化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測血漿腎素、醛固酮在原發(fā)性醛固酮增多癥診斷中的價(jià)值

程艾邦，李明軒，陳 波，曹 晟，蔣塨豪，許建忠，李 燕，王繼光

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院高血壓科 上海市高血壓研究所，上海 200025)

原發(fā)性醛固酮增多癥（以下簡稱原醛）是繼發(fā)性高血壓的常見病因之一[1]。在高血壓?？凭驮\的高血壓患者中，約8%患有原醛；在難治性高血壓患者中，這一百分比高達(dá)15%左右[2]。與原發(fā)性高血壓患者相比，即使處于相同的血壓水平，原醛患者的靶器官損傷也更嚴(yán)重[3]，心血管事件的發(fā)生率也更高，其非致死性心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)升高5.5倍，腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)升高3倍，房顫的風(fēng)險(xiǎn)升高11倍[4]。采用腎上腺外科手術(shù)或醛固酮受體拮抗劑等藥物治療原醛，不僅能降低患者的血壓，減少降壓藥物的使用，而且還可緩解高醛固酮負(fù)荷造成的心腎功能損害[2]。因此，在高血壓患者中，進(jìn)行原醛的篩查及診斷十分重要。

根據(jù)我國高血壓患者的原醛患病率為5%～10%推算，我國的原醛患者數(shù)量可能多達(dá)1 000萬～2 000萬。盡管如此，目前在高血壓患者中確診原醛的百分比仍較低。原因之一是原醛篩查需要檢測血漿醛固酮濃度、腎素濃度或活性，計(jì)算其醛固酮/腎素（濃度）比值（aldosterone to renin ratio，ARR），但采用傳統(tǒng)的手動(dòng)放射免疫分析法檢測醛固酮濃度及腎素活性耗時(shí)、費(fèi)力。這當(dāng)中，尤其是腎素活性檢測，為提高檢測靈敏度，需要延長血漿與底物的反應(yīng)時(shí)間，導(dǎo)致檢測的靈敏度及檢測效率無法兼顧，因此限制了該檢測方法在原醛篩查中的應(yīng)用。近年來，直接檢測腎素濃度的化學(xué)發(fā)光免疫分析法日趨成熟，不僅可以明顯縮短檢測時(shí)間，還可提高檢測的靈敏度。目前，直接腎素濃度檢測法正不斷改進(jìn)中，化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得的腎素濃度能否取代腎素活性檢測作為一線檢測方法，仍需進(jìn)一步行研究驗(yàn)證。本研究擬分析化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素、醛固酮濃度的準(zhǔn)確性，同時(shí)比較該檢測方法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、放射免疫分析法檢測結(jié)果間的一致性和診斷效能。

資料與方法

一、資料

本研究分為如下3個(gè)部分收集資料。第一部分為探索性研究，初步評(píng)估化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測腎素濃度、放射免疫分析法檢測腎素活性間的一致性。本研究收集2016年6月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院高血壓科門診采用放射免疫分析法檢測腎素活性的20例患者血漿樣本，用化學(xué)發(fā)光免疫分析法及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法復(fù)測腎素濃度，評(píng)估3種檢測方法間的一致性。第二部分研究在2017年4月至6月間進(jìn)行，將檢測樣本量擴(kuò)大至300例來高血壓科門診就診的患者，比較化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得腎素濃度與放射免疫分析法檢測得腎素活性間的一致性。第三部分在前期驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步完善化學(xué)發(fā)光免疫分析法與放射免疫分析法檢測腎素、醛固酮濃度間的一致性評(píng)估，并計(jì)算化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷原醛的ARR閾值。研究樣本來自2018年4月至5月間在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院高血壓科住院的高血壓患者，連續(xù)選取125例研究對(duì)象進(jìn)行血漿腎素和醛固酮檢測。

本研究納入患者的標(biāo)準(zhǔn)如下。①年齡≥16歲；②診室血壓≥140/90 mmHg，或平均24 h動(dòng)態(tài)血壓≥130/80 mmHg，或既往已確診為高血壓?；颊吲懦龢?biāo)準(zhǔn)如下。①高血壓病因診斷不明確者；②未留取血標(biāo)本者。

