溶磷菌組合WF542的篩選及多菌劑聯(lián)合對辣椒的促生作用

韓亞杰,李玉嬌,呂曉晨,何詩琪,艾柯代姆·穆海麥提,馬小寧

(1.石河子大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,新疆石河子 832003;2.新疆庫爾勒市第十一中學(xué),新疆庫爾勒 841000;3.石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院,新疆石河子 832003;4.新疆農(nóng)墾科學(xué)院農(nóng)業(yè)農(nóng)村部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心,新疆石河子 832000)

磷是植物生長發(fā)育所必需的大量營養(yǎng)元素之一,當(dāng)植株體內(nèi)缺磷,蛋白質(zhì)核酸、輔酶等重要生物分子的合成都會(huì)受到影響,進(jìn)而導(dǎo)致植物分枝減少,植株矮小?；蠎B(tài)中的磷由于與土壤中的Fe3+,Ca2+和Al3+等結(jié)合形成難溶磷酸鹽[1],導(dǎo)致土壤中95%以上的難溶性磷源不能直接被植物吸收利用[2]。為了達(dá)到增產(chǎn)增收的目的,每年必須向農(nóng)田土壤施入大量的可溶性磷肥[1]。磷肥利用率低不僅造成嚴(yán)重的資源浪費(fèi),還會(huì)使大量的磷素積累在土壤中,從而導(dǎo)致農(nóng)田及水體污染、農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)下降。隨著人們環(huán)保意識(shí)的加強(qiáng),發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè),生產(chǎn)安全、營養(yǎng)、綠色的農(nóng)產(chǎn)品成為21世紀(jì)世界農(nóng)業(yè)發(fā)展的主流。目前科學(xué)家們潛心研究傳統(tǒng)化學(xué)肥料的替代品。微生物菌肥技術(shù)是提高磷肥利用率最為有效的方法之一,對農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和環(huán)境保護(hù)具有重要意義,其中的溶磷菌是復(fù)合微生物菌肥的重要組成部分[3]。

溶磷微生物之間存在著各種關(guān)系,比如競爭關(guān)系、互利關(guān)系和中立關(guān)系等。溶磷微生物可以通過多菌株的互利共生關(guān)系實(shí)現(xiàn)其特定的生物學(xué)功能。張志鵬等[4]以復(fù)合微生物菌劑施加黃瓜,相比空白對照組黃瓜產(chǎn)量增加了43.63%～58.34%。李靜等[5]篩選的復(fù)合菌組合(PSM01+PSM12+PSM16)在提高土壤有效磷含量和促進(jìn)玉米植株生長方面效果顯著。由此可見多菌株組合,能得到促生性能更強(qiáng)的復(fù)合系統(tǒng)。

本研究對5株溶磷菌進(jìn)行鑒定,平板對峙法篩選溶磷菌組合并對其特性進(jìn)行分析,盆栽實(shí)驗(yàn)研究不同菌劑組合對辣椒幼苗的促生作用,為開發(fā)微生物肥料提供有價(jià)值的種質(zhì)資源,以此達(dá)到資源的充分利用,實(shí)現(xiàn)發(fā)展綠色農(nóng)業(yè)改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的目標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

HSYQ18、SYC3、WS54、FWG2和SCPG-7等5株溶磷菌 由實(shí)驗(yàn)室篩選獲得;褐球固氮菌(Azotobacterchroococcum)CICC21685 購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心;辣椒種子 新疆吉豐種業(yè)有限公司;LB液體(固體)培養(yǎng)基 蛋白胨10 g,酵母粉5 g,NaCl 5 g,加蒸餾水至1000 mL,pH7.0～7.2,121 ℃滅菌30 min,(20 g瓊脂粉),冷卻后備用;馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA) 馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂15～20 g,蒸餾水1000 mL,115 ℃高壓蒸汽滅菌20 min;Pikovskaya培養(yǎng)基(PKO)[6]葡萄糖10 g,Ca3(PO4)220 g,(NH4)2SO40.5 g,NaCl 0.3 g,KCl 0.3 g,MgSO4·7H2O 0.3 g,FeSO4·7H2O 0.03 g,MnSO4·4H2O 0.03 g,蒸餾水1000 mL,pH7.0～7.5,121 ℃濕熱滅菌20 min。

