛率與全凈膛率，胸寬與胸深均呈極顯著正相關(guān);而活重與龍骨長(zhǎng)、腿肌率與龍骨長(zhǎng)、體斜長(zhǎng)與胸寬和胸深均呈極顯著負(fù)相關(guān)，其相關(guān)系數(shù)依次為-0.58、-0.66、-0.53和-0.58;胸肌pH與屠宰率和龍骨長(zhǎng)、腿肌蒸煮損失率與體斜長(zhǎng)、活重與體斜長(zhǎng)、龍骨長(zhǎng)與脛長(zhǎng)均呈顯著負(fù)相關(guān)，對(duì)應(yīng)的相關(guān)系數(shù)依次為-0.42、-0.45、-0.40、-0.44和-0.42。在TT型瑤山雞（表7）中：胸肌pH與腿肌pH、胸肌蒸煮損失率、腿肌蒸煮損失率和活重，腿肌pH與胸肌蒸煮損失率和活重，胸肌蒸煮損失率與腿肌蒸煮損失率和龍骨長(zhǎng)，腿肌蒸煮損失率與活重和龍骨長(zhǎng)，半凈膛率與全凈膛率，胸肌率與腿肌率、脛長(zhǎng)和胸肌失水率，腿肌率與胸肌失水率，體斜長(zhǎng)與胸寬和胸深，胸寬與胸深均呈極顯著正相關(guān);而胸肌蒸煮損失率與胸肌率和胸肌失水率，活重與屠宰率，胸肌率與龍骨長(zhǎng)，腿肌率與龍骨長(zhǎng)，龍骨長(zhǎng)與脛長(zhǎng)和胸肌失水率均呈極顯著負(fù)相關(guān)。綜上所述，瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)3種基因型在體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)分析結(jié)果大部分呈現(xiàn)相同規(guī)律。

3 討論

MyoG基因是動(dòng)物機(jī)體骨骼肌分化的必需因子，不僅對(duì)基因自身及其家族基因的表達(dá)進(jìn)行自分泌和旁分泌調(diào)節(jié)，還能控制肌纖維形成和成肌細(xì)胞融合，對(duì)肌肉的分化起關(guān)鍵性作用（白俊艷等，2020）。MyoG基因作為MyoD家族中的下游基因，通過(guò)自分泌和旁分泌調(diào)節(jié)基因自身、家族其他成員及肌肉特異性基因的表達(dá)，從而影響肌細(xì)胞的分化和代謝，即MyoG基因?qū)π笄莓a(chǎn)肉性能起至關(guān)重要的作用（Jia et al.，1992;李莉鑫等，2019）。Anton等（2006）采用PCR-PFLP對(duì)MyoG基因3'端非編碼區(qū)（3'-UTR）多態(tài)性與白豬生產(chǎn)指標(biāo)及屠體指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行分析，結(jié)果表明，不同MyoG基因型間的增長(zhǎng)率差異顯著，以BB基因型個(gè)體在育肥期的成長(zhǎng)率最高。王瓊等（2007）采用PCR-SSCP對(duì)MyoG基因5'-UTR多態(tài)性與優(yōu)質(zhì)肉雞屠宰和肉質(zhì)性狀的相關(guān)性進(jìn)行研究，結(jié)果表明MyoG基因5'-UTR的2個(gè)多態(tài)位點(diǎn)與屠宰性狀顯著相關(guān)。魏岳等（2014）采用PCR-SSCP對(duì)邊雞MyoG基因進(jìn)行SNP位點(diǎn)檢測(cè)，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析MyoG基因多態(tài)性與邊雞生長(zhǎng)和屠體性狀間的關(guān)系，結(jié)果在MyoG基因上發(fā)現(xiàn)2個(gè)同義突變，并證實(shí)MyoG基因的多態(tài)位點(diǎn)對(duì)邊雞生長(zhǎng)和屠體性狀有顯著或極顯著影響，且MyoG基因在胸肌中的表達(dá)量極顯著高于在腿肌中的表達(dá)量。唐瑩等（2015）研究發(fā)現(xiàn)在京海黃雞群體MyoG基因第1外顯子上存在突變位點(diǎn)，且該突變位點(diǎn)對(duì)京海黃雞早期生長(zhǎng)有顯著影響。王彥欽（2016）研究表明，在MyoG基因第3外顯子上發(fā)現(xiàn)的錯(cuò)義突變位點(diǎn)對(duì)12、18、24周齡拜城油雞及42日齡AA肉雞各項(xiàng)屠宰指標(biāo)的影響均不顯著。本研究通過(guò)分析MyoG基因外顯子多態(tài)性與瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)性，結(jié)果在瑤山雞MyoG基因第3外顯子T17C位點(diǎn)處發(fā)現(xiàn)同義突變，除母雞群體的胸寬、腿肌率、胸肌蒸煮損失率和腿肌蒸煮損失率存在基因型差異外，其他大部分性狀指標(biāo)的差異均不顯著，與趙忠海等（2013）對(duì)貴妃雞MyoG基因的研究結(jié)果基本一致。但由于本研究的樣本數(shù)量有限，瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)突變的個(gè)體相對(duì)較少，因此后續(xù)研究需擴(kuò)大樣本數(shù)進(jìn)一步探究MyoG基因T17C位點(diǎn)能否作為瑤山雞分子標(biāo)記輔助育種的關(guān)鍵位點(diǎn)。

