基于糖基化抑制和誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的衣霉素抗腫瘤耐藥研究進(jìn)展

胡曉妍，李冠武

（汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院腫瘤分子生物學(xué)開放實(shí)驗(yàn)室，廣東 汕頭 515041）

衣霉素是一種含有葡萄糖胺的嘧啶核苷類抗生素，具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤的特性，是常用的N-糖基化抑制劑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑.衣霉素可以抑制N-乙酰葡糖胺1-磷酸轉(zhuǎn)移酶，阻止真核細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中UDP-N-乙酰氨基葡萄糖（N-acetylglucosamine，GlcNAc）向磷酸多萜醇轉(zhuǎn)移，抑制N-寡糖的合成，影響蛋白質(zhì)構(gòu)象，最終導(dǎo)致未折疊蛋白質(zhì)聚積于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）[1].衣霉素也可以通過未折疊蛋白反應(yīng)（unfolded protein response，UPR）信號(hào)通路，觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激.衣霉素在靶向多種糖蛋白和拮抗耐藥性方面有很大優(yōu)勢(shì)，可能提高腫瘤細(xì)胞對(duì)治療的敏感性.

1 異常糖基化促進(jìn)腫瘤發(fā)展

糖基化是糖與其他糖類、蛋白質(zhì)或脂質(zhì)生成糖苷鍵的酶促過程，是一種重要的翻譯后修飾，在蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、亞細(xì)胞定位和糖蛋白功能等方面有重要作用.相對(duì)于正常細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出廣泛的糖基化改變[2].異常糖基化是細(xì)胞復(fù)雜聚糖合成受損、產(chǎn)生異常結(jié)構(gòu)的過程，與癌癥的發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和化學(xué)耐藥性緊密聯(lián)系[3].目前發(fā)現(xiàn)與癌癥相關(guān)的糖基化有唾液酸化作用、巖藻糖基化、O-聚糖截?cái)嗪蚇-糖基化和O-糖基化等[4].

糖基化是細(xì)胞促進(jìn)和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)折疊和質(zhì)量控制的重要方式.新合成的未折疊蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行糖基化，糖蛋白上的聚糖鏈通過天冬酰胺的酰胺基，或通過絲氨酸或蘇氨酸的羥基與多肽鏈共價(jià)相連，分別為N-糖基化和O-糖基化[3].N-糖基化參與蛋白質(zhì)折疊和質(zhì)量控制，N-聚糖為精確指導(dǎo)蛋白質(zhì)底物折疊和質(zhì)量控制系統(tǒng)提供模板.N-糖基化合成途徑中，焦磷酸多萜醇供體上的寡糖GlcNAc等作為預(yù)裝組件前體，被轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的新生多肽NXS/T（X為脯氨酸外的任意氨基酸）共有序列的天冬酰胺殘基上[5].腫瘤細(xì)胞表面N-寡糖改變，與細(xì)胞增殖、遷移和侵襲特性有關(guān)[6].

糖基化是重要的腫瘤生物標(biāo)志物，應(yīng)用于臨床檢測(cè)癌癥，如糖鏈抗原（casbohydrateantigen19-9，CA19-9）和癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA）糖蛋白是監(jiān)測(cè)結(jié)直腸癌進(jìn)展和復(fù)發(fā)的血清生物標(biāo)志物[7].細(xì)胞表面N-糖基化的表達(dá)升高已被證明與腫瘤耐藥相關(guān)，抑制其糖基化一定程度上能夠拮抗耐藥，如N-糖基化抑制提高多藥耐藥的卵巢癌對(duì)長(zhǎng)春新堿、阿霉素和順鉑的敏感性[8]，抑制糖基化提高乳腺癌對(duì)阿霉素的敏感性[9].衣霉素抑制多種腫瘤中的N-糖基化，可能逆轉(zhuǎn)現(xiàn)有抗腫瘤藥物的耐藥性，重新定位藥物的應(yīng)用范圍.

