鄭 玲,王朋林,陳凱麗,劉林科,王榮軍,張龍現(xiàn),寧長申,菅復(fù)春
(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院,河南鄭州 450002)
我國羊品種資源豐富,在全國各地區(qū)均有分布。近年來,隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整,科技的進(jìn)步和市場需求的增加,我國養(yǎng)羊業(yè)得到迅速發(fā)展[1],養(yǎng)羊已成為農(nóng)牧民增收的重要途徑之一。然而羊腸道寄生蟲感染情況較為普遍,且被感染羊的臨床癥狀并不明顯,所以很容易被人們忽視,羊群感染寄生蟲后,一般情況下只有少數(shù)羊表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀[2],大部分羊往往呈慢性消耗性經(jīng)過,造成飼料轉(zhuǎn)換率降低,隱形飼養(yǎng)成本增加。為了解我國部分地區(qū)羊腸道寄生蟲感染情況,探討分析羊腸道寄生蟲的流行特征,減少腸道寄生蟲對羊群的侵害,保護(hù)養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展,本研究于2017年6月至2018 年12月采集了我國部分地區(qū)的羊糞便樣品,并對樣品中的寄生蟲感染情況進(jìn)行調(diào)查,旨在為我國羊腸道寄生蟲的防控提供參考依據(jù),推動(dòng)我國養(yǎng)羊業(yè)健康發(fā)展。
1.1.1 樣品來源 2017年6月至2018年12月對河南、陜西、遼寧、內(nèi)蒙古、貴州、新疆6省(自治區(qū))放牧或舍飼羊群隨機(jī)采集糞便樣品935份,其中陜西68份,河南292份,遼寧35份,內(nèi)蒙23份,貴州108份,新疆409份。每份樣品采集10 g~20 g,采集后保存于潔凈自封袋中,記錄其采集地點(diǎn),采樣時(shí)間,臨床癥狀等樣品信息。將采集好的樣品帶回實(shí)驗(yàn)室,保存于4 ℃冰箱備檢。
1.1.2 主要儀器設(shè)備 低速自動(dòng)平衡臺(tái)式離心機(jī)(H1650-W),杭州哈析儀器儀表有限公司產(chǎn)品;電子天平(AB204-N)、架盤藥物天平(JYT-10),天津市德安特傳感技術(shù)有限公司產(chǎn)品;微分干涉顯微鏡(DP73),歐聯(lián)自動(dòng)化設(shè)備有限公司產(chǎn)品;高壓蒸汽滅菌器(MLS-3750),廣東精譜實(shí)業(yè)有限公司產(chǎn)品。
1.2.1 離心沉淀法 稱取糞便樣品5 g~10 g置于燒杯中,加35 mL蒸餾水后充分浸泡,用60目銅篩過濾,濾液置離心管中,3 500 r/min離心5 min,棄去上清液體,用玻璃棒挑取少許沉淀,均勻涂布在載玻片上,加入蓋玻片后在100倍、400倍顯微鏡下觀察。此類方法主要用于用于檢查吸蟲卵、線蟲卵等。
1.2.2 盧戈氏碘液染色法 用滴管吸取1滴~2滴盧戈氏碘液放于載玻片上,用玻璃棒蘸取經(jīng)離心沉淀后的糞便樣品少許,涂布于載玻片上,使其與碘液混合均勻,蓋上蓋玻片在400倍顯微鏡下觀察。本方法主要適用于檢查賈第蟲包囊和阿米巴包囊。
1.2.3 飽和蔗糖溶液漂浮法 取5 g~10 g新鮮糞便置燒杯中,加入35 mL蒸餾水后充分浸泡,將糞液攪拌至混勻后,用60目銅篩過濾到50 mL離心管中,3 500 r/min離心5 min,棄去上清液,向沉淀中加入30 mL飽和蔗糖溶液,充分?jǐn)噭蚝?,? 500 r/min離心15 min,用鐵絲吊環(huán)圈輕輕蘸取表層液體于液于潔凈的載玻片上,加蓋玻片后置400倍顯微鏡下觀察。本方法適用于檢查隱孢子蟲卵囊、環(huán)孢子蟲卵囊、線蟲卵及球蟲卵囊等[3-5]。
1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用 SPSS 21.0 軟件采用 χ2檢驗(yàn)比較不同地區(qū)羊腸道寄生蟲感染率的差異。當(dāng)P>0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著;當(dāng)P<0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著;當(dāng)P<0.01,為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異極顯著。
采用顯微鏡檢測法,對本次研究中采集的935份羊糞便樣品進(jìn)行觀察,結(jié)果發(fā)現(xiàn),總感染率為83.9%(784/935)。共檢出7類寄生蟲(部分蟲卵或卵囊見圖1),其中艾美耳球蟲和阿米巴原蟲為感染優(yōu)勢蟲種,感染率分別為 81.1%(758/935)和11.2%(105/935),毛首線蟲、類圓線蟲、細(xì)頸線蟲、莫尼茨絳蟲、歧腔吸蟲的感染率分別為3.2%(30/935)、9.2%(86/935)、0.4%(4/935)、2.4%(22/935)和0.1%(1/935)(表1)。
