酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)TORCH抗體的方法學(xué)對(duì)比研究

姜 曄

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬國(guó)際和平婦幼保健院檢驗(yàn)科 上海市胚胎源性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200030

TORCH抗體檢查在臨床上常稱作優(yōu)生5項(xiàng)或致畸5項(xiàng)，此檢查是孕前或孕中的必查項(xiàng)目，是保障健康嬰兒出生的關(guān)鍵[1]。其中TORCH包括弓形蟲(chóng)(TOX)、風(fēng)疹病毒(RV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)及單純皰疹病毒(HSVⅠ、HSVⅡ)5項(xiàng)，若孕期感染上述病原微生物，極有可能通過(guò)胎盤傳播給胎兒，導(dǎo)致胎兒感染、畸變以及產(chǎn)生各種發(fā)育不良問(wèn)題，先天畸形的胎兒出生將給家庭和社會(huì)帶來(lái)負(fù)擔(dān)，且嚴(yán)重影響胎兒未來(lái)的生活質(zhì)量及心理健康[2-3]。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)作為檢查TORCH抗體的常用手段之一，可檢測(cè)血清中TORCH的IgM抗體進(jìn)而明確診斷，而該方法存在靈敏度不足的缺點(diǎn)?；瘜W(xué)發(fā)光法(CLIA)也是檢測(cè)TORCH抗體的檢查手段之一，諸多研究證實(shí)，CLIA較ELISA檢測(cè)TORCH抗體更具優(yōu)勢(shì)[4-5]。本文主要研究并比較上述兩種方法學(xué)的診斷價(jià)值，特選取632例來(lái)本院進(jìn)行相關(guān)檢查的孕前或孕期的婦女進(jìn)行回顧性研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 將在2017年2月至2019年7月來(lái)本院進(jìn)行孕前或孕期TORCH抗體篩查的632例婦女作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)研究對(duì)象均年滿20歲且已婚；(2)研究對(duì)象對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)研究對(duì)象此前存在流產(chǎn)或早產(chǎn)；(2)既往有畸形胎、死胎病史。632例婦女年齡20～41歲，平均(26.85±5.42)歲；孕次0～4次，平均(1.24±0.34)次；孕前婦女326例，孕早期婦女306例；孕早期婦女孕周9～15周，平均(11.82±1.06)周。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1ELISA 采集入組研究對(duì)象的晨起空腹靜脈血3 mL，置于采血管中，抗凝、離心處理后，低溫保存待測(cè)。采用深圳凱特科技有限公司提供的型號(hào)為KC-100的全自動(dòng)酶標(biāo)儀，配套使用TORCH特異性抗體診斷試劑盒，均由同一名檢驗(yàn)醫(yī)師嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果分析顯示S/CO≥ 1.2提示為陽(yáng)性，反之則提示陰性[6]。

1.2.2CLIA 采集血液標(biāo)本及檢測(cè)前準(zhǔn)備同上，采用深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)股份有限公司生產(chǎn)制造的型號(hào)為Maglumi 2000 PLUS的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及相關(guān)配套試劑等，均由同一名檢驗(yàn)醫(yī)師嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果以發(fā)光強(qiáng)度計(jì)算，結(jié)果顯示：血清中TOX IgM≥6 AU/mL，RV IgM ≥15 AU/mL，CMV IgM≥30 AU/mL，HSV Ⅰ IgM≥1.1 AU/mL，HSV Ⅱ IgM≥1.1 AU/mL均記為陽(yáng)性[7]。對(duì)上述血液標(biāo)本進(jìn)行病原體培養(yǎng)、分離、鑒定，以其結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3觀察指標(biāo) (1)比較使用不同方法(ELISA、CLIA)檢測(cè)632例血液標(biāo)本的TORCH 抗體的陽(yáng)性率；(2)與金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比時(shí)，ELISA檢測(cè)TORCH 抗體的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值；(3)與金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比時(shí)，CLIA檢測(cè)TORCH 抗體的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值；(4)比較ELISA與CLIA的診斷價(jià)值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本研究數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示,組間比較行χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1ELISA、CLIA檢測(cè)TORCH抗體陽(yáng)性率情況 見(jiàn)表1。