UV-2100紫外可見分光光度計(jì) 優(yōu)尼柯(上海)儀器有限公司;5418R冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf公司;LRH-150恒溫培養(yǎng)箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;ZQZY-70BS恒溫振蕩器 上海知楚儀器有限公司;MLS-3750高壓滅菌鍋 日本三洋公司;SW-CJ-ZFD超凈工作臺(tái) 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司;GZX-9140MBE電熱鼓風(fēng)干燥箱 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 溶磷菌的鑒定 理化性質(zhì)及形態(tài)學(xué)分類:按照文獻(xiàn)[7]做形態(tài)與生理生化分析。以細(xì)菌16S rDNA用引物27f(5′-AGAGTTTGATC-CTGGCTCAG-3′)和1492 r(5′-CGGTTACCTTGT-TACGACTTC-3′)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)條件:94 ℃ 5 min;94 ℃ 30 s,54 ℃ 30 s,72 ℃ 1.5 min,共35個(gè)循環(huán);7 ℃ 10 min[8]。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物提交生物公司進(jìn)行測序。將測序結(jié)果輸入到NCBI數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行BLAST比對[9]。

1.2.2 溶磷菌組合的篩選及特性

1.2.2.1 溶磷菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn) 將5株溶磷菌(HSYQ18、WS54、FWG2、SYC3和SCPG-7)在LB液體培養(yǎng)基上活化,移取100 μL菌懸液均勻涂布在PDA固體培養(yǎng)基上,然后將其它4株菌分別用接種環(huán)接種至已經(jīng)涂布菌懸液的PDA平板上,28 ℃下培養(yǎng)3 d后檢查結(jié)果,觀察相互之間有無抑菌圈[10]。

1.2.2.2 溶磷菌組合WF542的溶磷能力的測定 將50 mL液體PKO無機(jī)磷培養(yǎng)基裝入150 mL三角瓶,121 ℃滅菌20 min,冷卻后,分別將500 μL各待測菌株菌懸液(108cfu/mL)接種至三角瓶中[11]。每菌株設(shè)3個(gè)重復(fù),以基礎(chǔ)培養(yǎng)基(不接種菌株)為對照。將上述三角瓶置于28 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)5 d后,將培養(yǎng)液在10000 r/min、4 ℃離心15 min,取上清液,用鉬銻抗比色法測定溶磷量[12]。

1.2.2.3 溶磷菌組合WF542分泌嗜鐵素及IAA的測定 菌株分泌IAA的能力采用Glickmann的實(shí)驗(yàn)方法[13]測定。采用含鉻天青S的CAS瓊脂平板檢測菌株產(chǎn)生的嗜鐵素。觀察菌落周圍是否有淡黃色的暈圈產(chǎn)生[6]。分別用溶磷菌組合(WF542)的滅活菌液(CK)作為對照,定性檢測溶磷細(xì)菌分泌鐵載體能力。

1.2.2.4 溶磷菌組合WF542對溫度、pH、鹽分等生態(tài)因子的反應(yīng) 將LB液體培養(yǎng)基分裝至錐形瓶中,121 ℃滅菌30 min,備用。將OD600為1.0的WF542菌液以2%的接種量加至LB液體培養(yǎng)基中,溫度梯度為10、15、20、25、30、35、40、45 ℃,恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 h,每個(gè)溫度平行測定3次。分光光度計(jì)測量每個(gè)溫度下的菌懸液λ=600 nm吸光度,確定溶磷菌組合的最適生長溫度[14]。

表1 五株溶磷菌的生理生化特性

表2 石蕊牛奶實(shí)驗(yàn)