2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)影響腫瘤發(fā)展

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的重要組成部分，蛋白質(zhì)折疊和翻譯后修飾主要發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并受嚴(yán)格的質(zhì)量控制.細(xì)胞應(yīng)激及任何影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能的因素都可能導(dǎo)致錯(cuò)誤折疊蛋白聚集，發(fā)生未折疊蛋白反應(yīng)，觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[10].內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下，UPR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)程序的三條通路相互平行，分別由三個(gè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跨膜受體介導(dǎo)：雙鏈RNA激活蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（double-stranded RNA-activated protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase，PERK）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跨膜蛋白需肌醇酶1a（inositol-requiring enzyme 1，IRE1a）和轉(zhuǎn)錄激活因子6（activating transcription factor 6，ATF6）[11].這些分子有廣泛相似的激活機(jī)制，調(diào)節(jié)許多獨(dú)特或共有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)過程.正常狀態(tài)下，它們都與葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（glucose-regulated protein 78，GRP78）結(jié)合，呈單體和非活性狀態(tài)，應(yīng)激狀態(tài)下GRP78分離.隨后，PERK通過自身磷酸化激活，進(jìn)而磷酸化真核起始因子，增加轉(zhuǎn)錄激活因子（Activating Transcription Factor 4）翻譯，調(diào)節(jié)基因表達(dá)，減少蛋白質(zhì)合成.IRE1獲得內(nèi)切核糖核酸酶活性，導(dǎo)致X盒結(jié)合蛋白1（X-box binding protein 1，XBP1）mRNA剪切產(chǎn)生轉(zhuǎn)錄因子XBP1s.ATF6轉(zhuǎn)移至高爾基體，裂解并釋放轉(zhuǎn)錄因子的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域[12].這些信號(hào)通路相互強(qiáng)化，執(zhí)行適應(yīng)性程序，減少翻譯起始（IRE1和ATF6介導(dǎo)）和選擇性抑制特定mRNA翻譯（PERK介導(dǎo)），糾正蛋白質(zhì)折疊錯(cuò)誤，恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài).適應(yīng)不良的UPR不可逆轉(zhuǎn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，而是激活UPR依賴的凋亡通路，如通過激活I(lǐng)RE1α介導(dǎo)的c-Jun氨基末端激酶（p-c-Jun N-terminal kinase，JNK），抑制抗凋亡的B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma 2，Bcl-2）活性，增強(qiáng)促凋亡蛋白（Bcl-2 interacting mediator of cell death，Bim）的功能，誘發(fā)細(xì)胞凋亡[13].腫瘤細(xì)胞能夠逃避細(xì)胞凋亡途徑，并在應(yīng)激狀態(tài)下生長(zhǎng).此外，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激能觸發(fā)自噬體形成[14].

一些研究表明衣霉素上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，抑制腫瘤的發(fā)生和化療耐藥.也有觀點(diǎn)認(rèn)為，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激傳感器PERK、IRE1和ATF6持續(xù)激活，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的致瘤性、轉(zhuǎn)移能力、耐藥性和血管生成，且內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能阻止機(jī)體保護(hù)性的抗腫瘤免疫[15].多種腫瘤細(xì)胞存在強(qiáng)烈的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，且內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激常與化療耐藥有關(guān).雖然基因突變、血管生成不足、氧氣和葡萄糖短缺、高復(fù)制和代謝需求可能導(dǎo)致活躍的UPR，但癌基因的表達(dá)也可能抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[16].腫瘤細(xì)胞也可能增強(qiáng)蛋白質(zhì)復(fù)制能力，恢復(fù)穩(wěn)態(tài).衣霉素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在不同研究中結(jié)論不一致，可能與細(xì)胞自噬機(jī)制、涉及的信號(hào)通路、腫瘤細(xì)胞的種類及衣霉素的濃度有關(guān).