水的相對(duì)含量和分布狀態(tài)直接影響畜禽肉制品的色澤、嫩度及多汁性，對(duì)肉制品的加工和貯藏也有明顯影響（Labuza and Hyman，1998;朱丹實(shí)等，2013;李潔等，2020）。本研究結(jié)果表明，在瑤山母雞群體中，胸肌失水率在不同基因型間無(wú)顯著差異，胸肌蒸煮損失率表現(xiàn)為CC型顯著高于TT型，而腿肌蒸煮損失率表現(xiàn)為CC型顯著低于TT型。在瑤山雞群體中，腿肌蒸煮損失率也表現(xiàn)為CC型顯著低于TT型。不同基因型瑤山雞體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)分析結(jié)果顯示，3種基因型瑤山雞在體尺、屠宰性能及肉質(zhì)性狀間的相關(guān)性大部分呈現(xiàn)相同規(guī)律，其中胸寬與胸深在不同基因型瑤山雞中均呈極顯著正相關(guān)。此外，本研究通過(guò)RNAfold預(yù)測(cè)瑤山雞MyoG基因mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MyoG基因T17C位點(diǎn)突變致使mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致其最小自由能降低，突變后mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性增強(qiáng)，由此推測(cè)該位點(diǎn)突變可能是影響瑤山雞生長(zhǎng)及屠宰性能的原因之一。

4 結(jié)論

瑤山雞MyoG基因T17C位點(diǎn)存在3種基因型，屬于同義突變，并未引起氨基酸及其蛋白結(jié)構(gòu)和功能的明顯變化，但其多態(tài)性對(duì)瑤山雞體尺性狀、屠宰性能和肉質(zhì)性狀有一定影響，因此可作為瑤山雞分子選育的候選遺傳標(biāo)記。

參考文獻(xiàn)：

白俊艷，時(shí)坤鵬，盧小寧，楊帥，陳夢(mèng)柯，馬永康，鞏慧榮，董智豪，龐有志，雷瑩，曹慧，安肖凱，常世增，侯偉曉，付學(xué)言，樊紅燈，曹恒. 2020. 鵪鶉MyoG基因多態(tài)性與早期生長(zhǎng)性能的關(guān)聯(lián)分析[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，49（4）：147-152. [Bai J Y，Shi K P，Lu X N，Yang S，Chen M K，Ma Y K，Gong H R，Dong Z H，Pang Y Z，Lei Y，Cao H，An X K，Chang S Z，Hou W X，F(xiàn)u X Y，F(xiàn)an H D，Cao H. 2020. Association analysis between MyoG gene polymorphism and early growth performance of quail[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，49（4）：147-152.] doi：10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.04.021.

郭賽. 2019. 藏雞MyoG基因的表達(dá)及其與經(jīng)濟(jì)性狀的相關(guān)分析[J]. 生物化工，5（4）：111-113. [Guo S. 2019. Correlation analysis between expression and economic traits of MyoG gene in Tibetan[J]. Biological Chemical Enginee-ring，5（4）：111-113.] doi：10.3969/j.issn.2096-0387.2019. 04.031.

韓順順，陸登宇，鄒云峰，劉子豪，衛(wèi)遠(yuǎn)航，賀民，羅榮華，王彥，趙小玲，朱慶，尹華東. 2016. 彭縣黃雞體尺性狀與屠宰性能的典型相關(guān)分析[J]. 中國(guó)家禽，38（10）：7-10. [Han S S，Lu D Y，Zou Y F，Liu Z H，Wei Y H，He M，Luo R H，Wang Y，Zhao X L，Zhu Q，Yin H D. 2016. Canonical correlation analysis on body measurements and slaughter performances of Pengxian yellow chicken[J]. China Poultry，38（10）：7-10.] doi：10.16372/j.issn.1004-6364.2016.10.002.

