血常規(guī)檢驗中全自動血細胞分析儀的應(yīng)用價值評估及檢測誤差因素分析*

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血常規(guī)是臨床疾病診療中的主要檢測項目之一，可通過觀察血細胞計數(shù)變化及形態(tài)分布情況為疾病診斷和治療方案提供有效的客觀信息[1-2]。既往血常規(guī)檢測方式主要以血涂片顯微鏡檢為主，盡管具有理想的精確性，但存在耗時、耗力、工作效率低等問題。近年來，隨著我國醫(yī)療事業(yè)以及科技水平的不斷發(fā)展，計算機技術(shù)、自動化應(yīng)用在臨床醫(yī)學(xué)中的優(yōu)勢越來越明顯，得到了臨床醫(yī)技工作人員的普遍認可。有學(xué)者指出，全自動血細胞分析儀不僅具有操作簡單、檢測速度快等優(yōu)勢，同時其對中性粒細胞、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞、單核細胞等各類細胞的陽性檢出率與血涂片鏡檢的一致性較高，建議可作為目前血細胞檢測的首選方式[3]。但在實際臨床工作中，使用全自動血細胞分析儀進行分類計數(shù)時仍然存在諸多感染因素，導(dǎo)致結(jié)果產(chǎn)生一定的誤差，造成誤診、漏診，甚至引發(fā)醫(yī)療事件和醫(yī)療糾紛[4-5]。因此，本研究選取了2019年7月-2020年6月本院收治的350例患者為研究對象，探討了血常規(guī)檢查中全自動血細胞分析儀的應(yīng)用價值，并對其檢查誤差因素進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年7月-2020年6月本院收治的350例患者為研究對象。納入標準：（1）年齡≥14歲；（2）既往史、家族史等臨床資料齊全；（3）依從性高。排除標準：（1）精神病或嚴重意識障礙；（2）存在惡性腫瘤；（3）合并原發(fā)性高血壓、糖尿病等慢性疾??；（4）存在全身性免疫系統(tǒng)疾病。患者及家屬對檢查項目、注意事項知情同意，研究符合倫理委員會要求并已經(jīng)審核批準。

1.2 方法 全自動血細胞分析儀檢測：以真空采血的方式采集所有患者空腹12 h的狀態(tài)下的肘靜脈血，用EDTA-K2真空抗凝管收集后輕輕搖勻，若標本出現(xiàn)凝塊、溶血等現(xiàn)象應(yīng)予以排除。采用BC-5390全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑在1 h內(nèi)對采集的血液樣本進行檢測和分析，對各細胞分類和計數(shù)進行記錄。操作步驟參考《臨床檢驗操作規(guī)程》中制定的標準進行[6]。血涂片鏡檢檢測：取抗凝血樣本制備厚薄適宜的血涂片2張，采用瑞氏染液對血液樣本進行染色，染色深淺適中。選取細胞展開良好、分散均勻的部位，由臨床經(jīng)驗豐富、專業(yè)技能扎實的醫(yī)師按照《臨床檢驗操作規(guī)程》中的操作步驟進行鏡檢[6]，以O(shè)lympus顯微鏡對各細胞形態(tài)、大小部分以及數(shù)量進行觀察并記錄。

1.3 觀察指標與判定標準 （1）比較兩種不同血常規(guī)檢測方法對紅細胞（RBC）、白細胞（WBC）、血小板（PLT）的陽性檢出率。RBC正常范圍：男性（4.0～5.5）×1012/L，女性（3.5～5.0）×1012/L；WBC正常范圍（4.0～10.0）×109/L；PLT正常范圍（100～300）×109/L。（2）選取中性粒細胞（N）、淋巴細胞（L）、嗜酸性粒細胞（E）、嗜堿性粒細胞（B）、單核細胞（M）為觀察指標，以鏡檢結(jié)果為金標準，評價全自動血細胞分析儀對各細胞陽性檢出的特異度、敏感度，并評估兩種檢測方法的一致性。特異度=真陰性/（假陽性+真陰性）×100%，敏感度=真陽性/（假陰性+真陽性）×100%。判斷標準：N正常范圍（2.0～7.5）×109/L，L正常范圍（0.8～4.0）×109/L，E正常范圍（0.05～0.50）×109/L，B正常范圍（0～0.1）×109/L，M正常范圍（0.12～0.80）×109/L。（3）對全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果中產(chǎn)生假陽性、假陰性的標本、操作步驟等情況進行復(fù)盤追蹤分析，記錄檢測誤差發(fā)生的原因。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗；應(yīng)用Kappa對兩種檢測方法結(jié)果進行一致性檢驗，以Kappa≥0.75表示兩者一致性較好，Kappa<0.40表示兩者一致性較差，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 入組患者基本情況 350例患者，男217例，女133例；年齡14～71歲，平均（41.89±13.53）歲；初步診斷病種類型：急性腸胃炎97例，敗血癥62例，急性粒細胞性白細胞癥39例，淋巴結(jié)核47例，粒細胞減少癥55例，脾功能亢進癥36例，其他14例。

2.2 兩種血常規(guī)檢測方法對RBC、WBC、PLT的陽性檢出率比較 血涂片鏡檢對RBC、WBC、PLT的陽性檢出率分別為66.6%、70.3%、77.4%，均高于全自動血細胞分析儀，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.3 全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢測中的價值分析 以血涂片鏡檢結(jié)果為金標準，全自動血細胞分析儀檢測對N、L、E、B、M的陽性診斷特異度分別 為93.5%（217/232）、88.6%（148/167）、98.4%（301/306）、98.8%（322/326）、92.5%（173/187）；對N、L、E、B、M的陽性診斷敏感度分別為90.7%（107/118）、94.0%（172/183）、93.2%（41/44）、91.7%（22/24）、92.6%（151/163）。采用Kappa檢驗兩種檢測方式的一致性顯示，全自動血細胞分析儀的檢測結(jié)果與血涂片鏡檢一致性均較好（Kappa>0.75，P<0.05）。見表2和3。