3 衣霉素抗腫瘤及腫瘤耐藥

3.1 衣霉素通過抑制EGFR糖基化影響腫瘤細(xì)胞增殖

糖基化的表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）表達(dá)持久，而去糖基化的EGFR穩(wěn)定性差.衣霉素可能誘導(dǎo)EGFR去糖基化，促使EGFR從胞膜轉(zhuǎn)移至胞質(zhì)，從而抑制下游磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）、絲裂原活化蛋白激酶/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases/extracellular signal-regulated kinase，MAPK/ERK）通路[1].乳腺癌細(xì)胞中，衣霉素下調(diào)EGFR受體酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase，RTK）家族蛋白的表達(dá)[17]；頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中，衣霉素抑制EGFR信號(hào)通路[1]，均抑制腫瘤細(xì)胞增殖.

3.2 衣霉素通過抑制PI3K/Akt、MAPK信號(hào)通路拮抗紫杉醇和曲妥珠單抗耐藥

PI3K/Akt、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）通路是EGFR家族二聚體激活的關(guān)鍵信號(hào)通路，衣霉素對(duì)PI3K/Akt和MAPK通路的影響也和EGFR的糖基化抑制密切相關(guān).

紫杉醇用于治療晚期乳腺癌和卵巢癌，但易產(chǎn)生耐藥性，其機(jī)制可能包括紫杉醇誘導(dǎo)的蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）和MAPK信號(hào)通路上調(diào)、PI3K/Akt和MAPK等細(xì)胞保護(hù)通路的激活、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）1/2通路的激活、細(xì)胞凋亡通路的改變等[18].Shengshi Huang等人發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌細(xì)胞中，衣霉素降低AKT、ERK1/2、JNK和p38的蛋白表達(dá)水平和磷酸化水平，可能拮抗紫杉醇引起的ERK1/2和JNK的磷酸化水平增加[19].

另一項(xiàng)研究表明衣霉素能夠提高乳腺癌細(xì)胞對(duì)曲妥珠單抗的敏感性[17].曲妥珠單抗用于治療人類表皮生長(zhǎng)因子受體（human epidermal growth factor receptor，HER）2過表達(dá)的乳腺癌，其耐藥機(jī)制涉及EGFR/HER家族、PI3K/Akt通路、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）家族等多個(gè)交叉信號(hào)通路[20]，拮抗其耐藥性難度較大.衣霉素降低乳腺癌細(xì)胞中EGFR、HER2、HER3及ERK1/2、AKT的蛋白表達(dá)和磷酸化水平，可能拮抗對(duì)曲妥珠單抗的耐藥性.且相較于單一用藥，衣霉素和曲妥珠單抗聯(lián)用抑制PI3K/Akt和MAPK信號(hào)通路，顯著抑制乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡[17].

MAPK和AKT的激活導(dǎo)致甲狀腺未分化癌對(duì)放射性碘治療反應(yīng)不佳.衣霉素可能通過降低ERK和AKT磷酸化水平，下調(diào)MAPK和AKT信號(hào)通路，進(jìn)而恢復(fù)腫瘤細(xì)胞甲狀腺相關(guān)基因的表達(dá)和攝碘能力，增強(qiáng)放射性碘治療療效[21].衣霉素還降低甲狀腺癌細(xì)胞的糖代謝水平[21].

3.3 衣霉素通過抑制PTX3糖基化拮抗順鉑耐藥（Akt/NF-κB信號(hào)通路）

穿孔素-3（pentraxin3，PTX3）在多種腫瘤中表達(dá)上調(diào)，與腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、病理分級(jí)和藥物敏感性有關(guān).PTX3的N-糖基化調(diào)節(jié)PTX3的功能[22].順鉑可能通過增加PTX3的表達(dá)，減弱對(duì)肺癌的療效.衣霉素通過使糖基化的PTX3去糖基化，進(jìn)而抑制Akt/核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear transcription factor，NF-κB）信號(hào)通路，阻止 NF-κB 激活相關(guān)的腫瘤轉(zhuǎn)移，可能恢復(fù)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑的化學(xué)敏感性[23].兩者聯(lián)用抑制AKT激活和NF-κB磷酸化，增強(qiáng)順鉑對(duì)肺癌細(xì)胞的增殖和遷移的抑制作用[23].衣霉素也被發(fā)現(xiàn)可以通過Akt/NF-κB信號(hào)通路抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和侵襲[24].

