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    西瓜種質(zhì)資源表型精準(zhǔn)鑒定技術(shù)方案

    2020-12-23 09:40:59李娜尚建立周丹王吉明馬雙武
    中國(guó)瓜菜 2020年11期
    關(guān)鍵詞:表型西瓜資源

    李娜 尚建立 周丹 王吉明 馬雙武

    摘 ? ?要: 表型性狀是遺傳物質(zhì)在特定環(huán)境下的具體表現(xiàn),是進(jìn)行種質(zhì)/品種評(píng)價(jià)和遺傳多樣性研究的重要組成部分。筆者根據(jù)120份不同生態(tài)型的栽培西瓜種質(zhì)在代表我國(guó)西北、華北和華南生態(tài)區(qū)的新疆昌吉、河南新鄉(xiāng)和海南三亞進(jìn)行2 a(年)的品質(zhì)、形態(tài)特征和生物學(xué)特性等22個(gè)重要性狀的表型精準(zhǔn)鑒定,以及在枯萎病抗性鑒定、病毒病抗性鑒定、耐濕熱鑒定的基礎(chǔ)上,形成了規(guī)模化的西瓜種質(zhì)資源表型精準(zhǔn)鑒定方案,為西瓜種質(zhì)資源分發(fā)利用、種質(zhì)創(chuàng)新和基因挖掘提供參考,也可為西瓜新品種定向選育奠定基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞: 西瓜; 資源; 核心種質(zhì); 表型; 精準(zhǔn)鑒定

    中圖分類號(hào): S651 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: B 文章編號(hào): 1673-2871(2020)11-94-05

    為了解決西瓜種質(zhì)表型性狀鑒定標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一、鑒定數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確、利用不便和利用效率低等問(wèn)題,筆者課題組開(kāi)展了不同優(yōu)勢(shì)生產(chǎn)區(qū)域西瓜核心種質(zhì)資源多年的表型精準(zhǔn)鑒定和多年的抗性鑒定,基于筆者課題組老師主編或參與的《西瓜種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》[1]和《農(nóng)作物優(yōu)異種質(zhì)資源評(píng)價(jià)規(guī)范 西瓜》(NY/T 2387—2013)[2] 等著作或標(biāo)準(zhǔn)形成了規(guī)?;奈鞴戏N質(zhì)資源表型精準(zhǔn)鑒定技術(shù)方案,使表型數(shù)據(jù)的采集更加標(biāo)準(zhǔn)化,為西瓜種質(zhì)資源分發(fā)利用、創(chuàng)新種質(zhì)的篩選和創(chuàng)制提供參考,也為西瓜抗性和重要園藝性狀的基因挖掘、全基因組分子輔助育種、分子標(biāo)記輔助育種奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

    1 試驗(yàn)材料

    通過(guò)原有表型和基因型分析,從“國(guó)家西瓜甜瓜中期庫(kù)”中的西瓜種質(zhì)資源中選出120份不同生態(tài)型的栽培西瓜為材料。

    2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)及管理

    選擇能夠代表我國(guó)西北生態(tài)區(qū)、華北生態(tài)區(qū)和華南生態(tài)區(qū)的新疆昌吉、河南新鄉(xiāng)和海南三亞作為試驗(yàn)點(diǎn),每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)分別鑒定2 a。采用催芽播種,春夏生長(zhǎng)期地膜覆蓋露地栽培(新疆昌吉試驗(yàn)基地、河南新鄉(xiāng)試驗(yàn)基地2017年和2018年5—8月,海南三亞試驗(yàn)基地2017年12月至2018年4月、2018年12月至2019年4月),每份種質(zhì)重復(fù)3次,隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每次重復(fù)定植10株,行距2.0 m,株距0.4 m,雙蔓整枝,自然坐果,每株留1果(同一種質(zhì)不同重復(fù)間坐瓜節(jié)位盡可能保持一致),試驗(yàn)地周圍設(shè)置保護(hù)行。試驗(yàn)地按當(dāng)?shù)胤仕焦芾恚麑?shí)充分成熟后采收,并按小區(qū)、單瓜進(jìn)行性狀調(diào)查和采種,種子及時(shí)晾干并干燥處理。