將LB液體培養(yǎng)基分裝至錐形瓶中,分別用1 mol/L的NaOH和1 mol/L的HCl依次調(diào)節(jié)pH為4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0,121 ℃滅菌30 min,備用。將OD600為1.0的WF542菌液以2%的接種量加至LB液體培養(yǎng)基中,每個(gè)pH平行測定3次,恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 h,每個(gè)pH平行測定3次。分光光度計(jì)測量每個(gè)pH下的菌液λ=600 nm吸光度,確定溶磷菌組合的最適生長pH。

在LB固體培養(yǎng)基中加入NaCl配成1%、3%、5%、7%、9%濃度梯度,滅菌后制成平板備用。將OD600為1.0的WF542菌液200 μL以涂布法接種于各鹽濃度的LB固體培養(yǎng)基上,每個(gè)處理重復(fù)3次,以不接種的為對照,置28 ℃下培養(yǎng)7 d,觀察菌體生長情況。

1.2.3 多種菌劑的組合盆栽實(shí)驗(yàn)

1.2.3.1 不同菌株的拮抗實(shí)驗(yàn) 將溶磷菌WS54、FWG2,褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)CICC21685活化培養(yǎng)后在新的LB平板上劃線培養(yǎng),培養(yǎng)6～12 h,挑取菌落制成菌懸液備用在8 ℃低溫冰箱中低溫冷凍保存。將純化的固氮菌,溶磷菌組合斜面接種于裝盛無菌的LB液體培養(yǎng)基中置于30 ℃,220 r/min搖床中培養(yǎng)成菌懸液。培養(yǎng)12 h。

不同菌株之間的拮抗反應(yīng)是將菌株在LB固體培養(yǎng)基上兩兩相交劃線,放于37 ℃的恒溫箱中培養(yǎng)1～2 d,觀察菌落兩兩之間交叉點(diǎn)的生長情況,如果兩細(xì)菌在交叉點(diǎn)處的生長情況良好,說明這兩株菌可以在一起生長,適合做混合菌液,如果兩株菌在交叉點(diǎn)處的生長情況弱或者是不生長的話,說明這兩株菌不適合在一起生長,不適合做混合菌液[15]。

1.2.3.2 多種菌劑組合對辣椒的促生效果 篩選出形狀一致、無明顯缺陷的辣椒種子,使用75%的酒精表面滅菌兩次,每次持續(xù)3 min,后使用無菌水沖洗三次。將表面滅菌的種子置于溶磷菌菌液中30 ℃恒溫振蕩12 h后種植在滅菌的鹽堿土中,種植深度3 cm,初次澆水50 mL。種子發(fā)芽后澆處理過的菌液(溶磷菌組合WF542、固氮菌、固氮菌+溶磷菌組合WF542)。實(shí)驗(yàn)設(shè)置5組平行,并設(shè)置對照組。20 d后記錄種子發(fā)芽時(shí)間、株高等信息。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Origin軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與繪圖,所有樣品均測量3次,取平均值并給出標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 溶磷菌的形態(tài)及生理生化測定

2.1.1 溶磷菌的鑒定 SYC3和SCPG-7菌落均為淺黃色,菌落呈圓形,邊緣完整,平坦,很濕潤,不透明,光滑,生長較快;WS54、FWG2和HSYQ18均為白色,菌落呈圓形,邊緣呈鋸齒狀,有凸起,比較濕潤,不透明,光滑,生長較快。

2.1.2 生理生化鑒定 對5株溶磷細(xì)菌的各項(xiàng)生理生化鑒定項(xiàng)目包括:氧化酶實(shí)驗(yàn)、觸酶實(shí)驗(yàn)、明膠液化實(shí)驗(yàn)、淀粉水解實(shí)驗(yàn)、甲基紅實(shí)驗(yàn)、乙酰甲基甲醇等。5株菌的各項(xiàng)生理生化結(jié)果見表1和表2。

