2 種復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)和屠宰性能、免疫性能和組織病理學(xué)的影響

王黎琦，曹 珺，龔利敏，董 冰

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼料安全與生物學(xué)效價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193）

隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展及人民生活水平的不斷提高，人們對(duì)動(dòng)物性食品安全日益關(guān)注?？股卦趧?dòng)物飼料中的廣泛應(yīng)用極大地改善了畜禽的生長(zhǎng)性能，但也導(dǎo)致了獸藥殘留和動(dòng)物源細(xì)菌耐藥風(fēng)險(xiǎn)，給公共衛(wèi)生安全帶來(lái)隱患[1-2]。因此，尋找綠色、安全的飼料添加劑成為研究的重點(diǎn)[3]。

中草藥主要來(lái)源于天然動(dòng)植物及其加工后的產(chǎn)品，不僅含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)，還具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高畜禽產(chǎn)品質(zhì)量、無(wú)殘留等優(yōu)點(diǎn)，其來(lái)源廣泛、安全可靠和無(wú)抗藥性也是中草藥有潛力取代抗生素的一大優(yōu)勢(shì)。本試驗(yàn)選取2 種配伍不同的復(fù)方中草藥添加劑（加曼-100 和料磺1 號(hào)），主要包括山楂、魚(yú)腥草、麥芽、補(bǔ)骨脂和白術(shù)等有效成分，山楂和麥芽可健脾開(kāi)胃助消化，同時(shí)麥芽可以補(bǔ)充B 族維生素和酶類(lèi)物質(zhì)；魚(yú)腥草中含有的酚類(lèi)、生物堿和黃酮等活性物質(zhì)可以起到清熱解毒、利尿消腫、止血等功效；白術(shù)作為補(bǔ)益藥物，具有健脾益氣、燥濕利水的功能。沈永強(qiáng)等[4]研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加加曼-111 可顯著提高肉雞的日增重。石福岳等[5]研究發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加料磺1 號(hào)可提高放養(yǎng)肉雞的生長(zhǎng)性能及肉品質(zhì)。本試驗(yàn)旨在研究中添加復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞的生長(zhǎng)性能、屠宰性能和免疫性能的影響，確定其最適添加量，為促進(jìn)中草藥添加劑在肉雞健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供科學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 加曼-100 含山楂、魚(yú)腥草、麥芽、補(bǔ)骨脂等組分，以玉米粉作為載體；料磺1 號(hào)含山楂、魚(yú)腥草、麥芽、白術(shù)等組分，以玉米粉作為載體，均由高山集團(tuán)·信宜市金方子生物科技有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)一、二各選用432 只1 日齡AA 肉仔雞，隨機(jī)分為4 個(gè)處理，每個(gè)處理6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)18 只雞。試驗(yàn)一4個(gè)處理組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0（對(duì)照組）、500、1 000、1 500 mg/kg 的加曼-100；試驗(yàn)二4 個(gè)處理組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0（對(duì)照組）、1 500、2 000、2 500 mg/kg 的料磺1 號(hào)，試驗(yàn)分為前期（0～21 d）和后期（22～42 d），共42 d。

1.3 試驗(yàn)飼糧 試驗(yàn)采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)水平參考參照美國(guó)NRC （1994）和中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33—2004）進(jìn)行配制，試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧的組成如表1，試驗(yàn)各組日糧營(yíng)養(yǎng)成分如表2。配合日糧時(shí)，用玉米粉對(duì)加曼-100 或料磺1 號(hào)進(jìn)行逐級(jí)稀釋放大，混勻后與其他原料混合。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成 %

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院代謝室進(jìn)行，試驗(yàn)前對(duì)雞舍進(jìn)行徹底消毒。試驗(yàn)雞采用3 層籠養(yǎng)，喂給干粉料，自由采食與飲水。每日24 h 光照，試驗(yàn)第1 周溫度控制在34～35℃，每周下降2℃，最終溫度控制在20～26℃，相對(duì)濕度45%～55%。按照肉仔雞常規(guī)免疫程序免疫和飼養(yǎng)管理，每日觀(guān)察雞群健康與精神狀況。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，稱(chēng)量肉仔雞的初始體重，21 d 和42 d 每個(gè)飼養(yǎng)階段結(jié)束時(shí)，早上空腹稱(chēng)重并記錄耗料量。以重復(fù)為單位，計(jì)算前期（0～21 d）、后期（22～42 d）和全期（0～42 d）平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和耗料增重比（F:G）及死亡率。

