新都地區(qū)成人血氨測(cè)定參考區(qū)間的建立*

鐘 麗，黃華翠

四川省成都市新都區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川新都 610500

生物參考區(qū)間通常指參考值分布的95%置信區(qū)間[1],是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、分析檢驗(yàn)信息的基本依據(jù)和尺度,是臨床判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室必須保證提供給臨床的參考區(qū)間可靠、適用，否則容易引起漏診、誤診[2]。血氨對(duì)急慢性肝病的診斷和判斷預(yù)后有重要作用。臨床中血氨增高也常見(jiàn)于消化道出血，是急診及危重癥醫(yī)學(xué)常關(guān)注的檢測(cè)指標(biāo)之一。建立本地區(qū)成人血氨的參考區(qū)間，可為相關(guān)疾病的診療提供更可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)抽取2020年1月10-20日到本院體檢的健康者402例作為研究對(duì)象，其中男200例，年齡18～86歲,中位年齡為43歲；女202例，年齡18～93歲，中位年齡為32歲。每10歲為一個(gè)年齡段，男女納入人群各分為8個(gè)年齡段。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)肝功能檢測(cè)正常；(2)無(wú)消化道出血及其他消化道疾?。?3)近期沒(méi)有接受輸血治療；(4)無(wú)各種腫瘤疾病；(5)無(wú)先天性疾病。

1.2儀器與試劑 采用美康生物科技股份有限公司生產(chǎn)的血氨檢測(cè)試劑盒在貝克曼全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，并將所得的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。使用配套的校準(zhǔn)品(批號(hào)：190711102，生產(chǎn)日期：20190711，有效期：20200710，校準(zhǔn)值：300.0 μmol/L)和質(zhì)控品(批號(hào)：190927101，生產(chǎn)日期：20190927，有效期：20200926)，檢測(cè)期間保證每天的室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.3方法 所有研究對(duì)象均在安靜狀態(tài)下采集空腹靜脈EDTA抗凝血3 mL，采血管由江蘇康健醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)提供(批號(hào)：191201，有效期：20210112)，標(biāo)本3 000 r/min離心15 min，用血漿檢測(cè)。排除標(biāo)本量不足、嚴(yán)重溶血、黃疸、乳糜等標(biāo)本，立即進(jìn)行檢測(cè)。所有試驗(yàn)嚴(yán)格按照儀器和血氨項(xiàng)目檢測(cè)試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)進(jìn)行操作。本研究依據(jù)WS/T 402-2012《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》[2]推薦方法，取單側(cè)95%建立各項(xiàng)目的參考區(qū)間。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 對(duì)所得的數(shù)據(jù)采用Dixon法剔除離群值[3]后，采用SPSS 21.0軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用K-S檢驗(yàn)對(duì)有效數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，對(duì)符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；對(duì)不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)。采用SPSS描述統(tǒng)計(jì)功能，計(jì)算血氨數(shù)據(jù)的P2.5、P5、P50、P95和P97.5百分位數(shù)，以單側(cè)第95百分位數(shù)(P95)作為參考區(qū)間的上限。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.5參考區(qū)間驗(yàn)證 隨機(jī)抽取男女各20例體檢者做血氨檢測(cè)，計(jì)算R值。R=測(cè)定結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的例數(shù)/總測(cè)定例數(shù)×100%。如20例參考個(gè)體中不超過(guò)2例檢查結(jié)果落在所驗(yàn)證的參考區(qū)間外(即R≥90%)，則可基本認(rèn)為該參考區(qū)間適用；如果有3例及以上的觀測(cè)值落在參考區(qū)間外，則證明該參考區(qū)間不適用。

2 結(jié) 果

2.1離群值判斷 對(duì)所得的數(shù)據(jù)使用Dixon法剔除離群值，將各項(xiàng)目數(shù)據(jù)分男、女升序排列，疑似離群值與相鄰值的差值(D)與數(shù)據(jù)全距(R)之比D/R≥1/3則判斷為離群值。所有檢測(cè)對(duì)象的血氨檢測(cè)結(jié)果按男、女按數(shù)值升序排列后，計(jì)算D/R值均小于1/3，故保留所有檢測(cè)數(shù)據(jù)。