    枯萎病抗性鑒定和病毒病抗性鑒定選擇苗期鑒定方法,2018—2019年春季在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹(shù)研究所所部溫室內(nèi)進(jìn)行。采用營(yíng)養(yǎng)缽育苗,營(yíng)養(yǎng)缽大小為8 cm×8 cm,每份種質(zhì)3次重復(fù),隨機(jī)排列,每個(gè)重復(fù)50粒種子,每個(gè)營(yíng)養(yǎng)缽5粒種子。

    耐濕熱鑒定在課題組實(shí)驗(yàn)室的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行。每份種質(zhì)3次重復(fù),每個(gè)重復(fù)30粒種子。

    3 表型鑒定方案

    本方案進(jìn)行精準(zhǔn)鑒定的表型性狀,涉及到西瓜重要的抗性性狀、品質(zhì)性狀、形態(tài)特征和生物學(xué)特性??剐孕誀畎菸】剐澡b定、病毒病抗性鑒定、耐濕熱鑒定;品質(zhì)性狀包括中心可溶性固形物含量和瓜瓤質(zhì)地;形態(tài)特征和生物學(xué)特性包括株型、雌花兩性花、子房形狀、主蔓長(zhǎng)度、坐果距離、果粉、果實(shí)質(zhì)量、果皮硬度、果皮底色、果皮覆紋形狀、果實(shí)形狀、瓜瓤顏色、果實(shí)長(zhǎng)度、果實(shí)寬度、果形指數(shù)、果皮厚度、種子長(zhǎng)度、種子寬度、種子厚度、種子千粒重。

    參照《西瓜種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》[1],結(jié)合實(shí)際操作中的流程改良設(shè)計(jì)并完成本實(shí)驗(yàn)方案。

    3.1 西瓜抗性鑒定

    3.1.1 枯萎病抗性鑒定[3] 西瓜枯萎病病菌為尖孢鐮刀菌西瓜專化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveurm)生理小種1菌種由本實(shí)驗(yàn)室使用菌土保存法保存。

    菌株活化:用保存的菌土育苗,待瓜苗發(fā)病后,采用組織分離法分離病原菌。取病苗根莖接合部上下各約1.0 cm的莖部,清水沖洗晾干,切成約0.5~1.0 cm的小段,消毒后接種于滅菌的PDA培養(yǎng)基平板上,于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)2 d后,光照培養(yǎng)約3 d至平板上長(zhǎng)出紫紅色孢子。將麥粒提前1 d浸泡,煮至熟透,濾干水分,分裝,121 ℃滅菌20 min備用。在長(zhǎng)滿孢子的PDA平板上加入無(wú)菌水,輕輕搖晃使孢子散入水中。將含有孢子體的水倒入麥粒中,在28 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)至紫紅色菌體長(zhǎng)滿麥粒(5~7 d)。

    菌土準(zhǔn)備:將長(zhǎng)滿尖孢鐮刀菌的麥粒磨碎后,與滅菌的沙土1∶50(體積比)混勻備用。

    種子準(zhǔn)備:每份種質(zhì)種子使用0.1%高錳酸鉀溶液消毒后用濕布包好室溫浸種16 h,甩干水分后,在33 ℃恒溫培養(yǎng)箱催芽36 h。

    接種鑒定:將準(zhǔn)備好的菌土用營(yíng)養(yǎng)缽裝好,溫室內(nèi)加溫苗床播種,設(shè)感病、抗病對(duì)照品種和保護(hù)行。抗性對(duì)照品種為‘Sugarlee(中期庫(kù)號(hào)ZXG00261),感病對(duì)照品種為‘蜜寶(中期庫(kù)號(hào)ZXG00216)。

    病情調(diào)查:出苗結(jié)束后拔除畸形苗,統(tǒng)計(jì)出苗數(shù),10 d后開(kāi)始發(fā)病并記載發(fā)病情況,4周左右待感病對(duì)照品種達(dá)到感病水平后統(tǒng)計(jì)各重復(fù)的活苗數(shù),計(jì)算死苗率。

    死苗率/%=100×(出苗數(shù)-活苗數(shù))/出苗數(shù)。

    抗病性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下:

    高抗(HR),0≤死苗率≤20%,賦值1;抗病(R),20%<死苗率≤40%,賦值3;中抗(MR),40%<死苗率≤60%,賦值5;感?。⊿),60%<死苗率≤80%,賦值7;高感(HS),死苗率>80%,賦值9。

