基于活血化瘀理論的中藥配伍防治腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制

張琛朱慧淵王江韋克克萬海同

1.陜西中醫(yī)藥大學(xué) 陜西，咸陽 712046 2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)

腦缺血再灌注損傷（cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI）是因腦部血管破裂或血管阻塞導(dǎo)致大腦相應(yīng)區(qū)域失去正常灌注，缺血后血流灌注恢復(fù)導(dǎo)致的組織損傷和功能障礙[1]，其最顯著的特點是高致死率、高致殘率和高復(fù)發(fā)率[2]。以往研究表明，調(diào)控炎癥反應(yīng)對于CIRI的治療具有重要作用[3]，而活血化瘀法作為中醫(yī)基本治則，具有拮抗CIRI的炎癥反應(yīng)、減輕氧化應(yīng)激損傷等積極作用[4-5]。本文擬總結(jié)探討活血化瘀法防治CIRI炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制，現(xiàn)綜述如下。

1 炎癥反應(yīng)與CIRI

隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展，炎癥反應(yīng)在CIRI病理生理過程中的地位和作用也逐漸受到人們的認(rèn)識和重視。腦血管內(nèi)大量白細(xì)胞的浸潤、炎癥介質(zhì)的增加與血管異常反應(yīng)是CIRI炎癥反應(yīng)的特點[6]。劉進(jìn)國等[7]研究指出，機(jī)體內(nèi)炎性因子的釋放對CIRI的病理生理改變具有直接影響，并與患者預(yù)后密切相關(guān)，故防治炎癥反應(yīng)是改善CIRI患者癥狀的關(guān)鍵措施之一。

CIRI發(fā)病過程中，許多局部炎性因子、趨化因子和白細(xì)胞粘附分子表達(dá)上調(diào)。核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）信號通路被證實可影響多種下游炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，這些細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[8]。NF-κB是參與炎癥過程的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，發(fā)生CIRI時被激活，進(jìn)一步誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-1（interleukin-1，IL-1）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等炎性細(xì)胞因子表達(dá)，并導(dǎo)致神經(jīng)元死亡。IL-1、IL-17是NF-κB的兩個重要誘導(dǎo)因子，IL-17可通過與NF-κB銜接蛋白激活劑1（activator 1，ACT1）結(jié)合，并與IL-1共同作用，上調(diào)NF-κB表達(dá)；還可激活炎癥反應(yīng)，同時作用于不同的靶細(xì)胞，誘導(dǎo)其他細(xì)胞因子產(chǎn)生，參與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)，觸發(fā)炎癥遞質(zhì)釋放，導(dǎo)致高凝狀態(tài)[9]。抑制ACT1可以下調(diào)IL-17 表達(dá)[10-11]，從而抑制 NF-κB 通路的激活[12]。研究證實，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）可以激活許多炎癥細(xì)胞（如單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞），引起相關(guān)細(xì)胞因子的合成以及釋放，最終導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生，以上效應(yīng)都與NF-κB信號通路密切相關(guān)[13]。

2 瘀血證與炎癥反應(yīng)的相關(guān)性研究

近年來，瘀血證一直是CIRI研究中較為活躍的領(lǐng)域，基礎(chǔ)研究主要集中在瘀血證與炎癥、血流動力學(xué)、血小板功能、微循環(huán)等方面?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)的炎癥反應(yīng)是指組織細(xì)胞發(fā)生不同程度的形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷、充血、腫脹、滲出、變性、血管破壞或增生栓塞、局部缺血、缺氧，并伴有代謝機(jī)能改變、循環(huán)障礙、血流變異等過程。研究發(fā)現(xiàn)，以上許多過程都與瘀血證有著密切的關(guān)系[14]。

研究已證實，NF-κB信號通路的激活與瘀血狀態(tài)密切相關(guān)[15]。NF-κB信號通路異?；罨螅梢鹁植垦仔约?xì)胞浸潤，并促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致微血管損傷；又可以促進(jìn)組織因子的表達(dá)而影響凝血功能，引起微循環(huán)障礙[15]。瘀血證與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、免疫反應(yīng)、能量代謝障礙有著密切的關(guān)系，活血化瘀法治療CIRI能夠改善內(nèi)皮細(xì)胞功能，還具有抗炎和調(diào)節(jié)免疫的作用[16]。

