• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04菌株的抑菌譜及對仁果類真菌病害的防治作用

    2020-12-26 04:44:22萬丹丹吳海霞湯曼麗馬桂珍暴增海
    現(xiàn)代農(nóng)藥 2020年6期
    關(guān)鍵詞:輪紋病發(fā)酵液芽孢

    萬丹丹,吳海霞,湯曼麗,彭 云,陳 茹,馬桂珍,暴增海*

    (1.江蘇海洋大學(xué)海洋科學(xué)與水產(chǎn)學(xué)院,江蘇連云港222000;2.南京醫(yī)科大學(xué)康達(dá)學(xué)院,江蘇連云港222000)

    蘋果輪紋病是由葡萄座腔菌屬引起的,該病菌不僅會危害生長期的果樹和果實,也會造成果實成熟期的爛果、落果,并且在貯藏期也會造成大量的爛果,是嚴(yán)重危害蘋果產(chǎn)業(yè)的病害之一。除危害蘋果外,還可侵染梨、桃、杏等多種果樹,對果樹的生長和水果產(chǎn)量造成了巨大的影響[1-2]。目前,我國輪紋病害的防治主要是依靠化學(xué)農(nóng)藥,而化學(xué)農(nóng)藥的大量使用和濫用導(dǎo)致了環(huán)境污染、生態(tài)多樣性破壞、農(nóng)藥殘留及植物病原菌產(chǎn)生耐藥性等一系列難題[3]。開發(fā)利用新型生物農(nóng)藥可彌補(bǔ)化學(xué)農(nóng)藥的不足,微生物制劑用于植物病害的防治受到了廣泛的重視[4-5]。芽孢菌屬繁殖力強(qiáng),其芽孢可在惡劣環(huán)境中存活,并且其產(chǎn)生的細(xì)菌素、抗菌蛋白、脂肽類抗生素等產(chǎn)物具有抑菌作用,被廣泛地應(yīng)用于微生物菌劑的研制[6-8]。用于植物病害防治的微生物菌株主要來源于陸地和海洋,其中來源于陸地的生物菌株開發(fā)應(yīng)用比較普遍,而來源于海洋的微生物菌株,由于海洋特殊的生態(tài)環(huán)境,如高壓、高鹽、低溫、寡營養(yǎng)等,造就了其產(chǎn)物的特異結(jié)構(gòu)和活性是陸源微生物無法比擬的[9-11]。很多海源微生物的次生代謝產(chǎn)物對植物病害的防效更好,成為近年來的研究熱點(diǎn)。

    本課題組從連云港海域分離獲得1株對輪紋病等多種植物病原真菌具有較強(qiáng)抑制作用的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04菌株。為了進(jìn)一步了解該菌株特性,筆者系統(tǒng)研究了該菌株及其發(fā)酵液的抑菌譜以及對仁果類輪紋病病害的防效,旨在為該菌株后續(xù)開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗菌株、培養(yǎng)基及果實來源

    甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04由江蘇海洋大學(xué)海洋微生物實驗室分離、鑒定、保存。供試植物病原真菌(表1)和細(xì)菌保存在該實驗室。

    PDA馬鈴薯培養(yǎng)基;PD液體培養(yǎng)基;NA液體培養(yǎng)基;發(fā)酵培養(yǎng)基:麩皮1.0%,花生餅粉1.0%,CaCl21.0%,pH 7.5。

    梨:市售雪梨;蘋果:市售紅富士。

    1.2 BMF 04菌株及其無菌發(fā)酵液對植物病原真菌抑菌作用的測定

    將4℃下保存的BMF 04菌株在無菌條件下轉(zhuǎn)接于PDA斜面上,在28℃的條件下培養(yǎng)1 d進(jìn)行活化;將4℃下保存的植物病原真菌在無菌條件下轉(zhuǎn)接于PDA平板上,在28℃培養(yǎng)3 d進(jìn)行活化,備用。

