菲牛蛭體成分和養(yǎng)殖技術(shù)的研究進展

■陳 琛戚 敏楊秀娟

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，云南昆明 650201；2.云南省畜牧總站，云南昆明 650225）

菲牛蛭（Poecilobdella manillensis），別名馬尼擬醫(yī)蛭，俗名金邊（銅邊）螞蟥，屬環(huán)節(jié)動物門，蛭綱，醫(yī)蛭科，牛蛭屬，高等無脊椎動物，雌雄同體；體形較大，體長為107～113 mm，寬為8～12.5 mm；以吮吸人與家畜等脊椎動物血液為生，在國內(nèi)分布于廣東、海南島、廣西、福建等地區(qū)，在國外分布于印度、越南、泰國、菲律賓等國家，喜生活在溝渠、稻田、沼澤、池塘等濕熱環(huán)境中[1-3]。

水蛭是一味傳統(tǒng)中藥材，初載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，有破血、通經(jīng)、散瘀的功能；主治血瘀經(jīng)閉腹痛、癥瘕積聚，跌打損傷[4]。水蛭體內(nèi)最主要的活性成分是水蛭素（Hirudin），是迄今為止發(fā)現(xiàn)的自然界最強特異性抗凝血物質(zhì)，廣泛的存在于吸血水蛭唾液腺及唾液中，其藥效上優(yōu)于重組水蛭素（Recombinant hirudin,rH）和肝素，副作用低于重組水蛭素和肝素[5-6]。菲牛蛭是水蛭的一種，體內(nèi)含有水蛭素、菲牛蛭素（Bufrudin）、纖溶酶、透明質(zhì)酸酶，血小板聚集抑制劑等多種活性成分，具有抗凝血、抗腫瘤、抗炎、降血脂等作用[7]，且菲牛蛭提取物的抗凝血酶活性高于其他水蛭[8-9]，在醫(yī)學(xué)上有著廣闊的應(yīng)用前景。近年來，由于人們對心血管藥物的迫切需求，以及天然水蛭素的不可替代性，人們開始重視對菲牛蛭有效成分和養(yǎng)殖技術(shù)的研究，本文對菲牛蛭的體成分以及養(yǎng)殖技術(shù)研究進行綜述，為菲牛蛭的養(yǎng)殖和開發(fā)提供參考。

1 菲牛蛭體營養(yǎng)成分

菲牛蛭粗蛋白含量為16.7%、灰分為1.33%、粗脂肪為1.35%、水分為80.55%，粗蛋白含量較高，粗脂肪含量低[10]。苗艷麗等[11]測定了菲牛蛭體18種氨基酸含量，含量最高的非必需氨基酸為甘氨酸，達5 535.28μg/g；必需氨基酸為亮氨酸，高達2 340.59μg/g。甘氨酸在機體某些病理條件下表現(xiàn)出抗損傷、抗炎、免疫調(diào)節(jié)的作用[12]。而天冬氨酸、甘氨酸、亮氨酸在菲牛蛭活血化瘀的功效中也起到了十分重要的藥理作用[11]。菲牛蛭氨基酸組成比例中必需氨基酸與總氨基酸的比值（EAA/TAA）為36.87%，必需氨基酸與非必需氨基酸的比值（EAA/NEAA）為58.41%，符合FAO/WHO推薦值，具有良好的氨基酸組成比；藥用氨基酸（MAA）總含量為43.44%，其中包括天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸，藥用氨基酸與總氨基酸的比值（MAA/TAA）達65.73%，藥用氨基酸含量高[10]。

菲牛蛭16種脂肪酸，占脂肪酸總量的97.39%，其中飽和脂肪酸占63.34%，不飽和脂肪酸占34.05%，含量最高的脂肪酸是十六烷酸（棕櫚酸），達到23.78%，其次是9-十八碳烯酸（油酸），占12.53%[10]。棕櫚酸能降低血清中的膽固醇含量，是細胞膜中磷脂的重要組成成分，而油酸具有提高血液中高密度脂蛋白的作用，能夠有效預(yù)防心腦血管疾病[13-15]。

