圈養(yǎng)大熊貓“妙音”初次發(fā)情及假孕的行為研究

王 雪 鐘靈秀

(1.大連森林動物園，大連，116000)

大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是國家Ⅰ級保護動物，屬于我國特有的珍稀瀕危物種，具有極高的研究價值和觀賞價值[1]。

大熊貓為季節(jié)性單次發(fā)情動物，雄性發(fā)情期可持續(xù)30 d左右，而雌性大熊貓為幾天至十幾天，高峰期僅為1—3 d，且有與雄性不同步發(fā)情的現(xiàn)象[2]。雌性大熊貓的發(fā)情一般集中在每年的3—5月，個別熊貓的發(fā)情日期會受氣候的影響，如開春較早，氣溫較高時，有些個體的發(fā)情時間能夠提前至2月中旬[3]。大熊貓的假妊娠現(xiàn)象比較普遍，而且很不容易與真妊娠區(qū)別，它們的臨床表現(xiàn)及孕激素的變化都很接近，因此把大熊貓這種未妊娠而出現(xiàn)相似妊娠的現(xiàn)象稱為大熊貓的假妊娠[4]。典型的假妊娠是在配種后或未經(jīng)配種，它們食欲均有一個恢復、增加、減少到食欲基本廢絕的過程。

發(fā)情期和妊娠期是動物重要的生命時期，其行為特征和其他生命時期有差異[5-7]。通過對發(fā)情期及假孕期大熊貓行為的研究，將為其飼養(yǎng)管理提供行為方面的技術依據(jù)[8]。根據(jù)行為的變化對動物的生命時期進行預判，高效診斷其行為變化的原因，從而適時調整飼養(yǎng)管理方案，保證動物的健康及正常生長發(fā)育。

1 研究方法

1.1 研究對象

選擇大連森林動物園亞成體大熊貓“妙音”為研究對象(雌)，身體健康(表1)。

表1 實驗大熊貓自然情況

Tab.1 Experimental giant panda natural situation

1.2 研究地點

大連位于北半球的暖溫帶地區(qū)，具有海洋性特點的暖溫帶大陸性季風氣候，冬無嚴寒，夏無酷暑，四季分明，氣候涼爽。大連熊貓館用地面積8 058 m2，建筑面積2 000 m2，有效依托山體坡度，考慮熊貓的生活、飼養(yǎng)習性，共分為外運動場、內運動場、室內籠舍、后勤區(qū)4個功能區(qū)。外運動場占地約為1 200 m2，內運動場占地約為500 m2。運動場內草植遍地，溪流循環(huán)，并有高低棲架、滑梯輪胎等娛樂設備。旺季每天8：30—16：15外放，淡季9：00—15：45外放。精料每天喂4頓，分別是10：00、12：00、14：00、20：00。竹子足量供應，根據(jù)季節(jié)的變化會調整竹子的種類以及竹筍的飼喂量。

1.3 研究方法

利用熊貓館內24 h監(jiān)控設備，采用瞬間掃描取樣法觀察記錄，取樣時間間隔設定為5 min，記錄每小時內大熊貓的行為特征。選取大熊貓“妙音”發(fā)情期及假孕期各6 d的行為變化進行觀察記錄，同時選取其非發(fā)情及非假孕期各6 d的行為變化作為對照。根據(jù)預觀察的結果[7]，將亞成體大熊貓的主要行為進行分類定義(表2)。

表2 圈養(yǎng)亞成體大熊貓行為分類及定義

Tab.2 Behavior classification and definition of captive sub-adult giant panda

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)釆用Excel 2003進行匯總和統(tǒng)計，按每小時進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，并計算百分比。運用SPSS 19.0進行數(shù)據(jù)分析。

2 研究結果

2.1 發(fā)情期

雌性大熊貓“妙音”于2015年2月初次發(fā)情。結合它的叫聲(咩叫[9])、行為及外陰變化進行的發(fā)情鑒定。

2.1.1 發(fā)情期與正常時期的行為時間分配

表3是“妙音”正常時期與發(fā)情期各行為的時間分配，由表3可以看出發(fā)情期的3種主要行為與正常時期相同，依然是采食行為、活動行為和休息行為，但發(fā)情期的采食行為(8.68%)的時間分配要少于正常時期(18.58%)；活動行為(27.14%)要多于正常時期(10.76%)，休息行為(61.63%)少于正常時期(67.07%)。

