食品中水溶性維生素的檢測(cè)方法

郭利華

譜尼測(cè)試集團(tuán)股份有限公司 北京 100094

絕大多數(shù)維生素以輔酶或輔基形式參加各種酶系統(tǒng)工作，在中間代謝的許多環(huán)節(jié)中都起著極重要的作用。針對(duì)這種情況，將維生素作為一種營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑，加入到不同食品中，為人體補(bǔ)充所需維生素，對(duì)有關(guān)該類食品中維生素的檢測(cè)，也引發(fā)學(xué)者專家的廣泛研究與關(guān)注。

1 食品中水溶性維生素種類及相關(guān)特性

現(xiàn)階段應(yīng)用到食品中水溶性維生素種類繁多，不同類型的維生素，其特性也存在著較大差異，常見的有以下幾種：第一，Vc，該維生素在暴露環(huán)境下很容易降解，因此在前期處理階段，需要減少暴露時(shí)間，加快操作速度。第二，VB1，該維生素在堿性條件下，遇熱后容易分解，但是在酸性條件下，其性質(zhì)會(huì)處于比較穩(wěn)定的狀態(tài)。第三，VB2，該維生素在堿性或者光照條件下很容易發(fā)生分解，這也是前期處理階段需要重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容。第四，VB5 和VB6，因其缺少?gòu)?qiáng)發(fā)色團(tuán)，因此使用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器檢測(cè)時(shí)效果較差；而且VB6 易溶于水和乙醇，稍溶于脂肪類溶劑，光照條件下易分解，不耐高溫。第五，VB12，在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿下極易分解，弱酸中十分穩(wěn)定。

2 水溶性維生素的檢測(cè)方法分析

本文以水溶性維生素VB12 為例，分析幾種常用分析方法的優(yōu)勢(shì)與不足，從而為后期檢測(cè)方法的篩選提供數(shù)據(jù)參考。

2.1 熒光分析法

在水溶性維生素檢測(cè)過程中，熒光分析法屬于常見的處理方法之一。其作用原理在于，不同類物質(zhì)在紫外光照射下會(huì)處于不同的激發(fā)態(tài)，在此激發(fā)過程中，會(huì)出現(xiàn)反應(yīng)該物質(zhì)基本特性的熒光，對(duì)此類光進(jìn)行定量分析，以此來判斷某一些物質(zhì)的含量情況?？紤]到部分物質(zhì)本身激發(fā)態(tài)下產(chǎn)生的熒光效果較差，那么此時(shí)可以借助添加熒光染料的方式來增強(qiáng)熒光效果，從而得到可靠的分析結(jié)果。該方法在VB12 含量檢測(cè)中具備良好的應(yīng)用價(jià)值，但是檢測(cè)結(jié)果容易受到雜質(zhì)干擾，而且干擾因素排除起來較難，會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.2 高效液相色譜法

在維生素檢測(cè)方法中，高效液相色譜法也是經(jīng)常使用到的檢測(cè)方法，其作用原理在于，將液體來作為流動(dòng)相，同時(shí)利用高壓輸液系統(tǒng)，將已經(jīng)混合、分離好的待測(cè)物質(zhì)，混合緩沖液一同添加到色譜柱當(dāng)中，在色譜柱內(nèi)的各成分得到分離之后，在檢測(cè)器中對(duì)于試樣進(jìn)行定量分析，從而來判斷某一些物質(zhì)的含量情況。該方法在實(shí)際應(yīng)用中，具備了檢測(cè)速度快、靈敏度高等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，可以對(duì)水溶性維生素中的VB12 含量情況進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)。但是在色譜柱使用期間，需要做好反應(yīng)時(shí)間的控制工作，避免反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)，導(dǎo)致色譜柱堵塞情況的出現(xiàn)。