菲牛蛭體成分含有Ca、Fe、Mg、Mn、Zn、Cu、V、Cr 8種元素，在測定的元素當中，其常量元素中Ca的含量最高，為14.11 mg/g，微量元素中Fe與Zn的含量最高，分別為1.33 mg/g和1.37 mg/g，且菲牛蛭體內(nèi)的Fe、Mg、Zn微量元素符合抗癌藥物微量元素范圍[16]。

2 菲牛蛭的活性成分

2.1 水蛭素和菲牛蛭素

水蛭素是存在于水蛭唾液腺里的一種重要活性成分，是由65～66個氨基酸殘基組成的小分子單鏈環(huán)肽化合物，相對分子質(zhì)量為7 000 u。水蛭素具有抗凝血和抗血栓的作用，其抗凝作用專一且抗凝活性強于肝素，是一種特異性最強的天然凝血酶抑制劑。而重組水蛭素由于第63位氨基酸Tyr無硫酸基團，導(dǎo)致重組水蛭素對凝血酶的抑制效果較水蛭素低90%，血清半衰期短，并且伴有嚴重的副作用[5-6，17]。重組水蛭素的這一缺陷，導(dǎo)致了天然水蛭素具有了不可替代性。菲牛蛭素是從菲牛蛭唾液中分離得到的多肽類化合物，可以與凝血酶相結(jié)合，有抑制凝血酶的效果[18]。黎淵弘[19]通過實驗得到菲牛蛭素是由cDNA長度為251 bp，編碼框由20個氨基酸信號肽和63個氨基酸成熟肽構(gòu)成的。菲牛蛭素中含有兩種主要的特異凝血酶抑制物——菲牛蛭素A（Bufrudin A，BDA）與菲牛蛭素B（Bufrudin B，BDB），且兩者作用的凝血因子稍有不同，且抗凝血酶指標存在差異性。黃愛民[20]從菲牛蛭中成功分離純化出菲牛蛭素并分離出BDA與BDB。BDA分子量約為15.2 ku，等電點為3.97，BDB分子量為14.6 ku，等電點為4.61；兩者均能作用于Ⅱ、Ⅷ、Ⅻ型凝血因子，均不能作用于Ⅴ、Ⅸ、Ⅺ型凝血因子，但BDB還能作用于Ⅹ型凝血因子。

菲牛蛭唾液中同時含有天然水蛭素和菲牛蛭素，但菲牛蛭素和水蛭素是兩種不同的物質(zhì)。菲牛蛭素氨基酸序列50%～60%和水蛭素氨基酸序列相同，其余氨基酸序列不同[18]，且BDA和BDB的分子量與水蛭素均不同，可知是不同的抗凝血物質(zhì)。除了分子量（Mr）與報道的水蛭素分子量（Mr）相差較遠外，BDA等電點（3.97）與水蛭素相似；而BDB等電點（4.61）則比水蛭素大，其他的生化指標及抗凝活性行為均與報道的水蛭素極為相似[21]。

2.2 其他活性成分

菲牛蛭還含有纖維蛋白溶解酶、抗血小板聚集活性成分，新型抗凝血酶活性多肽。鐘小斌等[22]從菲牛蛭消化液中分離出一種纖維蛋白溶解酶，其相對分子量為42 ku，其纖溶機理可表現(xiàn)為直接溶解纖維蛋白。李文等[23]通過抗ADP或膠原誘導(dǎo)的血小板聚集實驗發(fā)現(xiàn)，菲牛蛭具有抗血小板聚集的作用，說明菲牛蛭含有抗血小板聚集的活性成分。例如：水蛭素以及變異體家族能夠抑制凝血酶[24]；Antistasin[25]、Therostasin[26]和Tridegin[27]能夠?qū)δ蜃赢a(chǎn)生抑制作用；Decorsin[28]、ORnatin[29]能夠頡頏血小板糖蛋白；Ga?lin[30]、Lapp[31]能夠抑制血小板聚集等；Hementin[32]能夠溶解血栓蛋白。

