• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    模擬放牧采食對典型草原土壤中AM真菌分解枯落物的影響

    2023-03-05 14:03:32趙心雨田麗華趙學(xué)春桂維陽
    草地學(xué)報 2023年2期
    關(guān)鍵詞:禾草氧化酶菌絲

    趙心雨, 田麗華, 趙學(xué)春, 陳 超, 桂維陽

    (貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院, 貴州 貴陽 550025)

    枯落物是天然草原碳庫的主要組成部分之一,是草地生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)和能量的重要來源[1-2]。枯落物經(jīng)礦化作用分解后或被植物吸收利用,或以CO2的形式返回至大氣中,在維持草地生態(tài)系統(tǒng)碳平衡中起到關(guān)鍵作用[2-3]。

    草地生態(tài)系統(tǒng)中的大部分碳庫位于土壤中[4]。典型草原中80%的植物可以和叢枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)形成共生體,其中AMF菌絲是地下碳庫的重要載體之一[5]。大多數(shù)研究認為AMF并不具有腐生能力,因此AMF參與枯落物分解的過程主要通過影響其與土壤微生物之間的互作關(guān)系,改變土壤微生物對酶的分泌,調(diào)控枯落物的分解率[6]。有研究發(fā)現(xiàn),AMF會通過分泌易分解有機質(zhì)刺激土壤微生物活性,加快枯落物的分解[7]。Cheng等研究發(fā)現(xiàn),土壤中的AMF被隔離后,枯落物的分解減少,土壤微生物的活性下降[8]。此外,AMF還會與土壤微生物競爭養(yǎng)分,進而刺激或抑制微生物的活性。Jannoura等發(fā)現(xiàn),由于土壤中氮素的缺乏,豆科植物接種AMF后,微生物活性受抑制,導(dǎo)致枯落物—玉米(Zeamays)的分解率降低[9]。

    水解酶和氧化酶是土壤微生物降解復(fù)雜有機化合物的重要物質(zhì),可以反映土壤生化過程的大小和趨勢[10]。纖維素是植物殘體進入土壤的碳水化合物的重要組分之一,是一種含碳量較高的化合物,結(jié)構(gòu)相對簡單,分解較快[11]。纖維素二糖水解酶在參與纖維素的分解過程中可將纖維素分解為纖維二糖[12]。β-葡糖苷酶的主要作用是參與分解纖維素類多糖的水解過程,裂解β-葡糖苷和多聚糖形成葡萄糖,其作用產(chǎn)物是土壤微生物重要的營養(yǎng)源[13]。氧化酶中起主要作用的為多酚氧化酶,其可以促進腐殖質(zhì)的形成,分解枯落物中的木質(zhì)素,進一步將酚類物質(zhì)氧化為醌[14]。有研究發(fā)現(xiàn),AMF的生長會促進土壤酶的活性,例如β-葡糖苷酶、磷酸酶和脲酶等[15]。然而,較少有研究系統(tǒng)調(diào)查AMF是否通過調(diào)控土壤酶活性影響枯落物的分解。

    植物功能群會影響土壤微生物的群落結(jié)構(gòu)和功能[16]。不同植物功能群的地上凈初級生產(chǎn)力并不一致,這會改變植物對土壤微生物群落的碳分配,從而使微生物的活性受到干擾[17]。植物群落結(jié)構(gòu)的改變會影響土壤的固碳能力,還會影響土壤微生物碳源(根系分泌物)的多樣性,植物與土壤微生物之間的相互關(guān)系以及土壤微環(huán)境的多樣性等[18-19]。并且,很多研究均指出不同植物功能群對AMF的依賴性表現(xiàn)差異較大,其中C4禾草相比于C3禾草及固氮雜草對AMF的依賴性更大,更易于形成共生體[20]。但植物功能群對AMF參與枯落物分解的影響卻鮮有報道。

    植物的光合作用可以為地下部分輸送大量碳源[21]。因此,宿主植物光合作用的削弱,例如植物地上部分的刈割,會限制宿主植物為其共生的AMF的碳分配[22]。因此,刈割會通過調(diào)控宿主植物共生的AMF來影響土壤微生物群落,進而降低枯落物的分解率[23]。放牧是草地生態(tài)系統(tǒng)的主要土地利用方式之一,會對植物功能性其家畜采食作用中采食量的部分可以通過刈割處理代表,用于探究刈割對土壤微生物的影響,有助于我們預(yù)測草地生態(tài)系統(tǒng)中由放牧導(dǎo)致的土壤碳流轉(zhuǎn)的變化。放牧過程中家畜采食過程會改變地上植被的豐富度和多樣性,影響根際微生態(tài)環(huán)境[24-25]。

