范雅芬
(貴州農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院,貴州貴陽 551400)
羊腸毒血癥是由D型產(chǎn)氣莢膜梭菌感染而引起的病畜多器官出血、急性病變和突然死亡為主要特征的疾病[1],屬于羊梭菌性疾病的一種,可以引起羊的梭菌性疾病主要有羊快疫、羊腸毒血癥、羊猝狙、羊黑疫和羔羊痢疾,這些疾病的病原分別是腐敗梭菌、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌、C型產(chǎn)氣莢膜梭菌、諾維氏梭菌和B型產(chǎn)氣莢膜梭菌,該病嚴(yán)重危害養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展[2]。
在遵義市某規(guī)?;驁鲂乱M的羊只在隔離期間第三天有2只幼齡羊出現(xiàn)不食、精神沉郁,感覺過敏、步態(tài)不穩(wěn)、大量飲水,腹脹,尿液黃色,排出水狀或膿狀帶血或呈黑褐色大便,體溫升高至40.0~41.8℃,其中一只突然倒地,昏迷繼而死亡,另一只抽搐過后死亡。死亡的羊體重均約18kg。另外3只幼齡羊也出現(xiàn)不同程度的腹瀉、食欲下降等情況。
2.2.1 臨床檢查
經(jīng)過詢問,死亡的兩只羊皮膚被毛檢查無異常,肛門處有污染,糞便附著,呈暗褐色。
對未死亡且出現(xiàn)臨床癥狀的3只幼齡羊進行檢查,發(fā)現(xiàn)精神不振,食欲廢絕,其中一只排出黃色水樣稀便,體溫正常。
對其余80只羊進行檢查,體溫、呼吸、脈搏均正常,飲食,排泄均正常,未發(fā)現(xiàn)異常情況。
2.2.2 剖檢變化
對死亡的2只黑山羊進行剖檢,發(fā)現(xiàn)這兩只羊的消化道、呼吸道及心血管系統(tǒng)分別有不同程度病變。真胃內(nèi)有未消化的食物,腸道出血,尤其是小腸內(nèi)有大量血液,腸壁充血;肺臟出血、水腫;腎臟綿軟如泥,有出血斑;胸腔和腹腔有不同程度的積液;心肌變軟而薄,表面存在樹枝狀充血,心包積液。肺臟萎縮,充血、氣管或支氣管中帶有白色泡沫;肝臟淤血腫大成淡紅色、有干酪樣壞死塊,質(zhì)地脆易碎;脾腫且有出血斑;膀胱充盈。
2.2.3 實驗室診斷
(1)染色鏡檢:經(jīng)無菌操作,采取病死羊肺臟、腸道內(nèi)容物、腸粘膜及腎臟直接分別涂片、革蘭氏染色,鏡檢可見兩端鈍圓的藍紫色革蘭氏陽性大桿菌,多為單個存在,少數(shù)存在兩個相連。
(2)分離培養(yǎng):將病死羊心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腸道內(nèi)容物及腸粘膜分別接種血液瓊脂平板、普通營養(yǎng)瓊脂平板和麥康凱培養(yǎng)基,分別于37 ℃厭氧培養(yǎng)24~48 h[3]。血液瓊脂平板上出現(xiàn)圓形、中央隆起、邊緣整齊、灰白色、半透明的大菌落,菌落周圍存在棕色溶血環(huán),有的存在雙溶血環(huán);普通瓊脂平板上的菌落呈凸面狀,表面光滑而半透明,圓形;而麥康凱培養(yǎng)基上,未見有細菌生長。挑取典型單個菌落涂片、革蘭氏染色、并鏡檢可見到有兩端鈍圓的藍紫色革蘭氏陽性、短粗的桿菌。
(3)生化鑒定:將分離純化的細菌分別在無菌的條件下進行果糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、麥芽糖等發(fā)酵實驗,靛基質(zhì)實驗,硫化氫實驗,含鐵牛乳實驗和明膠液化實驗。該菌可以發(fā)酵果糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、麥芽糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,靛基質(zhì)試驗呈陰性,硫化氫試驗呈陽性,明膠液化實驗為陽性,但不發(fā)酵山梨醇、木糖、甘露醇,在含鐵牛乳試驗中,分解乳糖產(chǎn)酸,出現(xiàn)“爆裂發(fā)酵”現(xiàn)象。
(4)動物試驗:采集小腸內(nèi)容物,生理鹽水2~4倍稀釋,混勻,離心,10000轉(zhuǎn)/min離心5min,并取0.5ml濾液分別靜脈注射于生長條件相同的6只小鼠[4],對照組2只注射等量生理鹽水,結(jié)果發(fā)現(xiàn)實驗組小鼠2h均死亡,而對照組小鼠正常存活。取病鼠臟器,進行組織涂片,染色鏡檢后,發(fā)現(xiàn)大量兩端鈍圓的藍紫色革蘭氏陽性大桿菌。
2.2.4 確診
根據(jù)臨床典型癥狀,并結(jié)合流行病學(xué)和實驗室染色鏡檢,細菌分離培養(yǎng)、生化鑒定和動物實驗,確診病死羊為魏氏梭菌中D型產(chǎn)氣莢膜梭菌感染,即羊腸毒血癥。
本病病程短,致死率高,一旦癥狀出現(xiàn),很難治愈,因此應(yīng)以預(yù)防為主。加強管理,營養(yǎng)均衡,保證食物干凈衛(wèi)生,提高機體抵抗力;同時將可疑羊群全部隔離飼養(yǎng),病死羊及污染物則徹底焚燒或深埋,對污染的圈舍和四周環(huán)境進行嚴(yán)格消毒,患病羊群則帶畜消毒,對新購進羊要進行嚴(yán)格的隔離、檢疫。定期對場地、用具進行全面消毒,可用0.2%的過氧乙酸清洗用具,同時用過氧乙酸全面噴霧消毒圈舍;并定期驅(qū)蟲,對圈舍要及時地通風(fēng)、換氣,保持干燥清潔;防止應(yīng)激變化,要定期喂飲電解多維等。治療可肌肉注射泰樂菌素,或口服氟苯尼考,環(huán)丙沙星等。同時對羊群做好免疫接種,在高發(fā)期或者此病多發(fā)羊腸可以注射“羊快疫、羊腸毒血癥、羊猝狙”三聯(lián)苗或“羊快疫、羊腸毒血癥、羊猝狙、羔羊痢疾”四聯(lián)苗亦或“羊快疫、羊腸毒血癥、羊猝狙、羊黑疫、羔羊痢疾”五聯(lián)苗。通過采用上述防治措施,疫情得到有效控制,挽回羊場巨大經(jīng)濟損失。