基于“脾胃”學(xué)說探討針灸調(diào)節(jié)腸道菌群的研究概述＊

鄭雅玲，金榮疆，黃依杰，蔡繼希，李 涓

（成都中醫(yī)藥大學(xué)養(yǎng)生康復(fù)學(xué)院 成都 610075）

腸道菌群（gut microbes，GM）是一個(gè)具有多樣性、復(fù)雜性特點(diǎn)的的腸道微生態(tài)系統(tǒng)，主要由擬桿菌、厚壁菌、放線菌和變形菌4大門類組成，是一個(gè)影響人體自身平衡的重要“器官”[1-2]。GM在人出生后立即達(dá)到較高的數(shù)量[3]，在一生中不斷進(jìn)化和動(dòng)態(tài)變化[4]，與宿主保持互利共生的關(guān)系[1,5]，形成有機(jī)整體，菌群之間保持動(dòng)態(tài)平衡，起到保護(hù)和維持機(jī)體健康的作用［6］。腸道微生態(tài)平衡遭到破壞，會(huì)導(dǎo)致一系列疾病，如腸道疾病[7-8]、心血管疾病[9-11]、肥胖[13-14]、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病[15-17]、糖尿病[11,13]、肝病[14,18]等。這與中醫(yī)“脾胃”理論不謀而合。李東垣提出“內(nèi)傷脾胃，百病由生”，認(rèn)為疾病的產(chǎn)生都與脾胃相關(guān)?！督饏T要略》一說“四季脾旺不受邪”，表明調(diào)理脾胃可以起到防病治病的作用。中醫(yī)認(rèn)為脾運(yùn)化功能正常，即為腸道微生態(tài)平衡，脾健運(yùn)失調(diào)即為GM紊亂。

針灸，是一種通過疏通經(jīng)絡(luò)，調(diào)理臟腑，調(diào)暢氣機(jī)，恢復(fù)人體穩(wěn)態(tài)的中醫(yī)外治法。作為一種特殊的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，針灸在一定程度上介入和利用了人體微生態(tài)系統(tǒng)的功能，在調(diào)節(jié)GM過程中，展示出了中醫(yī)治療多途徑、多靶點(diǎn)的優(yōu)勢[19]。本研究基于脾胃理論，對近年來針灸調(diào)節(jié)GM的文章進(jìn)行梳理，分疾病進(jìn)行簡要概述，為進(jìn)一步研究針灸調(diào)節(jié)GM提供參考。

1 “脾胃”學(xué)說與GM的關(guān)系

脾為后天之本，氣血生化之源，五臟六腑皆依賴于脾的滋養(yǎng)?！捌⒅鬟\(yùn)化”是脾胃生理功能的概括，是指胃受納腐熟水谷，經(jīng)由脾化為精微物質(zhì)，并轉(zhuǎn)輸至全身，脾氣健運(yùn)，化生氣、血、津液等營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)全身，維持正常的生理活動(dòng)?，F(xiàn)代微生物學(xué)研究顯示，正常菌群產(chǎn)生各種酶，參與食物消化和新陳代謝[3]，這與“脾”的生理功能是一致的。腸道微生態(tài)遭到破壞，會(huì)導(dǎo)致消化、吸收功能降低，進(jìn)而出現(xiàn)腹瀉、納差、便秘等胃腸道病理癥狀，與中醫(yī)脾氣虛弱，脾失健運(yùn)的臨床癥狀相符。此外，《金匱要略》提出“脾旺不受邪?！北砻髌⒃诘钟⌒胺矫嬗兄豢商娲淖饔?。金元時(shí)期李東垣亦認(rèn)為：“脾胃之氣既傷，元?dú)庖嗖荒苌?，而誅病之由生，扶正必先補(bǔ)脾土”，并創(chuàng)立“內(nèi)傷脾胃，百病由生”理論。這些理論均表明脾對于人體的生理變化和抗病能力的作用。中醫(yī)認(rèn)為脾的“運(yùn)化”和“御邪”的功能與GM對宿主的代謝和免疫功能的作用相似，是中醫(yī)“脾”生理功能的生物學(xué)基礎(chǔ)[20-21]。