二、方法

1.血樣采集：囑患者抽血當(dāng)日站立或行走2 h，靜坐15 min后,經(jīng)肘靜脈采血5～6 mL，置于一次性乙二胺四乙酸抗凝管中，分離血漿后用于腎素和醛固酮測定。使用含有酶抑制劑（二巰基丙醇及羥基喹啉硫酸鹽）的采血管進(jìn)行血樣采集，用于腎素活性檢測，檢測腎素活性的血樣采集前，需在采血管中加入酶抑制劑，如血樣本不能及時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，則將分離獲得的血漿保存在4 ℃～6 ℃恒溫冰箱中。門診采集的血樣在進(jìn)行血漿腎素濃度和腎素活性檢測時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法及放射免疫分析法共用采血管；病房采集的血樣在進(jìn)行腎素、醛固酮濃度檢測時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫分析法分別采用含有和不含有酶抑制劑的2種采血管進(jìn)行重復(fù)采樣。

2.腎素、醛固酮檢測

（1）化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定血漿腎素及醛固酮濃度：使用LUMO化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測儀和配套試劑盒（鄭州安圖生物工程股份有限公司）進(jìn)行檢測。根據(jù)雙抗體夾心法原理，檢測血漿腎素濃度時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度與其含量成正比；根據(jù)競爭法原理，檢測血漿醛固酮濃度時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度與其含量成反比。血漿腎素的檢測范圍為0.5～500.0 pg/mL（1 pg/mL=0.03 pmol/L），其檢測下限為0.5 pg/mL，批內(nèi)變異＜5%，批間變異＜15%；血漿醛固酮的檢測范圍為5～1 000 pg/mL （1 pg/mL=2.77 pmol/L），檢測下限為5.0 pg/mL，批內(nèi)變異＜6%，批間變異＜9%。

（2）放射免疫分析法測定血漿腎素活性及血漿醛固酮濃度：在上海市內(nèi)分泌代謝病研究所臨床內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)室，采用得到美國病理家協(xié)會(huì)認(rèn)可的核素標(biāo)記免疫檢測平臺(tái)，檢測血漿醛固酮濃度，測定下限為3 ng/dL（1 ng/dL=10 ng/L），批內(nèi)變異＜5%，批間變異＜8%；血漿腎素活性測定試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供，檢測下限為0.1 ng/（mL·h），批內(nèi)變異＜10%，批間變異＜15%。

（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測定血漿腎素濃度：使用美國DRG國際公司腎素酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)商品試劑盒進(jìn)行檢測，腎素濃度檢測下限為0.80 pg/mL，批內(nèi)變異＜8.7%，批間變異＜8.9%。

3.原醛的診斷

（1）藥物洗脫：對(duì)于疑診原醛的患者，入院前予停用對(duì)腎素-血管緊張素系統(tǒng)有較大影響的藥物。如螺內(nèi)酯停用≥6周，其他利尿劑停用≥4周，腎上腺素β 受體阻滯劑、中樞降壓藥、強(qiáng)效二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（如硝苯地平、非洛地平等）、甘草制劑和非甾體抗炎藥和糖皮質(zhì)激素類藥物等停用≥2周。對(duì)于無法停用降壓藥物的患者，則予換用非二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（維拉帕米或地爾硫），或腎上腺素α1受體阻滯劑 （特拉唑嗪或多沙唑嗪），或?qū)δI素-血管緊張素系統(tǒng)影響較小的二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（氨氯地平）降血壓。

（2）確診試驗(yàn)：本研究采用放射免疫分析法檢測醛固酮、腎素并計(jì)算ARR，對(duì)ARR≥240 （pg/mL）/[ng/（mL·h）] 的患者進(jìn)行原醛確診試驗(yàn)——靜脈生理鹽水滴注試驗(yàn)(鹽水負(fù)荷試驗(yàn))，陽性者確診為原醛。鹽水負(fù)荷試驗(yàn)一般在早晨8：00左右開始，患者在試驗(yàn)開始前先靜臥1～2 h，然后靜脈滴注生理鹽水500 mL/h，連續(xù)滴注4 h。滴注前后分別測定血漿醛固酮濃度、腎素活性、血鉀和血皮質(zhì)醇水平。鹽水負(fù)荷后的血漿醛固酮質(zhì)量濃度≥60 pg/mL，且腎素活性＜1 ng/（mL·h），判定為鹽水負(fù)荷試驗(yàn)陽性。