盧舒凡等[33]利用水提醇沉、離子交換、反向?qū)游龇ǚ蛛x純化菲牛蛭，所得菲牛蛭抗凝活性多肽抗凝活性≥2 548 000 ATU，并發(fā)現(xiàn)粗提物經(jīng)過電泳分離的蛋白條帶在CBNI數(shù)據(jù)庫未找到相似蛋白，說明該研究的目的蛋白和已發(fā)現(xiàn)的“菲牛蛭素”不同，屬于新型抗凝蛋白。肖凌[34]通過胰蛋白酶酶解菲牛蛭和日本醫(yī)蛭凍干粉，從日本醫(yī)蛭中得到3種抗凝血酶多肽，從菲牛蛭中得到6種，其中有4種是日本醫(yī)蛭所沒有的。

3 菲牛蛭生長發(fā)育以及繁殖特性

3.1 菲牛蛭的生長發(fā)育特性

菲牛蛭是一種料重比比值小、體質(zhì)量大的水蛭。菲牛蛭具有3個生長發(fā)育階段，從活兔身上吸食血液，吸血第1、2、3次為幼體階段，吸血第4次以后為亞成體階段，吸血第5次部分個體性成熟，第6次全部性成熟，總體歷經(jīng)14個月，在菲牛蛭環(huán)帶區(qū)的生殖孔附近出現(xiàn)米黃色顆粒，即性成熟后成為成體。菲牛蛭幼體重為1.27～3.35 g，亞成體3.35～11.7 g，成體11.7～20.2 g，性成熟吸血量為：103.15 g/10條，且生命周期最大體重是性成熟體重的3倍，料重比為3∶1，而螞蟥（日本醫(yī)蛭）的料重比為5.6∶1[35]。

3.2 菲牛蛭的繁殖特性

菲牛蛭是一種雌雄同體的環(huán)節(jié)動物，異體交配，雄性生殖器一般性成熟較早，繁殖過程一般為：交配、產(chǎn)卵、孵化三個階段，幼蛭第一年8月孵化后，于次年春季性成熟[36]。。

菲牛蛭能夠在土壤、水中進行交配，且在土壤環(huán)境條件下的交配率高于水體環(huán)境。受到溫度的影響，菲牛蛭在30℃的條件下有最高交配率，為97.780%；菲牛蛭水體交配率較低，即使在最適水體溫度下交配，其交配率也不超過70%[37]。菲牛蛭的交配大約一月后開始產(chǎn)卵繭，一般在春季進行，當水溫大于20℃時，菲牛蛭成蛭會爬離水面20～30 cm，在土壤中產(chǎn)卵繭；卵繭在20～30℃條件下，經(jīng)過2～3周的時間即可孵化出幼蛭，菲牛蛭成蛭每次產(chǎn)卵1～5個，平均3.2個，每個卵繭可孵化幼蛭1～25條，平均11.6條[38]。卵繭克數(shù)為1.0～1.5 g和1.5～2.0 g時，孵化率和孵化數(shù)最高，其最適孵化溫度為26～28℃[37]。

菲牛蛭繁殖能力與體重和年齡有關(guān)，體重在5～15 g范圍內(nèi)時，菲牛蛭性腺系數(shù)隨體重的增長而增長，當菲牛蛭體重10～15 g時，性腺系數(shù)最高，達3.129%，且產(chǎn)繭數(shù)以及孵化率最高；當菲牛蛭2～3年齡時，產(chǎn)繭數(shù)以及孵化率最高[39]。