表3 基于16S rRNA序列分析的BLAST結(jié)果

由于細(xì)菌具有的酶系統(tǒng)各不相同,因此對營養(yǎng)基質(zhì)的分解能力也不一樣。用生化試驗(yàn)的方法可以鑒定細(xì)菌對基質(zhì)的代謝及代謝產(chǎn)物,進(jìn)而鑒別細(xì)菌的種屬。不同細(xì)菌含有發(fā)酵不同碳源的酶系,有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。某些細(xì)菌具有膠原酶,促使明膠分解。氧化酶實(shí)驗(yàn)主要用于腸桿菌科細(xì)菌與假單胞菌的鑒別。觸酶又稱過氧化氫酶,大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過氧化氫酶。甲基紅試驗(yàn)是用于鑒別大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌,當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)生酸性物質(zhì)促使培養(yǎng)基的pH小于4.5,為甲基紅試驗(yàn)陽性。若細(xì)菌代謝葡萄糖產(chǎn)酸量少,促使培養(yǎng)基的pH大于6.2,為甲基紅試驗(yàn)陰性。V.P試驗(yàn)主要測定細(xì)菌利用葡萄糖產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力,不產(chǎn)生紅色化合物者為陰性反應(yīng)。由表1和表2可以初步判斷HSYQ18,SYC3是腸桿菌科細(xì)菌;而FWG2、WS54、SCPG-7是假單胞菌屬。

2.2 16S rRNA鑒定

將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物提交生物公司進(jìn)行測序。將所測16S rRNA序列登陸 http://www.EzTaxon.org進(jìn)行BLAST比對,獲得同源性數(shù)值,探討目的菌株的親緣性[9]。5個(gè)菌株通過 BLAST比對,都能在數(shù)據(jù)庫中找到同源性非常高的相似菌株序列,因此,綜合5株溶磷細(xì)菌的培養(yǎng)特征、生理生化特性、和BLAST結(jié)果分析,初步判斷HSYQ18為深紅沙雷氏菌(Serratiarubidaea),SYC3屬于分散泛菌(Pantoeadispersa),WS54、FWG2和SCPG-7為假單胞菌(Pseudomonas)。

2.3 溶磷菌組合的篩選及菌株特性

2.3.1 溶磷菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn) 微生物間的拮抗作用,一般是指一種微生物的生命活動(dòng)或其代謝產(chǎn)物,抑制或干擾另一種微生物生命活動(dòng)的現(xiàn)象。拮抗試驗(yàn)是鑒定菌株間遺傳差異的傳統(tǒng)方法,是其不同遺傳特性和親和群的重要表現(xiàn)[16]。本研究供試菌株間拮抗反應(yīng)測試結(jié)果表明HSYQ18不能與FWG2和WS54共存,SYC3也不能與WS54共存。共生的菌有HSYQ18+SYC3,SYC3+FWG2,WS54+FWG2,可用于制作混合接種液。分散泛菌SYC3和深紅沙雷氏菌HSYQ18需做致病性試驗(yàn)方可確定其生物安全性,因此本實(shí)驗(yàn)選用WS54+FWG2為溶磷菌組合,簡稱WF542。

圖1 溶磷菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn)圖

2.3.2 溶磷菌組合WF542的溶磷能力的測定 試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示,溶磷菌組合(WF542)在液體培養(yǎng)基中的溶磷量為420～530 mg/L,溶磷菌組合(WF542)在1～4 d內(nèi)隨著時(shí)間的延長,溶磷量逐漸升高,在第4 d的時(shí)候溶磷量達(dá)到最大為530 mg/L,隨后溶磷量略有下降,曲線呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。分析其原因,曲線先上升可能是因?yàn)槲⑸镌谄浯x過程中分泌質(zhì)子酸化介質(zhì)后產(chǎn)生的釋磷作用所致,由于培養(yǎng)介質(zhì)酸度的提高或部分有機(jī)酸的螯合作用可能使難溶性化合物溶解。曲線后下降可能是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中合成的各種次生代謝物使有效磷被重新固定所致[17-20]。