    前人對AMF參與枯落物的分解主要在溫室和盆栽試驗中進行,AMF和土壤微生物之間的互作受控制試驗的條件限制,難以展現(xiàn)其在野外原位環(huán)境中的真實性[26]。本試驗采用網(wǎng)袋法,使用兩種不同孔徑的尼龍網(wǎng)(隔離植物根系但允許AMF菌絲通過、同時隔離植物根系和AMF菌絲),并通過測量枯落物的分解率、土壤酶活性,以闡明在典型草原中,放牧的采食作用(植物功能群和刈割處理)對AMF參與枯落物分解過程的影響。

    本研究提出3個假設(shè):(1)不同植物功能群處理中枯落物的分解率有差異;(2)AMF會通過影響土壤酶活性改變枯落物的分解;(3)刈割會抑制枯落物分解。

    1 材料與方法

    1.1 研究區(qū)概況

    研究區(qū)位于內(nèi)蒙古多倫縣中科院植物所十三里灘恢復(fù)草地生態(tài)系統(tǒng)試驗示范基地(42°02′N ~ 116°17′E、海拔1 324 m)。氣候為溫帶內(nèi)陸型季風(fēng)氣候,年降水量為385.5 mm,年均溫為2.1℃。研究區(qū)土壤為栗鈣土,肥力低,結(jié)構(gòu)疏松。植被類型為溫帶典型草原,主要植被:大針茅(Stipakryroii)、羊草(Leymuschinensis)、糙隱子草(Cleistogenessquarrosa)、冷蒿(Artemisiafrigida)等。

    1.2 試驗設(shè)計

    本研究采用隨機區(qū)組試驗設(shè)計,選取研究區(qū)地勢開闊、平坦且植被均勻的位置設(shè)立試驗。選擇植物功能群和刈割兩種利用方式模擬放牧中的采食作用(采食種類和采食量),其中植物功能群處理:C3禾草、C4禾草、雜類草和對照(CK),共4水平。刈割處理:刈割和不刈割,共兩水平,五個區(qū)組,共40個小區(qū)。小區(qū)面積:1.5 m × 1.5 m樣方,間隔:2 m。

    每種植物功能群處理僅保留本功能群植物,其余植物地上部分全部使用剪刀剪去,使地下部分凋萎死亡但不破壞土壤結(jié)構(gòu)。試驗于2015年5月1日開始,每隔兩周剔除一次,10月1日結(jié)束。刈割為每月一次(5—10月),留茬5 cm,屬于中度放牧強度。

    1.3 測定項目及方法

    1.3.1枯落物分解袋 2014年10月中旬,在研究區(qū)內(nèi)用剪刀齊地面采集當(dāng)?shù)貎?yōu)勢物種羊草。挑選植株長度在15~20 cm,4~5片葉子的羊草立枯體,以保證材料質(zhì)量的均勻度,切碎成1 cm左右的小段備用。

    枯落物分解袋使用兩種規(guī)格尼龍網(wǎng)制成,分別為0.45 μm(完全隔離AMF菌絲和植物根系)和25 μm(僅隔離植物根系允許AMF菌絲通過)。分解袋長10 cm、直徑 6.5 cm(見圖1),袋內(nèi)裝原位土150 g和羊草立枯物2 g,每種孔徑各小區(qū)均有3個重復(fù),混合均勻后回填,填埋時間為每年5月1號,每年10月1號取樣。

    枯落物分解袋取出后,將袋內(nèi)的剩余枯落物小心取出,經(jīng)清洗后烘干稱重。袋內(nèi)的土壤用于測定土壤酶活和AMF菌絲密度。

    圖1 凋落物分解袋示意圖Fig.1 Litter decomposition bag

    1.3.2AMF菌絲密度測定方法 AMF菌絲密度的測定使用真空泵微孔抽濾法[27]。取5.000 g風(fēng)干土壤于1 L燒杯中,加入1 L去離子水和攪拌子,置于磁力攪拌器上攪拌5 min以使菌絲充分脫落,從而形成土壤懸濁液;將此懸濁液靜置至無明顯漩渦后過雙層篩,上篩為20目,下篩為400目,過濾土壤懸濁液;再向燒杯中加水1 L后重復(fù)過濾一次,保證燒杯中所有土壤全部轉(zhuǎn)移至篩中;上篩中的雜質(zhì)丟棄,下篩中的土用約100 mL水沖洗至攪拌機中,攪拌10 s,停止5 s,再攪拌20 s;攪拌后的懸濁液全部轉(zhuǎn)移至250 mL三角瓶中,用去離子水定容至250 mL,置于220 r·min-1搖床中劇烈搖晃后,靜置1 min;使用移液器在同一液面下1 cm處吸取5 mL懸濁液,轉(zhuǎn)移至放有0.45 μm濾膜的抽濾裝置的過濾杯中,進行真空抽濾;抽濾后將濾膜轉(zhuǎn)移至載玻片,滴數(shù)滴0.05%曲利苯藍溶液染色,蓋上蓋玻片后靜置20 h;重復(fù)“劇烈搖晃”和“抽濾”4次,即每個土壤樣品制4片濾膜。使用“100 ×”倍數(shù)下用顯微鏡(CX41,Olympus,Japan)觀察并計數(shù)。使用網(wǎng)格交叉法估算菌絲長度,隨機觀察圓形濾膜上25個視野,每個視野的交叉點數(shù)為一根菌絲與十字交叉格橫豎方向上的全部點數(shù)。

