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    大豆疫霉根腐病防治藥劑的篩選與復(fù)配研究

    2022-02-06 01:29:20蔣冰心陳方新高智謀
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年24期
    關(guān)鍵詞:配劑疫霉甲霜

    蔣冰心,蓋 迪,陳方新,高智謀

    (安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,安徽合肥 230036)

    由大豆疫霉(Phytophthorasojae)引致的大豆疫霉根腐病是大豆上具有毀滅性的一種土傳病害,其嚴(yán)重制約大豆生產(chǎn)[1-3]。目前對(duì)于大豆疫霉根腐病的防治主要采用綜合治理的策略與方法,藥劑防治仍是控制大豆疫霉根腐病發(fā)生與流行的關(guān)鍵技術(shù)措施之一[4-5]。雖然生產(chǎn)上已有一些有效藥劑,但有些地區(qū)由于高頻次施用化學(xué)農(nóng)藥,導(dǎo)致田間致病菌抗藥性群體逐年上升而導(dǎo)致防治效果下降[6-8]。因此,尋求防治大豆疫霉根腐病的新型有效殺菌劑對(duì)于有效控制大豆疫霉根腐病的危害尤為迫切和重要。筆者在現(xiàn)有研究[9-12]的基礎(chǔ)上,測(cè)定了當(dāng)前生產(chǎn)上8種常用殺菌劑對(duì)大豆疫霉根腐病菌的室內(nèi)毒力,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了復(fù)配研究,旨在為防治大豆疫霉根腐病的有效藥劑及復(fù)配劑的篩選、研發(fā)提供試驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)藥劑97%烯酰嗎啉TC(江蘇耕耘化學(xué)有限公司),95%氟嗎啉TC(沈陽(yáng)化工研究院),97%甲霜靈TC(江蘇寶靈化工股份有限公司),98%嘧菌酯TC(山東中農(nóng)聯(lián)合生物科技股份有限公司),98%霜脲氰TC(紹興東湖生化有限公司),99%霜霉威TC(西安近代化學(xué)研究所),98%啶酰菌胺TC(河北蘭升生物科技有限公司),50%苯甲·丙環(huán)唑EW(先正達(dá)(中國(guó))投資有限公司)。將上述原藥用丙酮溶解配制成5 000 μg/mL母液,置于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 試驗(yàn)菌株大豆疫霉根腐病菌(Phytophthorasojae)菌株TH25系從田間發(fā)生大豆疫霉根腐病的大豆植株上分離、鑒定獲得[13],現(xiàn)保存于安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病原真菌實(shí)驗(yàn)室。

    1.3 試驗(yàn)培養(yǎng)基利馬豆培養(yǎng)基(LBA)。稱取利馬豆60 g,加水1 L,浸泡12 h后在60 ℃下水浴1 h,雙層紗布過(guò)濾取上清。上清液補(bǔ)足水至1 L,加入瓊脂粉20 g,煮沸后持續(xù)沸騰3 min,121 ℃下高壓蒸汽滅菌15~20 min。

    1.4 殺菌劑毒力測(cè)定采用菌絲生長(zhǎng)速率法[14]。將保存于12 ℃冰箱的供試大豆疫霉菌株在LBA培養(yǎng)基上活化,移至LBA平板上,25 ℃黑暗培養(yǎng)6 d。將8種供試藥劑母液用無(wú)菌水稀釋成7個(gè)相適應(yīng)的濃度梯度。分別吸取2 mL配好的藥液于無(wú)菌培養(yǎng)皿中,倒入18 mL熔化并冷卻至50℃左右的LBA培養(yǎng)基,充分混合均勻后靜置冷卻,得到終濃度分別為0.01、005、0.10、0.20、0.50、1.00、5.00 μg/mL的含藥LBA平板。用直徑6 mm的打孔器將活化好的供試菌株菌落制成菌碟,用接種環(huán)將菌碟置于含藥的培養(yǎng)基平板中央,菌絲面朝下。每個(gè)處理濃度5次重復(fù),以不含藥的LBA平板為對(duì)照。接種后置于生物培養(yǎng)箱中25 ℃黑暗條件下培養(yǎng),6 d后用十字交叉法測(cè)量菌落直徑(mm),計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。