3.4 衣霉素通過抑制CD44的糖基化阻止腫瘤細(xì)胞遷移

細(xì)胞表面跨膜糖蛋白CD44通過結(jié)合透明質(zhì)酸，參與干細(xì)胞特性的獲得，是腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物.CD44分子糖基化導(dǎo)致構(gòu)象變化，可能影響其結(jié)合透明質(zhì)酸的能力.衣霉素可能降低CD44糖基化水平，進(jìn)而阻止頭頸部鱗狀細(xì)胞癌腫瘤干細(xì)胞成球[1].CD44糖基化也參與上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，促使腫瘤細(xì)胞遷移.此外，衣霉素降低肝癌細(xì)胞的CD44s糖基化水平，下調(diào)CD44s-ERK1/2信號(hào)通路，同時(shí)阻斷驅(qū)動(dòng)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-tomesenchymal transition，EMT）的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming growth factor beta，TGF-β）信號(hào)通路，抑制肝癌細(xì)胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化[25].

3.5 衣霉素通過激活STAT3促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和免疫抑制

然而也有研究表明衣霉素可能有促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducers and activators of transcription 3，STAT3）是多條腫瘤信號(hào)通路的交點(diǎn)，STAT3也與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)，UPR通路中，IRE1和PERK激活STAT3.衣霉素誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞和正?？谇火つそ腔?xì)胞白介素-6（interleukin 6，IL6）受體基因上調(diào)，正?？谇火つそ腔?xì)胞STAT3和白血病抑制因子受體蛋白表達(dá)更高.IL6等生長(zhǎng)因子激活STAT3，STAT3上調(diào)MAPK通路和自身STAT3通路，可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移，并產(chǎn)生免疫抑制因子，導(dǎo)致抗腫瘤免疫抑制[26].

3.6 衣霉素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激影響腫瘤發(fā)展和耐藥產(chǎn)生

關(guān)于衣霉素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否促進(jìn)腫瘤發(fā)展和耐藥產(chǎn)生存在爭(zhēng)議.多藥耐藥的胃癌細(xì)胞對(duì)衣霉素的敏感性高于親本細(xì)胞，原因可能為其糖基化異常，導(dǎo)致基礎(chǔ)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平更高.衣霉素通過抑制N-糖基化，進(jìn)一步提高內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平，可能克服多藥耐藥胃癌細(xì)胞的化療抗性[27].衣霉素通過此機(jī)制也抑制頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)展[1].而Yakin等人發(fā)現(xiàn)衣霉素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，上調(diào)UPR通路中的STAT3和抗凋亡蛋白，促使口腔鱗癌細(xì)胞存活[26].衣霉素通過增強(qiáng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抗腫瘤的機(jī)制可能有賴于衣霉素的糖基化抑制作用，而非由于衣霉素通過未折疊蛋白反應(yīng)，觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用.

3.7 衣霉素通過調(diào)控GRP78影響腫瘤發(fā)展和耐藥產(chǎn)生

衣霉素誘導(dǎo)的GRP78表達(dá)及上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平是否能抑制腫瘤發(fā)展尚不明確.GRP78也稱免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白（immunoglobulin heavy chain binding protein，BiP），是鈣依賴的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白，也是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記物，在多種腫瘤中過表達(dá).研究發(fā)現(xiàn)在衣霉素處理的乳腺癌細(xì)胞中，GRP78表達(dá)量增加，上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，抑制腫瘤細(xì)胞增殖[17，28].但在甲狀腺癌中，衣霉素誘導(dǎo)的GRP78表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移；GRP78表達(dá)下調(diào)則抑制衣霉素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，并可能逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力[10].Lee等人也認(rèn)為GRP78表達(dá)升高能增強(qiáng)腫瘤侵襲能力，促使耐藥發(fā)生[29].關(guān)于GRP78是否表達(dá)于細(xì)胞表面也有不同觀點(diǎn).內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平對(duì)于不同腫瘤細(xì)胞的影響和作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究.