    菌絲密度計算公式:

    菌絲長度(m)=11/14×總交叉點數(shù)×網(wǎng)格單元格長度×濾膜上樣塊面積/網(wǎng)格面積

    菌絲密度(m·g-1)=菌絲長度/所稱土的質(zhì)量

    1.3.3土壤酶活性測定方法 試劑配制:

    (a)醋酸鈉緩沖液:配制50 mmol·L-1的醋酸鹽溶液(將6.804 g三水合乙酸鈉溶解在800 mL去離子水中),再使用12 mol·L-1的鹽酸將緩沖液調(diào)節(jié)pH至5.0后保存在4 ℃冰箱,需在8天內(nèi)使用完畢。

    (b)甲基傘型酮(MUB)及酶底物(表1):配制200 μmol·L-1的底物和10 μmol·L-1MUB,提前一天配制,放置在4oC冰箱保存,3天內(nèi)使用完畢。

    測量方法:

    (1)稱取1.00 g鮮土于250 mL錐形瓶中,加入125 mL的醋酸鈉緩沖液,使用磁力攪拌器(攪拌子長度為3.5 cm)使土壤成均一懸濁液,后置于往復(fù)式搖床中震蕩1 h(200 r·min-1);

    (2)用八通道移液器吸取200 μL醋酸鈉緩沖液于黑色96微孔板上,分別是空白對照,標(biāo)準熒光,底物對照,依次加入50 μL緩沖液、10 μmol·L-1-MUB和200 μmol·L的底物;

    (3)用八通道移液器吸取200 μL土壤懸濁液于黑色96微孔板上,每一個土壤樣品設(shè)置8個重復(fù),并設(shè)置樣品對照和標(biāo)準對照;吸取50 μL的200 μmol·L-1的底物,加到96孔板對應(yīng)的樣品池里,樣品對照加50 μL緩沖液,標(biāo)準對照加50 μL 10 μmol·L-1的MUB。

    (4)點樣結(jié)束后,立即20oC暗光培養(yǎng)2 h,培養(yǎng)結(jié)束后添加10 μL 1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液終止反應(yīng);

    (5)使用多功能酶標(biāo)儀(SpectraMax i3x,Molecular Devices,CA,USA)在365 nm激發(fā)光,450 nm透射光下測定熒光值(DeForest,2009),土壤酶活性計算過程如下:

    表1 土壤酶種類及其縮寫和酶作用底物Table 1 Enzymes measured in soil samples,and their substrates and abbreviation

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

    采用SAS 8.0(SAS Institute,USA)對各指標(biāo)進行三因素方差分析(Three-way ANOVA)。結(jié)果顯示刈割對各指標(biāo)的影響均不顯著,故將刈割處理合并為重復(fù)(附表1),再使用雙因素方差分析(Two-way ANOVA)進行檢驗,多重比較方法使用Duncan檢驗。使用一元線性回歸分析(Linear regression)AMF菌絲密度與枯落物分解率的相關(guān)性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 枯落物分解率和AMF菌絲密度

    兩年間,植物功能對枯落物分解率有顯著影響,且變化趨勢相似(圖2,2016:P<0.001;2017:P<0.001)。雜類草和CK顯著高于C3禾草處理,C4禾草處理最低。兩年中,AMF均促進了枯落物的分解(圖2a,2b,P<0.001)。

    圖2 2016年(a)和2017年(b)植物功能群處理(F)和AMF處理(A)對枯落物分解率的影響Fig.2 The effect of AMF Treatment (A) on mass loss of different plant functional groups (F) in 2016 (a) and 2017 (b)注:不同字母表示植物功能處理中差異顯著。#表示在植物功能群處理內(nèi)差異顯著。*=P<0.05;**=P<0.01;***=P<0.001;NS=P>0.05Note:Different letters indicate significant differences among the plant functional groups. #that a significant difference between the treatments of AMF isolated or not within one plant functional group. *P<0.05;**P<0.01;***P<0.001;NSP>0.05. The same as below