    菌絲生長(zhǎng)抑制率=[(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對(duì)照菌落直徑-6)]×100%

    將藥劑濃度轉(zhuǎn)化成對(duì)數(shù)(x),抑制率轉(zhuǎn)化成機(jī)率值(y),根據(jù)x與y的線性關(guān)系求出毒力回歸曲線方程y=a+bx、相關(guān)系數(shù)(r)、有效抑制中濃度(EC50)。

    1.5 復(fù)配劑聯(lián)合毒力和共毒系數(shù)測(cè)定根據(jù)毒力測(cè)定結(jié)果,選取毒力較強(qiáng)且在藥劑類型上具有代表性的甲霜靈、烯酰嗎啉、嘧菌酯、霜脲氰4種藥劑按照1∶1、1∶2、2∶1、1∶3、3∶1 5個(gè)配比進(jìn)行兩兩復(fù)配試驗(yàn),以尋求對(duì)大豆疫霉毒力更強(qiáng)的藥劑復(fù)配組合。試驗(yàn)采用Sun等[15]的方法。在測(cè)定單劑毒力的基礎(chǔ)上,分別測(cè)定不同組合各配比混劑的聯(lián)合毒力,再計(jì)算各混劑的理論毒力指數(shù)TTI、實(shí)際毒力指數(shù)ATI和共毒系數(shù)CTC。

    毒力指數(shù)(TI)= 標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/ 供試藥劑EC50× 100

    混劑實(shí)際毒力指數(shù)(ATI)= 標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/ 混劑EC50× 100

    混劑理論毒力指數(shù)(TTI)= 單劑A的TI × PA + 單劑B的TI × PB

    (PA和PB分別是混劑中有效成分的百分含量)

    混劑的共毒系數(shù)(CTC)= ATI /TTI × 100

    2種藥劑復(fù)配的相互作用判斷:當(dāng)CTC ≥ 120時(shí),判定2種藥劑具有增效作用;當(dāng)80

    2 結(jié)果與分析

    2.1 8種殺菌劑對(duì)大豆疫霉根腐病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明,供試8種藥劑對(duì)大豆疫霉菌株的EC50值表現(xiàn)為甲霜靈<烯酰嗎啉<霜脲氰<氟嗎啉<嘧菌酯<啶酰菌胺<苯甲·丙環(huán)唑<霜霉威;其中,甲霜靈、烯酰嗎啉、霜脲氰、氟嗎啉和嘧菌酯對(duì)大豆疫霉毒力強(qiáng)(EC50<1 μg/mL);啶酰菌胺和苯甲·丙環(huán)唑毒力中等(1 μg/mL< EC50< 5 μg/mL);霜霉威對(duì)大豆疫霉毒力最弱(EC50= 48.342 9 μg/mL>10 μg/mL)(表1)。

    表1 供試藥劑對(duì)大豆疫霉根腐病菌的毒力Table 1 Toxicity of the tested fungicides to Phytophthora sojae isolate

    2.2 4種殺菌劑復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力及共毒系數(shù)聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果顯示,甲霜靈、烯酰嗎啉、嘧菌酯、霜脲氰4種藥劑兩兩復(fù)配所形成的6個(gè)復(fù)配組合在試驗(yàn)設(shè)定的5種配比范圍內(nèi),均存在產(chǎn)生一定增效作用的復(fù)配組合(表2~7)。其中,嘧菌酯+甲霜靈、烯酰嗎啉+甲霜靈、烯酰嗎啉+霜脲氰3個(gè)復(fù)配組合在5種配比下均有增效作用(表2~4);霜脲氰+甲霜靈復(fù)配組合在1∶3、1∶2、2∶1、3∶1配比時(shí)有增效作用,1∶1配比時(shí)為相加作用(表5),嘧菌酯+烯酰嗎啉復(fù)配組合在1∶1、1∶2、2∶1配比時(shí)有增效作用,其余為相加作用(表6);嘧菌酯+霜脲氰復(fù)配在1∶2配比時(shí)有增效作用,其余比例為相加作用(表7)。