4 菲牛蛭的人工養(yǎng)殖模式

菲牛蛭的養(yǎng)殖模式多種多樣。菲牛蛭的人工養(yǎng)殖方式按照養(yǎng)殖環(huán)境不同可以分室內(nèi)養(yǎng)殖和室外養(yǎng)殖，可以看作一級養(yǎng)殖模式；這兩大類一級養(yǎng)殖模式又可以和土池塘、水泥池、壟溝、水泥池+土池塘等組合形成對應(yīng)二級養(yǎng)殖模式，在此基礎(chǔ)上，使用網(wǎng)箱、養(yǎng)殖箱組合形成三級養(yǎng)殖模式，從而組成單一或復(fù)合的養(yǎng)殖模式。

在現(xiàn)階段我國人工養(yǎng)殖模式中，水泥池養(yǎng)殖模式占比為30%左右，多數(shù)為室外池塘+水泥池養(yǎng)殖[40]。周維官等[41]在養(yǎng)殖試驗的過程中發(fā)現(xiàn)，菲牛蛭在經(jīng)過10個月室內(nèi)水泥池養(yǎng)殖模式后，條均凈增重、成活率為0.919 g和67.3%，成活率與體增重較低。

室外土池塘（無網(wǎng)箱）養(yǎng)殖成本較低，建設(shè)在水源充足、環(huán)境安靜、無污染、避風(fēng)向陽的地方，同室外水泥池一致，當氣溫過高時，使用遮陽網(wǎng)避光降溫，當氣溫過低時，建設(shè)大棚保溫。周維官等[41]在養(yǎng)殖試驗的過程中發(fā)現(xiàn)，菲牛蛭在經(jīng)過10個月室內(nèi)土池塘養(yǎng)殖模式后，條均凈增重、成活率為1.087 g和79.3%，高于室內(nèi)水泥池養(yǎng)殖模式。但由于養(yǎng)殖在室外土池塘中的水蛭容易逃跑與被天敵捕食，養(yǎng)殖過程中容易被氣候影響，使用室外土池塘養(yǎng)殖水蛭的人較少，在現(xiàn)階段我國人工養(yǎng)殖模式中，室外土池塘（無網(wǎng)箱）養(yǎng)殖模式占比約為3%左右[40]。

室外土池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖是基于室外土池塘養(yǎng)殖模式形成的，室外土池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖一定程度上避免了水蛭被天敵捕食與逃跑，但受氣候影響較大，據(jù)調(diào)查現(xiàn)階段我國人工養(yǎng)殖模式中，室外土池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖模式占比在45%以上[40]。

室外壟溝養(yǎng)殖（無網(wǎng)箱）是在室外土池塘養(yǎng)殖的基礎(chǔ)上改良進行的，壟溝適量種植水草，壟溝應(yīng)設(shè)有出入水口，防洪、泄洪溝，還有防逃逸裝置[38]。周維官等[41]研究發(fā)現(xiàn)，室外壟溝養(yǎng)殖條均凈增重、成活率為1.253 g和91.7%，養(yǎng)殖優(yōu)勢上室外壟溝養(yǎng)殖（無網(wǎng)箱）>室外土池塘養(yǎng)殖（無網(wǎng)箱）>室內(nèi)水泥池養(yǎng)（無網(wǎng)箱）。室外壟溝養(yǎng)殖的淤泥量、土壤量和水草量均高于室外池塘養(yǎng)殖，且周維官在試驗過程中發(fā)現(xiàn)，菲牛蛭在濕潤土壤上的時間與在水體中的時間比約為7∶3，一定程度上說明室外壟溝養(yǎng)殖的環(huán)境更加符合菲牛蛭的生存習(xí)性。

