白芷中有效成分的提取及純化方法

柳玥雯

摘要：為有效提取純化白芷中的香豆素類、揮發(fā)油類和黃酮類等有效成分，根據(jù)相關(guān)試驗(yàn)研究成果，分別總結(jié)有效成分的主要提取和純化方法，以及其最佳工藝條件，為白芷的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論參考和數(shù)據(jù)支持。

關(guān)鍵詞：白芷;有效成分;提取;純化

中圖分類號：R284.2 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A ? ?文章編號：1674-1161（2020）06-0061-02

白芷是傳統(tǒng)的藥食同源中藥材，含有香豆素類、揮發(fā)油類和黃酮類等有效成分，具有散風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿之功效。近年來，為有效提取純化白芷中的有效成分，諸多學(xué)者和科研工作者進(jìn)行了大量的試驗(yàn)研究，獲得了許多有價值的研究成果，在白芷的深度開發(fā)利用方面發(fā)揮了重要作用。

1 白芷中有效成分的提取

白芷中的有效成分主要有香豆素類、揮發(fā)油類和黃酮類等，為提取其中的某一種或幾種有效成分，眾多科研工作者開展了諸多相關(guān)試驗(yàn)研究，為確定提取的最佳工藝參數(shù)提供數(shù)據(jù)支撐。

1.1 香豆素類成分

現(xiàn)代研究表明，香豆素是白芷鎮(zhèn)痛的主要成分，具有抗氧化、抗增殖活性等作用。當(dāng)前，香豆素類成分的提取工藝有滲漉法、常溫/熱水法、溶劑法、回流法、微波法、超聲法、星點(diǎn)設(shè)計與效應(yīng)面法相結(jié)合法等。

為優(yōu)化白芷中香豆素類成分的滲漉提取工藝，黃家佳等以乙醇體積分?jǐn)?shù)、乙醇用量、滲漉速度、浸泡時間為影響因素，以歐前胡素含有量為評價指標(biāo)，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上開展正交試驗(yàn)。通過試驗(yàn)確定的最佳工藝條件為：藥材粉碎過20目篩，加8倍量60%乙醇，滲漉速度4 mL/（min·kg），浸泡時間12 h。該方法準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好，可用于提取白芷中的香豆素類成分。袁園等用微波法提取白芷中香豆素類成分后，利用紫外光譜研究其穩(wěn)定性，確定最佳提取工藝為：乙醇濃度40%，提取時間8 min，料液比1︰50，提取溫度80 ℃。

常金花等分別采用乙醇回流提取和3種水提預(yù)處理法得到提取物Ⅰ～Ⅳ，4種提取物中的總香豆素含量分別為3.98%，6.03%，6.81%，4.46%;歐前胡素含量分別為0.633%，0.540%，0.465%，0.155%;各提取物在120 min內(nèi)的累積溶出度均顯著高于藥材細(xì)粉，且3種水提預(yù)處理方法可明顯改善提取物的粉體學(xué)性質(zhì)。

李靖等利用效應(yīng)面法優(yōu)選白芷的醇提取工藝參數(shù)時，確定白芷中歐前胡素的最佳提取工藝為：甲醇濃度83.17%，提取時間9.15 h，甲醇用量147.32 mL;異歐前胡素的最佳提取工藝為：甲醇濃度91.83%，提取時間9.15 h，甲醇用量112.68 mL。于定榮等也利用不同方法提取香豆素中的歐前胡素和異歐前胡素，并進(jìn)行了鎮(zhèn)痛作用的比較研究。

1.2 多糖類成分

白芷多糖具有增強(qiáng)免疫的作用，大多用水進(jìn)行成分提取。唐森等采用響應(yīng)面法優(yōu)化白芷水溶性多糖的提取工藝時，以多糖提取率為指標(biāo)，利用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)選出的最佳提取工藝為：液料比102∶1（mL∶g），提取時間90 min，提取溫度68 ℃，多糖實(shí)際提取率7.35%±0.005%。

1.3 揮發(fā)油類成分

白芷中的揮發(fā)油成分具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗菌等功效，提取方法有水蒸氣蒸餾法、微波提取法和超臨界CO2萃取法等。

舒任庚等分別采用微波輔助法和水蒸氣蒸餾法提取白芷揮發(fā)油，共鑒定出68個成分，其中微波輔助法和水蒸氣蒸餾法分別鑒定出59種和37種，分別占總峰面積的88.93%和94.79%。這說明所得揮發(fā)油的化學(xué)成分有較大差異，且微波提取的揮發(fā)油成分較多。