    采用平板對峙培養(yǎng)法,在PDA平板中央接種直徑為7 mm的病原真菌菌苔,在真菌三邊距培養(yǎng)皿邊緣25 mm處劃線接種活化1 d的BMF 04菌株,以不接BMF 04菌株作為對照,3次重復(fù)。28℃培養(yǎng)3~5 d,觀測并測量抑菌帶寬度。

    表1 BMF 04 菌株及其無菌發(fā)酵液對不同植物病原真菌的抑制作用測定結(jié)果

    將甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04接種于PDA斜面,在溫度為28℃條件下,培養(yǎng)16 h,用PD培養(yǎng)基洗下,制成菌懸液,接入裝有60 mL種子液培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中。在溫度為28℃條件下,180 r/min搖床培養(yǎng)16 h,得到種子液,調(diào)整種子液濃度為108CFU/mL。按照10%的接種量,將種子液接種裝入盛有60 mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中;在溫度為28℃條件下,180 r/min搖床培養(yǎng)48 h,發(fā)酵液冷卻至4℃,以10 000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min,上清液經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾去除菌體,即為無菌發(fā)酵液。

    采用牛津杯法,將植物病原真菌接在直徑90 mm的平板中央,在距邊緣25 mm處對稱放置4個牛津杯,3個牛津杯中各加入無菌發(fā)酵液200 μL,以發(fā)酵培養(yǎng)基為對照,重復(fù)3次。28℃下恒溫培養(yǎng)4 d后,觀察植物病原真菌的生長情況,并測量其抑菌帶寬度。

    1.3 BMF 04菌株發(fā)酵液對不同細(xì)菌抑制作用的測定

    采用牛津杯法,將斜面培養(yǎng)24 h的5種供試細(xì)菌接種至盛有60 mL NA液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中,28℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)24 h,制成濃度為106CFU/mL的菌懸液,取100 μL菌懸液均勻涂布在NA平板上,每個涂菌平板上等距離擺放4個牛津杯。牛津杯中加入200 μL BMF 04菌株的無菌發(fā)酵液,以等量的發(fā)酵培養(yǎng)基為對照,28℃下培養(yǎng)36 h,測定抑菌帶寬度,重復(fù)3次。

    1.4 BMF 04菌株發(fā)酵液及其無菌發(fā)酵液對梨、蘋果果實輪紋病防治作用的測定

    蘋果、梨果實表面的處理:選擇健康果形大小一致的蘋果和梨的果實,對其表面消毒后,在果實的赤道處打直徑為7 mm、深度為3 mm的傷口,每個果實3個傷口。用2種不同處理方法分別測定BMF 04菌株發(fā)酵液和無菌發(fā)酵液的保護(hù)作用和治療作用。

    保護(hù)作用:在傷口處分別用濃度為108CFU/mL BMF 04發(fā)酵液和無菌發(fā)酵液100 μL處理,以等量的發(fā)酵培養(yǎng)基為對照,16 h接種蘋果輪紋病菌菌苔。

    治療作用:在果實傷口處接種輪紋病菌菌苔,16 h后分別接種濃度為108CFU/mL BMF 04發(fā)酵液、無菌發(fā)酵液100 μL。

    將不同處理的果實放入相對濕度為95%左右、28℃的恒溫培養(yǎng)箱中,觀察5~7 d,采用十字交叉法測量病斑直徑。每個處理設(shè)3重復(fù),每個重復(fù)10個果實。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 BMF 04菌株及其無菌發(fā)酵液對不同植物病原真菌的抑制作用

    從表1和圖1可見,BMF 04菌株對供試的26種植物病原真菌絲生長均具有明顯的抑制作用,對23種真菌的抑菌帶寬度達(dá)18 mm以上,其中對芒果炭疽病菌抑制作用最強(qiáng),抑菌帶寬度為28.67 mm,其次是小麥赤霉病菌、水稻紋枯病菌、番茄早疫病菌,抑菌帶寬度均超過27 mm。