    3.1.2 病毒病抗性鑒定[4] 小西葫蘆黃花葉病毒(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)病毒株由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹(shù)研究所古勤生博士惠贈(zèng)。

    種子準(zhǔn)備:每份種質(zhì)種子使用0.1%高錳酸鉀溶液消毒后用濕布包好室溫浸種16 h,甩干水分后,在33 ℃恒溫培養(yǎng)箱催芽36 h后播種于裝有滅菌基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽中。

    接種鑒定:在西瓜幼苗子葉平展期進(jìn)行接種。剪取攜帶植物病毒的葉片,放在研缽中并加入適量磷酸緩沖液研磨成汁液。澆透后,水噴濕葉面,在植物幼嫩的葉面上灑少許金剛砂,用紗布蘸取少量病樣汁液在灑了金剛砂的葉面上朝同一方向輕抹2~3次。接種后蓋膜保濕,遮陽(yáng)網(wǎng)遮陰暗培養(yǎng)2 d。之后去掉遮陽(yáng)網(wǎng)溫室常規(guī)生長(zhǎng)。設(shè)感病和抗病對(duì)照品種,抗病對(duì)照品種為‘PI 595203(中期庫(kù)號(hào)ZXG001562),感病對(duì)照品種為‘Sugarlee(中期庫(kù)號(hào)ZXG00261)。

    病情調(diào)查:接種1周后開(kāi)始觀察葉片癥狀表現(xiàn),接種35 d后調(diào)查發(fā)病情況:0級(jí):無(wú)任何感病癥狀;1級(jí):個(gè)別葉片褪綠斑或明脈;2級(jí):輕度花葉,形狀正常;3級(jí):嚴(yán)重花葉,形狀正常;4級(jí):嚴(yán)重花葉,葉片輕微變形;5級(jí):嚴(yán)重花葉,葉片嚴(yán)重畸形。

    抗病性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下:

    病情級(jí)數(shù)計(jì)算:RI=∑xini/N(RI-平均病情級(jí)數(shù);i-病害分級(jí)的各個(gè)級(jí)別;xi-病害級(jí)別;ni-相應(yīng)病害級(jí)別的株數(shù);N-調(diào)查總苗株數(shù)),抗病性分級(jí)如下:

    高抗(HR),RI<1.0,賦值1;抗(R),1.0≤RI<2.0,賦值3;中抗(MR),2.0≤RI<3.0,賦值5;感(S),3.0≤RI<4.0,賦值7;高感(HS),RI≥4.0,賦值9。

    3.1.3 耐濕熱鑒定[5-6] 每份種質(zhì)種子用濕布包好室溫浸種16 h,甩干水分后,分別放入高溫處理(40 ℃)和最適發(fā)芽溫度(33 ℃)的恒溫培養(yǎng)箱催芽。從處理的第3天起每天統(tǒng)計(jì)種子的發(fā)芽數(shù),至第7天各處理發(fā)芽種子數(shù)不再增加視為完全發(fā)芽。

    發(fā)芽率/%=(7 d內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/試驗(yàn)種子總數(shù))×100;

    發(fā)芽勢(shì)/%=(4 d內(nèi)正常發(fā)芽的種子總數(shù)/試驗(yàn)種子總數(shù))×100;

    相對(duì)發(fā)芽率/%=(40 ℃處理發(fā)芽率/33 ℃處理發(fā)芽率)×100;

    相對(duì)發(fā)芽勢(shì)/%=(40 ℃處理發(fā)芽勢(shì)/33 ℃處理發(fā)芽勢(shì))×100;

    根據(jù)每份種質(zhì)的相對(duì)發(fā)芽率和相對(duì)發(fā)芽勢(shì),分抗性級(jí)別如下:

    強(qiáng)(相對(duì)發(fā)芽勢(shì)、相對(duì)發(fā)芽率≥70%),賦值3;中(30%≤相對(duì)發(fā)芽勢(shì)、相對(duì)發(fā)芽率<70%),賦值5;弱(相對(duì)發(fā)芽勢(shì)、相對(duì)發(fā)芽率<30%),賦值7。