賈汝敏，姚晶寧，杜炳旺. 2005. 兩個(gè)海大香肉雞品系屠宰性能與肉質(zhì)性狀的比較[J]. 中國(guó)家禽，27（6）：10-12. [Jia R M，Yao J N，Du B W. 2005. Comparison of two Haidaxiang meat chicken lines on slaughter performance and meat quality[J]. China Poultry，27（6）：10-12.] doi：10.16372/j.issn.1004-6364.2005.06.003.

蔣會(huì)梅，張義玲，劉章忠，楊遠(yuǎn)青，舒暢，李萬(wàn)貴，張依裕，劉若余. 2015. 威寧雞體尺與屠宰性狀間的相關(guān)性研究[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)，42（12）：3300-3307. [Jiang H M，Zhang Y L，Liu Z Z，Yang Y Q，Shu C，Li W G，Zhang Y Y，Liu R Y. 2015. The correlation analysis between body size and slaughter traits of Weining chicken[J]. Chinese Animal Husbandry & Veterinary Medicine，42（12）：3300-3307.] doi：10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.12.028.

李潔，趙生國(guó)，王建福，李金錄，史兆國(guó)，董瑞生，馬曉文，邱國(guó)斌，劉珽. 2020. ‘太平雞’‘海蘭褐雞’及其雜交一代屠宰性能及肉品質(zhì)比較分析[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，55（1）：196-203. [Li J，Zhao S G，Wang J F，Li J L，Shi Z G，Dong R S，Ma X W，Qiu G B，Liu T. 2020. Comparative analysis of carcass characteristics and meat quality of Taiping chicken，Hy-line Brownchicken and their hybrid[J]. Journal of Gansu Agricultural University，55（1）：196-203.] doi：10.13432/j.cnki.jgsau.2020.01.025.

李莉鑫，任華偉，李藝?yán)?，冀云燕，薛霖莉，曹靖，羅小毛，于秀菊，赫曉燕，王海東. 2019. 不同發(fā)育時(shí)期小鼠心肌MyoG基因的表達(dá)分析[J]. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，47（4）：677-680. [Li L X，Ren H W，Li Y L，Ji Y Y，Xue L L，Cao J，Luo X M，Yu X J，He X Y，Wang H D. 2019. MyoG expression analysis in the cardiac muscle at different developmental stages in mice[J]. Journal of Shanxi Agricultural Sciences，47（4）：677-680.] doi：10.3969/j.issn.1002-2481. 2019.04.43.

李乃賓，楊芬霞，杜炳旺，陶林，陳潔波. 2014. 珍禽貴妃雞體尺性狀與屠宰性能的相關(guān)分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，45（7）：1281-1285. [Li N B，Yang F X，Du B W，Tao L，Chen J B. 2014. Correlation between body size and slaughter performance of Princess chicken[J]. Journal of Southern Agriculture，45（7）：1281-1285.] doi：10.3969/j：issn.2095-1191.2014.7.1281.

林家棟，張福平，龔俞，李雪松，張游宇，任麗群，李洪林，祖盤(pán)玉，吳立鑫，李維. 2018. 瑤山雞慢羽系羽型與出殼體重相關(guān)性研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，（15）：114-116. [Lin J D，Zhang F P，Gong Y，Li X S，Zhang Y Y，Ren L Q，Li H L，Zu P Y，Wu L X，Li W. 2018. Study on the correlation between feather type and shell weight of Yaoshan chicken slow feather line[J]. Heilong-jiang Animal Science and Veterinary Medicine，（15）：114-116.] doi：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.11.0329.

劉紅麗，徐亞歐，熊斌，胡衛(wèi)民，梅寒，石浩，左斌，聶曉慶，王海. 2015. 肌細(xì)胞生成素基因多態(tài)性與瀘寧雞生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)研究[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)，42（3）：629-637. [Liu H L，Xu Y O，Xiong B，Hu W M，Mei H，Shi H，Zuo B，Nie X Q，Wang H. 2015. Study on the correlation between polymorphisms of MyoG gene and growth traits of Lu-ning chicken[J]. China Animal Husbandry and Veterinary Medicine，42（3）：629-637.] doi：10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.03.019.