圖2 5 d溶磷量動(dòng)態(tài)變化

2.3.3 溶磷菌組合WF542分泌嗜鐵素及IAA的性能 微生物產(chǎn)生植物激素類物質(zhì)如吲哚-3-乙酸,可促進(jìn)植物根系有效地吸收土壤中的水分和養(yǎng)分,促進(jìn)植物的生長發(fā)育,并調(diào)控植物體其他的生命活動(dòng)[20-21];微生物分泌鐵載體,在缺鐵的土壤環(huán)境中鐵載體螯合鐵離子形成螯合物,在滿足微生物自身生長需要的同時(shí),也能夠被植物直接吸收利用,改善植物的鐵營養(yǎng)狀況[22-23],從而促進(jìn)植物生長[24]。將配制好的CASAD 嗜鐵素平板打孔后接種菌液,恒溫培養(yǎng)24 h后產(chǎn)生黃色暈圈,如圖3所示,溶磷菌組合(WF542)可以分泌嗜鐵素。由IAA曲線的回歸方程y=0.0294x+0.0854(R2=0.9922),計(jì)算溶磷菌組合分泌的IAA濃度為15.7 g/mL。

圖3 菌株WF542產(chǎn)生嗜鐵素性能的比較

2.3.4 溶磷菌組合WF542對溫度、pH、鹽分等生態(tài)因子的反應(yīng) 溫度、pH和鹽分濃度對菌體生長影響很大,在微生物發(fā)酵的過程中要嚴(yán)格控制溫度,pH和鹽分濃度才能有最大的有效活菌數(shù)[25]。溫度是影響生物有機(jī)體生長和存活最重要的因素,它可以從不同的方面對生物體內(nèi)所進(jìn)行的許多生物化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生影響[26],如圖4所示,實(shí)驗(yàn)測得溶磷菌組合(WF542)的最適溫度在35 ℃左右,在10 ℃時(shí)生長較慢,在20～25 ℃之間變化比較大,45 ℃時(shí)幾乎不生長;pH是衡量溶液酸堿性的尺度,也是反映微生物溶磷的影響因素之一。如圖5所示,溶磷菌組合(WF542)在pH在5.5～8.0之間都能生長,比較適合在中性的條件下生長,在pH為4.0的時(shí)候基本不生長,從pH8.0～9.0生長開始下降說明菌株在培養(yǎng)的過程中能分泌一些酸類物質(zhì)使pH降低;NaCl在維持滲透壓方面起著重要作用,Na+與細(xì)胞膜成分發(fā)生特異作用而增強(qiáng)了膜的機(jī)械強(qiáng)度,有利于細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。如表4所示,溶磷菌組合(WF542)在鹽濃度為1%、3%的濃度下都能生長,生長情況都為良好,溶磷菌組合WF542在5%鹽濃度下生長一般,在7%的鹽濃度下生長較差,到9%的鹽濃度下不生長,說明溶磷菌組合(WF542)耐鹽性一般。

圖4 溫度對溶磷菌組合WF542生長的影響

圖5 pH對溶磷菌組合WF542生長的影響

表4 不同鹽分濃度對各菌株的影響

2.4 多種菌劑的組合盆栽實(shí)驗(yàn)

2.4.1 不同菌種的相互拮抗實(shí)驗(yàn)的結(jié)果 利用平板對峙法研究了5株溶磷菌間的拮抗作用,固氮菌+WS54、固氮菌+FWG2、SCPG-7+固氮菌、SCPG-7+WS54以及SCPG-7+FWG2在混合培養(yǎng)基上共培養(yǎng)2 d后的菌落形態(tài)如圖6所示。固氮菌+WS54、固氮菌+FWG2、SCPG-7+固氮菌、SCPG-7+WS54以及SCPG-7+FWG2之間不存在拮抗反應(yīng),可以兩兩混合,進(jìn)行盆栽實(shí)驗(yàn)。

圖6 不同菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn)

2.4.2 多種菌劑組合對辣椒的促生效果 在溫室條件下,將WF542、固氮菌、固氮菌+WF542、空白對照分別接種辣椒種子,接種后20 d測定平均株高(PH)和發(fā)芽率(FW)。結(jié)果如圖7顯示,接種處理平均株高和發(fā)芽率均超過了空白對照。尤其是平均株高,接種處理顯著(P<0.05)高于空白對照。以上說明固氮菌+溶磷菌組合WF542對辣椒的促生效果最明顯,發(fā)芽率為84.1%,平均苗長為4.2 cm,組合處理效果比單一菌株好。

