中醫(yī)藥對潰瘍性結(jié)腸炎基于腸道菌群的研究進展

王茵，史學(xué)文，左魯玉

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟南；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東 濟南）

0 引言

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)是一種影響結(jié)腸和直腸的慢性非特異性炎癥性疾病，主要表現(xiàn)為持續(xù)性反復(fù)發(fā)作的腹瀉、粘液膿血便、腹痛等癥狀，甚至合并嚴重的局部和全身癥狀。近20年來，我國UC的發(fā)病率處于快速上升趨勢[1]。UC病因和發(fā)病機制復(fù)雜，尚未有進展性突破，越來越多的研究表明，潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生與腸道微生態(tài)的改變有關(guān)，而中醫(yī)藥則被證實可以調(diào)節(jié)腸道菌群，改善菌群失調(diào)。

1 腸道菌群與UC

健康人的腸道內(nèi)存在著多種微生物，稱為腸道菌群?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)將腸道菌群分為3類，第一類為共生菌，大多數(shù)為厭氧菌，是腸道菌群的主體。第二類為條件致病菌，當腸道微生態(tài)保持平衡時，這些細菌是無害的，而在某些條件下可以是有害的。第三類為病原菌，不再腸道內(nèi)定居，大部分會被腸道內(nèi)的穩(wěn)定菌排斥到體外。腸道菌群以一定的比例相互制約、相互依賴，形成了一種生態(tài)平衡。腸道菌群平衡影響著腸道健康，腸道菌群參與多種重要的生理活動。腸道菌群的功能主要有促進消化和營養(yǎng)吸收功能、免疫調(diào)節(jié)作用和生物屏障作用[2]。

腸道菌群的失調(diào)在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生和發(fā)展中扮演重要角色。汪婷婷等[3]采用16S rRNA高通量測序技術(shù)，檢測小鼠糞便中的腸道菌群，結(jié)果顯示潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸道上皮完整性被破壞，腸道菌群多樣性明顯降低，潰瘍性腸炎組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌屬降至0.2%，明顯低于正常組小鼠，乳酸桿菌屬平均豐度度也顯著降低至2.9%。姜洋等[4]通過宏基因組學(xué)16S r RNA測序技術(shù)分析了8名UC患者和8名正常人群腸道菌群構(gòu)成發(fā)現(xiàn)，UC患者擬桿菌門、變形菌門和厚壁菌門數(shù)量顯著偏低，而變形菌門則顯著偏高。Macfarlane等[5]應(yīng)用16S r RNA探針熒光原位雜交法研究UC患者直腸活檢標本中的菌群發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌比正常對照減少明顯。孫娟[6]等通過ERIC-PCR指紋圖譜分析方法，分析結(jié)腸菌群的差異性，結(jié)果表明造模后大鼠與正常組相比較發(fā)生改變，腸道優(yōu)勢菌群種類明顯減少，由此說明潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的腸道微生態(tài)發(fā)生改變，腸道菌群失調(diào)。綜合以上研究表明，UC患者腸道菌群的數(shù)量和種類改變，其中雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量的減少明顯削弱了腸粘膜的保護屏障。

2 單味中藥對UC有關(guān)腸道菌群的研究進展

隨著微生態(tài)學(xué)的發(fā)展，我們不僅認識到腸道微生物對口服中藥藥理作用發(fā)揮作用，同時中藥能扶持腸道內(nèi)正常菌生長，抑制非正常菌生長，有維持腸道菌群平衡的作用[7]。