欒兆進(jìn)，曲緒仙，賀建寧，柳楠. 2015. 家畜MyoG基因結(jié)構(gòu)和功能研究進(jìn)展[J]. 家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，36（7）：1-4. [Luan Z J，Qu X X，He J N，Liu N. 2015. Advances on structure and function of MyoG in livestock animals[J]. Acta Ecologae Animalis Domastici，36（7）：1-4.] doi：10.3969/j.issn.1673-1182.2015.07.001.

蘇紅衛(wèi)，吳平山，羅明華，毛輝榮，張樂(lè)紅，余新武，梁桂桃，劉三鳳. 2014. 修水黃羽烏雞體質(zhì)量、體尺和屠宰性能測(cè)定及相關(guān)性分析[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，36（3）：633-638. [Su H W，Wu P S，Luo M H，Mao H R，Zhang L H，Yu X W，Liang G T，Liu S F. 2014. The measurement and correlation analysis of body weight，body size and carcass traits of Xiushui yellow silky chicken[J]. Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis，36（3）：633-638.] doi：10.13836/j.jjau.2014103.

唐瑩，張跟喜，樊慶燦，王金玉，張濤，魏岳，薛倩，王文浩，王永娟. 2015. MyoG與Myf5基因與京海黃雞生長(zhǎng)性狀的相關(guān)分析[J]. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，35（9）：1562-1567. [Tang Y，Zhang G X，F(xiàn)an Q C，Wang J Y，Zhang T，Wei Y，Xue Q，Wang W H，Wang Y J. 2015. Association of growth traits with the MyoG and Myf5 genes in the Jinghai yellow chicken[J]. Chinese Journal of Veterinary Medicine，35（9）：1562-1567.] doi：10.16303/j.cnki.1005-4545.2015. 09.31.

田佳. 2014. MyoG、H-FABP、LPL基因?qū)π陆畠蓚€(gè)地方綿羊品種產(chǎn)肉量及肉質(zhì)的影響[D]. 烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué). [Tian J. 2014. Effects of MyoG，H-FABP，LPL genes on meat production and meat quality in two Xinjiang sheep breeds[D]. Urumqi：Xinjiang Agricultural University.] doi：10.7666/d.Y2697987.

王瓊，劉益平，蔣小松，楊朝武，杜華瑞，邱莫寒，朱慶. 2007. MyoG基因多態(tài)性與優(yōu)質(zhì)肉雞屠宰性狀和肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析[J]. 遺傳，29（9）：1089-1096. [Wang Q，Liu Y P，Jiang X S，Yang C W，Du H R，Qiu M H，Zhu Q. 2007. Correlation analysis of relationships between polymorphisms of high quality chicken myogenin gene and slaughter and meat quality traits[J]. Hereditas（Beijing），29（9）：1089-1096.] doi：10.16288/j.yczz.2007.09.017.

王彥欽. 2016. 功能基因多態(tài)性對(duì)拜城油雞生產(chǎn)性能影響的研究[D]. 烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué). [Wang Y Q. 2016. Study on the effect of functional gene polymorphism on production performance of Baicheng Fatty chicken[D]. Urumqi：Xinjiang Agricultural University.] doi：10.7666/d.Y3265754.

魏岳，張跟喜，王金玉，張濤，唐瑩，樊慶燦，薛倩，王亞男，丁馥香，張麗. 2014. 邊雞MyoG基因與生長(zhǎng)和屠體性狀的關(guān)聯(lián)分析[J]. 中國(guó)畜牧雜志，50（19）：1-5. [Wei Y，Zhang G X，Wang J Y，Zhang T，Tang Y，F(xiàn)an Q C，Xue Q，Wang Y N，Ding F X，Zhang L. 2014. Correlation analysis between single nucleotide polymorphism of MyoG gene and production traits in Bian chicken[J]. Chinese Journal of Animal Science，50（19）：1-5.] doi：10.3969/j.issn. 0258-7033.2014.19.001.

葉恒振. 2018. 溫度和饑餓對(duì)布氏鯧鲹MSTN與MyoG基因表達(dá)的影響[D]. ?？冢汉Ｄ洗髮W(xué). [Ye H Z. 2018. The effect of temperate and starvation stress on the expession of myostatin and myogenin genes in golden pompano Trachinotus blochii[D]. Haikou：Hainan University.]