3.8 衣霉素促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡

研究表明，衣霉素下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞的ERK和JNK的表達(dá)和磷酸化，抑制哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信號(hào)通路，可能通過抑制線粒體凋亡信號(hào)通路促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤生長(zhǎng)和侵襲性[30].此外，衣霉素上調(diào)促凋亡Bcl-2家族蛋白Bim和Bid（BH3-interacting domain death agonist），下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-xL（B-cell lymphoma extra large）和髓細(xì)胞白血病 1（Myeloid cell leukemia-1，MCL1），促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡[25].衣霉素和順鉑聯(lián)用時(shí)減少AKT激活，抑制NF-κB磷酸化，誘導(dǎo)腫瘤壞死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF）α介導(dǎo)的肺癌細(xì)胞凋亡[23].衣霉素和紫杉醇聯(lián)用也增強(qiáng)紫杉醇誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞凋亡[19].

3.9 衣霉素通過阻滯細(xì)胞周期抑制腫瘤細(xì)胞增殖

衣霉素顯著抑制細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（cyclindependent kinase，CDK）1、CDK2，阻止結(jié)腸癌細(xì)胞進(jìn)入DNA（deoxyribonucleic acid）合成期（S期）和分裂期（M期）[30].衣霉素升高細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制物p27蛋白，降低細(xì)胞周期蛋白D1，使乳腺癌細(xì)胞阻滯于靜止期/DNA合成前期（G0/G1期）.衣霉素還可能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞DNA合成后期/分裂期（G2/M期）阻滯[25].

3.10 衣霉素通過恢復(fù)攝碘能力增強(qiáng)甲狀腺癌對(duì)放射性碘治療的反應(yīng)性

人B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（serine/threonine-protein kinase B-Raf，BRAF）、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)受體酪氨酸激酶1（neurotrophic receptor tyrosine kinase 1，NTRK1）、RET（rearranged during transfection）等甲狀腺相關(guān)基因的表達(dá)影響甲狀腺癌細(xì)胞的攝碘能力，是放射性核素碘131治療甲狀腺癌的關(guān)鍵因素[31].甲狀腺未分化癌的相關(guān)基因沉默，細(xì)胞喪失攝碘能力，導(dǎo)致對(duì)放射性碘治療反應(yīng)不佳.有研究表明，衣霉素恢復(fù)碘代謝相關(guān)基因表達(dá)，增加鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體、甲狀腺過氧化物酶等蛋白的表達(dá)，促進(jìn)甲狀腺癌細(xì)胞對(duì)放射性碘的攝取[21].相比于單用衣霉素或者碘131，兩者聯(lián)用顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)[21].