1.5.2 屠宰性能 全期試驗(yàn)結(jié)束后，每處理組隨機(jī)取6只與群體平均體重±10%以?xún)?nèi)的雞空腹12 h，稱(chēng)重后屠宰，進(jìn)行胴體分割。測(cè)定活體重、屠體重、凈膛重、半凈膛重、腿肌重、胸肌重和腹脂重，計(jì)算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.5.3 免疫性能 全期試驗(yàn)結(jié)束后，每處理組隨機(jī)取6 只與群體平均體重±10%以?xún)?nèi)的雞，心臟采血，3 000 r/min離心10 min 制備血清樣品。用免疫球蛋白測(cè)定試劑（南京建成生物工程研究所）測(cè)定血清中的免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）和免疫球蛋白M（IgM）含量。屠宰后取脾臟、胸腺和法氏囊稱(chēng)鮮重，計(jì)算各免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)=器官鮮重/ 活體重（g/kg）

1.5.4 組織病理切片 全期試驗(yàn)結(jié)束后，每處理組選取6 只雞，取心臟、肝臟、脾臟和腎臟，于10%的福爾馬林緩沖液中固定48 h。在Sakura 自動(dòng)脫水機(jī)中過(guò)夜脫水，包埋，切片厚度為5 μm，H&E 染色，手動(dòng)蓋玻，完成組織病理切片并進(jìn)行觀(guān)察。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.2 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's 多重比較。P＜0.05 為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 2 種中草藥添加劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表3可以看出，試驗(yàn)前期（0～21 d），加曼-100 試驗(yàn)組的ADFI、ADG、F:G 及死亡率與對(duì)照組均無(wú)顯著差異；試驗(yàn)后期（22～42 d）和試驗(yàn)全期（0～42 d），加曼-100試驗(yàn)組的ADG 高于對(duì)照組（P＜0.01）且F:G 低于對(duì)照組（P＜0.01），ADFI 及死亡率與對(duì)照組差異不顯著。該結(jié)果表明，肉仔雞日糧添加加曼-100 可提高肉仔雞后期及全期的ADG 水平并降低F:G。

由表4 可以看出，試驗(yàn)前期（0～21 d），料磺1 號(hào)試驗(yàn)組與對(duì)照組之間的ADFI、ADG、F:G 及死亡率均無(wú)顯著差異；試驗(yàn)后期（22～42 d），2 000 mg/kg 料磺1 號(hào)組的ADG 顯著高于其他組（P＜0.01），ADFI、F:G及死亡率與對(duì)照組差異不顯著；試驗(yàn)全期（0～42 d），料磺1 號(hào)組的ADG 高于對(duì)照組（P＜0.01），2 000 mg/kg料磺1 號(hào)組的F:G 顯著低于其他組（P＜0.05），其他指標(biāo)各組間差異不顯著。綜合以上結(jié)果表明，肉仔雞日糧添加2 000 mg/kg 料磺1 號(hào)可提高肉仔雞后期及全期的ADG 水平并降低全期的F:G。

表4 飼糧添加不同水平料磺1 號(hào)對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 2 種中草藥添加劑對(duì)肉雞屠宰性能的影響 由圖1可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，日糧添加1 000 mg/kg 加曼-100提高了肉仔雞屠宰率（P＜0.01）、半凈膛率（P＜0.05）、全凈膛率（P＜0.01）和腿肌率（P＜0.01），降低了腹脂率（P＜0.01）；日糧添加500 mg/kg 及1 500 mg/kg加曼-100 提高了肉仔雞屠宰率（P＜0.01）和全凈膛率（P＜0.01）且降低其腹脂率（P＜0.01）。

由圖2 可見(jiàn)，日糧添加2 000 mg/kg 料磺1 號(hào)提高了肉仔雞屠宰率（P＜0.01）、半凈膛率（P＜0.01）、全凈膛率（P＜0.01）和腿肌率（P＜0.05），對(duì)胸肌率和腹脂率無(wú)影響。同時(shí)日糧添加1 500 mg/kg 及2 500 mg/kg料磺1 號(hào)對(duì)肉仔雞的屠宰性能也無(wú)顯著差異。

2.3 2 種中草藥添加劑對(duì)肉雞免疫性能的影響 由表5、6 可知，在試驗(yàn)42 d 時(shí)，日糧中添加加曼-100 和料磺1號(hào)的肉仔雞血清IgG、IgM 和IgA 均高于對(duì)照組（P＜0.05），各組間脾臟、胸腺和法氏囊指數(shù)均無(wú)顯著差異。

