殺菌劑對(duì)櫻花枝枯病菌葡萄座腔菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

胡沖吳道軍

(1.重慶市風(fēng)景園林科學(xué)研究院，重慶 401329；2.重慶市城市園林綠化工程技術(shù)研究中心，重慶 401329)

櫻花是園林植物中重要的觀花植物，也是重慶市春季賞花的重要植物。據(jù)報(bào)道，櫻花常見病害有根癌病、葉枯病和穿孔性褐斑病[1]，但重慶市櫻花近年來(lái)多次發(fā)生枝枯病，與張宗俠報(bào)道的枝干潰瘍病[2]、枯梢病、爛皮病、腐爛病癥狀相似。枝枯病嚴(yán)重影響櫻花的開花質(zhì)量，影響枝條的正常生長(zhǎng)，甚至導(dǎo)致枝條枯萎，植株死亡(圖1)?？葜Σ〔【饕衅咸炎痪?botryosphaeria dothidea)[3,4]、莖點(diǎn)霉屬(Phomopsis)[5,6]、炭疽菌屬(Colletotrichum)[7]等。國(guó)內(nèi)學(xué)者比較了氟硅唑、嘧菌酯、氟啶胺、咪鮮胺、多菌靈、苯醚甲環(huán)唑等藥劑[8,9]，其中，氟硅唑、嘧菌酯、咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑等EC50較低，對(duì)枝枯病病原菌的抑制較強(qiáng)。本試驗(yàn)從重慶市南岸區(qū)分離得到的櫻花枝枯病病原菌葡萄座腔菌，根據(jù)文獻(xiàn)和農(nóng)藥市場(chǎng)情況，選擇5種低毒殺菌劑對(duì)其進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，以期為該病的防治提供依據(jù)。

圖1 櫻花枝枯病危害狀(整體照)

圖2 櫻花枝枯病危害狀(局部照)

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

病原菌來(lái)源：重慶市南岸區(qū)南山植物園櫻花枝枯病嫩枝中分離獲得。

培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)，馬鈴薯200.0g，葡萄糖20.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1000.0mL。

供試殺菌劑具體見表1。

表1 供試殺菌劑統(tǒng)計(jì)

1.2 試驗(yàn)方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[10]，測(cè)定5種殺菌劑對(duì)葡萄座腔菌的毒力。用無(wú)菌水將各藥劑稀釋成100倍液的母液，按照預(yù)設(shè)濃度所需的母液量分別加入滅菌的PDA中，充分搖勻后倒入培養(yǎng)皿中，配制成5個(gè)不同濃度的含藥PDA平板培養(yǎng)基(100μL·mL-1、20μL·mL-1、10μL·mL-1、5μL·mL-1、2L·mL-1)，每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù)，以無(wú)菌水培養(yǎng)基作為對(duì)照。

待平板冷卻后，無(wú)菌條件下將培養(yǎng)好的葡萄座腔菌，用直徑6mm的滅菌打孔器，從菌落邊緣切下菌餅，置于含藥平板中央，在27℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5d，十字交叉法測(cè)量菌落直徑，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

菌絲生長(zhǎng)抑制率(%)=[(對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-藥劑處理菌落增長(zhǎng)直徑)/對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑]×100%

根據(jù)上述公式分別計(jì)算不同供試藥劑各濃度對(duì)葡萄座腔菌的抑制率。利用Excel2010軟件計(jì)算出各藥劑對(duì)應(yīng)的毒力回歸方程、EC50值及相關(guān)系數(shù)r。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同供試藥劑對(duì)葡萄座腔菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果存在一定差異。在葡萄座腔菌菌絲生長(zhǎng)試驗(yàn)中，40%氟硅唑的抑制作用最強(qiáng)，EC50值為0.0034μL·mL-1；70%甲基硫菌靈的抑制作用次之，EC50值為0.0427μL·mL-1，45%咪鮮胺和50%多菌靈也有一定抑制作用，而40%苯醚甲環(huán)唑的抑制作用最弱，EC50值為36.8184μL·mL-1(見表2)。

表2 5種殺菌劑對(duì)葡萄座腔菌的毒力回歸方程

3 結(jié)論與討論

葡萄座腔菌能引起松樹枝梢病、楊樹潰瘍病、桃樹流膠病和櫻花枝枯病等病害[2]，也是許多木本植物和果樹的重要病原菌[11,12]。室內(nèi)藥效試驗(yàn)表明，5種藥劑對(duì)櫻花枝枯病菌葡萄座腔菌有一定防治效果，40%氟硅唑表現(xiàn)出最佳抑制效果，70%甲基硫菌靈、45%咪鮮胺和50%多菌靈對(duì)葡萄座腔菌有一定抑制作用，40%苯醚甲環(huán)唑的抑制作用最弱。氟硅唑作為廣譜殺菌劑，同時(shí)也是有機(jī)硅類殺菌劑，也屬三唑類內(nèi)吸性殺菌劑，可防治子囊菌綱、擔(dān)子菌綱和半知菌類真菌，曾爾玲等用40%的氟硅唑乳油防治藍(lán)莓枝枯病、EC50為0.0025g·L-1，與本試驗(yàn)中氟硅唑的毒力都較高，說(shuō)明氟硅唑在葡萄座腔菌枝枯病和擬盤多毛孢枝枯病的防效中具有重要參考價(jià)值。此外，復(fù)配藥劑也是防治枝枯病的一種趨勢(shì)，如，利用75%苯醚甲環(huán)唑·咪鮮胺猛鹽可濕性粉劑防治枝枯病，防效可達(dá)到75.0%～79.5%。為提高防效，可將氟硅唑與苯醚甲環(huán)唑等高毒力藥劑進(jìn)行復(fù)配。

由于櫻花苗木根系既不耐澇，也不抗旱，應(yīng)加強(qiáng)苗木管理，及時(shí)剪除病梢枯枝，清除雜草，并集中銷毀，減少病菌和蟲卵。加強(qiáng)園藝防治，有助于提高防效。枝條萌芽前應(yīng)注重防治病害，可采用涂抹0.3～0.5波美度石硫合劑對(duì)植株進(jìn)行噴霧，也可以于早春在櫻花枝干上涂抹石硫合劑，預(yù)防枝枯病的發(fā)生。

葡萄座腔菌致病力有差異，本次試驗(yàn)所采用的南山植物園樣品致病力有差異，不同品種的櫻花呈現(xiàn)的抗病性有差異，對(duì)于藥劑篩選的要求也有所不同。