    在嘧菌酯+甲霜靈復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶1配比時(shí)最大,CTC1∶1=261,2∶1配比時(shí)其次(表2)。烯酰嗎啉+甲霜靈復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶3配比時(shí)最大,CTC1∶3=174,1∶1配比時(shí)其次(表3)。烯酰嗎啉+霜脲氰復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶3配比時(shí)最大,CTC1∶3=356,1∶1配比時(shí)其次(表4)。霜脲氰+甲霜靈復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶3配比時(shí)最大,CTC1∶3=272,3∶1配比時(shí)其次(表5)。嘧菌酯+烯酰嗎啉復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶1配比時(shí)最大,CTC1∶1=326,2∶1配比時(shí)其次(表6)。嘧菌酯+霜脲氰復(fù)配組合中,復(fù)配劑CTC在1∶2配比時(shí)最大,CTC1∶2=267(表7)。綜上所述,烯酰嗎啉與霜脲氰按1∶3復(fù)配,嘧菌酯和烯酰嗎啉按1∶1復(fù)配,霜脲氰和甲霜靈按1∶3復(fù)配,嘧菌酯和霜脲氰按1∶2復(fù)配,嘧菌酯和甲霜靈按1∶1復(fù)配,烯酰嗎啉+甲霜靈按1∶3復(fù)配,復(fù)配劑CTC最大,增效作用最佳。上述試驗(yàn)結(jié)果表明,藥劑復(fù)配CTC大小不僅與藥劑種類有關(guān),還與藥劑配比有關(guān)。

    表2 嘧菌酯和甲霜靈復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 2 Combined toxicity of azoxystrobin and metalaxyl to Phytophthora sojae

    表3 烯酰嗎啉和甲霜靈復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 3 Combined toxicity of dimethomorph and metalaxyl to Phytophthora sojae

    表4 烯酰嗎啉和霜脲氰復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 4 Combined toxicity of dimethomorph and cymoxanil to Phytophthora sojae

    表5 霜脲氰和甲霜靈復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 5 Combined toxicity of cymoxanil and metalaxyl to Phytophthora sojae

    表6 嘧菌酯和烯酰嗎啉復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 6 Combined toxicity of azoxystrobin and dimethomorph to Phytophthora sojae

    表7 嘧菌酯和霜脲氰復(fù)配對(duì)大豆疫霉根腐病菌的聯(lián)合毒力Table 7 Combined toxicity of azoxystrobin and cymoxanil to Phytophthora sojae

    3 結(jié)論與討論

    采用菌絲生長(zhǎng)速率法,測(cè)定了甲霜靈、烯酰嗎啉、氟嗎啉、嘧菌酯、霜脲氰、霜霉威、啶酰菌胺、苯甲·丙環(huán)唑8種殺菌劑對(duì)大豆疫霉根腐病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明,甲霜靈、烯酰嗎啉、霜脲氰、氟嗎啉和嘧菌酯對(duì)大豆疫霉菌毒力較強(qiáng),可用于大豆疫霉根腐病的防治。甲霜靈作為防治作物疫病的主打藥劑在多年使用后,仍對(duì)大豆疫霉有很強(qiáng)的毒力,而有些報(bào)道[6-8]指出在一些地區(qū)大豆疫霉已對(duì)甲霜靈產(chǎn)生了抗藥性。其原因可能與安徽大豆產(chǎn)區(qū)較少使用甲霜靈防治大豆疫霉根腐病有關(guān)。為了避免或延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生,在病害防治上應(yīng)盡量避免長(zhǎng)期單一使用某一殺菌劑,提倡不同藥劑交替使用或混合使用。

    經(jīng)藥劑復(fù)配篩選,發(fā)現(xiàn)甲霜靈、烯酰嗎啉、霜脲氰和嘧菌酯兩兩復(fù)配均可產(chǎn)生對(duì)抑制大豆疫霉有顯著增效作用的配比混合物;其中,尤以烯酰嗎啉與霜脲氰按1∶3復(fù)配、嘧菌酯和烯酰嗎啉按1∶1復(fù)配、霜脲氰和甲霜靈按1∶3復(fù)配、嘧菌酯和霜脲氰按1∶2復(fù)配、嘧菌酯和甲霜靈按1∶1復(fù)配、烯酰嗎啉+甲霜靈按1∶3復(fù)配,增效作用最佳。該研究結(jié)果為防治大豆疫霉根腐病的新型復(fù)配劑開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)上藥劑合理混用提供了科學(xué)依據(jù)。

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