崔秋兵等采用均勻設(shè)計法考察超臨界CO2萃取白芷揮發(fā)油的最佳工藝條件，并對萃取物進(jìn)行GC×GC/TOFMS分析。在萃取壓力17.8 MPa、萃取溫度54 ℃、萃取時間175 min的條件下，最大優(yōu)化萃取率為4.17%。這說明均勻設(shè)計方法可以快速萃取白芷揮發(fā)油，為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。

1.4 黃酮類化合物

白芷中含有黃酮類化合物，具有抗氧化、增加免疫力等功效，主要是用醇進(jìn)行提取。

李蜀眉等用正交試驗(yàn)確定白芷黃酮類化合物的最佳提取條件為：溫度40 ℃、料液比1∶0（g/mL）、乙醇濃度70%（體積分?jǐn)?shù)）。通過DPPH法研究不同溫度、pH、金屬離子、食品添加劑對白芷黃酮類化合物抗氧化活性的影響，發(fā)現(xiàn)抗氧化活性在35 ℃或者pH 3～4時良好;Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mg2+、檸檬酸、對羥基苯甲酸乙酯、苯甲酸可使白芷黃酮類化合物的抗氧化活性提高。

1.5 淀粉

白芷中含有大量的淀粉，其提取主要有超聲波提取法和堿浸法。鄭藝梅等采用超聲波輔助提取白芷淀粉，考察超聲波功率、超聲波處理時間和料液比對白芷淀粉提取率的影響。單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法確定的最佳條件為：超聲波功率325 W，超聲波處理27 min，料液比1∶6（g/mL）。在最佳條件下，白芷淀粉提取率為74.02%，比常規(guī)方法提高10.07%。李大峰等以NaOH為浸泡劑，探討料液比、pH、浸泡時間、浸泡溫度對淀粉提取率的影響，并用正交試驗(yàn)確定白芷淀粉提取的最佳工藝。結(jié)果表明：在料液比1∶6、NaOH浸提液pH 9.0、浸泡時間6 h、浸泡溫度30 ℃的條件下，淀粉的提取率最高，為84.56%。

2 白芷中有效成分的純化方法

白芷中有效成分的純化有大孔樹脂、高速逆流色譜、結(jié)晶等方法。劉曉昱等選用L9（34）正交試驗(yàn)優(yōu)選的醇提工藝為：使用10倍量90%的乙醇提取2次，每次2 h;最佳純化工藝為：選用D101大孔樹脂，上樣濃度為每mL含生藥0.3 g，最大上樣量7倍BV（7倍柱體積），上樣速度4 BV/h，用6 BV水以4 BV/h的速度洗脫，棄去洗脫液，再用7 BV的90%乙醇以4 BV/h的流速洗脫，收集洗脫液。此大孔樹脂純化工藝簡便、穩(wěn)定，有效成分轉(zhuǎn)移率高。

林小靜等用超臨界CO2萃取法從白芷中提取歐前胡素和異歐前胡素，根據(jù)正交試驗(yàn)確定的最佳工藝條件為：溫度60 ℃、萃取壓力25 MPa、藥材粉碎度40～60目，放大50倍進(jìn)行萃取。利用高速逆流色譜技術(shù)分離純化歐前胡素和異歐前胡素，產(chǎn)物純度達(dá)99.0%以上，且簡便快捷、重現(xiàn)性好。

施婷婷等研究白芷總香豆素類有效部位的萃取純化工藝時，采用石油醚-乙酸乙酯聯(lián)用法純化白芷提取物（濃度為2 g/mL），總香豆素含量達(dá)50%以上，其中歐前胡素含量在4%以上。此純化工藝穩(wěn)定可行，可為白芷總香豆素制備提供參考。另外，梅彥紅通過選定合適的結(jié)晶溶劑和結(jié)晶條件，也得到了高純度的香豆素結(jié)晶。

3 結(jié)語

白芷中的有效成分主要有香豆素類成分、揮發(fā)油類成分、黃酮類成分等，應(yīng)根據(jù)各成分的性質(zhì)采用不同的提取純化方法。今后，針對有效成分的作用機(jī)制、作用部位、發(fā)揮效能過程和臨床應(yīng)用，應(yīng)進(jìn)行更加深入細(xì)致地研究，為白芷的合理應(yīng)用提供試驗(yàn)基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支撐。

參考文獻(xiàn)

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