氣相色譜法檢測(cè)紅棗內(nèi)聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留

牛立航 楊歡歡 王瑾峰

紅棗作為一類藥食同源的物質(zhì)，果實(shí)中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，深受廣大消費(fèi)者的喜歡。但是隨著紅棗栽培面積的不斷擴(kuò)大，為了提高紅棗的產(chǎn)量與質(zhì)量，常常需要使用化學(xué)藥劑，這些化學(xué)藥劑在殺死病蟲害的同時(shí)，也引發(fā)了農(nóng)藥殘留的問題，消費(fèi)者若食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的紅棗，將會(huì)威脅身體健康。

在紅棗的殘留農(nóng)藥中，聯(lián)苯菊酯是一種較常見的農(nóng)藥。聯(lián)苯菊酯又被叫作氟氯菊酯，俗稱天王星，屬于新型擬除蟲菊類農(nóng)用殺蟲劑，具有高效、廣譜的特征，但是具備一定的毒性。根據(jù)我國(guó)最新的標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2014，食品中聯(lián)苯菊酯的農(nóng)藥殘留量應(yīng)低于5mg/kg。當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥的方法有高效液相色譜法、氣相色譜法、高效薄層色譜法等等，其中以氣相色譜法最為常見。接下來本文就氣相色譜法檢測(cè)紅棗中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留的結(jié)果總結(jié)如下。

一、儀器和材料選擇

1.儀器。美國(guó)瓦里安公司提供的VARIAN450氣相色譜儀、檢測(cè)器、電子秤、氮吹儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、燒杯、速組織勻漿機(jī)、固相萃取裝置、搗碎器、Florisil固相萃取小柱、CARB/NH2柱（生產(chǎn)商：杭州福?？萍挤?wù)有限公司）。

2.試劑與材料。試劑：無水硫酸鈉（將其置于溫度高達(dá)400℃的環(huán)境下持續(xù)燒灼4h后再儲(chǔ)存在干燥器內(nèi)）、蒸餾水、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、甲醇（分別用作分析純與色譜純）、農(nóng)夫山泉瓶裝礦泉水。材料：采自本地的紅棗，在常溫下陰干制成干果，然后置于零下18℃的環(huán)境下冷凍24h，取出粉碎后置入具塞聚乙烯瓶?jī)?nèi)，放在零下18℃的環(huán)境下冷凍保存。

3.色譜條件。色譜條件選用DB-1701的色譜柱（其規(guī)格如下：30m×0.32mm×0.25um），設(shè)置好相關(guān)的溫度，其中進(jìn)樣口與檢測(cè)器溫度分別為260℃、300℃，在程序升溫下，將初始溫度設(shè)置為180℃，保持10min后按照每分鐘5℃的速度升溫至270℃，保持10min;選擇純度超過99.99%的氮?dú)庾鳛檩d氣，恒流速度控制在每分鐘1.3mL，分流比為10∶1，進(jìn)樣量控制在1μL。

4.實(shí)驗(yàn)方法。（1）樣品制備。稱取上述經(jīng)過處理后的紅棗樣品30g加入至容量為100mL的燒杯內(nèi)，再加入20mL蒸餾水，振蕩使其均勻，再加入乙腈60mL，借助高速組織勻漿機(jī)實(shí)施勻漿操作，時(shí)間控制在1min，超聲提取3min。操作完畢后進(jìn)行過濾，收集過濾液，用滴管吸取30mL的乙腈濾液，在無水硫酸鈉的作用下將其干燥，使其濃縮至近干。

（2）樣品凈化處理。①CARB/NH2柱第一次凈化。分別將丙酮與二氯甲烷兩種試劑按照1∶1的比例均勻混合后對(duì)CARB/NH2柱予以活化操作，完成活化后再用3mL丙酮與二氯甲烷的混合液前后分三次洗滌濃縮處理后的紅棗樣品，將獲得的洗滌液分別吸入CARB/NH2柱，直到洗滌液的液面達(dá)到柱表面為止。接下來再加入12mL的淋洗液，用50mL的平底燒瓶收集淋洗液，濃縮近干，用2mL的正己烷進(jìn)行溶解。②弗羅里硅土柱第二次凈化。先取弗羅里硅土柱，在其上層加入無水硫酸鈉1.0g，然后先使用正己烷5mL淋洗，再加入上述用2mL正己烷溶解的濃縮液過柱，先使用濃度為5%的二氯甲烷5mL實(shí)施除雜操作，然后用濃度為10%的乙酸乙酯的正己烷10mL洗脫，將洗脫液置于40℃氮?dú)庵写蹈?，然后再加?mL正己烷進(jìn)行溶解，最后將其移入2mL自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶?jī)?nèi)，實(shí)施氣相色譜檢測(cè)。