現(xiàn)代研究顯示，中醫(yī)脾胃與GM有著密不可分的聯(lián)系，GM的平衡是脾臟正常發(fā)揮生理作用的重要因素，GM對機(jī)體的營養(yǎng)、代謝和免疫作用為脾臟功能的生物學(xué)內(nèi)涵[22]。學(xué)者王占國［23］就明確指出中醫(yī)“脾”與腸道正常菌群密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，脾虛濕盛泄瀉的患者與正常健康人相比，糞便中雙歧桿菌數(shù)量減少，存在明顯的GM失調(diào)[22]。王卓等［24］運(yùn)用ERIC-PCR指紋圖譜多樣性分析發(fā)現(xiàn)脾氣虛大鼠GM多樣性指數(shù)下降，菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)，表明脾氣虛可影響腸道微生態(tài)平衡。脾主運(yùn)化功能發(fā)揮正常則GM保持平衡，脾失健運(yùn)則造成GM紊亂[25]。國外學(xué)者Greenwood MT也認(rèn)為中醫(yī)所說的“脾氣”主要是GM的動(dòng)態(tài)變化[26]。由于脾胃和GM天然的相關(guān)性，調(diào)理脾胃防治各種疾病，其機(jī)制可能與調(diào)整GM失調(diào)密切相關(guān)。

脾胃為氣機(jī)升降之樞。脾胃氣機(jī)升降失調(diào)，導(dǎo)致胃腸功能紊亂，進(jìn)一步影響腸道微生態(tài)平衡?！鹅`樞·刺節(jié)真邪論》曰：“用針之要，在于調(diào)氣。”調(diào)氣是針灸最為顯著的功用，而調(diào)理氣機(jī)升降是針灸調(diào)氣的關(guān)鍵。在臨床或?qū)嶒?yàn)研究中，學(xué)者用針灸調(diào)理脾胃，取得了很好的效果[27-28]。由于脾胃與GM的密切相關(guān)性，針灸可以通過調(diào)理脾胃來影響GM值得我們進(jìn)一步研究。司原成運(yùn)用健脾益氣針法，選取天樞、關(guān)元、足三里及三陰交等穴位，施以補(bǔ)法，調(diào)節(jié)肥胖鼠GM取得了顯著的成效[29]。脾胃學(xué)說為針灸調(diào)節(jié)GM奠定了良好的中醫(yī)理論基礎(chǔ)。