4.血壓測量及身高、體重測量：采用電子血壓計(jì)（歐姆龍HEM-907型）測量患者入院后第1天清晨時(shí)段坐位血壓，測血壓前坐位休息15 min，測右上肢血壓，連續(xù)測量2次，間隔1 min，取均值。采用經(jīng)驗(yàn)證的美國Spacelabs公司90207示波法動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測儀，記錄24 h動(dòng)態(tài)血壓，計(jì)算收縮壓和舒張壓均值。測量身高、體重，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI）（kg/m2）。

5.其他實(shí)驗(yàn)室檢測：所有患者均空腹12 h以上，于次日清晨經(jīng)肘靜脈采血，進(jìn)行生化檢測。采用全自動(dòng)生化分析儀（美國貝克曼庫爾特有限公司，CX5PRO SYNCHRON檢測系統(tǒng)）檢測血清肌酐和電解質(zhì)等，血清肌酐用酶法測定（BUN Regeant試劑），血清鉀采用離子選擇電極法。根據(jù)慢性腎臟病流行病學(xué)合作研究公式計(jì)算估算的腎小球?yàn)V過率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）[5]。

6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)用SAS 9.4版軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（百分比）表示。不符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后再行分析，分別用Student t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)比較組間均數(shù)和頻率差異。相關(guān)性分析采用Pearson方法，采用Bland-Altman方法比較化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法間的腎素檢測結(jié)果。以原醛確診試驗(yàn)陽性作為診斷原醛的金標(biāo)準(zhǔn)，繪制受試者操作特征曲線 （receiver operator characteristic curve,ROC曲線），用于評(píng)估化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷原醛的準(zhǔn)確率，取約登指數(shù)最大時(shí)來確定最佳臨界值。P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、3種方法測得結(jié)果間的一致性分析

在納入研究的20例標(biāo)本中，放射免疫分析法測得腎素活性的中位值（全距）為3.11 ng/（mL·h）[0.01～8.59 ng/（mL·h）]，而化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測得的腎素濃度中位值（全距）分別為16.27 pg/mL（0.41～44.09 pg/mL）和17.41 pg/mL（0.16～63.41 pg/mL），其中有1例因腎素濃度過低，用放射免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法均未能檢測出具體數(shù)值。

如圖1所示，化學(xué)發(fā)光免疫分析法（r=0.97）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（r=0.98）測得腎素濃度與放射免疫分析法測得腎素活性間均顯著相關(guān) （P＜0.001）。采用Bland-Altman分析化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測得腎素濃度結(jié)果間的一致性（見圖2），結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得的腎素濃度顯著低于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，2組間的平均差異（±2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差）為-（3.08±15.38）pg/mL；進(jìn)一步分析顯示，2種檢測方法測得腎素濃度的差值及平均值之間相關(guān)系數(shù)為-0.87 （P＜0.001），即受試者血漿腎素濃度較高時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得值與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法相比,低估更明顯。

圖1 化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法與放射免疫分析法檢測腎素的相關(guān)散點(diǎn)圖（n=20）

圖2 化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測腎素濃度的Bland-Altman圖

二、化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得腎素濃度與放射免疫分析法測得腎素活性間的一致性驗(yàn)證

擴(kuò)大研究樣本量，在300例完成腎素活性及濃度檢測的血樣中，用放射免疫分析法測得的腎素活性中位值（全距）為1.52 ng/（mL·h）[0.01～6.83 ng/（mL·h）]，用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得腎素濃度中位值（全距）為16.61 pg/mL（0.85～763.58 pg/mL）。如圖3所示，自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換的腎素濃度與腎素活性間呈顯著正相關(guān)（r=0.78，P＜0.001）。

三、化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素、醛固酮篩查原醛的準(zhǔn)確率

在125例高血壓住院患者中，45例進(jìn)行了原醛篩查試驗(yàn)，15例經(jīng)鹽水負(fù)荷試驗(yàn)確診為原醛。收集受試者臥位和立位、鹽水負(fù)荷試驗(yàn)前后的血漿樣本，每人檢測1～6次，中位次數(shù)（全距）為2次，共有300例血漿樣本用于腎素以及醛固酮的一致性檢測。如圖4所示，不論有無酶抑制劑，自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換的化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得腎素濃度與放射免疫分析法測得腎素活性間均顯著相關(guān)，但相較于有酶抑制劑的腎素檢測，無酶抑制劑時(shí)測得的腎素濃度與腎素活性間的相關(guān)性更強(qiáng) （0.80比0.67，P＜0.01）。與之類似，化學(xué)發(fā)光免疫分析法與放射免疫分析法檢測的醛固酮濃度顯著相關(guān)，與有酶抑制劑時(shí)測得的醛固酮濃度相比，無酶抑制劑時(shí)，2種方法測得血漿醛固酮濃度間的相關(guān)性略強(qiáng)，但差異尚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（0.83比0.79，P=0.09）。