2.2不同性別血氨檢測(cè)結(jié)果比較 經(jīng)檢驗(yàn),血氨數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布。不同性別間血氨檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-7.946，P<0.05)。故建議分別建立男性和女性血氨的參考區(qū)間。見(jiàn)表1。

表1 不同性別血氨檢測(cè)結(jié)果比較(μmol/L)

2.3不同年齡段血氨檢測(cè)結(jié)果比 各性別不同年齡段間血氨水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。故無(wú)需依據(jù)年齡分別建立血氨指標(biāo)的參考區(qū)間。見(jiàn)表2。

表2 不同年齡段血氨檢測(cè)結(jié)果比較

2.4健康成人血氨的參考區(qū)間 健康成人的血氨檢測(cè)結(jié)果的分布在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在性別差異，但不存在年齡差異，故建立不同性別參考區(qū)間。取單側(cè)95%建立各項(xiàng)目的參考區(qū)間，健康成年男性血氨參考區(qū)間為0～65.0 μmol/L，健康成年女性血氨參考區(qū)間為0～52.0 μmol/L。 見(jiàn)表3。

2.5驗(yàn)證生物參考區(qū)間 隨機(jī)抽取男女各20例體檢者檢測(cè)血氨值，檢測(cè)結(jié)果均在自建參考區(qū)間內(nèi)，即檢測(cè)結(jié)果落在本研究參考區(qū)間外的個(gè)數(shù)為0例(R≥90%)。

表3 成人血氨參考區(qū)間(μmol/L)

3 討 論

氨是人體內(nèi)氨基酸代謝的主要產(chǎn)物，成人每天產(chǎn)生大約1 000 mmol 的氨，主要在腸道吸收，一部分氨在生物合成中被重新利用，在肝臟通過(guò)鳥(niǎo)羧酸循環(huán)轉(zhuǎn)化為尿素由腎臟排出[4]，其余部分對(duì)機(jī)體沒(méi)有作用甚至具有神經(jīng)毒性[5]。血氨的檢測(cè)廣泛用于肝臟疾病、小兒先天性高血氨血癥等疾病的診斷、鑒別診斷及治療中[6]。大量臨床研究數(shù)據(jù)表明，高氨血癥能活化肝星狀細(xì)胞和導(dǎo)致肌肉萎縮的發(fā)生[7-8]，是肝硬化患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與肝性腦病的發(fā)生密切相關(guān)[9]。除肝源性疾病外，血氨增高還常見(jiàn)于消化道出血及危重患者，大量臟器出血、大量輸血、低鉀血癥、腎臟病變等患者，血氨增高會(huì)抑制神經(jīng)系統(tǒng)的功能，引起昏迷，不利于患者的預(yù)后恢復(fù)[10]。目前高血氨的研究仍在繼續(xù)，可能其危害仍未完全發(fā)現(xiàn)。生物參考區(qū)間是臨床判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，適宜的生物參考區(qū)間對(duì)疾病的預(yù)防、診斷、療效及預(yù)后都有重要的指導(dǎo)意義。臨床各實(shí)驗(yàn)室使用檢測(cè)方法、儀器、試劑、環(huán)境等不同，加之生物屬性本身存在個(gè)體差異，故建立適合本地區(qū)人群的參考區(qū)間尤為重要。本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)402例健康人群的血液進(jìn)行血氨檢測(cè)，建立本地區(qū)男性成人18～86歲血氨的參考區(qū)間為0～65.0 μmol/L，女性成人18～93歲血氨的參考區(qū)間為0～52.0 μmol/L，并通過(guò)了實(shí)驗(yàn)室內(nèi)參考區(qū)間驗(yàn)證。在得到實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間的基礎(chǔ)上，聯(lián)系醫(yī)務(wù)科，與臨床各科室老師共同商討確立了適合本地區(qū)的血氨危急值。

參考區(qū)間的適用性取決于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果與建立參考區(qū)間結(jié)果的可比性和服務(wù)人群的適用性[11]。直接引用試劑說(shuō)明書(shū)的參考范圍，勢(shì)必會(huì)影響醫(yī)生對(duì)疾病的準(zhǔn)確判斷，建立本地區(qū)血氨的參考區(qū)間十分重要和必要，建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的檢測(cè)系統(tǒng)和本地區(qū)人群特性，建立適合本地區(qū)人群的參考區(qū)間。