中醫(yī)認為潰瘍性結(jié)腸炎的基本病因病機在于寒熱錯雜、濕熱瘀阻[8]，疾病初期以濕熱為主，日久病及脾腎之陽，形成寒熱虛實夾雜之候，脾陽不足為本，濕熱蘊結(jié)為標。治宜標本兼治，寒熱同調(diào)。對于治療潰瘍性結(jié)腸炎的中藥，劉萍等[9]系統(tǒng)的檢索中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫的相關(guān)文獻，篩選出100篇文獻中用以治療潰瘍性結(jié)腸炎的中藥有67種，其中主要有健脾類中藥，如白術(shù)、黃芪、黨參、茯苓、甘草等；以清熱燥濕類中藥，如白頭翁、黃連、黃芩、秦皮等；調(diào)血和血類中藥，如當歸、白芍等。鄢偉倫[10]等通過對比白術(shù)低、中、高劑量組小鼠灌胃前后體質(zhì)量和腸桿菌、球桿菌影響，結(jié)果表明，白術(shù)配方顆粒對小鼠體質(zhì)量增長無影響、但白術(shù)高劑量組可促進雙歧桿菌和乳桿菌增殖，調(diào)節(jié)腸道菌群。徐航宇[11]等通過對黃芩湯給藥組和對照組造模大鼠糞便樣本的總DNA，利用Illumina Miseq平臺進行高通量測序。結(jié)果顯示，與模型組比較，黃芩湯給藥組乳酸桿菌屬顯著增多、理研菌屬顯著減少。提示黃芩湯可能通過調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)在治療潰瘍性結(jié)腸炎中發(fā)揮重要作用。孫立群[12]通過采用納米級黃芪治療前后潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的腸道菌群、乙酸含量的變化，結(jié)果表明采用納米級黃芪治療后大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌、乳酸桿菌含量明顯上升，腸球菌、腸桿菌含量下降，大鼠腸道菌群比例恢復(fù)至正常水平。李平蘭[13]通過體外實驗研究顯示，五味子、枸杞、地黃三種補益類中藥對兩歧雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌均有促生長作用，且與濃度因素呈正相關(guān)，說明中藥以其獨特性能可能在一定程度上調(diào)節(jié)機體免疫機能、平衡腸道微生態(tài)。近年來，中藥有效成分如中藥多糖對UC有關(guān)腸道菌群的研究也日益深入，馬淑霞[14]教授從中藥馬齒莧中分離提取馬齒莧多糖，將實驗小鼠隨機分為正常對照組、UC模型組，UC模型組再分為自然恢復(fù)組、馬齒莧多糖治療組。分別于造模后、給藥7d后處死小鼠，進行腸黏膜細胞因子測定、腸道菌群檢測。結(jié)果，造模后模型組腸道菌群失調(diào)。馬齒莧多糖治療組小鼠與模型組小鼠相比腸道雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量上升。結(jié)論馬齒莧多糖可以調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，對潰瘍性結(jié)腸炎有治療作用。

3 復(fù)方中藥對UC有關(guān)腸道菌群的研究進展

復(fù)方中藥是傳統(tǒng)中醫(yī)治療疾病的主要途徑，主要分為內(nèi)服和外用兩種方式，而針對于潰瘍性結(jié)腸炎的治療，則主要以復(fù)方中藥口服和灌腸。

復(fù)方中藥口服治療潰瘍性結(jié)腸炎具有副作用小，長期用藥安全可靠，并可以維持UC緩解狀態(tài)，降低復(fù)發(fā)率。孫娟[15]等通過ERIC-PCR指紋圖譜分析方法，分析模型組、參苓白術(shù)散組、陽性對照藥組（SASP）和正常對照組大鼠的結(jié)腸菌群的差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)而參苓白術(shù)散組和陽性對照藥組ERIC-PCR指紋圖譜DNA條帶較模型組增多，而參苓白術(shù)散法組ERIC-PCR指紋圖譜與正常組最為接近。表明參苓白術(shù)散和SASP均能調(diào)節(jié)脾虛濕困證潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的結(jié)腸菌群。其中尤以參苓白術(shù)對腸道菌群調(diào)節(jié)能力為佳。魏文先[16]通過對68名UC患者進行臨床研究觀察，對照組采用潑尼松治療，治療組加用烏梅丸加減治療，連續(xù)給藥28天，通過觀察兩組患者臨床療效和腸道菌群變化。結(jié)果表明，烏梅丸加減能提高潰瘍性結(jié)腸炎的臨床療效，提高有益菌的水平。李桂賢[17]等將UC患者隨機分為治療組給予加味柴芍六君顆?？诜?，對照組柳氮磺胺吡啶腸溶片口服。分別于服藥前和治療3個月后進行腸道菌群測定，結(jié)果顯示，兩組患者腸道乳酸菌和雙歧桿菌的含量均增加，腸球菌、大腸桿菌含量均減少。其中加味柴芍六君顆粒較柳氮磺胺吡啶腸溶片在改善腸道微生態(tài)菌群方面具有明顯優(yōu)勢。高翔[18]等通過清腸化濕湯對益生菌和致病菌進行體外增菌及抑菌實驗，結(jié)果表明，清腸化濕湯可顯著促進雙歧桿菌、鼠李唐乳桿菌的體外生長，抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌的體外生長，起到調(diào)節(jié)腸道菌群作用，恢復(fù)腸道微生態(tài)的穩(wěn)態(tài)而達到治療UC的作用。