    圖1 BMF 04 菌株對不同植物病原真菌的抑制作用

    從表1和圖2可見,BMF 04菌株無菌發(fā)酵液對供試的植物病原真菌均有抑制作用,對24種真菌的抑菌帶寬度在10 mm以上,其中對蘋果輪紋病菌和芒果炭疽病菌的抑制作用最強(qiáng),抑菌帶寬度分別為23.50 mm和23.00 mm,對水稻胡麻斑病菌和馬鈴薯晚疫病菌抑菌作用最弱,抑菌帶寬度分別為6.67 mm和4.67 mm。

    圖2 BMF 04 無菌發(fā)酵液對不同病原真菌的抑制作用

    2.2 BMF 04菌株發(fā)酵液對不同細(xì)菌的抑制作用

    從表2和圖3可知,BMF 04菌株對供試的金黃色葡萄球菌的抑制作用最強(qiáng),抑菌帶寬度為20.55 mm,其次是青枯病菌,抑菌帶寬度為11.83 mm,對大腸桿菌、角斑病菌和枯草芽孢桿菌沒有抑制作用。

    表2 BMF 04 菌株無菌發(fā)酵液對不同細(xì)菌的抑制作用

    圖3 BMF 04 菌株對不同細(xì)菌的抑制作用

    2.3 BMF 04菌株發(fā)酵液及其無菌發(fā)酵液對梨、蘋果果實輪紋病防治作用

    從表3可見,經(jīng)BMF 04菌株發(fā)酵液處理過的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為21.03、18.03 mm,經(jīng)無菌發(fā)酵液處理過的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為24.60、22.60 mm,無菌發(fā)酵培養(yǎng)基為對照組的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為43.10、53.87 mm;BMF 04菌株發(fā)酵液對梨、蘋果的保護(hù)作用分別為61.15%、76.47%,無菌發(fā)酵液對梨、蘋果的保護(hù)作用分別為51.24%、66.72%。以上結(jié)果表明,BMF 04菌株發(fā)酵液的抑菌作用明顯優(yōu)于無菌發(fā)酵液;BMF 04菌株對蘋果和梨具有很強(qiáng)的保護(hù)作用,且對蘋果果實輪紋病的保護(hù)效果優(yōu)于梨果實上輪紋病的保護(hù)效果。

    從表4可知,先接種輪紋病菌,后接種BMF 04菌株發(fā)酵液的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為29.03、32.13mm,接種無菌發(fā)酵液的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為34.17、36.77 mm,無菌發(fā)酵培養(yǎng)基為對照組的梨、蘋果輪紋病病斑直徑分別為44.53、59.10 mm;BMF 04菌株發(fā)酵液對梨、蘋果的治療作用分別為41.30%、51.77%,無菌發(fā)酵液對梨、蘋果的治療作用分別為27.67%、42.88%。以上結(jié)果表明,BMF 04菌株發(fā)酵液對蘋果、梨輪紋病具有較好的治療作用,且對蘋果果實輪紋病的治療效果優(yōu)于梨果實上輪紋病的治療效果。

    對比表3和表4可以看出,海洋細(xì)菌BMF 04菌株發(fā)酵液及其無菌發(fā)酵液對蘋果、梨果實的輪紋病都具有良好的防效,且該菌株對果實的保護(hù)效果優(yōu)于治療效果。