圖1 飼糧添加不同水平加曼-100 對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

圖2 飼糧添加不同水平料磺1 號(hào)對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

表5 飼糧添加不同水平加曼-100 對(duì)肉仔雞免疫性能的影響

2.4 2 種中草藥添加劑對(duì)肉雞組織病理學(xué)變化的影響如圖3 所示，飼糧中添加不同濃度加曼-100 及料磺1號(hào)處理組的肉仔雞心臟、肝臟、脾臟和腎臟基本正常，未見(jiàn)明顯的與受試物（加曼-100 或料磺1 號(hào)）有關(guān)的病理學(xué)變化。試驗(yàn)表明加曼-100 或料磺1 號(hào)沒(méi)有對(duì)肉仔雞心臟、肝臟、脾臟和腎臟造成病理學(xué)改變。

3 討 論

3.1 2 種復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響 本試驗(yàn)中，加曼-100 和料磺1 號(hào)在肉仔雞生長(zhǎng)前期（0～21 d）均未表現(xiàn)出促進(jìn)作用，而在生長(zhǎng)后期（22～42 d）及全期顯著提高了ADG 并降低了F:G，隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，復(fù)方中草藥的作用逐步顯現(xiàn)。加曼-100 和料磺1號(hào)提高肉雞的生長(zhǎng)性能與其中藥組分的生物活性成分密切相關(guān)。山楂中富含黃硐類(lèi)化合物、槲皮素和蘆丁素，具有抗氧化作用，與富含B 族維生素和酶類(lèi)的麥芽合用可起到健脾開(kāi)胃助消化的作用。蔣慧等[6]認(rèn)為土雜肉雞飼糧中添加2%山楂粉可顯著提高其ADG 且降低血清中的膽固醇含量；孫永梅等[7]試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)添加麥芽的復(fù)方中草藥添加劑可不同程度地提高肉仔雞的生產(chǎn)性能。白術(shù)的根莖富含倍半萜和炔屬化合物，具有健脾益氣、燥濕利水的功效。趙燕飛等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在日糧添加1%微米白術(shù)可顯著提高斷奶仔豬的日增重，降低F:G 和腹瀉率，同時(shí)可以改善腸道形態(tài)，增加腸道微生態(tài)區(qū)系的多樣性。賈玉剛等[9]研究發(fā)現(xiàn)，山楂、魚(yú)腥草、黃芪、甘草等組成的復(fù)方中草藥可提高藏雞的ADG，降低死亡率，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。石福岳等[5]發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加料磺1 號(hào)可提高放養(yǎng)肉雞生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)采用的中草藥復(fù)方可能通過(guò)改善腸道健康環(huán)境，提高消化吸收水平及改善抗氧化能力方面發(fā)揮作用，最終提高肉仔雞的生長(zhǎng)性能。

表6 飼糧添加不同水平料磺1 號(hào)對(duì)肉仔雞免疫性能的影響

圖3 飼糧添加不同水平加曼-100 或料磺1 號(hào)對(duì)肉仔雞肝臟組織病理學(xué)變化的影響（比例尺：100 μm）

3.2 2 種復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響屠宰性能可通過(guò)表觀(guān)上反映營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在不同組織(內(nèi)臟、肌肉、骨骼、表皮等)及同一組織的不同部位中沉積量差異的一組指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)。其中，屠宰率、凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率是評(píng)定肉雞胴體品質(zhì)的重要指標(biāo)。大量研究表明在飼料中添加中草藥能提高畜禽屠宰性能，如靳二輝等[10]發(fā)現(xiàn)由白術(shù)、茯苓、甘草等組成的復(fù)方中草藥制劑能夠促進(jìn)肉雞胸肌的生長(zhǎng)發(fā)育，改善胸肌和腿肌的肌肉品質(zhì)；吳漢東[11]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，山楂、甘草、神曲等組成的中草藥添加劑可以能提高肉仔雞的屠宰率和全凈膛率并顯著降低腹脂率。石福岳等[5]認(rèn)為，在放養(yǎng)肉雞日糧中添加料磺1 號(hào)顯著提高了屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率，但對(duì)腹脂率無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加1 000 mg/kg 加曼-100可以提高肉仔雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腿肌率并降低腹脂率，日糧添加2 000 mg/kg 料磺1 號(hào)提高了肉仔雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腿肌率。復(fù)方中草藥中的白術(shù)、山楂、麥芽、魚(yú)腥草、補(bǔ)骨脂等通過(guò)促進(jìn)胃腸道的生長(zhǎng)發(fā)育、調(diào)節(jié)消化道多種酶的活性，改善腸道微生物菌群，進(jìn)而增強(qiáng)胃腸道的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收功能，為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)需要；同時(shí)中草藥中的有效物質(zhì)可增強(qiáng)機(jī)體的免疫性能及抗氧化能力，為機(jī)體的健康生長(zhǎng)提供有利條件。本試驗(yàn)未涉及肉雞肉品質(zhì)的結(jié)果，將在后續(xù)試驗(yàn)中繼續(xù)研究。

