不同水平酵母菌提取物對(duì)馬生長性能、免疫機(jī)能及糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響

王 勇， 王懷棟，郭永清

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭014109）

純血馬具有體格高大、速度快、耐勞、遺傳性穩(wěn)定、種用價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)，是世界公認(rèn)的最優(yōu)秀騎乘馬品種之一，從18世紀(jì)開始，各個(gè)國家將純血馬引入并進(jìn)行繁殖（趙宇飛，2019）。益生菌具有無殘留、綠色安全、易生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，可以促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育，調(diào)整腸道內(nèi)菌群平衡，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能及免疫機(jī)能等，被廣泛應(yīng)于畜禽養(yǎng)殖中（陳宏銳，2019；趙國清，2019）。 酵母菌是一種兼性厭氧微生物，該菌不僅富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素及礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)物質(zhì)，還含有活性因子及多種消化酶類（許國洋，2019；仲偉光，2018）。研究表明，酵母菌制劑可以提高牛、羊、豬、雞等多種動(dòng)物生長性能（劉政，2017）。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的酵母菌提取物，研究其對(duì)純血馬駒生長性能、免疫機(jī)能及糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響，為酵母菌提取物在臨床進(jìn)一步應(yīng)用與推廣提供研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器 酵母菌提取物為固體粉末狀，主要成分為甘露寡糖（純度≥65%），購自山東寶來利來生物工程股份有限公司；免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細(xì)胞因子（IL-2、IL-6）ELISA Kit，購自南京建成生物研究所；乳酸桿菌培養(yǎng)基、大腸桿菌桿菌顯色培養(yǎng)基、雙歧桿菌培養(yǎng)基，購自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理 采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn)，于2019年7～8月，在包頭市良種馬繁殖基地選擇8月齡體重相近的純血馬駒40匹，隨機(jī)分成4個(gè)組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1匹，1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加1.0%、2.0%、3.0%的酵母菌提取物，試驗(yàn)期為28 d。每個(gè)重復(fù)組單獨(dú)飼喂，每天定時(shí)3次飼喂，先精后粗、少量多次，自由飲水。按照常規(guī)飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行飼養(yǎng)與管理，定期免疫、驅(qū)蟲與養(yǎng)殖場(chǎng)消毒。試驗(yàn)馬的基礎(chǔ)飼糧營養(yǎng)水平參考NRC（2007）馬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，制成顆粒飼料，其日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成與營養(yǎng)水平%

1.3 生長性能的測(cè)定 在試驗(yàn)期間，對(duì)每個(gè)重復(fù)組的純血馬駒空腹稱重，記錄試驗(yàn)開始的體重和試驗(yàn)結(jié)束的體重及投料量和剩料。測(cè)定總增重、平均日增重指標(biāo)。

1.4 免疫指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)抽取5匹純血馬駒頸靜脈采血3 mL，離心分離血清。按照說明書測(cè)定血清中免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細(xì)胞因子（IL-2、IL-6）的含量。

1.5 糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的測(cè)定 參考何佳（2017）報(bào)道的方法，試驗(yàn)結(jié)束前5 d，采集每個(gè)組的新鮮糞便樣品，經(jīng)處理后，分別接種于乳酸桿菌培養(yǎng)基、大腸桿菌桿菌顯色培養(yǎng)基、雙歧桿菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)與菌落計(jì)數(shù)，記錄每克糞便中所含乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌總數(shù)，用對(duì)數(shù)（log10 cfu/g）表示。

1.6 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)結(jié)果以 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行均值比較，以P＜0.05表示差異顯著性。

2 結(jié)果

2.1 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬生長性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋鼐哂?組，其中試驗(yàn)2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋剌^1組分別提高17.9%、10.2%、15.1%、19.2%（P ＜ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗(yàn) 2、3、4 組的平均采食量均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬生長性能的檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬免疫機(jī)能的影響 由表3可知，試驗(yàn) 2、3、4組血清中 IgG、IgA、IL-2的含量均高于1組，其中試驗(yàn)2組高于1組，差異性不顯著 （P＞0.05）， 試驗(yàn)3、4組IgG、IgA、IL-2的含量含量較1組相比分別提高11.8%、14.7%、9.3%、10.1%、20.5%、28.5%（P ＜ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4組之間相比，差異性不顯著 （P ＞ 0.05）；試驗(yàn)2、3、4組血清中的 IgM、IL-6含量均高于 1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬免疫機(jī)能的檢測(cè)結(jié)果ng/mL