    兩年間,植物功能群對AMF菌絲密度有顯著影響,但趨勢并不一致(圖3,2016:P<0.01;2017:P<0.01)。2016年,雜類草和CK較高,C3和C4禾草處理較低;2017年,雜類草顯著高于C3和C4禾草處理。2017年,AMF菌絲密度在各功能群中均呈顯著差異,說明尼龍網(wǎng)在所有處理中都顯著阻隔了AMF菌絲的生長(圖3,P<0.05)。

    2.2 土壤酶活性

    兩年間,β-葡糖苷酶在不同植物功能群中呈顯著差異(圖4a,4d:P<0.001)。2016年,雜類草和CK處理較高,C3和C4禾草處理較低;2017年,C4禾草顯著低于其余三種處理。2016年,AMF僅對C3禾草中β-葡糖苷酶活性有顯著影響(圖4a,P<0.05)。

    2017年中,纖維素二糖水解酶在不同植物功能群間呈顯著差異,雜類草高于C3禾草和CK處理,C4禾草處理呈最低值(圖4e,P<0.05)。

    兩年間,多酚氧化酶在不同植物功能群中呈顯著差異(圖4c,4f,2016:P<0.001;2017:P<0.001)。2016年,雜類草和CK處理較高,顯著高于C3和C4禾草處理;2017年,多酚氧化酶活性在雜類草和CK處理中最高,C3禾草較低,最低為C4禾草處理。2016年,AMF顯著提高除C3禾草外其余處理中的多酚氧化酶活性(圖4c,P<0.05);2017年,AMF顯著提升了所有處理的多酚氧化酶活性(圖4f,P<0.05)。

    圖3 2016年(a)和2017年(b)植物功能群處理(F)和AMF處理(A)對AMF菌絲密度(HLD)的影響Fig.3 The effect of AMF treatment (A) on extra-radical mycorrhizal hyphal length (HLD) among different plant functional groups (F) in 2016 (a) and 2017 (b)注:不同字母表示植物功能處理中差異顯著。#表示在植物功能群處理內(nèi)差異顯著。*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001;NSP>0.05Note: Different letters indicate significant differences in plant functional treatment. #indicates that there is significant difference in plant functional group treatment. * P<0.05;**P<0.01;***P<0.001;NS P>0.05

    圖4 2016年(a)和2017年(b)植物功能群處理(F)和AMF處理(A)對土壤酶活的影響Fig.4 The effect of AMF treatment (A) on enzymes activity among different plant functional groups (F) in 2016 (a) and 2017 (b)注:不同字母表示植物功能處理中差異顯著。#表示在植物功能群處理內(nèi)差異顯著。*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001;NSP>0.05Note: Different letters indicate significant differences in plant functional treatment. #indicates that there is significant difference in plant functional group treatment. * P<0.05; ** P<0.01; ***P<0.001; NS P>0.05

    2.3 AMF菌絲密度與枯落物分解率的關(guān)系

    兩年間,AMF菌絲密度與枯落物分解率間均有顯著的線性正相關(guān)關(guān)系(圖5a,5b,2016年:P=0.033 1;2017年:P=0.006 6)。

    3 討論

    本試驗使用網(wǎng)袋法,通過適宜孔徑的尼龍網(wǎng)可以成功隔離AMF菌絲,顯著降低了0.45 μm網(wǎng)袋內(nèi)的AMF菌絲密度,通過比較枯落物分解率、土壤水解酶活性和氧化酶活性,在天然草地探究了植物功能群和刈割對AMF參與枯落物分解的影響,明確AMF促進枯落物分解的可能原因。試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),2016和2017兩年中AMF根外菌絲的生長均會加速枯落物的的分解,且不同功能群處理之間的差異顯著,雜類草處理中的枯落物分解率顯著高于C3禾草處理,C4禾草處理中枯落物分解率最小??萋湮锏姆纸鈱ω赘畹捻憫?yīng)不顯著。使用線性回歸分析發(fā)現(xiàn),兩年間AMF菌絲密度和枯落物分解率之間均有顯著的正相關(guān)關(guān)系。本研究說明AMF會通過調(diào)控土壤酶活促進枯落物的分解,且植物功能群和刈割處理不會影響AMF對枯落物的分解作用。