    表3 BMF 04 菌株發(fā)酵液和無菌發(fā)酵液對梨、蘋果果實輪紋病的保護(hù)作用

    表4 BMF 04 菌株發(fā)酵液和無菌發(fā)酵液對梨、蘋果果實輪紋病的治療作用

    3 結(jié)論與討論

    甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04菌株及其發(fā)酵液對供試的26種植物病原真菌和2種細(xì)菌均具有抑制作用,該菌株對23種真菌的抑菌帶寬度達(dá)到了18 mm以上,無菌發(fā)酵液對24種真菌的抑菌帶寬度達(dá)到了10 mm以上,其中對蘋果輪紋病菌和芒果炭疽病菌的抑制作用最強(qiáng),抑菌帶寬度分別為23.50 mm和23.00 mm,說明其抗菌譜較廣。目前,應(yīng)用于植物防病促生的芽孢菌屬主要為枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌等[12],關(guān)于甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌在植物病害的防治應(yīng)用近年來也有所報道。甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BAC-9912、WF-3對黃瓜灰霉病和炭疽病的防效分別達(dá)78.8%、77.38%[13-14]。從海洋中分離篩選的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌SHB114和BH21,能有效抑制黃瓜枯萎病、炭疽病、立枯絲核菌和葡萄灰霉病[15-16]。分離自天然餅肥發(fā)酵液的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌4-L-16菌株在香蕉根際土壤和植物體內(nèi)具有良好的定殖能力,是防治香蕉枯萎病的新菌種資源[17]。趙文珺等[18]室內(nèi)盆栽實驗表明,甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NK、G-1對番茄白粉病防效分別達(dá)87.55%、47.74%,且能不同程度促進(jìn)番茄的生長。本研究中的BMF 04菌株與上述報道的菌株相比抗菌譜較廣,抗菌種類也有明顯不同。該菌株的發(fā)酵液和無菌發(fā)酵液對蘋果和梨的輪紋病均具有防治作用,且保護(hù)效果優(yōu)于治療效果,發(fā)酵液的防效優(yōu)于無菌發(fā)酵液的防效,對蘋果的保護(hù)效果及治療效果分別為76.47%、51.77%。

    本研究說明甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF 04是一株具有廣譜抗菌性的海洋細(xì)菌,對果實輪紋病具有良好的防效,在植物病害的微生物防治方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