與原發(fā)性高血壓患者相比，原醛患者平均24 h動(dòng)態(tài)收縮壓/舒張壓更高（139.7/90.0 mmHg比128.2/77.8 mmHg，P≤0.01），血清鉀濃度更低（3.50 mmol/L比3.97 mmol/L，P＜0.001）。篩查原醛的45例高血壓患者平均年齡為（48.4±16.4）歲，有21例（46.7%）為女性，平均診室血壓為137.0/82.1 mmHg，平均24 h動(dòng)態(tài)血壓為131.5/81.4 mmHg。采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得ARR為1.9～11 600.6 （pg/mL）/（pg/mL），中位值為12.9（pg/mL）/（pg/mL），放射免疫分析法測得的ARR為22.5～11 595.5（pg/mL）/[ng/（mL·h）]，中位值為157.4（pg/mL）/[ng/（mL·h）]（見表1）。

表1 原醛篩查患者的基本參數(shù)（n=45）

以鹽水負(fù)荷試驗(yàn)為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)化學(xué)發(fā)光免疫分析法和放射免疫分析法測得的腎素、醛固酮計(jì)算ARR，并繪制ROC曲線（見圖5）；化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得ARR ≥240（pg/mL）/[ng/（mL·h）]診斷原醛的曲線下面積為0.91，放射免疫分析法測得ARR診斷原醛的曲線下面積為0.95，兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.21）。

圖5 化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ARR≥18.26）與放射免疫分析法（ARR≥240）診斷原醛的ROC曲線

根據(jù)約登指數(shù)獲取化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測ARR診斷原醛的最佳臨界值為18.26（pg/mL）/（pg/mL），此時(shí)其診斷原醛的靈敏度和特異度均為86.7%（見表2）。

表2 化學(xué)發(fā)光免疫分析法[ARR≥18.26（pg/mL）/（pg/mL）]診斷原醛的準(zhǔn)確率

討論

本研究采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法及放射免疫分析法檢測腎素濃度 （或活性）及醛固酮濃度，比較不同方法測得結(jié)果間的一致性，證實(shí)如下結(jié)果。①化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測得的腎素濃度與放射免疫分析法測得腎素活性顯著相關(guān)；②若采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素濃度時(shí)，使用不含酶抑制劑的乙二胺四乙酸采血管，其測得結(jié)果與放射免疫分析法測得腎素活性間的相關(guān)性更高；③化學(xué)發(fā)光免疫分析法在原醛診斷中的準(zhǔn)確率與放射免疫分析法相似，基于化學(xué)發(fā)光免疫分析法ARR≥18.26（pg/mL）/（pg/mL）為診斷原醛的閾值，此時(shí)診斷原醛的靈敏度和特異度均為86.7%。

根據(jù)2016年歐洲內(nèi)分泌學(xué)會(huì)《原發(fā)性醛固酮增多癥的臨床診療指南》[2]，2～3級(jí)高血壓患者、難治性高血壓患者及合并低鉀血癥的高血壓患者等均應(yīng)篩查原醛，這些患者約占全部高血壓患者的50%?？紤]到高血壓患者的原醛患病率高，且這些原醛患者面臨更高的心血管風(fēng)險(xiǎn)，故急需尋求一種便捷、準(zhǔn)確、快速的方法進(jìn)行腎素和醛固酮的檢測。目前，臨床上多采用放射免疫分析法檢測腎素活性，根據(jù)腎素在設(shè)定的pH值和時(shí)間內(nèi)將樣本中血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅰ，然后通過檢測血管緊張素Ⅰ水平來間接反映腎素濃度。這一檢測方法要求樣本在運(yùn)輸過程中予低溫存儲(chǔ)，檢測條件苛刻，耗時(shí)較長，對(duì)操作技術(shù)要求高，限制了其在大規(guī)模原醛篩查中的應(yīng)用。而化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素濃度時(shí)，操作簡便，耗時(shí)短，本研究采用的試劑盒僅需60 min即可完成腎素檢測，因此在臨床篩查或大規(guī)模人群研究中，化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素濃度具有更加廣闊的應(yīng)用前景。