復(fù)方中藥灌腸可使藥物直達病所，所吸收的藥物部分可不經(jīng)過肝臟，避免了對藥效的影響。于姣[19]通過對86例潰瘍性結(jié)腸炎患者堆積分為觀察組43例和對照組43例。對照組給予美沙拉嗪口服，觀察組在對照組的基礎(chǔ)上給予中藥灌腸, 兩組療程均為30天。比較兩組患者治療后的臨床療效和腸道菌群情況，結(jié)果表明觀察組的菌群正常和I度失調(diào)者比例較對照組顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明美沙拉嗪聯(lián)合中藥灌腸相比單用美沙拉嗪口服治療潰瘍性結(jié)腸炎療效更佳，且能更有效改善腸道菌群失調(diào)。翟月華[20]將56例重度UC患者隨機分為對照組和觀察組，每組28例，對照組患者給予西醫(yī)常規(guī)處理，觀察組患者在對照組基礎(chǔ)上加用自擬清腸愈瘍湯經(jīng)驗方口服聯(lián)合中藥灌腸，兩組均治療四周。通過中醫(yī)癥候積分變化評價臨床效果，對比兩組腸道菌群分布得出結(jié)論，自擬清腸愈瘍湯經(jīng)驗方口服、中藥灌腸進行中醫(yī)內(nèi)外合治能顯著改善重度UC患者的臨床癥狀，改善腸道菌群紊亂狀態(tài)。

4 針灸療法對UC有關(guān)腸道菌群的研究

針灸是針法和灸法的總稱，作為我國非物質(zhì)文化遺產(chǎn)，越來越多的被用于治療潰瘍性結(jié)腸炎，其臨床療效可靠，無明顯不良反應(yīng)，患者依從性好，值得臨床推廣。侯天舒[21]等通過將39只健康雄性大鼠隨機分為空白組和UC造模組，然后將造模組隨機分為模型組和電針組。電針組針刺“天樞”、“足三里”、“上巨虛”穴。通過收集各組大鼠糞便排泄物，分析腸道菌群的多樣性、相似性及豐度值，采用Quantity one等軟件對所得結(jié)果圖譜進行分析，結(jié)果顯示，模型大鼠腸道菌群的豐度值及多樣性指數(shù)明顯降低，電針組大鼠疾病活動指數(shù)降低，腸道菌群的豐度值及多樣性指數(shù)升高，菌種鑒定表明電針能提高UC模型大鼠腸道菌群中乳酸桿菌和毛螺科菌含量，降低雙酶梭菌的含量。因此得出結(jié)論，電針治療潰瘍性結(jié)腸炎有效，且能改善UC造模大鼠腸道菌群的多樣性和益生菌含量。吳煥淦教授[22]通過對大鼠的天樞、氣海穴位進行隔藥灸分別與正常組、UC模型組和維柳芬組（SASP灌胃組）進行對照，結(jié)果顯示隔藥灸對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的腸道菌群有調(diào)節(jié)作用，并可有效抑制TNF-α和IL12的過度表達。

5 小結(jié)與展望

近年來，研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群失調(diào)不僅可以造成腸道相關(guān)疾患，還與其他各系統(tǒng)疾病有著不可分離的關(guān)系。伴隨著中醫(yī)藥與腸道微生態(tài)相關(guān)性的研究不斷深入，中醫(yī)中藥有望成為敲啟腸道微生態(tài)之門的鑰匙。現(xiàn)已證實，中醫(yī)藥對于腸道菌群有著不同程度的調(diào)節(jié)作用。中醫(yī)治療潰瘍性結(jié)腸炎在改善患者臨床癥狀、維持緩解、降低復(fù)發(fā)率、副作用小、不良反應(yīng)少以及患者依從性好等方面具有一定優(yōu)勢，但目前相關(guān)研究多仍停留在動物實驗上，且臨床實驗缺乏大樣本實驗，證據(jù)不充分，仍需開展高質(zhì)量、大樣本、多中心的臨床試驗。隨著研究的不斷深入，相信中醫(yī)藥能在調(diào)節(jié)腸道菌群方向有巨大潛力與廣闊的前景。