2 針灸調(diào)整GM的機(jī)制研究

臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究均發(fā)現(xiàn)針灸能調(diào)節(jié)GM，但其機(jī)制尚不明確。國外學(xué)者提出大腦和腸道具有雙向調(diào)節(jié)作用[30]，形成了一個(gè)神經(jīng)體液調(diào)節(jié)系統(tǒng)，稱為腦-腸軸[31]。腸道微生物群和中樞神經(jīng)系統(tǒng)之間的雙向調(diào)節(jié)包含了幾個(gè)關(guān)鍵成分，它們聚集形成復(fù)雜的反射網(wǎng)絡(luò)，傳入神經(jīng)向中樞神經(jīng)系統(tǒng)投射，傳出神經(jīng)支配腸壁[32]，這就形成了微生物-腦-腸軸。微生物-腦-腸軸是腸道、微生物和大腦之間復(fù)雜的通訊網(wǎng)絡(luò)，調(diào)節(jié)胃腸和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能[30,33]?；谖⑸?腦-腸軸理論，人們提出可能的幾種途徑來理解腸道微生物和腦之間的聯(lián)系，包括神經(jīng)內(nèi)分泌（下丘腦-垂體-腎上腺軸），免疫系統(tǒng)（神經(jīng)調(diào)節(jié)細(xì)胞因子），腸神經(jīng)系統(tǒng)和自主神經(jīng)系統(tǒng)（迷走神經(jīng)），而腸道微生物產(chǎn)生色氨酸相關(guān)代謝產(chǎn)物，腸道激素，腸內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的5-羥色胺（5-HT），短鏈脂肪酸和神經(jīng)代謝物GABA，去甲腎上腺素和多巴胺等可能調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能[34]。GM和中樞神經(jīng)系統(tǒng)密切相關(guān)，且具有雙向調(diào)節(jié)作用，這種調(diào)節(jié)作用是通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)分泌細(xì)胞、腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）和胃腸道中的多種神經(jīng)遞質(zhì)來實(shí)現(xiàn)的。它們既是神經(jīng)遞質(zhì)又是激素，被稱為腦-腸肽。腦腸肽中興奮性神經(jīng)遞質(zhì)包括組胺、5-HT、P物質(zhì)（SP）、降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子相關(guān)肽（CRF），主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)包括膽囊收縮素（CCK）、一氧化氮（NO）、去甲腎上腺素（NE）和血管活性肽（VIP）[35]。研究已發(fā)現(xiàn)，針灸對神經(jīng)內(nèi)分泌、腸神經(jīng)系統(tǒng)、迷走神經(jīng)有著很好調(diào)節(jié)作用[36-37]。針灸可以通過作用于腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、腸肌間神經(jīng)叢、腸神經(jīng)遞質(zhì)、TRPV1通路來調(diào)節(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)[37]，同時(shí)有研究表明針灸可以調(diào)控色氨酸代謝，能夠有效改善IBS大鼠結(jié)腸中5-HT的含量，神經(jīng)遞質(zhì)GABA的代謝，去甲腎上腺素，多巴胺等[38-39]。此外，針灸對腦腸肽也有明顯調(diào)節(jié)作用，Jianhua Sun[40]運(yùn)用電針干預(yù)腹瀉型腸易激綜合征（D-IBS）大鼠，發(fā)現(xiàn)電針可降低腦腸軸5-HT、CGRP和神經(jīng)肽Y（NPY）的含量，認(rèn)為電針可平衡體內(nèi)腦腸軸水平。綜上可知，針灸可能通過微生物-腦-腸軸來調(diào)整GM。

3 基于脾胃學(xué)說的針灸調(diào)節(jié)GM的應(yīng)用研究進(jìn)展

3.1 針灸治療肥胖

實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)針灸干預(yù)能對肥胖大鼠紊亂的GM結(jié)構(gòu)有良性的調(diào)節(jié)作用，可改善菌群物種的差異度、豐富度、均勻度和群落的差異性，增加擬桿菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌的數(shù)量，減少厚壁菌的數(shù)目，幫助恢復(fù)機(jī)體正常的代謝功能[41]。司原成[29,42]采用電針干預(yù)肥胖小鼠（天樞、關(guān)元、后三里及三陰交等穴），運(yùn)用16SrRNA和16sDNA測序技術(shù)開展系列研究，治療后ACE和Chao指數(shù)結(jié)果表明電針能顯著促進(jìn)腸菌多樣性，降低肥胖鼠物種聚類數(shù)量，且梭桿菌門、厚壁菌門、螺旋菌門、嗜熱菌門、纖維桿菌門等相對豐度呈下降趨勢，擬桿菌門顯著升高，異常菌門結(jié)構(gòu)豐度明顯恢復(fù)。同時(shí)良性調(diào)整軟壁菌門、互養(yǎng)菌門、嗜熱絲菌門等菌群菌門及整體調(diào)控K01915、K02057、K03081等相關(guān)功能基因。

鄧雪梅[43]選取中脘、天樞、脾俞、足三里等調(diào)理脾胃的腧穴，治療單純性肥胖，從接受針灸減肥的26例單純肥胖患者中選取治療效果較好的前十名患者大便樣本進(jìn)行GM培養(yǎng)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療前后肥胖患者GM需氧菌總數(shù)、腸球菌、厭氧菌總數(shù)均減少類桿菌增加。電針胃腸腑熱型單純性肥胖癥患者后，乳桿菌、腸球菌、擬桿菌、雙歧桿菌數(shù)量增加，腸桿菌數(shù)量降低[44]。Zhuting Xu[45]用腹針治療單純肥胖患者，選取中脘、水分、關(guān)元俞、天樞、足三里、三陰交等穴，針刺干預(yù)后乳酸菌和雙歧桿菌增加，但擬桿菌和梭狀芽孢桿菌減少。實(shí)驗(yàn)及臨床試驗(yàn)結(jié)果表明針灸干預(yù)肥胖可能通過微調(diào)GM的結(jié)構(gòu)、數(shù)量和功能，達(dá)到治療肥胖的目的。