    猜你喜歡
    輪紋病發(fā)酵液芽孢
    蒼耳不同溶劑提取物對蘋果輪紋病菌的抑制效果
    河北果樹(2020年4期)2020-11-26 06:04:50
    3種中藥提取物對蘋果輪紋病菌的室內(nèi)抑制作用
    河北果樹(2020年4期)2020-11-26 06:04:38
    蘋果輪紋病防治技術(shù)
    河北果樹(2020年2期)2020-01-09 11:15:07
    解淀粉芽孢桿菌Lx-11
    解淀粉芽孢桿菌的作用及其產(chǎn)品開發(fā)
    側(cè)孢短芽孢桿菌A60
    連翹內(nèi)生真菌的分離鑒定及其發(fā)酵液抑菌活性和HPLC測定
    桑黃纖孔菌發(fā)酵液化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:03
    30L發(fā)酵罐培養(yǎng)枯草芽孢桿菌產(chǎn)高密度芽孢的研究
    蘋果輪紋病與炭疽病的區(qū)別
    久久人人爽av亚洲精品天堂| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 成年动漫av网址| 日本黄色日本黄色录像| 最近最新免费中文字幕在线| 高清在线国产一区| 97精品久久久久久久久久精品| 搡老岳熟女国产| 成年人免费黄色播放视频| 人成视频在线观看免费观看| 少妇人妻久久综合中文| 色婷婷av一区二区三区视频| 丝袜美足系列| 亚洲精品成人av观看孕妇| 999久久久国产精品视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 亚洲精华国产精华精| 色综合欧美亚洲国产小说| 99久久综合免费| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 日本av免费视频播放| 正在播放国产对白刺激| 水蜜桃什么品种好| 欧美午夜高清在线| 国产一区二区三区av在线| 国产成人精品无人区| 欧美黄色淫秽网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产精品久久久久久精品古装| 国产不卡av网站在线观看| av网站免费在线观看视频| 91麻豆av在线| av免费在线观看网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 他把我摸到了高潮在线观看 | 亚洲国产看品久久| cao死你这个sao货| 国产精品一区二区在线不卡| 秋霞在线观看毛片| 午夜福利,免费看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久午夜综合久久蜜桃| 黄色 视频免费看| 99精品欧美一区二区三区四区| 十八禁人妻一区二区| 久久久久精品国产欧美久久久 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 成年人黄色毛片网站| 9色porny在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲精品一二三| 男女边摸边吃奶| 国产成人啪精品午夜网站| 久久久久网色| 久久毛片免费看一区二区三区| 伊人亚洲综合成人网| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 淫妇啪啪啪对白视频 | 国产日韩欧美亚洲二区| 三上悠亚av全集在线观看| 老熟女久久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久国产精品大桥未久av| a级毛片在线看网站| 午夜老司机福利片| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 大码成人一级视频| 黄色a级毛片大全视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产在线一区二区三区精| 在线永久观看黄色视频| 欧美日本中文国产一区发布| 最近最新免费中文字幕在线| 夫妻午夜视频| 丝袜在线中文字幕| 亚洲九九香蕉| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 亚洲成国产人片在线观看| 高清欧美精品videossex| 国产亚洲精品第一综合不卡| 最近最新免费中文字幕在线| 国产99久久九九免费精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 91成年电影在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 热re99久久国产66热| 自线自在国产av| 99国产综合亚洲精品| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 99国产精品一区二区三区| 久久狼人影院| 麻豆av在线久日| 制服人妻中文乱码| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美久久黑人一区二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 最新的欧美精品一区二区| 久久久久久久久免费视频了| 日韩欧美国产一区二区入口| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品欧美亚洲77777| 国产精品一二三区在线看| 亚洲久久久国产精品| 操出白浆在线播放| 男人爽女人下面视频在线观看| 午夜福利一区二区在线看| 超色免费av| 久久久久久久精品精品| 欧美av亚洲av综合av国产av| 久久久久久久久久久久大奶| 国产免费视频播放在线视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 天天操日日干夜夜撸| 91大片在线观看| 丝袜在线中文字幕| 亚洲一码二码三码区别大吗| 日本av手机在线免费观看| 成年av动漫网址| 免费观看av网站的网址| 久久久精品94久久精品| www.自偷自拍.com| 一级片免费观看大全| 精品第一国产精品| 丝袜喷水一区| 久久性视频一级片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 高清视频免费观看一区二区| 各种免费的搞黄视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美人与性动交α欧美软件| 99精品欧美一区二区三区四区| 99久久国产精品久久久| 亚洲专区国产一区二区| 久久久国产精品麻豆| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久人人爽人人片av| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 两人在一起打扑克的视频| 手机成人av网站| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲精品乱久久久久久| 美女视频免费永久观看网站| 精品高清国产在线一区| kizo精华| 成人国语在线视频| 不卡一级毛片| 男女免费视频国产| 国产1区2区3区精品| 丝袜喷水一区| 69精品国产乱码久久久| 午夜福利影视在线免费观看| 99国产精品免费福利视频| 少妇人妻久久综合中文| 美女国产高潮福利片在线看| 黄色视频不卡| 国产片内射在线| 久久久久久人人人人人| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 色视频在线一区二区三区| 国产精品影院久久| 久久性视频一级片| 又黄又粗又硬又大视频| 国产在线视频一区二区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲国产看品久久| 极品人妻少妇av视频| 精品福利观看| 国产av精品麻豆| 久久久精品94久久精品| 波多野结衣av一区二区av| 久久久久国内视频| 亚洲精品国产av成人精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 亚洲av片天天在线观看| 午夜免费观看性视频| 99精品久久久久人妻精品| 国产精品久久久久成人av| 18禁国产床啪视频网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 动漫黄色视频在线观看| 大型av网站在线播放| 日本av手机在线免费观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| av福利片在线| 下体分泌物呈黄色| 久久国产精品大桥未久av| 高清在线国产一区| 午夜影院在线不卡| 欧美在线一区亚洲| 欧美国产精品一级二级三级| 