除了以上4種養(yǎng)殖模式以外，還有其他一些較為不常見的養(yǎng)殖模式，例如：生態(tài)養(yǎng)殖、泡沫箱養(yǎng)殖、濕土養(yǎng)殖和集約化立體養(yǎng)殖模式等。生態(tài)養(yǎng)殖是在池塘養(yǎng)殖上加入其他經(jīng)濟作物同時養(yǎng)殖，比如蓮藕，棱角等經(jīng)濟作物[42]。泡沫箱養(yǎng)殖，是在規(guī)格40 cm×60 cm×30 cm，箱內(nèi)總底面積為5 m2的泡沫箱里進行菲牛蛭養(yǎng)殖[43]。濕土養(yǎng)殖模式是利用濕潤的砂土壤代替水體，養(yǎng)殖密度達3 000尾/m2，可在此基礎(chǔ)上進行立體養(yǎng)殖[44]。

5 菲牛蛭的養(yǎng)殖環(huán)境

菲牛蛭養(yǎng)殖水體應(yīng)符合《漁業(yè)水質(zhì)標準》（GB 11607），且水體pH應(yīng)為5.5～7.0，為弱酸性[38]。在廣州地區(qū)菲牛蛭生活水體有較高的HCO3-、Ca2+、SO42-，有較穩(wěn)定的Ca2+，pH表現(xiàn)為中性偏酸[45]。菲牛蛭幼蛭最適生長水溫范圍為26～30℃，此時幼體各項生長指標達到高峰；菲牛蛭生長溫度為18～34℃，當氣溫低于7℃，水溫低于6.5℃時，菲牛蛭全部不活動，當氣溫21℃，水溫19℃時活動最活躍[46]。

菲牛蛭養(yǎng)殖水體中可以添加一定量有益微生物，例如硝化細菌、光合細菌等有益微生物，有益菌能夠顯著的凈化水體，增加水中氧氣的溶解度，降低氨氮、亞硝態(tài)氮等物質(zhì)[47]。菲牛蛭養(yǎng)殖水體溶解氧應(yīng)大于4 mg/L，且菲牛蛭水體耗氧率隨水溫的升高而升高，當水溫為20.2℃時，菲牛蛭幼蛭和成蛭的耗氧率分別為0.351、0.063 mg/(g/h)，30.4℃時，分別為0.624、0.110 mg/(g/h)[39，48]。菲牛蛭規(guī)范化養(yǎng)殖的養(yǎng)殖池土質(zhì)應(yīng)符合《土壤環(huán)境質(zhì)量標準》（GB 15618）二級土壤的要求。含鐵較高的土壤更有利于菲牛蛭的生長、繁殖；菲牛蛭規(guī)范化養(yǎng)殖的養(yǎng)殖場地應(yīng)選擇坐北向南，冬暖夏涼，環(huán)境安靜、水源充足、進排水方便的地方興建，并符合《水產(chǎn)品產(chǎn)地環(huán)境要求》（GB/T 18407.4）中“3.1”和“3.3”的規(guī)定要求[38]。

6 菲牛蛭的飼養(yǎng)管理

菲牛蛭幼蛭的喂食周期與其特定增長率呈現(xiàn)負相關(guān)關(guān)系，隨著喂食周期的減短，幼蛭的各項生長指標均呈現(xiàn)上升趨勢，從生長率考慮，建議菲牛蛭幼蛭喂食周期為2 d，養(yǎng)殖密度為75尾/L，從個體體質(zhì)量增長率以及成活率綜合考慮后，建議菲牛蛭成蛭喂食周期為10 d，養(yǎng)殖密度為8～10尾/L；建議菲牛蛭在6：00～10：00，17：00～19：00進行投喂[45，48]。

菲牛蛭高密度人工養(yǎng)殖，食物殘渣極易污染水體，誘發(fā)菲牛蛭疾病，所以菲牛蛭飼喂時應(yīng)當把飼料灌注到豬小腸或者人工腸衣當中，加入飼料之前，應(yīng)當把飼料加溫，加入后進行分段，并扎緊，每段長度約20～50 cm；喂食時間大約是0.5～1 h，菲牛蛭飽食之后會自動從腸衣上脫落，飼喂完成后應(yīng)當及時收集剩料以及腸衣，防止水體污染[38]。