4 自噬調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡

自噬是一種進(jìn)化上保守的細(xì)胞蛋白質(zhì)降解系統(tǒng)，在減輕細(xì)胞異常蛋白積累方面發(fā)揮關(guān)鍵作用.自噬誘導(dǎo)形成雙膜囊泡的自噬體，自噬體將細(xì)胞蛋白和細(xì)胞器轉(zhuǎn)運(yùn)至溶酶體降解和再利用，從而減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[32].內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可以形成自噬體的膜[27].自噬的特征為細(xì)胞質(zhì)空泡和自噬體形成、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（Microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）裂解增加和Sequestosome 1（SQSTM1/p62）蛋白水平降低[33].自噬對(duì)維持內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激也可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬.PERK下游的激活轉(zhuǎn)錄因子4（Activating Transcription Factor 4，ATF4）控制轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)自噬小體形成，而IRE1阻止自噬激活[12].在一定應(yīng)激狀態(tài)下，自噬維持生物合成的穩(wěn)態(tài)，避免或延遲死亡反應(yīng)，具有細(xì)胞保護(hù)功能.SQSTM1與泛素化蛋白聚合物結(jié)合，然后經(jīng)自噬降解；抑制自噬時(shí)，細(xì)胞內(nèi)SQSTM1積累，泛素/蛋白酶體系統(tǒng)破壞，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體中未折疊蛋白積累，細(xì)胞對(duì)凋亡敏感[34].細(xì)胞損傷嚴(yán)重時(shí)，自噬促進(jìn)凋亡[35]，如持續(xù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激或UPR延長(zhǎng)活化會(huì)激活促凋亡的Bcl-2家族，導(dǎo)致線粒體凋亡；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑衣霉素促使LC3-I轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3-II，誘導(dǎo)mTOR失活，進(jìn)而下調(diào)AKT/mTOR通路[36]；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)IRE1/JNK/beclin-1調(diào)節(jié)的乳腺癌細(xì)胞自噬，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[37].UPR的三條信號(hào)通路都對(duì)自噬有顯著意義，UPR與自噬的細(xì)胞保護(hù)性作用可能促進(jìn)腫瘤的耐藥性，如衣霉素能誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞自噬，使乳腺癌細(xì)胞對(duì)低濃度的衣霉素不敏感；降低乳腺癌細(xì)胞自噬水平則促進(jìn)細(xì)胞凋亡[37].

5 衣霉素的毒副作用

衣霉素引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能激活NF-κB介導(dǎo)的肝臟炎癥途徑，誘發(fā)非酒精性脂肪性肝炎[38].衣霉素對(duì)正常人體細(xì)胞中亦有生長(zhǎng)抑制作用.正常胃上皮細(xì)胞系對(duì)衣霉素比腫瘤細(xì)胞系更敏感[27]，低表達(dá)HER2的正常乳腺細(xì)胞對(duì)衣霉素敏感[17].衣霉素非特異性抑制N-糖基化，也可能干擾糖相關(guān)代謝.Xiqian Han等人發(fā)現(xiàn)衣霉素的毒副作用是劑量依賴性的，即小劑量應(yīng)用衣霉素可能是安全的[17].低劑量的衣霉素可能干擾乳腺癌EGFR家族及MAPK、PI3K/AKT通路，提高乳腺癌細(xì)胞GRP78表達(dá)水平，而不對(duì)肝組織產(chǎn)生明顯影響[17].

6 總結(jié)

盡管有部分研究表明衣霉素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，可能促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，但是衣霉素通過抑制N-糖基化，顯著增強(qiáng)多種腫瘤細(xì)胞的治療敏感性.衣霉素降低多個(gè)信號(hào)通路中的關(guān)鍵糖蛋白分子的糖基化水平，如CD44、EGFR和PTX3，明顯下調(diào)EGFR家族及其下游PI3K/Akt、MAPK信號(hào)通路，Akt/NF-κB信號(hào)通路等，促進(jìn)細(xì)胞凋亡.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平對(duì)腫瘤的影響較不明確，部分研究認(rèn)為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖；也有證據(jù)顯示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能通過誘導(dǎo)自噬，增強(qiáng)腫瘤的侵襲性.衣霉素與化療藥物如紫杉醇、曲妥珠單抗、順鉑等聯(lián)用時(shí)均逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥，增加多藥耐藥胃癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、甲狀腺未分化癌細(xì)胞等的治療敏感性，有望用于輔助治療難治性腫瘤.衣霉素的細(xì)胞毒性作用大多表現(xiàn)為劑量依賴性，且缺乏特異性，用于抗腫瘤時(shí)對(duì)正常組織的毒副作用難以避免.減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、避免過度的未折疊蛋白反應(yīng)可能緩解衣霉素導(dǎo)致的脂肪性肝炎[39-40]，但其機(jī)制是否影響衣霉素抗腫瘤特性需進(jìn)一步的研究.