3.2 針灸治療胃腸道疾病

國內(nèi)學(xué)者針刺粘連性腸梗阻大鼠足三里、天樞、上巨虛穴，治療28天后觀察其菌群移位情況，結(jié)果顯示針灸組大鼠臟器細(xì)菌移位率明顯低于模型組，認(rèn)為針刺可減少腸道細(xì)菌移位的發(fā)生，對大鼠腸粘膜有顯著保護(hù)作用[46]。馬飛翔[47]針刺虛秘大鼠足三里、照海穴，并搜集大鼠糞便進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)針刺在降低便秘大鼠糞便大腸球菌、大腸桿菌含量和升高乳酸桿菌含量方面有良好的效應(yīng)。Xiaomei Wang[48]艾灸腸易激綜合征大鼠天樞、上巨虛穴后發(fā)現(xiàn)與健康結(jié)腸相關(guān)的雙歧桿菌和乳酸菌顯著升高，與結(jié)腸炎癥相關(guān)的大腸桿菌明顯低于模型組。Qin Qi觀察右旋糖酐硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠，發(fā)現(xiàn)與健康大鼠相比其α多樣性降低，艾灸天樞穴可以改善α多樣性[49]。侯天舒等[50]通過電針潰瘍性結(jié)腸炎（UC）大鼠天樞、足三里及上巨虛，發(fā)現(xiàn)電針能明顯改善、UC模型大鼠腸道微生物的種類，增加腸道內(nèi)益生菌含量，提高其定植能力，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)腸道微生態(tài)的作用，認(rèn)為這種調(diào)節(jié)微生態(tài)發(fā)揮的保護(hù)作用很有可能是電針治療潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制之一。

此外，臨床試驗(yàn)也有相應(yīng)的發(fā)現(xiàn)。國內(nèi)王茜[51]等人選取以雙側(cè)天樞、足三里為主治療腸易激綜合征患者56例，總有效率達(dá)89.29%，且治療后患者雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量及雙歧桿菌/大腸桿菌比值升高，大腸桿菌數(shù)量下降，認(rèn)為針灸具有糾正GM失調(diào)的作用，從而有助于促進(jìn)腸道黏膜修復(fù)與屏障功能恢復(fù)。綜上，針刺治療腸道疾病的機(jī)制可能是通過調(diào)整GM。

3.3 針灸治療心血管疾病

心血管疾病與脾胃無論在病位、病因病機(jī)及治療方面都有密切聯(lián)系[52]。新近研究表明與健康人相比，心血管疾病患者體內(nèi)GM的數(shù)量差異較大，其腸道內(nèi)條件致病菌如大腸桿菌、腸球菌、鏈球菌等的數(shù)量明顯增加；益生菌雙歧桿菌、乳酸菌等的數(shù)量顯著降低[53]。又有研究發(fā)現(xiàn)腸道益生菌可抑制相關(guān)炎癥因子的釋放，發(fā)揮心血管保護(hù)作用[54]?？追踩A[55]選用調(diào)理脾胃的足三里、關(guān)元、內(nèi)關(guān)等穴電針治療動(dòng)脈粥樣硬化（AS）家兔,發(fā)現(xiàn)電針使致病菌大腸桿菌降低，益生菌乳酸桿菌和雙歧桿菌增加，重新恢復(fù)GM穩(wěn)態(tài)，抑制AS的發(fā)展。

3.4 針灸治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病

根據(jù)腦-腸-菌軸理論，GM在胃腸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)相互作用中有著不可替代的作用，并影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能發(fā)育和相關(guān)疾病的發(fā)生[56]。于源[57]利用Biolog-ECO碳源板的平均吸光度值（即AWCD值）來表征微生物群落代謝多樣性和功能性特征，發(fā)現(xiàn)電針對帕金森模型大鼠GM的AWCD值產(chǎn)生了較為明顯的影響。國外學(xué)者M(jìn)arin等［58］發(fā)現(xiàn)，抑郁癥的發(fā)生與GM的變化密切相關(guān)，美國醫(yī)師學(xué)會(huì)臨床實(shí)踐指南推薦針刺應(yīng)用于抑郁癥的治療，認(rèn)為其具有副作用小、療效顯著的特點(diǎn)[59]。于美月[60]選用調(diào)理脾胃的中脘、天樞、三陰交等穴能明顯改善帕金森病抑郁模型大鼠GM的AWCD值、Shannon指數(shù)，改善菌群活性和多樣性。因此，針刺可能通過調(diào)節(jié)GM治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