菲牛蛭致病原為“嗜水氣單胞菌”與“奇異變形菌”，這兩種病原菌可單獨或共同引發(fā)菲牛蛭疾病，當發(fā)病時，菲牛蛭患病皮膚角質(zhì)層脫落、潰爛、肌肉發(fā)生潰瘍，腐爛，肌纖維溶解壞死，發(fā)出腐臭氣味，身體腫脹，唾液腺排列混亂，部分斷裂；病原菌對慶大霉素、新霉素等藥物敏感，用板藍根以及陳皮藥浴治療效果良好[49]。在對水體進行消毒時，硫酸銅、硫酸亞鐵、高錳酸鉀對菲牛蛭毒性較強，不建議作為水體消毒劑，而強氯精、二氧化氯對菲牛蛭的毒性較弱，可以作為水體消毒劑，生石灰會提升水體的pH，不符合菲牛蛭弱酸性生活環(huán)境的要求，而且難于控制使用量，不建議使用[50-51]。

7 菲牛蛭的人工飼料

菲牛蛭作為一種吸血蛭類，主要以脊椎動物的血液為食物，由于存在動物血液的生物安全性難以控制、飼喂時對環(huán)境的污染較大、飼料質(zhì)量難以控制等問題，這使菲牛蛭的人工飼料研究成為人工養(yǎng)殖中的重點研究問題。

7.1 人工飼料與動物血液

菲牛蛭人工飼料與天然血液有一定差距，人工飼料飼喂的菲牛蛭生長率以及增重率低于脊椎動物血液，但成活率較高，菲牛蛭腸道抗氧化能力強。李軍等[52-53]用血漿蛋白粉、血球蛋白粉等原料配制飼料，驗證結(jié)果表明，飼料試驗組成活率達100%，高于對照組（豬血）75%的成活率，個體體質(zhì)量增長率達19.91%，低于對照組（豬血）（184.24%）。王雪等[54]以血球蛋白粉與血漿蛋白粉作為主要飼料原料，通過37 d的飼養(yǎng)，對比以雞血飼喂的對照組后發(fā)現(xiàn)，人工飼料組特定生長率和增重率均低于雞血飼喂組。熊偉等[55-56]以血球蛋白粉與血漿蛋白粉作為主要飼料原料，按照一定比例配制菲牛蛭人工飼料，通過60 d的飼養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，人工飼料投喂菲牛蛭，水蛭素活性未受影響，抗氧化指標方面，對菲牛蛭腸道抗氧化能力有一定的增強作用，人工飼料飼喂后菲牛蛭腸道丙二醛（MDA）含量等于或大于雞血飼養(yǎng)含量；非特異性免疫方面，菲牛蛭酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（AKP）活性能達到或超過血液飼養(yǎng)水平，同時可以降低菲牛蛭溶菌酶（LSZ）的活性。

7.2 人工飼料與飼料原料

菲牛蛭人工飼料在選用上常以血球蛋白粉、血漿蛋白粉作為常用原料，血漿蛋白粉的飼喂效果優(yōu)于血球蛋白粉，且有研究者認為從氨基酸組成來看，牛肉粉、大豆?jié)饪s蛋白、豬肉粉、雞肉粉等也可以作為菲牛蛭的飼料優(yōu)選原料。李軍等[52-53]以血球蛋白粉為主要原料，配比出一種菲牛蛭人工飼料，飼養(yǎng)后菲牛蛭成活率及體增重較差，將血球蛋白粉替換為血漿蛋白粉對飼料進行改良，驗證結(jié)果表明，改良后飼料菲牛蛭成活率及體增重較好，血漿蛋白粉飼喂效果優(yōu)于血球蛋白粉。