表3 時間分配

Tab.3 Time allocation %

2.1.2 發(fā)情期與正常時期的行為日節(jié)律

圖1—圖3為發(fā)情期與正常時期3個主要行為的日節(jié)律，由圖1可以看出11：05—12：00、13：05—14：00和20：05—21：00為發(fā)情期休息行為的3個高峰點。8：05—9：00、18：05—19：00和21：05—22：00為發(fā)情期休息行為的3個低谷。11：05—12：00、13：05—14：00、15：05—16：00、17：05—18：00和22：05—23：00為正常時期休息行為的5個高峰點，9：05—10：00和14：05—15：00為正常時期休息行為的2個低谷。

圖1 發(fā)情期與正常時期休息行為的日節(jié)律Fig.1 The daily rhythm of estrus and normal resting behavior

由圖2可以看出發(fā)情期間的活動行為有多個高峰點，分別是8：05—10：00、12：05—13：00、15：05—16：00和18：05—19：00，有兩個低谷，分別是11：05—12：00和20：05—21：00。9：05—11：00和15：05—16：00為正常時期活動行為的2個高峰點，12：05—13：00和17：05—18：00為正常時期活動行為的2個低谷。

由圖3可以看出，正常時期“妙音”的采食行為有多個高峰(12：05—13：00、14：05—15：00、16：05—17：00和21：05—22：00)和低谷(11：05—12：00、13：05—14：00、15：05—16：00和17：05—18：00)，整個曲線起伏較大，比較跳躍。發(fā)情期采食行為的曲線跟正常時期相比會平緩些，也有多個高峰和低谷。

圖2 發(fā)情期與正常時期活動行為的日節(jié)律Fig.2 The daily rhythm of estrus and normal moving avtivity

圖3 發(fā)情期與正常時期采食行為的日節(jié)律Fig.3 The daily rhythm of feeding behavior during estrus and normal times

2.2 假孕期

據(jù)黃祥明等的研究，懷孕產(chǎn)仔大熊貓和假孕大熊貓都有類似的反應：減食，拒食窩頭、竹，活動量明顯減少[10]。大熊貓“妙音”于2月初次發(fā)情之后(并未進行交配)，同年5月出現(xiàn)嗜睡、厭食等現(xiàn)象。采集“妙音”的尿液、糞便及毛發(fā)樣本(由于不吃精飼料，血樣樣本無法采集)。通過各項檢查，在尿樣激素水平檢查中發(fā)現(xiàn)，孕酮水平為31.7 ng/mgCr，高于孕酮基礎值16.813 ng/mgCr(孕酮量在妊娠早期和妊娠晚期升高，是妊娠黃體發(fā)育的表現(xiàn)[11])，結合它的發(fā)情及行為表現(xiàn)，認為屬于假妊娠，本文中稱為假孕。

2.2.1 假孕期與正常時期的行為時間分配

表4為“妙音”的假孕期和正常時期各個行為的時間分配。假孕期采食行為(7.70%)和活動行為(4.86%)的時間分配要少于正常時期的采食行為(18.58%)，和活動行為(10.76%)，而休息行為(85.65%)則要多于正常時期(67.07%)。

表4 時間分配

Tab.4 Time allocation %

2.2.2 假孕期與正常時期的行為日節(jié)律

圖4—圖6為假孕期與正常時期3個主要行為的日節(jié)律。由圖4可以看出，假孕期有4個相對明顯的高峰期，分別為9：05—10：00、11：05—12：00、13：05—14：00和19：05—20：00，有3個明顯的低谷，分別是6：05—7：00、16：05—17：00和21：05—22：00。11：05—12：00、13：05—14：00、15：05—16：00和17：05—18：00為正常時期休息行為的4個高峰點，9：05—10：00、14：05—15：00和16：05—17：00為正常時期休息行為的3個低谷。

圖4 假孕期與正常時期休息行為的日節(jié)律Fig.4 The daily rhythm of false pregnancy and normal resting behavior

由圖5可以看出，正常時期的活動行為有2個高峰點，分別為9：05—11：00和15：05—16：00，有2個低谷(12：05—13：00和17：05—18：00)。假孕期的活動行為有3個高峰期，分別為6：05—9：00、12：05—13：00和15：05—16：00，9：05—12：00為假孕期活動行為白天1個明顯的低谷區(qū)。