圖7 盆栽實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論與結(jié)論

溶磷菌作為有益微生物在活化土壤磷素,促進(jìn)植物在低肥力土壤生長方面起著較為重要的作用[27-28],溶磷微生物能夠推動(dòng)土壤中有效磷的釋放,從而促進(jìn)植物生長發(fā)育增加作物產(chǎn)量[29],利用解磷微生物對土壤磷分解,是提高土壤磷有效化利用的重要途徑之一[30]。本研究篩選獲得的溶磷菌組合(WF542)溶磷量最大可達(dá)510 mg·L-1,高于李靜(273.44 mg·L-1)[5]、王志剛(140.26 mg·L-1)[3]等分離的無機(jī)磷溶解菌的最高溶磷量，這可能與本研究選用混合菌株有關(guān),復(fù)合菌株具有比單一菌株更好的溶磷效果。

本研究用于盆栽實(shí)驗(yàn)的溶磷菌株分別歸屬于假單孢菌(Pseudomonas)、中慢生根瘤菌屬(Mesorhizobium)。其中假單胞菌屬(Pseudomonas)是目前報(bào)道的土壤中溶磷效果較強(qiáng)的菌種之一[31],選用的菌株對辣椒的促生效果以及平均株高都高于空白對照,這與其它研究結(jié)果相似[32],說明篩選出的菌株在改善辣椒品質(zhì)、提高辣椒產(chǎn)量方面具有良好的開發(fā)潛力和應(yīng)用前景。

劉青海等[8]研究的六株溶磷菌和四株固氮菌對苜蓿促生效果研究中表明,混合菌株較單菌株能更好的促進(jìn)苜蓿對氮磷的吸收并且具有比單菌株更強(qiáng)的耐酸堿和耐鹽性;李靜等[5]篩選的復(fù)合(PSM01+PSM12+PSM16)在提高土壤有效磷含量和促進(jìn)玉米植株生長方面效果顯著;沈麗英等[33]研究的復(fù)合微生物新型肥料對作物生長的影響結(jié)果表明,復(fù)合微生物肥料可使辣椒產(chǎn)量增加13%,腐植酸螯合微量元素肥復(fù)合微生物肥料具有促進(jìn)肥料的吸收達(dá)到提早采收的功效,且有減緩肥料的傷害作用。由此可以發(fā)現(xiàn)多種菌群聯(lián)合作用對植物的促生作用相當(dāng)明顯且對植物具有生防作用,分析其原因,這可能是多種菌群聯(lián)合通常是通過多種途徑協(xié)同作用促進(jìn)植物生長[34],將具有不同促生功能的菌株復(fù)合接種后,能協(xié)同作用,提高其對植物生長的促進(jìn)能力[8];Paulsen等[35]確定了熒光假單胞菌Pf-5的完整基因組序列,并突出標(biāo)明了在生物學(xué)控制或根際定植中具有已證明或擬議作用的基因島,結(jié)果表明,生物防治劑可保護(hù)植物免受疾病侵害為微生物農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力的提高奠定基礎(chǔ)。因此,在后續(xù)研究中應(yīng)該加強(qiáng)對多菌劑聯(lián)合促生植物效果的研究。

本實(shí)驗(yàn)室篩選的5株溶磷菌株WS54,SYC3,FWG2,HSYQ18和SCPG-7都為革蘭氏陰性菌。HSYQ18為深紅沙雷氏菌(Serratiarubidaea),SYC3屬于分散泛菌(Pantoeadispersa),WS54、FWG2 和SCPG-7為假單胞菌(Pseudomonas)。溶磷菌組合WF542具有分泌嗜鐵素與IAA的能力,溶磷菌組合WF542的最佳生長溫度為35 ℃,在pH為5.5～8.0之間都能生長,在鹽濃度大于9%時(shí)不生長。固氮菌、WF542、固氮菌+WF542對辣椒的促生效果均高于空白對照組,其中固氮菌+WF542組合對辣椒的促生效果最為明顯,發(fā)芽率為84.1%,平均苗長為4.2 cm。