    3.2 西瓜重要園藝性狀精準(zhǔn)鑒定

    3.2.1 株型 開(kāi)花坐果盛期,目測(cè)觀察每株植株生長(zhǎng)狀態(tài)和枝葉的疏密程度,如圖1:

    叢生:(伸蔓晚,基部葉片多而緊密,蔓上葉片節(jié)間短、密,蔓分枝少、短),對(duì)照品種為‘日本短蔓(中期庫(kù)號(hào)ZXG00143),賦值1;

    緊湊(伸蔓正常,基部葉片少而疏,蔓上葉片節(jié)間較短、較密,蔓分枝較少、較短),對(duì)照品種為‘96B41(中期庫(kù)號(hào)ZXG00152),賦值2;

    疏散(伸蔓正常,基部葉片少而疏,蔓上葉片節(jié)間長(zhǎng)、稀,蔓長(zhǎng)),對(duì)照品種為‘鄭引64號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG00104),賦值3。

    3.2.2 雌花兩性花 開(kāi)花坐果盛期,目測(cè)觀察每株主蔓至少2朵雌花中有無(wú)正常雄蕊,如圖2:

    單性花(雌花柱頭周圍沒(méi)有雄蕊),對(duì)照品種為‘96B41(中期庫(kù)號(hào)ZXG00152),賦值0;

    兩性花(雌花柱頭周圍有雄蕊并能產(chǎn)生正常的花粉),對(duì)照品種為‘火星(中期庫(kù)號(hào)ZXG00988),賦值1。

    3.2.3 子房形狀 開(kāi)花坐果盛期,目測(cè)觀察每株主蔓上至少2朵雌花子房側(cè)面呈現(xiàn)的形狀,如圖3:

    圓(縱徑和橫徑基本相同),賦值1;橢圓(介于圓和長(zhǎng)之間),賦值2;長(zhǎng)(縱徑明顯大于橫徑,顯得細(xì)長(zhǎng)),賦值3。

    3.2.4 主蔓長(zhǎng)度 果實(shí)成熟采收時(shí),用卷尺測(cè)量主蔓從子葉節(jié)到蔓頂端的最大距離,單位為m,精確到0.1 m。

    3.2.5 坐果距離 果實(shí)成熟采收時(shí),目測(cè)70%植株的坐果位置,并用卷尺測(cè)量主蔓子葉節(jié)到坐瓜節(jié)位之間的瓜蔓長(zhǎng)度,單位為m,精確到0.1 m。

    3.2.6 果粉 果實(shí)成熟采收時(shí),目測(cè)和手拂的方法觀察果實(shí)表面是否附著一層白色粉狀物,如圖4:

    無(wú)(果實(shí)表面無(wú)白色的粉狀物,用手拂過(guò)時(shí)沒(méi)有果粉脫落),對(duì)照品種為‘撫州瓜(中期庫(kù)號(hào)ZXG00386),賦值0;

    有(果實(shí)表面有一層白色的粉狀物,用手拂過(guò)時(shí)有明顯的果粉脫落),對(duì)照品種為‘鄭引64號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG00104),賦值1。

    3.2.7 果實(shí)質(zhì)量 果實(shí)成熟采收時(shí),用秤秤出成熟果實(shí)的質(zhì)量,單位為kg,精確到0.1 kg。

    3.2.8 果皮硬度 果實(shí)成熟采收時(shí),用硬度計(jì)測(cè)量果皮陽(yáng)面中部的硬度值,單位為kg·cm-2,精確到0.1 kg·cm-2。

    3.2.9 果皮底色 果實(shí)成熟采收時(shí),參照RHS植物比色卡上最接近代碼的顏色特征目測(cè)確定果實(shí)表面最底層的顏色或覆紋間的顏色:

    黃(FAN1 6 A),對(duì)照品種為‘黃金皮-3(中期庫(kù)號(hào)ZXG00088),賦值1;綠白(FAN4 192 D),對(duì)照品種為‘河南三白瓜(中期庫(kù)號(hào)ZXG00188),賦值2;淺綠(FAN3 134 C),對(duì)照品種為‘紅寶石(中期庫(kù)號(hào)ZXG00349),賦值3;綠(FAN3 140 A),對(duì)照品種為‘美國(guó)大花皮(中期庫(kù)號(hào)ZXG00790),賦值4;深綠(FAN3 135 A),對(duì)照品種為‘火星(中期庫(kù)號(hào)ZXG00988),賦值5;墨綠(FAN4 189 A),對(duì)照品種為‘PI 502319(中期庫(kù)號(hào)ZXG02079),賦值6。