2.3 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響 由表4可知，試驗(yàn)2、3、4組糞便中大腸桿菌的含量均低于1組，其中試驗(yàn)2組與1組相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05），試驗(yàn) 3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組分別降低18.5%、19.1% （P ＜ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗(yàn) 2、3、4 組糞便中雙歧桿菌的含量均高于1組，其中試驗(yàn)2組高于1組比，差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組糞便中雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高5.2%、6.7%（P＜0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P＞ 0.05）；試驗(yàn) 2、3、4組糞便中乳酸桿菌的含量均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表4 不同水平酵母菌提取物對(duì)馬糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的檢測(cè)結(jié)果lg cfu/g

3 討論

研究表明，酵母菌富含多種營養(yǎng)物質(zhì)及活性物質(zhì)，酵母菌制劑或含酵母菌的益生菌制劑可以提高動(dòng)物生長性能。楊帆等（2015）報(bào)道，在哺乳馬駒日糧中添加一定量的枯草芽孢桿菌制劑和植物乳桿菌制劑能夠提高馬駒增重。任宏（2019）等報(bào)道，飼料中添加 5.0%的復(fù)合微生態(tài)制劑，可以提高蒙古馬的生長性能。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組的平均采食量均高于1組（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋剌^1組分別提高7.9%、10.2%、15.1%、19.2%（P ＜0.05）， 說明不同水平的酵母菌提取物可以提高純血馬駒生長性能。本試驗(yàn)與上述報(bào)道的結(jié)果基本一致?？赡苡捎诮湍妇崛∥锔缓喾N消化酶類，可促進(jìn)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)的消化與吸收，增加采食量，提高飼料利用率，因而提高純血馬駒生長性能。

動(dòng)物機(jī)體內(nèi)免疫系統(tǒng)主要包括體液免疫和細(xì)胞免疫，免疫蛋白IgG、IgA、IgM主要誘導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答主要物質(zhì)，在動(dòng)物機(jī)體免疫中起著重要作用，IL-2、IL-6是介導(dǎo)細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞因子，參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，在免疫過程中具有重要作用（賈紅杰，2019；張召興，2017）。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)3、4組IgG、I-gA、IL-2的含量較1組相比分別提高 11.8%、14.7%、9.3%、10.1%、20.5%、28.5%（P ＜ 0.05），試驗(yàn)2、3、4組血清中的IgM、IL-6含量均高于1組（P＞0.05），說明不同水平的酵母菌提取物可以提高純血馬駒血清中免疫球蛋白和細(xì)胞因子的含量，提高其免疫機(jī)能?？赡苡捎诮湍妇崛∥锼事豆烟堑然钚晕镔|(zhì)可刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，促進(jìn)漿細(xì)胞分泌抗體和細(xì)胞因子分泌，提高機(jī)體的免疫機(jī)能。這與任宏（2019）等報(bào)道的結(jié)果一致。

動(dòng)物腸道中富含多種微生物菌群，當(dāng)腸道內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)不平衡時(shí)，會(huì)引起動(dòng)物一系列的腸道疾病，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡，動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu)的平衡，對(duì)動(dòng)物健康具有重要意義（鄧琳，2019）。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)3、4組糞便中雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高5.2%、6.7% （P＜0.05），試驗(yàn)3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組相比分別降低 19.1%、18.5% （P ＜ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組糞便中乳酸桿菌的含量均高于1組（P＞0.05）。說明不同水平的酵母菌提取物可以改善純血馬駒腸道菌群結(jié)構(gòu)，降低糞便中大腸桿菌含量，提高糞便中雙歧桿菌和乳酸桿菌的含量。由于酵母菌提取物的添加可以有效提高腸道內(nèi)有益菌的生長繁殖，抑制有害菌的生長，從而達(dá)到調(diào)節(jié)腸道菌群平衡的作用。其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

酵母菌提取物可以提高純血馬駒生長性能和免疫機(jī)能，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，抑制有害菌生長，提高有益菌生長，以3.0%的添加量為適宜。