干片式快速檢測系統(tǒng)在中成藥肝損傷初篩中的應(yīng)用*

常瀅瀅 許世強(qiáng)

中成藥是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，應(yīng)用現(xiàn)代制藥工藝對中藥材進(jìn)行加工，制成對疾病有一定預(yù)防和治療效果的藥物[1]。隨著我國中醫(yī)藥事業(yè)的大力發(fā)展，中成藥在我國疾病治療中被越來越廣泛地應(yīng)用。因其較好的療效、相對低廉的價格、較小的毒副作用，被大眾普遍接受與認(rèn)同，但與此同時，中成藥不良反應(yīng)的報道也逐年增多。1990—2015 年國內(nèi)藥物性肝損傷研究的相關(guān)文獻(xiàn)中，中藥占比可達(dá) 23.8%[2]。目前，中藥造成的肝損傷比例，已占我國藥物性肝損傷(DILI,Drug-induced liver injury)的首位[3]，因 DILI缺乏簡易、便捷、客觀、特異的診斷指標(biāo)和治療手段，醫(yī)學(xué)界一直對其保持著極高的關(guān)注度[4]。因此，對于基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)，選擇合適的初篩檢測方法可以大大提高早期識別中成藥肝損傷的能力，對提高治療依從性、改善DILI預(yù)后至關(guān)重要。

本研究對干片式快速檢測系統(tǒng)進(jìn)行精密度測試；選取我院使用口服中成藥制劑的患者，同時對谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT,alanine amiotransferase)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST，aspartate transaminase)指標(biāo)進(jìn)行干片式快速檢測系統(tǒng)及全自動生化分析儀的檢測，并將結(jié)果對比分析，結(jié)論如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源2018年7月—2019年7月石家莊市中醫(yī)院使用中成藥制劑的200位門診患者血液標(biāo)本。

1.2 儀器與試劑Mission C-100 小干式生化分析儀(批號：20162400374)及配套的ALT、AST測試條。全自動生化分析儀(型號：貝克曼AU5800)。

1.3 操作方法干片式快速檢測系統(tǒng)操作方法：使用毛細(xì)管采集30 μl的樣本，滴加到試紙加樣區(qū)，打開艙門，將測試條放入測試槽中，加樣面朝上，并將測試條上的定位孔扣入定位桿，倒計時120 s后出現(xiàn)測試結(jié)果。其檢測范圍為10～800 U/L；相同標(biāo)本同時應(yīng)用干片式快速檢測系統(tǒng)中ALT、AST試劑盒及全自動生化分析儀檢測，嚴(yán)格按照試劑及儀器說明書進(jìn)行操作。

1.4 干片式快速檢測系統(tǒng)精密度測試取2份不同濃度的血清樣本，使用干片式快速檢測系統(tǒng)對2份樣本的ALT、AST值連續(xù)重復(fù)測定20次，計算變異系數(shù)。

1.5 對比實(shí)驗(yàn)使用干片式快速檢測系統(tǒng)對200例門診患者的靜脈全血進(jìn)行ALT、AST的檢測，相同樣本再采用全自動生化分析儀(速率法)檢測，將初、復(fù)檢結(jié)果進(jìn)行對比、分析。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法統(tǒng)計2種方法檢驗(yàn)所得的結(jié)果(ALT全自動生化儀>50 U/L為陽性,干片式檢測>40 U/L為陽性。AST全自動生化儀及干片式檢測均>40 U/L為陽性)，應(yīng)用SPSS 20.0，采用Kappa一致性檢驗(yàn)，測得Kappa值，一般認(rèn)為≥0.75說明一致性良好；同時，應(yīng)用線性回歸分析計算回歸方程及相關(guān)系數(shù)，以相關(guān)系數(shù)R>0.9作為2種方法相關(guān)性良好的判定標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 精密度測試見表1、表2。

表1 干片式快速檢測儀精密度測試結(jié)果(ALT)

表2 干片式快速檢測儀精密度測試結(jié)果(AST)