    Leifheit等發(fā)現(xiàn),AMF通過改變土壤微環(huán)境中的養(yǎng)分和水分條件可以直接影響土壤中的微生物(分解者)活性,或通過為微生物提供或改變碳源間接影響微生物活性,進而影響土壤中的有機質(zhì)分解[28]。與Armada等試驗結(jié)果類似,本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)AMF的生長會促進土壤中β-葡糖苷酶的活性[15]。Toljander等研究得出,AMF根外菌絲的分泌物中包含有低分子量糖類,可被β-葡糖苷酶快速分解,為土壤中的其他微生物提供碳源,刺激其活性加快枯落物分解[29]。另外,AMF會顯著增加土壤中的多酚氧化酶,說明AMF的生長會促進土壤中其他微生物上調(diào)對多酚氧化酶的分泌。天然草地的羊草中,木質(zhì)素含量相比與纖維素含量較少,但卻是枯落物中最難以分解的復(fù)合物。木質(zhì)素的分解過程中起主要作用的是多酚氧化酶,此酶主要由土壤中的白腐菌分泌,很多研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)土壤中氮素缺乏時,會抑制土壤中其他微生物與白腐菌之間的競爭作用,從而使得白腐菌活性上升[30]。AMF會吸收土壤中的氮素并將其轉(zhuǎn)運給宿主植物,所以AMF的生長會加劇土壤微環(huán)境中氮素的匱乏,進而刺激土壤微生物(白腐菌等)的活性,以分泌更多的多酚氧化酶,促進枯落物中木質(zhì)纖維素的分解。但AMF的出現(xiàn)對土壤中纖維素二糖水解酶活性無顯著作用,說明AMF對枯落物中纖維素的分解效果不明顯。土壤中大量的細菌和真菌均可以分泌纖維素二糖水解酶,故其活性的控制因子復(fù)雜較難以被單一因素影響;并且AMF獲取碳源的主要方式是跟與其共生的宿主植物進行養(yǎng)分交換,并不需要從土壤中直接獲取碳源用于自身生長[31]。所以枯落物纖維素的分解率并不受AMF控制,但可能會是其他環(huán)境因子。

    植物功能群處理之間對枯落物分解率的影響有顯著差異,主要是因為不同植物功能群對碳分配的策略不同[32]。C4禾草處理中物種多樣性較低,僅糙隱子草(Cleistogenessquarrosa)一種,且這種植物株型矮小生物量低。2016和2017年中,C4禾草的地上和地下生物量均較其他功能群植物更少,導(dǎo)致與植物共生的AMF的菌絲密度較小,對土壤酶活的激發(fā)程度低。且C4禾草處理中的蓋度相比其他功能群植物更少,導(dǎo)致地表裸露面積較大,會接受更多的太陽輻射,使土壤水分蒸發(fā)效率上升,抑制土壤微生物的活性,進而減少了對枯落物的分解。而雜類草和CK(多樣性較高)處理中,土壤酶活性顯著高于其他植物功能群處理。前人已有研究得出,植物多樣性的增會促進土壤微生物生物量的升高,因為植物多樣性高的群落會為土壤微生物提供更為豐富的碳源[33]。且2016和2017兩年中雜類草和CK處理中地下生物量較高,表明其會為地下部分提供更多的碳,增加微生物的數(shù)量,促進土壤酶活性,加快枯落物的分解。

    本研究發(fā)現(xiàn),刈割對枯落物的分解無影響。Ren等研究發(fā)現(xiàn),放牧過程中僅7%的土壤微生物變異與放牧過程本身有關(guān),而89%的變異更可能來自于其他因素,說明微生物群落變化與土地管理方式引起的環(huán)境變化關(guān)系可能更密切,而不是放牧中的采食過程[34]。適度刈割會激發(fā)土壤微生物的活性[35]。但是,這也取決于時間尺度[36],本研究僅有三年跨度,刈割對枯落物分解的影響需要更長時間跨度才會顯示。

    4 結(jié)論

    通過植物功能群和刈割處理模擬放牧過程中家畜采食作用,探究此過程中AMF對枯落物分解的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)AMF主要通過提升土壤β-葡糖苷酶和多酚氧化酶活性,加速枯落物的降解。不同植物功能群分解枯落物的能力不同,其中雜類草處理分解枯落物的能力更強,而C4禾草處理中的枯落物分解率最低。AMF和植物功能群處理無顯著交互作用,表明植物群落組成的變化并不會改變AMF對枯落物的分解作用。刈割對枯落物的分解在短時間內(nèi)無顯著影響。