3 活血化瘀法與CIRI

中醫(yī)學(xué)并無CIRI的相關(guān)記載，根據(jù)患者臨床表現(xiàn)，通?？蓪⑵錃w于“中風(fēng)”“卒中”范疇?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》記載本病具有猝然昏倒、不省人事，伴語言不利、口角歪斜、半身不遂等臨床特點[17]，并指出其基本病機(jī)一是陰陽平衡失調(diào)，肝陽化風(fēng)，風(fēng)痰上擾，氣血上沖犯腦；二為血瘀阻滯或痰瘀阻滯，瘀阻脈絡(luò)，氣血失于流暢，由此可見瘀滯是中風(fēng)的主要病因和病理產(chǎn)物。清代名醫(yī)張錫純指出，治療中風(fēng)病應(yīng)以活血化瘀為基本大法，其所著《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》有云：“……因氣血虛者，其經(jīng)絡(luò)多瘀滯，此于偏枯痿廢亦頗有關(guān)系，加此通氣活血之品，以化其經(jīng)絡(luò)之瘀滯，則偏枯痿廢者自易愈也。”[18]高原等[19]研究發(fā)現(xiàn)，活血化瘀方藥聯(lián)合應(yīng)用能夠有效降低實驗大鼠機(jī)體內(nèi)氧化應(yīng)激損傷和炎性反應(yīng)，并能夠抑制細(xì)胞凋亡，降低缺血再灌注損傷對機(jī)體的損害程度。另外，常紅恩等[20]研究發(fā)現(xiàn)，通竅活血湯能降低CIRI大鼠炎癥細(xì)胞因子的水平，進(jìn)而減輕CIRI的程度，起到保護(hù)腦組織的作用。陳裕琳等[21]提取丹參和紅花的有效成分，采用正交實驗法進(jìn)行配伍并作用于CIRI大鼠，結(jié)果表明各配伍組均能抑制CIRI大鼠的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、減輕炎癥損傷。崔一然[22]研究發(fā)現(xiàn)，丹紅注射液抗腦缺血作用靶點是由12個蛋白組成的蛋白網(wǎng)絡(luò)，其作用還涉及到了Wnt信號通路、腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）信號通路和絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號通路等多條信號通路。由此可見，活血化瘀法作為中風(fēng)的基本治則，其不僅能在抗氧化、抑制細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮作用，同時能夠拮抗CIRI后的炎癥反應(yīng)，因此，活血化瘀治療已成為現(xiàn)代CIRI治療研究的主要方向之一。

近年來對活血化瘀藥物治療CIRI的研究表明，活血化瘀類藥物川芎的有效成分川芎嗪具有擴(kuò)張腦動脈，增加缺血區(qū)腦組織供血的作用，從而能夠改善腦組織的形態(tài)與功能[23]。丹參可以改善血液流變性，防止血小板聚集與粘附，減輕血管痙攣；其有效成分丹參酮ⅡA磺酸鈉和丹參素還可降低脂質(zhì)過氧化物含量，穩(wěn)定生物膜，具有抗氧化作用[24]。另有研究發(fā)現(xiàn)，采用丹參、川芎等藥物治療CIRI后，凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯減少，說明活血化瘀類藥物具有抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用[25]。

4 活血化瘀中藥配伍防治CIRI炎癥反應(yīng)的研究

常見的活血化瘀類中藥主要有桃仁、丹參、紅花、川芎、赤芍等，紅花-丹參作為具有活血化瘀作用的經(jīng)典藥對，不僅是許多經(jīng)典方劑的核心藥物，而且是臨床治療CIRI的常用有效藥物?；钛鲋兴幍挠行С煞挚勺饔糜贗L家族、MAPK家族和TNF等靶點基因，參與調(diào)控早期炎癥與后續(xù)炎癥反應(yīng)。本文主要探討丹參、紅花及二者的提取物制備的丹紅注射液抗CIRI炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制。