趙振華，黎壽豐，黃華云，李春苗，張靜，薛龍崗. 2012. 2個(gè)品系肉雞體尺性狀和屠宰性狀的典型相關(guān)分析[J]. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），41（2）：166-169. [Zhao Z H，Li S F，Huang H Y，Li C M，Zhang J，Xue L G. 2012. Canonical correlation analysis between body measurement traits and carcass traits of two natural meat-type line chickens[J]. Journal of Fujian Agriculture and Forestry University （Natural Science Edition），41（2）：166-169.] doi：10.3969/j.issn.1671-5470.2012.02.012.

趙忠海，李輝，吳嬋，易恒潔，唐漢超，楊茜，李先富. 2013. 貴妃雞肌細(xì)胞生成素基因SNPs檢測(cè)及其與屠宰性狀的相關(guān)性分析[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)，40（11）：148-152. [Zhao Z H，Li H，Wu C，Yi H J，Tang H C，Yang Q，Li X F. 2013. Study on association of single nucleotide polymorphism of MyoG gene with slaughter traits in Royal chicken[J]. Chinese Animal Husbandry and Veterinary Medicine，40（11）：148-152.] doi：10.3969/j.issn.1671-7236.2013.11. 034.

周國(guó)利，朱奇，吳玉厚，郭彥. 2005. Myogenin基因的分子生物學(xué)綜述[J]. 生物技術(shù)，15（1）：90-91. [Zhou G L，Zhu Q，Wu Y H，Guo Y. 2005. Molecular biology of Myogenin gene：A Riview[J]. Biotechnology，15（1）：90-91.] doi：10.16519/j.cnki.1004-311x.2005.01.042.

朱丹實(shí)，吳曉菲，劉賀，徐永霞，勵(lì)建榮. 2013. 水分對(duì)生鮮肉品品質(zhì)的影響[J]. 食品工業(yè)科技，34（16）：363-366. [Zhu D S，Wu X F，Liu H，Xu Y X，Li J R. 2013. Effect of water on quality of fresh meat[J]. Science and Technology of Food Industry，34（16）：363-366.] doi：10.13386/j.issn 1002-0306.2013.16.054.

Anton I，ZsolnaiA，Komlosi I，Király A，F(xiàn)ésüs L. 2006. Effect of MyoG genotypes on growth rate and production traits in Hungarian large white pigs[J]. Acta Veterinaria Hungarica，54（3）：393-397. doi：10.1556/AVet.54.2006.3.9.

Berkes C A，Tapscott S J. 2005. MyoD and the transcriptional control of myogenesis[J]. Seminars in Cell & Developmental Biology，16（4-5）：585-595. doi：10.1016/j.semcdb.2005. 07.006.

Dasarathy S，Dodig M，Muc S M，Kalhan S C，McCullough A J. 2004. Skeletal muscle atrophy is associated with an increased expression of myostatin and impaired satellite cell function in the portacaval anastamosis rat[J]. American Journal of Physiology. Gastrointestinal and Liver Physiology，287（6）：G1124-G1130. doi：10.1152/ajpgi.00 202.2004.

Hughes S M，Schiaffino S. 1999. Control of muscle fibre size：A crucial factor in ageing[J]. Acta Physiologica Scandinavica，167（4）：307-312. doi：10.1046/j.1365-201x.1999. 00622.x.

Jia H T，Tsay H J，Schmidt J. 1992. Analysis of binding and activating functions of the chick muscle acetylcholine receptor gamma-subunit upstream sequence[J]. Cellular and Molecular Neurobiology，12（3）：241-258. doi：10.1007/BF00712929.

Labuza T P，Hyman C R. 1998. Moisture migration and control in multi-domain foods[J]. Trends in Food Science and Technology，9（2）：47-55. doi：10.1016/S0924-2244（98）00005-3.

Pas M F，Visscher A H. 1994. Genetic regulation of meat production by embryonic muscle formation–A review[J]. Journal of Animal Breeding and Genetics，111（1-6）：404-412. doi：10.1111/j.1439-0388.1994.tb00477.x.

Sabourin L A，Girgis-Gabardo A，Seale P，Asakura A，Rudnicki M A. 1999. Reduced differentiation potential of primary MyoD-/- myogenic cells derived from adult skeletal muscle[J]. The Journal of Cell Biology，144（4）：631-643. doi：10.1083/JCB.144.4.631.

Wright W E，Sassoon D，Lin V K. 1989. Myogenin，a factor regulating Myogenesis，has a domain homologous to MyoD[J]. Cell，56（4）：607-617. doi：10.1016/0092-8674（89）90583-7.

（責(zé)任編輯 蘭宗寶）