A.細(xì)頸線蟲蟲卵;B.艾美耳球蟲卵囊;C.歧腔吸蟲卵;D.毛首線蟲蟲卵;E.貝氏莫尼茨絳蟲蟲卵;F.類圓線蟲蟲卵G.阿米巴包囊;H.擴(kuò)展莫尼茨絳蟲蟲卵A.Nematodirus egg;B.Eimeria oocyst;C.Egg of Dicrocoelium; D.Egg of Trichocephalus spp;E.Moniezia benedeni egg;F.Strongyloides egg;G.Cyst of Amoeba sp;H.Moniezia expansa egg
表1 我國部分地區(qū)羊腸道寄生蟲感染情況
935份樣品中有166份樣品混合感染了2~4種腸道寄生蟲,混合感染率為17.8%(166/935)。其中同時(shí)感染2種寄生蟲的占混合感染的74.7%(124/166),尤以球蟲和阿米巴混合感染最為常見。同時(shí)感染3種寄生蟲的占混合感染的20.5%(34/166),以球蟲、阿米巴原蟲、類圓線蟲混合感染為主。同時(shí)感染4種寄生蟲的占混合感染的比例為5.4%(9/166)。以球蟲、阿米巴原蟲、類圓線蟲、毛首線蟲最為常見。
本次采樣地點(diǎn)共涉及河南、貴州、陜西、遼寧、內(nèi)蒙古、新疆6個(gè)省(自治區(qū)),以陜西省和遼寧省羊腸道寄生蟲感染率最高,均達(dá)到100%。河南省次之,感染率為92.1%(269/292),新疆地區(qū)的感染率最低,為75.5%(309/409)。內(nèi)蒙和貴州的感染率分別為87.0%(20/23)和79.6%(86/108)。河南歧腔吸蟲的感染率為0.3%,其他地區(qū)未檢測出歧腔吸蟲。
本次采樣地點(diǎn)涉及我國具有明顯氣候特征差異的4個(gè)地區(qū),即西北地區(qū)、東北地區(qū)、中部地區(qū)及西南地區(qū)[6]。中部地區(qū)和東北地區(qū)寄生蟲總感染率較高,分別為93.6%和94.8%。西南地區(qū)和西北地區(qū)總感染率相似,分別為79.6%和75.5%。不同氣候特征下各地區(qū)寄生蟲感染情況見表2。
表2 不同氣候條件下羊腸道寄生蟲感染情況
本研究對我國6個(gè)省(自治區(qū))的12個(gè)羊場的羊腸道寄生蟲感染情況進(jìn)行了調(diào)查,結(jié)果顯示羊腸道寄生蟲總體感染率為 83.9%(784/935),這一結(jié)果明顯高于安徽及周邊地區(qū)羊腸道寄生蟲54.99%的感染率[7],低于鄭雙鍵等[8]、溫海燕等[9]報(bào)道的甘肅和山東菏澤羊腸道寄生蟲的感染率(分別為94.35%和100%),與甘肅地區(qū)和河南開封地區(qū)[10]感染的優(yōu)勢蟲種相同,均為阿米巴原蟲和艾美耳球蟲。本次調(diào)查只在河南檢出歧腔吸蟲,根據(jù)以往對安徽、河南、江蘇和山東部分地區(qū)[11]羊腸道寄生蟲感染情況調(diào)查中發(fā)現(xiàn),也僅在安徽和河南地區(qū)發(fā)現(xiàn)了吸蟲感染的情況,安徽和河南在地理位置上處于相鄰的接壤關(guān)系,具有相似的地理環(huán)境和氣候特征,均呈現(xiàn)夏季雨水充沛的氣候特點(diǎn),便于吸蟲的中間宿主陸地螺和補(bǔ)充宿主螞蟻的繁衍,在放牧羊群吃草時(shí),易將含有囊蚴的螞蟻食入而感染[12]。為減少羊群感染吸蟲的機(jī)會(huì),應(yīng)至少在初冬和春、夏各進(jìn)行一次驅(qū)蟲。放牧?xí)r,也盡量選擇地勢高且干燥的草地放牧。
由統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,6個(gè)不同省(自治區(qū))間羊腸道寄生蟲感染情況差異顯著(P<0.01)??赡苁怯捎谖覈赜蜻|闊,各省(自治區(qū))之間存在明顯的地理環(huán)境差異,各場區(qū)之間養(yǎng)殖水平和飼養(yǎng)管理模式也存在較大差別[13]。在我國具有典型氣候特征的4個(gè)地區(qū)中,西北地區(qū)寄生蟲總體感染率最低,可能由于西北地區(qū)氣候較其他地區(qū),氣候干燥,降雨量少,較其他地區(qū),不利于寄生蟲的生長繁殖,而中部地區(qū)和西南地區(qū)空氣潮濕,夏季降雨量集中,符合寄生蟲生長所需環(huán)境需求,寄生蟲感染率相對更高。而東北地區(qū)雖然降雨量不多,但蒸發(fā)少,空氣濕潤度較高,同樣有利于寄生蟲的生活繁殖。
對我國新疆、內(nèi)蒙古、遼寧等6省(自治區(qū))羊腸道寄生蟲流行病學(xué)調(diào)查共發(fā)現(xiàn)7類寄生蟲,總感染率達(dá)83.9%。中部和東北地區(qū)寄生蟲總感染率較西南和西北地區(qū)高,不同地區(qū)和地理環(huán)境下寄生蟲感染率差異明顯。表明我國肉羊腸道寄生蟲病現(xiàn)狀不容樂觀,仍需加強(qiáng)羊腸道寄生蟲病的防控。