既往已有一些研究報(bào)道了化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測腎素、醛固酮濃度的可靠性及診斷原醛的準(zhǔn)確率[6-9]，與本研究結(jié)果相似。Perschel等[6]較早進(jìn)行了化學(xué)發(fā)光免疫分析法與放射免疫分析法檢測腎素、醛固酮診斷原醛準(zhǔn)確性的研究，該研究共入選了76名血壓正常志愿者和28例原醛患者，結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得的腎素濃度與放射免疫分析法測得的腎素活性顯著相關(guān)（r=0.72），2種方法測得的ARR值均可用于區(qū)分健康人與原醛患者，2種方法診斷原醛的ROC曲線下面積無差異，化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷原醛的ARR臨界值為43 （pg/mL）/（pg/mL）。但該研究未納入高血壓患者，可能會(huì)在一定程度上影響ARR診斷閾值的判定。

近來進(jìn)行的一項(xiàng)較大樣本研究進(jìn)一步證實(shí)了化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測準(zhǔn)確性。該研究納入147例正常血壓者、152例原發(fā)性高血壓患者和93例原醛患者，結(jié)果證實(shí)化學(xué)發(fā)光免疫分析法測的腎素濃度（μIU/mL）與放射免疫分析法測得的腎素活性密切相關(guān)，以化學(xué)發(fā)光免疫分析法測得的ARR≥1.12（ng/dL）/（μIU/mL）作為臨界值時(shí)，其診斷原醛的靈敏度為98.9%，特異度為78.9%[7]。在日本進(jìn)行的一項(xiàng)以液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測醛固酮為標(biāo)準(zhǔn)的研究中，Morimoto等[8]入選了125例原醛患者和97例高血壓患者，評(píng)估化學(xué)發(fā)光免疫分析法與放射免疫分析法檢測醛固酮的準(zhǔn)確率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化學(xué)發(fā)光免疫分析法及放射免疫分析法測得的醛固酮水平均與液相質(zhì)譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測結(jié)果密切相關(guān)（r=0.97，r=0.95）。根據(jù)ROC曲線獲得化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷原醛的閾值為ARR≥6.0（ng/dL）/（pg/mL），即60（pg/mL）/（pg/mL），此時(shí)其診斷原醛的靈敏度為92.0%，特異度為76.3%[8]。

另外，有研究顯示，在特定類型的原醛患者中，化學(xué)發(fā)光免疫分析法可能比放射免疫分析法更具診斷優(yōu)勢[9]。Rossi等[9]在高血壓患者中進(jìn)行原醛篩查研究，同時(shí)對(duì)原醛患者進(jìn)行雙側(cè)腎上腺靜脈取血結(jié)合影像學(xué)分型來診斷醛固酮腺瘤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷醛固酮腺瘤的ROC曲線下面積顯著大于放射免疫分析法 （0.974比0.894，P=0.02）。

本研究存在一定的局限性。其一，本研究僅比較了化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法以及放射免疫分析法檢測腎素、醛固酮結(jié)果間的一致性，未與靈敏度、準(zhǔn)確率更高的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測結(jié)果進(jìn)行比較。這是考慮到目前指南推薦的原醛篩查ARR閾值仍是基于放射免疫分析法及化學(xué)發(fā)光免疫分析法[2]，因此本研究未使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法作為參考標(biāo)準(zhǔn)。其二，由于本研究用于原醛診斷閾值計(jì)算的樣本量較小，篩查患者中原醛患者所占百分比較高（33.3%），可能因此導(dǎo)致本研究計(jì)算出的ARR診斷閾值偏低[2]。較早研究以腎素活性為計(jì)算ARR依據(jù)，得出的診斷閾值為240（pg/mL）[ng/（mL·h)][10]，也低于指南推薦的300（pg/mL）/[ng/（mL·h)][11]。

總之，本研究驗(yàn)證了化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定腎素、醛固酮濃度在原醛診斷中的準(zhǔn)確性，并提出了化學(xué)發(fā)光免疫分析法診斷原醛的ARR閾值。這一檢測方法因?yàn)椴僮鞅憬荨⒑臅r(shí)短，可推廣作為血漿腎素、醛固酮濃度檢測以及原醛篩查的技術(shù)。