2.3 高效液相色譜-質(zhì)譜法

在色譜分析法當(dāng)中，高效液相色譜-質(zhì)譜法則屬于另外一個(gè)重要分支，其作用原理與高效液相色譜法相類似，將液體來作為流動(dòng)相，同時(shí)利用高壓輸液系統(tǒng)，將已經(jīng)混合、凈化、萃取、分離好的待測(cè)物質(zhì)，混合緩沖液一同添加到色譜柱當(dāng)中，然后進(jìn)行色譜柱分離。在此過程中，會(huì)使用電噴霧離子源多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式來完成數(shù)據(jù)采集和試驗(yàn)流程檢測(cè)，根據(jù)數(shù)據(jù)信息得到質(zhì)譜圖，對(duì)于質(zhì)譜圖進(jìn)行定量分析，確定水溶性維生素的具體含量情況。該方法的適用性較強(qiáng)，可以在短時(shí)間內(nèi)完成VB12 的檢測(cè)，但是其檢測(cè)成本相對(duì)較高，對(duì)于一些普通實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)并不適用。

2.4 超臨界流體色譜法

在色譜法的分支體系中，超臨界流體色譜法的出現(xiàn)時(shí)間相對(duì)較晚，是一種將超臨界流體作為維生素檢定時(shí)流動(dòng)相的一種檢測(cè)方法。從嚴(yán)格意義上來將，該檢測(cè)方法是一種介于液相色譜與氣相色譜之間的檢測(cè)技術(shù)，即該檢測(cè)方法同時(shí)具備了兩種檢測(cè)方法的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，其操作流程與常規(guī)色譜法的內(nèi)容相類似，只是更換了流動(dòng)相的組成。該方法可以在短時(shí)間內(nèi)完成維生素VB12 的測(cè)定，具備檢測(cè)速度快，準(zhǔn)確性高、回收率高等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)[1]。

2.5 高效毛細(xì)管電泳分析法

在新技術(shù)體系快速發(fā)展的背景下，衍生出了許多的新型檢測(cè)技術(shù)，高效毛細(xì)管電泳分析法便屬于常用的一種。其作用原理在于利用設(shè)備擬建高壓電場(chǎng)，同時(shí)以此為驅(qū)動(dòng)力，將已經(jīng)混合好的物質(zhì)液體推送到毛細(xì)管內(nèi)，受到樣品內(nèi)各組分淌度的差異影響，樣品內(nèi)的物質(zhì)也會(huì)出現(xiàn)分離的情況，對(duì)其進(jìn)行定量分析，從而得到準(zhǔn)確的計(jì)算結(jié)果。該檢測(cè)方法能夠在短時(shí)間內(nèi)快速完成水溶維生素VB12 的檢定，而且具備了較高的回收率和環(huán)保型，具備了較高的推廣價(jià)值[2]。

2.6 微生物分析法

除了上述提及到的檢測(cè)方法外，微生物分析法也屬于常用的檢定方法之一。在定量分析過程中，會(huì)使用酸度法或者光密度法來進(jìn)行輔助，從而得到更加準(zhǔn)確的計(jì)算數(shù)據(jù)，提升分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，但是該方法檢測(cè)單一性較強(qiáng)，無法滿足多種維生素同時(shí)檢測(cè)的需求[3]。

由上述比較分析可以得知，在維生素VB12 的檢測(cè)中，每一種檢測(cè)方法都有著相應(yīng)的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)和不足，從綜合性能情況來看，高效液相色譜法是目前性價(jià)比較高的檢測(cè)方法，而高效毛細(xì)管電泳分析法具備了較高的回收率和環(huán)保型，具有較高的推廣價(jià)值，有可能成為檢測(cè)過程中的最優(yōu)選擇。

3 結(jié)語

綜上所述，在科學(xué)技術(shù)發(fā)展速度不斷加快的背景下，水溶性維生素的檢測(cè)方法也處于不斷優(yōu)化的狀態(tài)，針對(duì)不同需求選擇恰當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法，對(duì)于提高檢測(cè)結(jié)果可靠性有著積極地作用。