揭示紅光調(diào)控植物抗蟲媒病毒新機制

（2021.1.12 中國科學(xué)院）

病害三角（disease triangle）是描述疾病流行規(guī)律的理論，該理論指出“病害三要素”為致病病原生物、易感宿主和適合的環(huán)境條件，三者相互作用才能引起侵染性病害。大部分已知的植物病毒由媒介昆蟲傳播，植物蟲傳病毒是制約我國農(nóng)作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的主要因素之一。以往的作物病毒病害研究注重病毒和植物宿主兩方面，但實際參與病毒傳播、病害發(fā)生的因子還包括傳毒媒介昆蟲和光照、溫度、氣候、生物周期節(jié)律等環(huán)境因子。作為人類賴以生存的重要生化反應(yīng)，植物光合作用主要吸收紅光和藍紫光并存儲為化學(xué)能，最終為人類和其他動物提供必需的食物和能量。光作為主要的環(huán)境因子，不僅調(diào)控植物生長發(fā)育的每個環(huán)節(jié)，而且與病害的流行爆發(fā)緊密相關(guān)。然而，光如何影響植物抗病性，病原微生物如何適應(yīng)宿主抗性機制從而促進自身的傳播等問題，亟須得到解答。

近日，中國科學(xué)院微生物研究所研究員葉健課題組在PLoS Pathogens上，在線發(fā)表了題為Red-light is an environmental effector for mutualism between begomovirus and its vector whitefly的研究論文。該研究發(fā)現(xiàn)，植物雙生病毒衛(wèi)星DNA編碼的βC1蛋白可以通過靶向光信號途徑的PIF轉(zhuǎn)錄因子家族調(diào)控的蟲媒病毒抗性，促進蟲媒病毒的快速傳播，揭示了光調(diào)節(jié)雙生病毒-煙粉虱-植物三者互惠共生的新機制。

該研究在前期工作的基礎(chǔ)上，研究人員進一步以雙生病毒中國番茄黃化曲葉病毒TYLCCNV與衛(wèi)星DNA形成的侵染復(fù)合物為研究對象，發(fā)現(xiàn)雙生病毒衛(wèi)星感病植物和對媒介昆蟲煙粉虱的吸引作用只有在光照條件下才會發(fā)生，在黑暗條件下不會發(fā)生。已有研究表明，βC1是病毒編碼的關(guān)鍵決定因子;進一步利用單色光LED燈箱進行昆蟲雙選擇實驗，發(fā)現(xiàn)βC1轉(zhuǎn)基因植物只有在紅光和含有紅光的白光條件下發(fā)生，在黑暗、遠紅光和藍光條件下無顯著差異。煙粉虱等大多數(shù)昆蟲的視覺系統(tǒng)缺乏紅光受體，是“紅色色盲”，因此，這種光依賴的煙粉虱選擇行為改變主要是病毒感染植物后影響了昆蟲嗅覺識別植物。

當植物受到昆蟲取食后，會產(chǎn)生一系列的化學(xué)揮發(fā)物來調(diào)控昆蟲的行為以趨避食草昆蟲，其中，萜烯類化合物（Terpenes）是植物揮發(fā)物中較豐富的一類化合物，研究報道部分倍半萜和單萜會趨避昆蟲。該研究通過酵母雙雜交篩選實驗，鑒定到光信號中的關(guān)鍵蛋白光敏色素互作蛋白（PHYTOCHROME-INTERACTING FACTOR 3， PIF3）可與βC1蛋白互作，進一步Co-IP實驗證明，PIF3與βC1在光照和黑暗條件下均可在植物體內(nèi)互作。PIFs蛋白可直接結(jié)合萜烯合酶（Terpene synthase，TPS）基因的啟動子促進其轉(zhuǎn)錄，因此，在PIF過表達的植物中，介體昆蟲煙粉虱的產(chǎn)卵量減少、偽蛹發(fā)育緩慢，說明PIFs蛋白具有直接的抗蟲作用。研究人員通過競爭性BiFC和pull-down實驗發(fā)現(xiàn)，βC1蛋白可通過干擾PIF蛋白二聚體的形成，不同程度地抑制其轉(zhuǎn)錄激活活性。

植物激素茉莉酸（jasmonic acid， JA）是一種介導(dǎo)植物抗蟲的重要激素，轉(zhuǎn)錄因子MYCs是JA途徑中的關(guān)鍵調(diào)控因子。MYC家族轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控下游多種抗蟲相關(guān)次生代謝物質(zhì)的合成代謝相關(guān)基因，包括TPS基因。該課題組早期研究發(fā)現(xiàn)，雙生病毒βC1可以靶標MYC2，通過干擾其二聚體的形成抑制MYC2-介導(dǎo)植物抗蟲反應(yīng)，與其媒介昆蟲煙粉虱形成的互惠共生關(guān)系（Li et al. Plant Cell 2014）。PIF蛋白參與植物多個信號通路以參與發(fā)育過程及不同的脅迫響應(yīng)，包括光和JA途徑。研究報道AtPIF4與AtMYC2相互作用，該研究還發(fā)現(xiàn)，AtPIFs-AtMYC2的互作在一定程度上抑制了TPS基因的表達，而βC1可以促進AtPIF4-AtMYC2異源二聚體的互作，進而進一步抑制TPS的表達，促進昆蟲的取食。結(jié)合上述研究結(jié)果，研究人員提出以下工作模型：在健康植物中，PIFs和MYC2形成同源二聚體，結(jié)合在TPS基因啟動子的不同區(qū)域，共同調(diào)節(jié)TPS基因表達，從而趨避煙粉虱;當植物受到雙生病毒感染后，一方面，βC1可抑制PIFs或MYC2同源二聚體的形成，另一方面，又可促進PIF- MYC2異源二聚體的形成，最終抑制了植物對煙粉虱的抗性反應(yīng)，促進煙粉虱的取食，促進病毒的傳播與擴散。該研究解析了光和JA信號共同調(diào)節(jié)病毒-昆蟲-植物三者互作的新機制，為防控蟲媒病害提供了新靶點，也為實現(xiàn)利用單色LED燈綠色防控雙生病毒病害提供了理論依據(jù)。

葉健為論文的通訊作者，葉健課題組的副研究員趙平芝、助理研究員張璇和已畢業(yè)碩士研究生龔雨晴為論文的共同第一作者，微生物所博士研究生王端、博士后王寧、助理研究員孫艷偉、碩士研究生高連博為論文的共同作者。研究工作得到中科院院士方榮祥、北京大學(xué)院士鄧興旺、美國加州大學(xué)戴維斯分校教授Daniel J. Kliebenstein、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所教授周雪平、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)教授許冬清、浙江大學(xué)教授劉樹生的支持，他們是論文的共同作者;清華大學(xué)教授陳浩東和中國農(nóng)業(yè)大學(xué)教授李繼剛為該研究提供了抗體材料;研究工作獲得國家自然科學(xué)基金重點項目、國家重點研究和發(fā)展計劃生物安全專項、國家優(yōu)青等項目的資助。