    猜你喜歡
    禾草氧化酶菌絲
    羊肚菌母種培養(yǎng)基配方的優(yōu)化研究
    刈割留茬高度對大針茅草原生產(chǎn)力及可持續(xù)利用的影響
    中國被毛孢三種菌絲形態(tài)的超顯微特征觀察
    HPV16E6與吲哚胺2,3-二氧化酶在宮頸病變組織中的表達
    半夏對不同禾草的化感效應(yīng)
    苜蓿與禾草混播
    中國飼料(2017年15期)2017-08-22 04:38:29
    甘露醇對低溫下草菇菌絲的保護效應(yīng)研究
    新型抗菌肽菌絲霉素純化工藝研究
    廣東飼料(2016年5期)2016-12-01 03:43:21
    小麥多酚氧化酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究
    東祁連山多年生禾草混播草地雜草發(fā)生規(guī)律
    亚洲专区国产一区二区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| videosex国产| 一a级毛片在线观看| 精品人妻在线不人妻| 此物有八面人人有两片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 在线观看66精品国产| 韩国精品一区二区三区| 91成年电影在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 校园春色视频在线观看| 9热在线视频观看99| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲第一青青草原| 视频在线观看一区二区三区| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 婷婷六月久久综合丁香| 一级片免费观看大全| 91麻豆av在线| 午夜福利影视在线免费观看| 丁香欧美五月| 色综合站精品国产| 操美女的视频在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 波多野结衣高清无吗| 99在线人妻在线中文字幕| 嫩草影视91久久| 在线免费观看的www视频| 一级片免费观看大全| 亚洲avbb在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产成年人精品一区二区| 免费看十八禁软件| 中文字幕久久专区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 18禁国产床啪视频网站| 啪啪无遮挡十八禁网站| 女警被强在线播放| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美日韩乱码在线| 日韩欧美在线二视频| 亚洲最大成人中文| 色综合亚洲欧美另类图片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 欧美最黄视频在线播放免费| 成人手机av| 日本vs欧美在线观看视频| 免费不卡黄色视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲中文av在线| 99国产精品免费福利视频| 日本a在线网址| 中国美女看黄片| 国产亚洲欧美98| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 亚洲男人天堂网一区| 91av网站免费观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 午夜老司机福利片| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美黄色淫秽网站| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲国产精品久久男人天堂| 成人亚洲精品av一区二区| 久久久久精品国产欧美久久久| 一本综合久久免费| 精品国产国语对白av| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 一进一出好大好爽视频| 久久久国产精品麻豆| 99国产精品一区二区蜜桃av| 午夜福利在线观看吧| 性少妇av在线| 色av中文字幕| 中文字幕最新亚洲高清| 午夜久久久久精精品| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品一区二区精品视频观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 波多野结衣av一区二区av| 国产高清激情床上av| 亚洲精品美女久久av网站| 香蕉丝袜av| 久久午夜亚洲精品久久| 女人被狂操c到高潮| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 超碰成人久久| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产精品98久久久久久宅男小说| 免费av毛片视频| 国产成人影院久久av| 久久午夜综合久久蜜桃| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 日韩精品中文字幕看吧| 深夜精品福利| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲午夜理论影院| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久久久久大精品| 免费在线观看完整版高清| 久久伊人香网站| 精品久久蜜臀av无| 中出人妻视频一区二区| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲avbb在线观看| 色播在线永久视频| 欧美日韩精品网址| 大型av网站在线播放| x7x7x7水蜜桃| 九色国产91popny在线| xxx96com| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产亚洲精品久久久久5区| 久久久精品欧美日韩精品| 男人操女人黄网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲色图av天堂| 女同久久另类99精品国产91| 少妇粗大呻吟视频| 美女午夜性视频免费| 亚洲国产看品久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美日韩乱码在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 狂野欧美激情性xxxx| 丁香六月欧美| 激情视频va一区二区三区| 亚洲伊人色综图| 久久精品影院6| 精品国产一区二区久久| 精品国产国语对白av| 美女午夜性视频免费| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲专区中文字幕在线| 极品教师在线免费播放| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲欧美激情在线| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲免费av在线视频| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲,欧美精品.| 久久久国产成人免费| 在线观看舔阴道视频| 国产一区在线观看成人免费| 男人的好看免费观看在线视频 | 级片在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 黄色视频,在线免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日韩中文字幕欧美一区二区| 视频区欧美日本亚洲| 性欧美人与动物交配| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| 十分钟在线观看高清视频www| 国产精品国产高清国产av| 99热只有精品国产| 国产极品粉嫩免费观看在线| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲第一青青草原| 免费在线观看亚洲国产| 手机成人av网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲欧美激情综合另类| 手机成人av网站| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲成a人片在线一区二区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 天堂动漫精品| 最新在线观看一区二区三区| 9热在线视频观看99| 