久热爱精品视频在线9| 亚洲精品一区蜜桃| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美国产精品一级二级三级| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 操美女的视频在线观看| 久久 成人 亚洲| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久精品成人免费网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 97在线人人人人妻| 男女边摸边吃奶| 精品少妇内射三级| 在线精品无人区一区二区三| 高清在线国产一区| 男人添女人高潮全过程视频| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲熟女毛片儿| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 他把我摸到了高潮在线观看 | 国产精品久久久久成人av| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 久久精品国产a三级三级三级| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 中文字幕高清在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 少妇的丰满在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲五月婷婷丁香| 下体分泌物呈黄色| 日本a在线网址| 免费在线观看日本一区| 亚洲第一青青草原| 国产男女内射视频| 亚洲伊人色综图| 一区二区三区精品91| 老司机深夜福利视频在线观看 | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 91麻豆av在线| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产精品成人在线| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 黄色a级毛片大全视频| 亚洲国产看品久久| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 飞空精品影院首页| 中文欧美无线码| 五月天丁香电影| 成人免费观看视频高清| 免费在线观看日本一区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 精品一区在线观看国产| 精品一品国产午夜福利视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 午夜免费成人在线视频| 人人妻人人澡人人看| 麻豆乱淫一区二区| 麻豆av在线久日| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产欧美亚洲国产| 国产高清国产精品国产三级| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 国产熟女午夜一区二区三区| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲一码二码三码区别大吗| 99国产精品一区二区三区| 久久久国产精品麻豆| 黑人欧美特级aaaaaa片| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 久久亚洲精品不卡| 午夜激情久久久久久久| 一个人免费看片子| 日韩大片免费观看网站| 丁香六月天网| 精品国产一区二区久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 91国产中文字幕| 97人妻天天添夜夜摸| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日日爽夜夜爽网站| 啦啦啦 在线观看视频| 国产精品一区二区在线不卡| 热99久久久久精品小说推荐| av一本久久久久| 日韩视频在线欧美| 色综合欧美亚洲国产小说| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久久这里只有精品19| 久久久久久免费高清国产稀缺| 51午夜福利影视在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲全国av大片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久久久久久精品精品| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久午夜综合久久蜜桃| 午夜免费成人在线视频| 免费观看人在逋| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲伊人色综图| 男女边摸边吃奶| 91九色精品人成在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 桃红色精品国产亚洲av| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 日韩精品免费视频一区二区三区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 女人精品久久久久毛片| 秋霞在线观看毛片| 亚洲人成77777在线视频| 精品久久蜜臀av无| 免费在线观看影片大全网站| 美女大奶头黄色视频| 国产免费视频播放在线视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 日韩电影二区| 国产黄频视频在线观看| 亚洲成人手机| 日本黄色日本黄色录像| 欧美精品av麻豆av| 国产精品影院久久| 国产成人影院久久av| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲国产看品久久| 中文欧美无线码| 国产成人a∨麻豆精品| 男女午夜视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| 丝袜美足系列| 国产91精品成人一区二区三区 | 久久久精品94久久精品| 成人国产一区最新在线观看| 精品福利永久在线观看| 亚洲成人手机| 久久亚洲国产成人精品v| 少妇的丰满在线观看| 婷婷成人精品国产| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲国产精品一区三区| 韩国精品一区二区三区| 久久久国产成人免费| 国产在视频线精品| 亚洲国产日韩一区二区| 国产男女内射视频| 波多野结衣av一区二区av| 日韩人妻精品一区2区三区| 人人澡人人妻人| 欧美黑人精品巨大| 少妇的丰满在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 免费人妻精品一区二区三区视频| 免费日韩欧美在线观看| 岛国毛片在线播放| 正在播放国产对白刺激| 在线观看人妻少妇| 成人黄色视频免费在线看| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产欧美亚洲国产| 欧美国产精品一级二级三级| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 99香蕉大伊视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 大码成人一级视频| 午夜视频精品福利| a级毛片在线看网站| 人妻人人澡人人爽人人| 久久久国产精品麻豆| 精品少妇久久久久久888优播| 国产真人三级小视频在线观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 老司机深夜福利视频在线观看 | 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 久久国产精品男人的天堂亚洲| 热re99久久精品国产66热6| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产成人av激情在线播放| 成年动漫av网址| 国产成人av教育| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 大香蕉久久网| 亚洲精品乱久久久久久| 妹子高潮喷水视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 黄色毛片三级朝国网站| 国产又爽黄色视频| 免费看十八禁软件| 国产亚洲精品一区二区www | 一本大道久久a久久精品| 