40%粉唑醇·嘧菌酯懸浮劑分析方法研究

王陳杰，余德勉，王丹斌，宋懷挺，張 釗

(上海悅聯(lián)生物科技有限公司，上海 201215)

關(guān)鍵字：嘧菌酯； 粉唑醇

粉唑醇是一種廣譜內(nèi)吸型殺菌劑，通過(guò)植物的根、莖葉吸收，再由維管束向上轉(zhuǎn)移。對(duì)擔(dān)子菌和子囊菌引起的多種病害具有良好的保護(hù)和治療作用，具有抑制麥角甾醇的生物合成，能引起真菌細(xì)胞破壁和抑制菌絲的生長(zhǎng)，具有很好的內(nèi)吸性，因此可以迅速地被植物吸收，并在內(nèi)部傳導(dǎo)，具有很好的保護(hù)和治療活性。

嘧菌酯具有高效、廣譜、保護(hù)、治療、鏟除、滲透、內(nèi)吸活性等特點(diǎn)，對(duì)幾乎所有真菌綱(卵菌綱、藻菌綱、子囊菌綱和半知菌類)病害有很好的活性，是一類極具發(fā)展?jié)摿褪袌?chǎng)活力的新型農(nóng)用殺菌劑。可用于作物莖葉噴霧、種子處理，也可以進(jìn)行土壤處理。嘧菌酯在推薦劑量下使用對(duì)作物安全、無(wú)藥害；對(duì)地下水、環(huán)境安全。

將粉唑醇和嘧菌酯兩個(gè)藥劑以適當(dāng)比例混配使用，可以適當(dāng)降低用藥量，延緩和治理病原菌的抗藥性產(chǎn)生，而且還可以使混劑兼具有保護(hù)、治療和內(nèi)吸作用，實(shí)現(xiàn)取長(zhǎng)補(bǔ)短、優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的目的，擴(kuò)大了防治譜和使用范圍。

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，粉唑醇有氣相[1]和液相[2]分析方法以及粉唑醇異構(gòu)體的手性拆分方法[3-5],嘧菌酯的氣相[6-7]和液相[8]分析方法,粉唑醇和嘧菌酯氣相和液相分析的方法都具有較好的準(zhǔn)確度和精密度。但粉唑醇和嘧菌酯同時(shí)分析的方法還尚未見(jiàn)報(bào)道。由于40%粉唑醇·嘧菌酯懸浮劑為復(fù)配制劑，在實(shí)際生產(chǎn)中，如果兩個(gè)組分單獨(dú)測(cè)定易耗費(fèi)時(shí)間。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，摸索出一個(gè)在同一條件同時(shí)測(cè)定粉唑醇和嘧菌酯的分析方法。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，此分析方法具有較好的準(zhǔn)確度和精確度。

1 材料儀器

1.1 樣品和試劑 甲醇：色譜純；水：二次重蒸；嘧菌酯標(biāo)樣：已知含量≥98.0%；粉唑醇標(biāo)樣：已知含量≥98.0%；流動(dòng)相：甲醇+水=65+35(V/V)，流動(dòng)相經(jīng)0.45um孔徑的濾膜，并在超聲波浴槽中脫氣10min。

1.2 儀器 高效液相色譜儀：具紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器；色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)；色譜柱：Φ4.6mm×150mm不銹鋼柱，內(nèi)裝CAPCELL PAK C18/5μm為填充料的不銹鋼柱。

1.3 高效液相色譜操作條件 流量：1.0mL/min；柱溫：室溫(溫差變化≤2℃)；檢測(cè)波長(zhǎng)：262nm；進(jìn)樣體積：20μL；保留時(shí)間：粉唑醇約5.7min，嘧菌酯約8.3min。

上述操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)儀器的特點(diǎn)，對(duì)給定的操作參數(shù)做適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果，典型的嘧菌酯(粉唑醇)高效液相色譜圖(圖1)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)樣溶液的配置 稱取嘧菌酯和粉唑醇標(biāo)樣各0.05g(精確到0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，超聲冷卻后，用甲醇定容，搖勻。

2.2 試樣溶液的配置 稱取含有嘧菌酯或粉唑醇0.05g(精確到0.000 2g)試樣，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，超聲冷卻后，加甲醇定容，搖勻，過(guò)濾，備用。

2.3 試樣的測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值的重復(fù)性，待相鄰2針的響應(yīng)值變化<1.0%后，按照標(biāo)樣溶液，試樣溶液，試樣溶液，標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4 試樣中有效含量的計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中嘧菌酯(粉唑醇)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1(%)按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

A1—標(biāo)樣溶液中嘧菌酯(粉唑醇)峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中嘧菌酯(粉唑醇)峰面積的平均值；

m1—嘧菌酯(粉唑醇)標(biāo)樣的質(zhì)量, g；

m2—嘧菌酯(粉唑醇)試樣的質(zhì)量, g；

P—嘧菌酯(粉唑醇)標(biāo)樣的質(zhì)量百分?jǐn)?shù), %。

3 結(jié)果與討論

3.1 分析方法的線性相關(guān)性實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確配制一系列不同濃度的嘧菌酯和粉唑醇標(biāo)樣溶液，然后分別按2.3測(cè)定步驟進(jìn)行分析檢測(cè)，分別以嘧菌酯和粉唑醇的重量為橫坐標(biāo)，嘧菌酯和粉唑醇峰面積為縱坐標(biāo)，計(jì)算一元線性回歸方程和作線性相關(guān)圖。線性相關(guān)性測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表1)。

表1 嘧菌酯和粉唑醇線性相關(guān)數(shù)據(jù)表

嘧菌酯一元線性回歸方程：Y=1.450E8X+58 670,相關(guān)系數(shù)：R=0.999 5。

粉唑醇一元線性回歸方程：Y=2.517E7X-6 435.57,相關(guān)系數(shù)：R=0.999 27。

3.2 分析方法的精密度實(shí)驗(yàn) 任取一批40%粉唑醇·嘧菌酯懸浮劑，按本標(biāo)準(zhǔn)中2.3測(cè)定步驟連續(xù)測(cè)定嘧菌酯、粉唑醇含量10次，分別計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)。精密度測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表2)。

表2 嘧菌酯、粉唑醇精密度測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)表

從嘧菌酯、粉唑醇精密度測(cè)定數(shù)據(jù)表中可以看出，嘧菌酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差0.068，變異系數(shù)為0.34%、粉唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.050，變異系數(shù)為0.25%。

3.3 分析方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn) 選取已知含量的40%粉唑醇·嘧菌酯懸浮劑樣品，準(zhǔn)確稱取5份，并分別加入定量的嘧菌酯、粉唑醇標(biāo)樣，然后按本標(biāo)準(zhǔn)中2.3測(cè)定步驟測(cè)定嘧菌酯、粉唑醇標(biāo)樣的加入量，同理論值進(jìn)行比較，計(jì)算回收率。回收率測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表3)。

表3 回收率測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)表

按照本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)試驗(yàn)嘧菌酯、粉唑醇的回收率分別為：98.47%～100.79%、98.40%～101.14%之間，嘧菌酯和粉唑醇的平均回收率分別為99.67%和99.66%。

4 結(jié)論

結(jié)果表明，本文中建立的同柱分析40%粉唑醇·嘧菌酯懸浮劑中粉唑醇和嘧菌酯的方法在測(cè)定該制劑中的粉唑醇和嘧菌酯含量的準(zhǔn)確度和精密度較高，線性關(guān)系良好。由于一次即可測(cè)定粉唑醇和嘧菌酯的含量，使得該方法快速、簡(jiǎn)便，適合于產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)和控制。