久久精品影院6| 极品人妻少妇av视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 午夜福利免费观看在线| 午夜a级毛片| АⅤ资源中文在线天堂| 叶爱在线成人免费视频播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 午夜福利一区二区在线看| 一夜夜www| 极品人妻少妇av视频| 亚洲av成人一区二区三| 午夜精品国产一区二区电影| 国产欧美日韩精品亚洲av| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲第一电影网av| 激情在线观看视频在线高清| 在线视频色国产色| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 免费搜索国产男女视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 岛国在线观看网站| 国产成年人精品一区二区| 国产区一区二久久| 麻豆成人av在线观看| 成人免费观看视频高清| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 色综合欧美亚洲国产小说| 不卡一级毛片| 香蕉丝袜av| 人人澡人人妻人| 91成人精品电影| 大香蕉久久成人网| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产私拍福利视频在线观看| av片东京热男人的天堂| 精品不卡国产一区二区三区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久狼人影院| 久久香蕉激情| 亚洲av五月六月丁香网| 久久香蕉国产精品| svipshipincom国产片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品国产国语对白av| 国产精品免费一区二区三区在线| 免费不卡黄色视频| 精品国产亚洲在线| 国产伦人伦偷精品视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 精品国产乱子伦一区二区三区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产欧美日韩一区二区精品| 手机成人av网站| 午夜福利免费观看在线| 91大片在线观看| 搡老岳熟女国产| 99精品久久久久人妻精品| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美久久黑人一区二区| 欧美在线黄色| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲精品粉嫩美女一区| 美女扒开内裤让男人捅视频| 大型黄色视频在线免费观看| 中国美女看黄片| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲熟妇熟女久久| 色尼玛亚洲综合影院| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| a在线观看视频网站| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲精品美女久久av网站| 久久伊人香网站| 国产三级在线视频| 国产成年人精品一区二区| 91麻豆av在线| 亚洲色图av天堂| 99精品欧美一区二区三区四区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 波多野结衣高清无吗| 欧美乱妇无乱码| 欧美精品亚洲一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 午夜老司机福利片| 国产99白浆流出| 日韩av在线大香蕉| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲第一av免费看| x7x7x7水蜜桃| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产精品久久视频播放| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲精品国产精品久久久不卡| av天堂久久9| 美女免费视频网站| 老司机午夜十八禁免费视频| 成人av一区二区三区在线看| 色精品久久人妻99蜜桃| 不卡av一区二区三区| 一个人免费在线观看的高清视频| 黄片播放在线免费| 亚洲片人在线观看| 国产亚洲欧美98| 精品电影一区二区在线| 桃红色精品国产亚洲av| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲性夜色夜夜综合| 一级毛片精品| 日韩欧美三级三区| 精品久久久久久成人av| 91成人精品电影| 无人区码免费观看不卡| 丝袜在线中文字幕| 黄片大片在线免费观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品美女久久av网站| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 一区二区日韩欧美中文字幕| www国产在线视频色| 亚洲精品在线观看二区| 在线观看免费午夜福利视频| 久久精品91蜜桃| 久久精品成人免费网站| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 日本免费a在线| 久久久久久久久中文| 亚洲精品美女久久av网站| xxx96com| 亚洲视频免费观看视频| 国产激情久久老熟女| 精品久久久久久,| 黄色片一级片一级黄色片| 不卡一级毛片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品国产高清国产av| 性色av乱码一区二区三区2| 国产熟女xx| 一个人免费在线观看的高清视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲熟妇熟女久久| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 多毛熟女@视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 9色porny在线观看| 国产精品,欧美在线| svipshipincom国产片| 亚洲片人在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产xxxxx性猛交| 少妇的丰满在线观看| 午夜福利18| 国产区一区二久久| 免费看a级黄色片| 三级毛片av免费| 一区二区三区高清视频在线| 麻豆国产av国片精品| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲在线自拍视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 99国产综合亚洲精品| 久久九九热精品免费| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久香蕉激情| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 精品一区二区三区四区五区乱码| 欧美不卡视频在线免费观看 | 搞女人的毛片| 国产成年人精品一区二区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 在线观看66精品国产| 黄色视频,在线免费观看| 国产高清videossex| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久久久久久精品吃奶| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 欧美一级毛片孕妇| 黄色 视频免费看| 91成年电影在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲国产欧美网| 亚洲性夜色夜夜综合| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 久久久久久久午夜电影| 国产1区2区3区精品| 视频区欧美日本亚洲| 色综合婷婷激情| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 91九色精品人成在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲午夜理论影院| 欧美激情高清一区二区三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲av五月六月丁香网| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 