久久久久精品人妻al黑| 一级毛片电影观看| 午夜精品国产一区二区电影| 最近最新中文字幕大全免费视频| 日韩大码丰满熟妇| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日本91视频免费播放| 国产精品成人在线| 久久久久网色| 99精品欧美一区二区三区四区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产精品一二三区在线看| 精品国产乱码久久久久久男人| 精品第一国产精品| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美在线一区亚洲| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品成人av观看孕妇| 最近中文字幕2019免费版| 黄片播放在线免费| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品久久蜜臀av无| 新久久久久国产一级毛片| 女警被强在线播放| 丝袜在线中文字幕| 黄片大片在线免费观看| 一级黄色大片毛片| 69av精品久久久久久 | 天堂8中文在线网| 国产一卡二卡三卡精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 爱豆传媒免费全集在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 最新在线观看一区二区三区| 国产精品影院久久| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产一级毛片在线| 久久九九热精品免费| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产在视频线精品| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美大码av| 亚洲国产看品久久| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 18禁观看日本| 女警被强在线播放| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲五月婷婷丁香| 丝袜脚勾引网站| 天堂中文最新版在线下载| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久青草综合色| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产精品一区二区在线不卡| 久久毛片免费看一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 精品久久久久久电影网| 亚洲全国av大片| 在线观看免费午夜福利视频| 999精品在线视频| tocl精华| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久99一区二区三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产男女超爽视频在线观看| 窝窝影院91人妻| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 青青草视频在线视频观看| a级片在线免费高清观看视频| av天堂久久9| 宅男免费午夜| 久久影院123| 亚洲久久久国产精品| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产欧美亚洲国产| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| av在线播放精品| 国产免费现黄频在线看| 99久久99久久久精品蜜桃| 岛国毛片在线播放| 色播在线永久视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产三级黄色录像| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲,欧美精品.| 丰满迷人的少妇在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 一区二区av电影网| 老熟妇仑乱视频hdxx| 中文字幕人妻熟女乱码| 飞空精品影院首页| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 亚洲专区国产一区二区| 国产成人影院久久av| 亚洲欧美激情在线| 国产黄频视频在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 一级片免费观看大全| 狂野欧美激情性bbbbbb| 1024视频免费在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品免费视频内射| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美激情久久久久久爽电影 | 午夜免费观看性视频| 欧美另类一区| 久久亚洲国产成人精品v| 黄色a级毛片大全视频| 黄片小视频在线播放| 国产精品一区二区免费欧美 | 久久热在线av| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日本av手机在线免费观看| 捣出白浆h1v1| 脱女人内裤的视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产99久久九九免费精品| 国产三级黄色录像| 精品少妇内射三级| 亚洲九九香蕉| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲欧美精品自产自拍| 色婷婷久久久亚洲欧美| 免费高清在线观看日韩| 精品国产国语对白av| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 99国产精品免费福利视频| 日日爽夜夜爽网站| 午夜福利在线免费观看网站| 美国免费a级毛片| 交换朋友夫妻互换小说| 国产视频一区二区在线看| 免费观看a级毛片全部| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产欧美日韩一区二区三 | 免费在线观看影片大全网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 男女午夜视频在线观看| 亚洲avbb在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产深夜福利视频在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲国产看品久久| 国产片内射在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 一级毛片精品| 国产伦人伦偷精品视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 飞空精品影院首页| 亚洲国产av新网站| 午夜福利视频在线观看免费| 多毛熟女@视频| 人妻一区二区av| 美女福利国产在线| 日韩视频一区二区在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲黑人精品在线| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲av男天堂| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 大片电影免费在线观看免费| 三级毛片av免费| 好男人电影高清在线观看| 国产男人的电影天堂91| 久久久精品免费免费高清| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 性色av乱码一区二区三区2| 久热爱精品视频在线9| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产在线一区二区三区精| 一级片'在线观看视频| 高清视频免费观看一区二区| 国产1区2区3区精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 十八禁网站网址无遮挡| 9191精品国产免费久久| 高清黄色对白视频在线免费看| 秋霞在线观看毛片| 视频区图区小说| 欧美在线黄色| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产1区2区3区精品| 成在线人永久免费视频| 成年人午夜在线观看视频| 中文欧美无线码| 97在线人人人人妻| svipshipincom国产片| 国产在线视频一区二区| 夜夜骑夜夜射夜夜干|