2.2 對比試驗(yàn)一致性及相關(guān)性分析200例患者中無超出檢測范圍的標(biāo)本。ALT結(jié)果中，干片式快速檢測系統(tǒng)陽性27例，陰性173例；全自動生化儀陽性25例，陰性175例。應(yīng)用Kappa一致性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示Kappa=0.980>0.75，P≤0.01。線性回歸分析計算回歸方程：干片法測量值=3.137+0.959×生化儀法測量值，相關(guān)系數(shù)：R=0.991。AST結(jié)果中，干片式快速檢測系統(tǒng)陽性11例，陰性189例；全自動生化儀陽性10例，陰性190例。應(yīng)用Kappa一致性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示Kappa=0.904>0.75，P≤0.01，線性回歸分析計算回歸方程：干片法測量值= 0.468+0.982×生化儀法測量值，相關(guān)系數(shù)：R=0.963。通過ALT、AST檢測結(jié)果分析，均提示2種檢測方法結(jié)果存在顯著一致性、2種檢測方法相關(guān)性良好。

3 討論

與西藥相比，中成藥多為復(fù)方制劑，毒性物質(zhì)基礎(chǔ)難以確定，作用機(jī)制更為復(fù)雜，服用藥量不固定，出現(xiàn)肝損傷的潛伏期可較長，從開始應(yīng)用至發(fā)生肝損傷的中位時間在1～3個月，部分患者發(fā)病相對隱匿，無明顯臨床癥狀及體征，對早期的診斷、監(jiān)測增加了極大難度[5-7]。加之，藥物性肝損傷本身的發(fā)病類型，絕大數(shù)屬于特異質(zhì)型，僅存在少數(shù)固有型，其隱匿性強(qiáng)、早期識別難度極大[8,9]。特異質(zhì)型人群可受到多種因素影響，包括藥物本身的因素以及性別、年齡、種族、家族遺傳等[10]。基于以上特點(diǎn)，對于本院在內(nèi)的基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行中成藥肝損傷的早期篩查，可針對重點(diǎn)易感人群及高風(fēng)險藥物進(jìn)行有針對性的主動監(jiān)測，以提高早期發(fā)現(xiàn)機(jī)率、降低肝衰竭風(fēng)險?？蛇x取既往出現(xiàn)肝損傷的高敏患者，或針對具有較高肝損傷風(fēng)險的中成藥物或中草藥成分進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測。如：何首烏[11]、雷公藤[12]、三七[13]等。

當(dāng)下普遍應(yīng)用的肝損傷生化指標(biāo)中，包含ALT、AST兩項[14]。相比其他指標(biāo)，ALT以較好的敏感性及特異性獲得了研究者更多的青睞。本研究將ALT、AST作為藥物性肝損傷早期初步篩查的臨床風(fēng)險信號應(yīng)用于肝損傷的早期識別，其意義不在于臨床診斷，而在于提前發(fā)現(xiàn)存在DILI的風(fēng)險，通過監(jiān)督患者用藥、動態(tài)監(jiān)測指標(biāo)變化，從而防控用藥風(fēng)險[15]。結(jié)合臨床實(shí)際可行性，本著快速、有效、易操作的原則，本研究應(yīng)用干片式快速檢測系統(tǒng)為患者進(jìn)行早期的血液檢測。通過對比分析，可認(rèn)定干片式快速檢測系統(tǒng)與全自動生化儀檢測結(jié)果具有一致性、相關(guān)性。研究顯示其準(zhǔn)確度高、精密度良好，操作簡便，且因其用血量少、檢測速度快，開展過程中患者的接受度普遍高于后者。干片式快速檢測系統(tǒng)為基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)開展肝損傷早期主動監(jiān)測，提供了可行性，適用于中成藥肝損傷的早期大范圍初篩工作的開展。對于初篩中發(fā)現(xiàn)的ALT、AST升高的患者，可行進(jìn)一步行系統(tǒng)動態(tài)監(jiān)測，從而做到早期識別、重點(diǎn)監(jiān)測、早期治療,為改善DILI預(yù)后起到一定的積極作用。