丹參（Salvia miltiorrhiza Bunge），味苦、微辛，性微寒，屬心、脾、肝、腎血分之藥，具有活血祛瘀、養(yǎng)血安神、涼血消腫的功效，主治瘀血頭、胸、脅、腹疼痛，積聚，月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)經(jīng)閉，產(chǎn)后瘀滯腹痛，關(guān)節(jié)痹痛，跌打瘀腫，瘡瘍腫毒，丹疹疥癬?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》言其能“破癥除瘕，止煩滿”[26]，《名醫(yī)別錄》載其能“去心腹痼疾結(jié)氣”[27]，《本草綱目》直言其能“活血，治疝痛”[28]615。丹參的有效成分主要包括脂溶性的丹參酮類，如丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹參酮ⅡB、丹參酸甲酯等和水溶性的酚酸類，如丹參素、丹參酸B、丹參酸C等。研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮Ⅰ可通過加強(qiáng)心肌收縮力，改善心臟功能，減少心肌耗氧量；并能擴(kuò)張冠狀動脈，增加心肌血流量[29]；還能夠提高纖溶酶活性，延長出、凝血時間，抑制血小板聚集，改善血液流變學(xué)特性[30]。丹參酮ⅡA是丹參酮的主要活性成分，可有效抑制LPS誘導(dǎo)的人外周血細(xì)胞TNF-α和IL-6的表達(dá)，下調(diào)血清炎性細(xì)胞因子的水平[31]。

紅花（Carthamus tinctorius L.），性味辛溫，具有活血通經(jīng)、去瘀止痛的功效，主治經(jīng)閉、癥瘕、難產(chǎn)、死胎、產(chǎn)后惡露不行及瘀血作痛、癰腫、跌撲損傷。據(jù)《中華本草》記載，紅花主治產(chǎn)后血運(yùn)口噤，腹內(nèi)惡血不盡、絞痛，胎死腹中等[32]。《本草綱目》言其能“活血，止痛，散腫，通經(jīng)”[28]794。紅花的有效成分主要為羥基紅花黃色素A，能夠抑制 NF-κB的活化，減少TNF-α的產(chǎn)生，從而改善LPS誘導(dǎo)的組織損傷；此外還可調(diào)節(jié)纖維蛋白酶原激活劑與抑制劑之間的動態(tài)平衡，降低全血黏度，改善CIRI[33]。

臨床應(yīng)用的丹紅注射液是由丹參及紅花按一定科學(xué)配比提取的中藥制劑，主要功效為活血化瘀、通脈舒絡(luò)，臨床應(yīng)用不良反應(yīng)小，有效性及安全性較高?，F(xiàn)代藥理學(xué)實驗證實，丹紅注射液通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB的激活，從而減少TNF-α、IL-1β和IL-10的分泌[34-36]；還能良好地調(diào)節(jié)促炎、抗炎因子的平衡，抑制炎性因子的過量釋放[37]，這與中醫(yī)學(xué)上的陰陽平衡理論不謀而合，從而有助于維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，減輕腦組織損傷，防止病情進(jìn)展，改善患者預(yù)后。

5 小結(jié)與展望

綜上所述，活血化瘀法可以從不同方面通過不同途徑防治CIRI炎癥反應(yīng)[38]，不僅能明顯改善腦梗死區(qū)的供血供氧狀況，增加腦細(xì)胞的活力和腦組織對缺氧的耐受性，還可以通過多種不同的機(jī)制保護(hù)腦組織。然而，活血化瘀中藥在CIRI的治療中發(fā)揮較好療效的同時，也存在著一些問題，如中藥發(fā)揮作用較慢，而CIRI的治療時間窗較短；另外中藥的量效關(guān)系一直是阻礙中藥被國際市場認(rèn)可的重要因素。隨著醫(yī)藥科技的發(fā)展，丹紅注射液等中藥制劑的出現(xiàn)，有效解決了中藥發(fā)揮作用慢的問題，但目前對于活血化瘀中藥的量效關(guān)系的研究尚在進(jìn)行中，進(jìn)一步研究將著眼于活血化瘀中藥作用于CIRI不同時期的量效關(guān)系，以期優(yōu)化CIRI的治療方案，指導(dǎo)臨床合理用藥，并為新藥開發(fā)提供理論數(shù)據(jù)支撐[39]。