3.3 2 種復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞免疫性能的影響家禽血清中主要含有IgG、IgM 和IgA 3 種免疫球蛋白。免疫球蛋白具有抗體活性，與動(dòng)物機(jī)體的抗體相關(guān)，在體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。其中，主動(dòng)免疫后，機(jī)體主要產(chǎn)生單體形式的IgG，是最主要的免疫球蛋白，具有抗細(xì)菌病毒等多種作用；IgM 是初次免疫應(yīng)答中最早產(chǎn)生的免疫球蛋白，具有調(diào)控漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體的作用；IgA 存在于血清、膽汁和其他分泌液中，介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。許多研究表明中草藥及其提取物可以對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能有調(diào)節(jié)作用，如Wang 等[12]試驗(yàn)證明在斷奶仔豬日糧中添加1 000 mg/kg 活性炭與中草藥復(fù)合物可顯著提高血清IgG 和IgM 水平。本試驗(yàn)中，日糧添加加曼-100 或料磺1 號(hào)均顯著提高了血清IgG、IgM和IgA 含量，這可能與魚(yú)腥草及補(bǔ)骨脂的添加相關(guān)，魚(yú)腥草中的癸酰乙醛為抗菌的有效成分，同時(shí)魚(yú)腥草也能明顯促進(jìn)白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的吞噬功能[13]。在肉雞中，周業(yè)飛[14]研究發(fā)現(xiàn)添加0.2%魚(yú)腥草可以促進(jìn)肉雞的免疫機(jī)能。補(bǔ)骨脂中的化學(xué)成分主要是黃酮、香豆素和萜酚類(lèi)，結(jié)構(gòu)中大多具有異戊烯基，也具有抗菌消炎、增加免疫力的功效[15]，提示2 種復(fù)方中草藥在改善肉雞免疫性能中具有積極作用。

免疫器官是免疫細(xì)胞增殖發(fā)育的場(chǎng)所，禽類(lèi)免疫功能的實(shí)現(xiàn)有賴(lài)于免疫器官的正常發(fā)育和功能。一般認(rèn)為動(dòng)物免疫器官重量的增加是由其自身細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所致，表明機(jī)體的免疫機(jī)能提高，免疫器官指數(shù)能夠反映免疫器官發(fā)育狀況，成為評(píng)價(jià)肉雞免疫狀況的重要指標(biāo)。日糧中魚(yú)腥草添加使肉雞的胸腺、脾臟和法氏囊等主要免疫器官的器官指數(shù)顯著提高[16]；田浪等[16]試驗(yàn)結(jié)果表明，中草藥微生態(tài)制劑組黃羽肉雞的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均顯著優(yōu)于抗生素組。在本試驗(yàn)中，2 種復(fù)方中草藥添加劑加曼-100 或料磺1 號(hào)均未對(duì)免疫器官指數(shù)產(chǎn)生顯著影響，這可能是中草藥成分激活了免疫器官的部分功能，使得免疫球蛋白等免疫活性物質(zhì)的分泌提高，但未對(duì)其器官的增重產(chǎn)生顯著影響。

3.4 2 種復(fù)方中草藥添加劑對(duì)肉仔雞組織病理學(xué)的影響組織病理學(xué)反映細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，進(jìn)而確定病變性質(zhì)[17]。因此，組織病理學(xué)檢查可輔助檢測(cè)器官的病變情況。在本試驗(yàn)中，復(fù)方中草藥添加劑對(duì)各組織的病理學(xué)觀(guān)察方面均正常，未見(jiàn)病變部位，表明試驗(yàn)中復(fù)方中草藥添加劑的添加量處于合理的范圍內(nèi)，對(duì)肉仔雞各臟器的健康沒(méi)有產(chǎn)生明顯的不良影響。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加復(fù)方中草藥添加劑加曼-100 或料磺1 號(hào)可顯著提高肉仔雞平均日增重并降低F:G，提高肉仔雞的生長(zhǎng)性能，顯著提高血清免疫球蛋白的含量，改善免疫性能；飼糧添加1 000 mg/kg 加曼-100 或2 000 mg/kg 料磺1 號(hào)顯著提高了肉仔雞屠宰性能且飼糧添加加曼-100 或料磺1 號(hào)沒(méi)有對(duì)肉仔雞臟器造成病理學(xué)改變。