表1 ELISA、CLIA檢測(cè)TORCH抗體陽(yáng)性率情況[n(%)]

2.2ELISA檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較 與金標(biāo)準(zhǔn)比較，ELISA檢測(cè)結(jié)果全陽(yáng)性78例，全陰性498例。見(jiàn)表2。

表2 ELISA檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較(n)

2.3CLIA檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較 與金標(biāo)準(zhǔn)比較，CLIA檢測(cè)結(jié)果全陽(yáng)性128例，全陰性484例。見(jiàn)表3。

表3 CLIA檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較(n)

2.4兩種方法診斷效能比較 CLIA檢測(cè)TORCH抗體的靈敏度及陰性預(yù)測(cè)值顯著高于ELISA，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其特異度、準(zhǔn)確性及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與ELISA檢測(cè)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表4。

表4 ELISA與CLIA檢測(cè)TORCH抗體的診斷效能比較(%)

3 討 論

女性因妊娠原因?qū)е麦w內(nèi)激素水平發(fā)生變化及免疫功能減弱，此時(shí)若不嚴(yán)加防范，極有可能被各種病原微生物侵入發(fā)生感染，或激活體內(nèi)原有的病毒導(dǎo)致發(fā)病，上述均是孕期婦女感染TORCH的主要因素。妊娠婦女感染TORCH可導(dǎo)致胎兒感染病毒、先天畸形、發(fā)育遲緩或缺陷，甚至在腹中死亡，在臨床檢查中應(yīng)給予高度重視。感染后母體的臨床癥狀并不具有特異性，因此需依靠相關(guān)檢查手段進(jìn)行確診，以便在早期采取有效措施處理，減少或杜絕不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。ELISA在臨床上以價(jià)格優(yōu)廉著稱，主要通過(guò)檢測(cè)母體感染病原體3～7 d后的特異性IgM抗體判斷病情，但其仍存在檢測(cè)周期較長(zhǎng)及操作煩瑣等諸多局限[8]。CLIA受試劑及實(shí)驗(yàn)條件的影響較ELISA更小，其主要通過(guò)病原體和試劑發(fā)生各種反應(yīng)，從而誘導(dǎo)試劑發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，采用特殊裝置將其呈現(xiàn)并以光單位形式記錄，由此反映是否感染TORCH[9]。

本研究結(jié)果顯示：ELISA檢測(cè)的TOX、RV、CMV、HSVⅠ及HSVⅡ抗體的陽(yáng)性率均低于CLIA檢測(cè)陽(yáng)性率(P<0.05)，CLIA檢測(cè)TORCH抗體的靈敏度及陰性預(yù)測(cè)值顯著高于ELISA檢測(cè)(P<0.05)，其特異度、準(zhǔn)確性及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與ELISA檢測(cè)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。上述結(jié)果證實(shí)，整體而言CLIA檢測(cè)TORCH抗體的效果要優(yōu)于ELISA，其更高的靈敏度表明在臨床使用中對(duì)TORCH抗體早期檢出更具有優(yōu)勢(shì)，可使患者病情盡早控制，利于預(yù)后，與顏霞等[4]、 STAHL等[10]的研究結(jié)果一致。同時(shí)，本次研究并未比較影響兩種檢測(cè)方式的其他相關(guān)因素，例如檢測(cè)操作難度、檢測(cè)費(fèi)用以及檢測(cè)要求的繁雜程度等內(nèi)容。此外，本文研究方法較為局限，需要后期進(jìn)一步深入研究得出更可靠結(jié)果。

綜上所述，ELISA與CLIA在檢測(cè)TORCH抗體的準(zhǔn)確性、特異度及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值上差異較小，兩者均可作為臨床診斷TORCH感染的有效手段。而在檢測(cè)的陽(yáng)性率、靈敏度以及陰性預(yù)測(cè)值上CLIA更勝一籌，綜合考慮CLIA的臨床價(jià)值更高，值得推廣應(yīng)用。