表1 兩種血常規(guī)檢測方法對RBC、WBC、PLT的陽性檢出率比較 例（%）

表2 兩種檢測方式對各細胞陽性檢出的結(jié)果分析 例

表3 兩種檢測方法對各細胞檢測結(jié)果的一致性分析

2.4 全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果誤差因素分析全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果誤差主要由血液樣本不合格和儀器操作步驟不規(guī)范導(dǎo)致，構(gòu)成比分別為59.2%（29/49）和26.5%（13/49），見表4。

表4 全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果誤差因素分析

3 討論

血常規(guī)檢測主要是針對血液中細胞部分進行檢測，包括RBC、WBC及PLT。RBC是人體血液中數(shù)量最多的細胞，呈扁圓狀，其主要功能是輸送氣體，若RBC減少且低于正常水平，提示患者可能存在貧血、血液系統(tǒng)疾病[7-8]；WBC的檢測主要分為白細胞計數(shù)和分類，觀察WBC水平的變化可評估患者機體防御免疫功能狀況[9]；PLT是從骨髓成熟的巨核細胞胞漿解脫落下來的小塊胞質(zhì)，屬于凝血功能的重要指標，若PLT顯著降低則說明有出血的風險[10]。因此，通過觀察這類細胞數(shù)量的變化及形態(tài)分布情況有利于為臨床醫(yī)生進行病情判斷及術(shù)前評估。

血涂片鏡檢和全自動血細胞分析儀是目前血常規(guī)檢測中最常見的方式，均具有廣泛的臨床應(yīng)用價值。有學(xué)者指出，全自動血細胞分析儀是基于應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)原理實現(xiàn)對血液成分進行快速、精準地檢測，但由于機械本身、操作規(guī)范性以及血細胞復(fù)雜性等因素的存在，導(dǎo)致其具有一定的局限性，而血涂片鏡檢可作為全自動血細胞分析儀檢測的有效補充，即使血細胞發(fā)生病理變化依然可以被及時發(fā)現(xiàn)[11-12]。更多研究認為，兩種檢測方式聯(lián)合應(yīng)用可進一步提高血常規(guī)檢測精度，但難免存在檢測效率低的問題，尤其是面對大批量血液樣本檢測時[13-15]。在本研究中，通過對比兩種血常規(guī)檢測方法對RBC、WBC、PLT的檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血涂片鏡檢對RBC、WBC、PLT的陽性檢出率均高于全自動血細胞分析儀，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），提示全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢測中具有較高的準確性，這在何文軍等[16]研究中也得以體現(xiàn)。

為進一步探究全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢測中的應(yīng)用價值，本研究選取N、L、E、B、M作為觀察指標，以血涂片鏡檢結(jié)果為金標準，分析了全自動血細胞分析儀對各細胞陽性檢出的特異度、敏感度和一致性。本研究結(jié)果顯示，全自動血細胞分析儀對N、L、E、B、M的陽性檢出特異度和敏感度均較高，且與血涂片鏡檢結(jié)果的一致性均較好（Kappa>0.75，P<0.05），證實了全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢測中具有較高的應(yīng)用價值，不僅可實現(xiàn)對大批量血液樣本的快速檢驗，同時可取得與血涂片鏡檢高度一致的結(jié)果。但在全自動血細胞分析儀檢測中，仍存在一定的假陽性、假陰性的情況。本研究追蹤了49例全自動血細胞分析儀檢測誤差的血液樣本發(fā)現(xiàn)，以血液樣本不合格最為多見，包括抗凝不全28.6%（14/49）、樣本量少20.4%（10/49）、送檢不及時10.2%（5/49），說明血液樣本采集、保存、送檢對保障血常規(guī)檢測結(jié)果準確性具有重要的作用。在國內(nèi)的一項研究中，有學(xué)者對全自動血細胞分析儀檢測的3425份不合格臨床血液樣本分析指出，導(dǎo)致血液樣本不合格的主要原因有抗凝不全、血液采集量不足、溶血、受檢者準備不足等，分別占比24.41%、20.24%、12.25%、16.07%，并建議建立完善的質(zhì)量控制標準[17]。除此之外，儀器操作步驟不規(guī)范、儀器本身局限性也可能導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)差錯。在部分血液疾病患者中，血液標本中的部分幼稚、原始細胞以及異型淋巴細胞在經(jīng)過溶血素處理后導(dǎo)致染色質(zhì)疏松程度、胞漿顆粒及細胞體積與單核細胞相似，在儀器檢測過程中容易出現(xiàn)計數(shù)分類誤差[18-19]；另外，有學(xué)者指出，在貧血、缺氧的患者中，外周血可能出現(xiàn)有核紅細胞，在儀器檢測時容易根據(jù)細胞體積大小將有核紅細胞誤歸為白細胞計數(shù)中[20]。

綜上所述，血常規(guī)檢驗中全自動血細胞分析儀的應(yīng)用價值較高，有利于快速、準確地進行大批量血液樣本檢測，但由于血液樣本、儀器本身、操作步驟等原因可能產(chǎn)生一定的誤差，尚不能完全代替血涂片鏡檢。在大批量血液樣本檢測時建議以全自動血細胞分析儀進行快速、有效的檢測篩選，對于可疑的、符合復(fù)檢標準的血液樣本進行血涂片鏡檢，提高臨床檢驗效率和準確度。