（3）測(cè)定。在特定的條件下，當(dāng)儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)，用微量進(jìn)樣器抽取1μL標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行進(jìn)樣。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別選取體積不同的上述10μg/mL的聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，加入正己烷稀釋配置成一系列溶液，設(shè)置五個(gè)不同的濃度，分別是0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.3μg/mL、0.5μg/ml、1.0μg/mL，分別將其移入2mL自動(dòng)進(jìn)樣器品瓶?jī)?nèi)，按照1.3的色譜條件，用橫坐標(biāo)表示聯(lián)苯菊酯的含量，用縱坐標(biāo)表示峰面積，最終將其標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制出來（如圖1所示）。根據(jù)該曲線得出聯(lián)苯菊酯濃度（x）與峰面積（y）二者線性回歸方程：y=2.24×106x+2.79×104，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9950。

圖1：聯(lián)苯菊酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.加標(biāo)回收試驗(yàn)。應(yīng)用標(biāo)樣添加的手段，將一定量的標(biāo)準(zhǔn)品加入至已知含量的樣品中，按照上述1.4的實(shí)驗(yàn)方法分別制備出3份濃度不同的樣品溶液，再按照1.3的色譜條件，對(duì)加標(biāo)回收率進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果得出：1號(hào)樣品中的聯(lián)苯菊酯含量為0.0345μg，加標(biāo)量為0.300μg，樣本中聯(lián)苯菊酯的總量為0.3135μg，加標(biāo)回收率為93.72%;2號(hào)樣品中的聯(lián)苯菊酯含量為0.0332μg，加標(biāo)量為0.300μg，樣本中聯(lián)苯菊酯的總量為0.3098μg，加標(biāo)回收率為92.98%;3號(hào)樣品中的聯(lián)苯菊酯含量為0.0321μg，加標(biāo)量為0.300μg，樣本中聯(lián)苯菊酯的總量為0.3012μg，加標(biāo)回收率為90.70%，經(jīng)計(jì)算3份樣品的平均加標(biāo)回收率為92.47%，RSD為1.70%。

3.樣品測(cè)定。根據(jù)上述1.4的實(shí)驗(yàn)方法分別配置3份樣品溶液，配置好后再以1.3的色譜方法開展測(cè)定，最終根據(jù)公式計(jì)算出紅棗樣品內(nèi)的聯(lián)苯菊酯，獲得結(jié)果見圖2所示，聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品與紅棗樣品色譜圖如圖2與圖3所示。

三、討論

有機(jī)磷與擬除蟲菊酯農(nóng)藥屬于有機(jī)污染物，具有持久性特征，能夠經(jīng)食物鏈逐步傳遞至人體體內(nèi)，危害人類的身體健康。特別是近年來，隨著人們食品安全意識(shí)的不斷提高，以及國(guó)家越來越重視農(nóng)藥中的化學(xué)殘留，對(duì)食品中農(nóng)藥殘留量的限制要求越來越嚴(yán)。按照國(guó)家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY761，uECD檢測(cè)作為有機(jī)氯擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留檢測(cè)的重要儀器，在確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量方面發(fā)揮著重要作用。在本文中，采用氣相色譜法對(duì)紅棗中的聯(lián)苯菊酯開展檢查，結(jié)果顯示本次實(shí)驗(yàn)樣品中的聯(lián)苯菊酯含量為0.0022μg/g，RSD為3.55%，按照國(guó)際現(xiàn)有的農(nóng)藥殘留檢測(cè)行業(yè)執(zhí)行的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示殘留的聯(lián)苯菊酯含量未超標(biāo)，符合要求。在本文中，分別實(shí)施CARB/NH2柱第一次凈化與弗羅里硅土柱第二次凈化對(duì)紅棗粗提取液實(shí)施固相萃取，在經(jīng)過分離、純化、富集以后，結(jié)果得出樣品的加標(biāo)回收率為92.47%，RSD為1.70%，可見將氣相色譜法應(yīng)用在紅棗聯(lián)苯菊酯檢測(cè)中具有較高的準(zhǔn)確度，檢測(cè)結(jié)果可靠。

通過本文的實(shí)驗(yàn)得出，將氣相色譜法應(yīng)用在紅棗聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中，利用氣相色譜法較高的靈敏度、檢測(cè)限以及回收率，能夠準(zhǔn)確地檢測(cè)出紅棗內(nèi)的聯(lián)苯菊酯是否超標(biāo)，同時(shí)該檢測(cè)方法還可以運(yùn)用在其他農(nóng)作物的聯(lián)苯菊酯殘留量的檢測(cè)，可以有效避免農(nóng)藥殘留超標(biāo)食品的存在，在保障消費(fèi)者食品安全方面發(fā)揮著重要作用。