在线观看午夜福利视频| 亚洲电影在线观看av| 精品欧美国产一区二区三| 丝袜在线中文字幕| 日本一区二区免费在线视频| 好男人电影高清在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜福利18| 老司机福利观看| 精品人妻在线不人妻| 中文字幕最新亚洲高清| www.999成人在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 嫩草影院精品99| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 一夜夜www| 国产精品国产高清国产av| av超薄肉色丝袜交足视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 成人国产一区最新在线观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产主播在线观看一区二区| 最新美女视频免费是黄的| 一二三四社区在线视频社区8| 日日夜夜操网爽| 长腿黑丝高跟| 亚洲国产欧美网| 制服丝袜大香蕉在线| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 最近最新免费中文字幕在线| 精品国产亚洲在线| 操出白浆在线播放| 午夜影院日韩av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲中文av在线| 九色国产91popny在线| 长腿黑丝高跟| 国产亚洲精品一区二区www| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲五月色婷婷综合| 精品欧美国产一区二区三| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲一区高清亚洲精品| 黄色女人牲交| 91大片在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 在线国产一区二区在线| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 午夜激情av网站| 99riav亚洲国产免费| 一区二区三区高清视频在线| 成人国语在线视频| 婷婷六月久久综合丁香| 看免费av毛片| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久久国产成人免费| 亚洲少妇的诱惑av| 精品久久久久久成人av| 亚洲男人天堂网一区| 久久久久久久久中文| 两个人视频免费观看高清| 一级黄色大片毛片| 一进一出抽搐动态| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产成人av激情在线播放| 淫秽高清视频在线观看| 曰老女人黄片| 好男人在线观看高清免费视频 | 精品久久久久久久毛片微露脸| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲人成电影观看| 悠悠久久av| 欧美黄色淫秽网站| 1024香蕉在线观看| 亚洲国产欧美网| 人成视频在线观看免费观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 极品人妻少妇av视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国内精品久久久久精免费| 俄罗斯特黄特色一大片| 麻豆成人av在线观看| 日韩有码中文字幕| 久久狼人影院| 国产99久久九九免费精品| 免费观看人在逋| 欧美成人午夜精品| 性少妇av在线| 国产精品久久久久久精品电影 | 日韩精品青青久久久久久| 色综合欧美亚洲国产小说| 99热只有精品国产| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 中亚洲国语对白在线视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产单亲对白刺激| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲午夜理论影院| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 人妻久久中文字幕网| 99国产精品免费福利视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 欧美一级毛片孕妇| 99国产精品免费福利视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 又大又爽又粗| 此物有八面人人有两片| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲熟妇熟女久久| 国产精品国产高清国产av| 久久久国产成人免费| 丁香欧美五月| 精品国产乱子伦一区二区三区| 免费观看人在逋| 久久精品91蜜桃| 最新在线观看一区二区三区| 在线免费观看的www视频| 韩国av一区二区三区四区| 一边摸一边抽搐一进一小说| av中文乱码字幕在线| 国产人伦9x9x在线观看| 国产av精品麻豆| 欧美成人午夜精品| 国产亚洲欧美98| 黄片小视频在线播放| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 高清毛片免费观看视频网站| 午夜福利18| 国产在线精品亚洲第一网站| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 久久久久精品国产欧美久久久| 久久精品人人爽人人爽视色| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 日韩欧美一区视频在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| av超薄肉色丝袜交足视频| 此物有八面人人有两片| 午夜久久久久精精品| av在线天堂中文字幕| 精品国产亚洲在线| 精品欧美一区二区三区在线| 变态另类丝袜制服| 午夜激情av网站| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费av毛片视频| 可以在线观看毛片的网站| 69av精品久久久久久| 精品电影一区二区在线| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 精品久久久久久久毛片微露脸| 欧美成人午夜精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 丝袜人妻中文字幕| 午夜影院日韩av| 精品久久久久久久久久免费视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 日韩免费av在线播放| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲电影在线观看av| 大码成人一级视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 麻豆一二三区av精品| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲最大成人中文| 啪啪无遮挡十八禁网站| 少妇 在线观看| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲 国产 在线| 久久久国产成人精品二区| 亚洲片人在线观看| 9色porny在线观看| 久久久国产精品麻豆| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 国产精品一区二区精品视频观看| 青草久久国产| 嫩草影视91久久| 91麻豆av在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产1区2区3区精品| 男女之事视频高清在线观看| 黄色成人免费大全| 国产色视频综合| 日韩精品青青久久久久久| 婷婷丁香在线五月| 18禁国产床啪视频网站| 黄色毛片三级朝国网站| 久久人妻熟女aⅴ| 久久国产精品影院| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 精品福利观看| 女人精品久久久久毛片| 日韩三级视频一区二区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 99久久精品国产亚洲精品| 深夜精品福利| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 精品欧美一区二区三区在线| 成人亚洲精品一区在线观看| 999久久久精品免费观看国产|