4 小結(jié)和展望

GM是人體最大的微生物群，直接或間接的影響著人體的動(dòng)態(tài)平衡和健康。我國微生態(tài)學(xué)創(chuàng)始人之一的魏曦教授曾說過：“微生態(tài)學(xué)很可能成為打開中醫(yī)奧秘大門的一把金鑰匙”。由于“脾胃”學(xué)說和GM在生理和防治疾病方面的相關(guān)性，可以讓我們更好的理解祖國醫(yī)學(xué)和GM的關(guān)系，為針灸調(diào)整GM提供理論基礎(chǔ)。基于“脾胃”學(xué)說，為針灸選擇穴位、行針手法、補(bǔ)瀉手法來調(diào)節(jié)GM提供了依據(jù)，為針刺調(diào)節(jié)GM治療疾病拓寬了思路。通過整理針灸調(diào)節(jié)GM的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，針刺調(diào)節(jié)GM治療疾病多集中在肥胖、胃腸功能障礙、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其具體機(jī)制可能是通過針灸調(diào)節(jié)GM平衡，影響微生物-腦-腸軸實(shí)現(xiàn)的。而現(xiàn)有研究已經(jīng)證實(shí)GM還與糖尿病、多囊卵巢綜合征[61-63]等疾病密切相關(guān)。因此，針灸通過調(diào)整腸道菌是否能應(yīng)用于更多疾病領(lǐng)域需進(jìn)行綜合且深入的研究。

脾胃為氣機(jī)升降之樞，針灸調(diào)理脾胃，重在調(diào)理脾胃氣機(jī)的升降?！督疳樫x》曰:“及夫調(diào)氣之法，下針至地之后，復(fù)人之分。欲氣上行，將針右捻，欲氣下行，將針左捻”，論述了不同的行針手法可調(diào)節(jié)氣機(jī)升降。但目前尚缺乏不同的行針手法會(huì)對GM產(chǎn)生怎樣影響的相關(guān)研究。此外，現(xiàn)有針灸調(diào)節(jié)GM的研究中，針刺方法選擇主要集中在普通針刺和電針，尚未有耳針、皮膚針、眼針，頭針，火針等影響GM的研究。Shudong Wang[61]分別艾灸菌群失調(diào)大鼠天樞和關(guān)元穴，結(jié)果顯示艾灸關(guān)元穴組大鼠雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量增加，艾灸天樞組大鼠腸桿菌、腸球菌數(shù)量增加，提出艾灸不同腧穴可以選擇性調(diào)整腸道優(yōu)勢益生菌群，從而調(diào)節(jié)GM失調(diào)。但針刺不同穴位是否有相同效果期待進(jìn)一步研究。此外，針灸調(diào)節(jié)GM效果明確，但目前研究多集中在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，臨床試驗(yàn)研究較少。

針灸能影響腸道微生物的種類、數(shù)量并對腸道微生態(tài)平衡起到良性調(diào)節(jié)作用，提升有益菌數(shù)量，降低有害菌數(shù)量，使腸道微生物保持平衡狀態(tài)。但針灸調(diào)節(jié)GM的機(jī)制目前研究指向針灸作用于微生物-腦-腸軸來調(diào)節(jié)GM，這可能是未來針灸調(diào)節(jié)GM治療疾病的機(jī)制研究方向。選擇針刺不同穴位，不同行針手法和針刺方法是否會(huì)對GM產(chǎn)生不同的影響可能是針刺調(diào)節(jié)GM的研究方向。在后續(xù)研究中，應(yīng)關(guān)注針灸調(diào)節(jié)GM的臨床研究，期待進(jìn)行更多的高質(zhì)量的隨機(jī)對照的臨床試驗(yàn)。