    3.2.10 果皮覆紋形狀 果實(shí)成熟采收時(shí),目測(cè)的方法觀察果實(shí)表皮的覆紋呈現(xiàn)的形狀,如圖5:

    網(wǎng)紋(覆紋呈連續(xù)的細(xì)網(wǎng)狀,經(jīng)過(guò)的地方果皮底色可見(jiàn),邊緣不明顯),對(duì)照品種為‘鄭引65號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG01517),賦值1;齒條(覆紋呈連續(xù)的窄條狀,經(jīng)過(guò)的地方果皮底色不可見(jiàn),有鋸齒狀突出、邊緣明顯),對(duì)照品種為‘紅寶石(中期庫(kù)號(hào)ZXG00349),賦值2;條帶(覆紋呈連續(xù)的寬條狀,經(jīng)過(guò)的地方果皮底色不可見(jiàn),有斑狀突出、邊緣不明顯),對(duì)照品種為‘All Sweet 3-1(中期庫(kù)號(hào)ZXG00445),賦值3;放射條(覆紋呈不連續(xù)的條狀,經(jīng)過(guò)的地方果皮底色不可見(jiàn),呈斑塊輻射狀、邊緣不明顯),對(duì)照品種為‘滿堂紅(中期庫(kù)號(hào)ZXG01514),賦值4;斑點(diǎn)(覆紋呈不連續(xù)的斑點(diǎn)狀,經(jīng)過(guò)的地方果皮底色不可見(jiàn),在果皮上不規(guī)則分布、邊緣明顯),對(duì)照品種為‘Moon and Star(中期庫(kù)號(hào)ZXG01626),賦值5。

    3.2.11 果實(shí)形狀 果實(shí)成熟采收時(shí),目測(cè)果實(shí)的形狀,如圖6:

    圓(縱徑和橫徑基本相同),對(duì)照品種為‘太陽(yáng)西瓜(中期庫(kù)號(hào)ZXG01304),賦值1;橢圓(介于圓和長(zhǎng)之間),對(duì)照品種為‘PI 635594(中期庫(kù)號(hào)ZXG01854),賦值2;長(zhǎng)(縱徑明顯大于橫徑),對(duì)照品種為‘菲88-110(中期庫(kù)號(hào)ZXG01307),賦值3。

    3.2.12 瓜瓤顏色 果實(shí)成熟采收時(shí),用刀沿果實(shí)中心縱切后,參照RHS植物比色卡上最接近代碼的顏色特征目測(cè)確定果實(shí)縱切后瓜瓤所呈現(xiàn)的顏色,果實(shí)剖面拍照備查:白,對(duì)照品種為‘河南三白瓜(中期庫(kù)號(hào)ZXG00188),賦值1;乳白(FAN4 N155 B),對(duì)照品種為‘PI 279462(中期庫(kù)號(hào)ZXG02017),賦值2;黃(FAN1 5 A),對(duì)照品種為‘黃玫(中期庫(kù)號(hào)ZXG00185),賦值3;橙黃(FAN1 17 B),對(duì)照品種為‘太原1號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG00655),賦值4;粉紅(FAN1 55 B),對(duì)照品種為‘96B41(中期庫(kù)號(hào)ZXG00152),賦值5;大紅(FAN1 45 AB),對(duì)照品種為‘鄭引43號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG00090),賦值6。

    3.2.13 中心可溶性固形物含量 果實(shí)成熟采收時(shí),用刀沿果實(shí)中心縱切后,用手持折光儀測(cè)定果實(shí)中心瓜瓤可溶性固形物含量,以%表示。

    3.2.14 瓜瓤質(zhì)地 果實(shí)成熟采收時(shí),用刀沿果實(shí)中心縱切后,用品嘗的方法根據(jù)口感的軟硬、致密程度和汁液多少綜合評(píng)價(jià)瓜瓤質(zhì)地:

    軟(瓜瓤質(zhì)地較松、汁液少),對(duì)照品種為‘紅籽瓜(中期庫(kù)號(hào)ZXG00637),賦值1;沙(瓜瓤質(zhì)地松、汁液少),對(duì)照品種為‘阜陽(yáng)3號(hào)(中期庫(kù)號(hào)ZXG00154),賦值2;脆(瓜瓤質(zhì)地實(shí)、汁液多),對(duì)照品種為‘96B41(中期庫(kù)號(hào)ZXG00152),賦值3;硬(瓜瓤質(zhì)地很實(shí)、汁液較多),對(duì)照品種為‘PI 174103(中期庫(kù)號(hào)ZXG01946),賦值4。

    3.2.15 果實(shí)長(zhǎng)度 果實(shí)成熟采收時(shí),用刀沿果實(shí)中心縱切后,用卷尺測(cè)量果實(shí)縱切面從基部邊緣到頂部邊緣之間的最大距離,單位為cm,精確到0.1 cm。

    3.2.16 果實(shí)寬度 用卷尺測(cè)量3.2.15中選取果實(shí)縱切面與果實(shí)縱軸垂直方向兩邊緣之間的最大距離,單位為cm,精確到0.1 cm。

    3.2.17 果形指數(shù) 根據(jù)3.2.15和3.2.16每個(gè)果實(shí)的長(zhǎng)度和寬度數(shù)據(jù),計(jì)算出果實(shí)的果形指數(shù)。果形指數(shù)=果實(shí)長(zhǎng)度/果實(shí)寬度。

    3.2.18 果皮厚度 用卷尺測(cè)量3.2.15中選取果實(shí)果皮陽(yáng)面中部從外果皮到內(nèi)果皮之間的距離,單位為cm,精確到0.1 cm。

    3.2.19 種子長(zhǎng)度 在果實(shí)成熟采收后,每個(gè)果實(shí)采收的種子中隨機(jī)選取20粒飽滿的種子,測(cè)量結(jié)束后放回混勻,再隨機(jī)選取,共3次。用游標(biāo)卡尺測(cè)量每粒種子喙部到尾部邊緣之間的最大距離,單位為mm,精確到0.01 mm。60次測(cè)量的平均值作為該果實(shí)種子厚度的性狀值。

    3.2.20 種子寬度 用游標(biāo)卡尺測(cè)量3.2.19中選取種子種面與種子縱軸垂直方向兩邊緣之間的最大距離,單位為mm,精確到0.01 mm。60次測(cè)量的平均值作為該果實(shí)種子厚度的性狀值。

    3.2.21 種子厚度 用游標(biāo)卡尺測(cè)量3.2.19中選取種子平放時(shí)上下表面之間的最大距離,單位為mm,精確到0.01 mm。60次測(cè)量的平均值作為該果實(shí)種子厚度的性狀值。

    3.2.22 種子千粒重 在果實(shí)成熟采收后,每個(gè)果實(shí)采收的種子中隨機(jī)選取20粒飽滿的種子,測(cè)量結(jié)束后放回混勻。用千分之一的天平稱重,單位為g,精確到0.01 g。20粒重?fù)Q算為千粒重。3次測(cè)量值的平均值作為該果實(shí)種子千粒重的性狀值。

    4 數(shù)據(jù)處理及分析

    每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)有3次重復(fù),每次重復(fù)至少取5個(gè)樣品。目測(cè)、品嘗等感官質(zhì)量數(shù)據(jù)的采集需具有專業(yè)知識(shí)的人員至少3人同時(shí)進(jìn)行。所采集數(shù)量性狀的數(shù)據(jù),根據(jù)3次重復(fù)的觀測(cè)值,使用Excel軟件統(tǒng)計(jì)每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)性狀的最大值、最小值、平均值、變異系數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差,特異的測(cè)量值做缺失處理,平均值做為該試驗(yàn)點(diǎn)種質(zhì)的性狀值。計(jì)算每份種質(zhì)不同試驗(yàn)點(diǎn)性狀值的平均數(shù)、變異系數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差,并利用SAS的Anova程序進(jìn)行方差分析,判斷試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。結(jié)合試驗(yàn)點(diǎn)當(dāng)年的環(huán)境條件判斷數(shù)據(jù)的合理性和特定性狀數(shù)據(jù)整體差異的原因。生長(zhǎng)不正常的年份和小區(qū)數(shù)據(jù)不予統(tǒng)計(jì)。

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