7.3 人工飼料與氨基酸添加

在菲牛蛭人工飼料中添加一定量的賴氨酸可以提升菲牛蛭生長率、增重率和水蛭素活性，促進了菲牛蛭的抗氧化能力和免疫功能。王雪等[54]以血球蛋白粉與血漿蛋白粉作為主要飼料原料，向人工飼料中添加賴氨酸，通過37 d的飼養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，當添加賴氨酸濃度為1.4 g/kg時，菲牛蛭的特定生長率、增重率和水蛭素活性最高，且對比以雞血飼喂的對照組后發(fā)現(xiàn)，人工飼料組特定生長率和增重率均低于雞血飼喂組。熊偉等[55]在研究添加一定賴氨酸到水蛭人工飼料時發(fā)現(xiàn)，賴氨酸的添加不僅提高了水蛭素活性和誘導(dǎo)水蛭素基因的表達，而且促進了菲牛蛭的抗氧化能力和免疫功能。且發(fā)現(xiàn)，適宜的賴氨酸添加濃度為1.4 g/kg，與王雪的實驗結(jié)果一致。楊秀娟等[57]對蛋白飼料與菲牛蛭蛭體氨基酸組成進行灰色關(guān)聯(lián)度分析，發(fā)現(xiàn)血漿蛋白粉與菲牛蛭蛭體的氨基酸灰色關(guān)聯(lián)度為0.84，血粉、血球蛋白粉分別為0.73與0.69，血漿蛋白粉的氨基酸灰色關(guān)聯(lián)度均高于血粉、血球蛋白粉，這和李軍的研究結(jié)果一致，血漿蛋白粉作為原料，優(yōu)于血球蛋白粉。

在人工飼料中添加L-精氨酸和氯化鈉對吸血水蛭具有良好的誘食作用、K+具有毒性，許多菲牛蛭飼料中，均添加了L-精氨酸和氯化鈉，作為菲牛蛭的誘食劑。Elliott[58]研究表明，添加L-精氨酸和氯化鈉（或者氯化鋰）對歐洲醫(yī)蛭具有誘食的效果。Kornreich等[59]研究水蛭的味覺感受器時發(fā)現(xiàn)，精氨酸對吸血蛭類具有誘食作用，而Cl-離子具有維持水蛭的連續(xù)攝食作用，而K+對北美巨蛭具有毒性；苦味物質(zhì)（苯甲地那銨、奎寧）能終止水蛭的攝食行為；水蛭的味覺感受器位于腸道內(nèi)的背唇組織。因此在制作菲牛蛭人工飼料時，應(yīng)當保證Cl-含量、可以使用精氨酸作為誘食劑，避免K+過度添加。

8 小結(jié)

菲牛蛭作為一種藥用價值高、飼養(yǎng)經(jīng)濟價值佳的藥用動物，其應(yīng)用的領(lǐng)域正在不斷被拓展。由于天然水蛭素在藥效上、安全性上比重組水蛭素更好，現(xiàn)階段天然水蛭素只能從活體水蛭中獲取，這使水蛭養(yǎng)殖的研究在水蛭研究領(lǐng)域成為重點。同時，菲牛蛭作為一種藥用動物，具有抗凝血、抗腫瘤、抗炎、降血脂多種功效，含有水蛭素、菲牛蛭素等多種活性成分，其主要抗凝血功能在單位質(zhì)量上均優(yōu)于其他幾種水蛭，且在經(jīng)濟效益上優(yōu)于其他水蛭，使菲牛蛭成為了水蛭研究中的重點研究對象。對于菲牛蛭的研究，在養(yǎng)殖環(huán)境、人工飼料、飼養(yǎng)管理、品種繁育、養(yǎng)殖模式等方面，仍有很大的研究前景和空缺，需要進一步加強養(yǎng)殖環(huán)境研究，人工飼料研究、以及養(yǎng)殖模式等養(yǎng)殖技術(shù)的研究，建立系統(tǒng)化的養(yǎng)殖技術(shù)。