圖5 假孕期與正常時期活動行為的日節(jié)律Fig.5 The daily rhythm of false pregnancy and normal moving avtivity

由圖6可以看出假孕期采食行為有4個明顯的高峰點，分別為6：05—7：00、10：05—11：00、16：05—17：00和21：05—22：00，9：05—10：00、11：05—12：00、14：05—15：00和19：05—20：00為假孕期采食行為4個低谷點。正常時期“妙音”的采食行為有多個高峰點，分別是1：05—2：00、8：05—10：00、12：05—13：00、14：05—15：00、16：05—17：00和21：05—22：00，有4個低谷，分別是11：05—12：00、13：05—14：00、15：05—16：00和17：05—18：00。

圖6 假孕期與正常時期采食行為的日節(jié)律Fig.6 The daily rhythm of feeding behavior during false pregnancy and normal times

2.3 正常時期、發(fā)情期及假孕期行為時間分配的差異性比較

表5中組1代表正常時期與發(fā)情期時間分配的比較，組2代表正常時期和假孕期時間分配的比較，組3代表發(fā)情期和假孕期時間分配的比較。通過表5中的數(shù)值可以看出，正常時期與發(fā)情期相比，采食行為和活動行為差異極其顯著。正常時期與假孕時期相比，采食行為、活動行為和休息行為在時間分配上差異性極其顯著。發(fā)情期和假孕期相比，活動行為和休息行為在時間分配上差異性極其顯著。發(fā)情期和假孕時期沒有觀察到玩耍行為，所以無法進行比較。

表5 時間分配差異性比較

Tab.5 Comparison of differences in time allocation

注：*表示差異顯著(P<0.05)，**表示差異極其顯著(P<0.01)

Note：* Indicates significant difference(P<0.05).** Indicates very significant difference(P<0.01)

2.4 正常時期、發(fā)情期及假孕期日節(jié)律差異性比較

表6中組1代表正常時期與發(fā)情期日節(jié)律差異性比較，組2代表正常時期和假孕期日節(jié)律差異性比較，組3代表發(fā)情期和假孕期日節(jié)律差異性比較。通過表6中的數(shù)值可以看出，正常時期與發(fā)情期相比，采食行為和活動行為差異極其顯著。正常時期與假孕時期相比，采食行為、活動行為和休息行為在時間分配上差異性極其顯著。發(fā)情期和假孕期相比，活動行為、休息行為和蹭陰行為在時間分配上差異性極其顯著。在發(fā)情期和假孕時期沒有觀察到玩耍行為，所以無法進行比較。

表6 日節(jié)律差異性比較

Tab.6 Comparison of daily rhythm

注：*表示差異顯著(P<0.05)，**表示差異及其顯著(P<0.01)

Note：*Iindicates significant difference(P<0.05).** Indicates very significant difference(P<0.01)

2.5 大熊貓“妙音”發(fā)情期外陰變化

雌性大熊貓在發(fā)情時，由于體內雌激素的變化，其生殖器也隨之發(fā)生了有別于正常時期的一些生理變化[3]。在“妙音”發(fā)情期間，通過每天觀察其外陰，發(fā)現(xiàn)主要是外陰的顏色和松弛度發(fā)生了變化。將外陰的變化總結為3個時期，前期(圖7)：顏色由蒼白逐漸變?yōu)榉奂t，外陰微微外翻；中期也是高峰期(圖8)：外陰潮紅，腫脹外翻，發(fā)現(xiàn)液體分泌物；后期(圖9)：外陰顏色逐漸變淡至蒼白，外翻一點點回縮，變得萎縮松弛?！懊钜簟钡?次發(fā)情持續(xù)了20 d左右，其中高峰期只有1—2 d。

圖7—9 發(fā)情期間外陰變化Fig.7-9 Vulva changes during estrus

3 討論

大熊貓“妙音”在發(fā)情期間的采食行為、活動行為和休息行為均為3種主要行為，且休息行為的時間分配明顯要少于正常時期；活動行為明顯要多于正常時期，這與陳超等的研究結果相似[2]，但“妙音”在發(fā)情期采食行為的時間分配明顯低于正常時期，而陳超等的研究結果顯示大熊貓在這兩個時期的攝食行為并未有差異，分析可能與熊貓繁育基地具有更豐富的竹子種類提供給發(fā)情期的熊貓有關，有效緩解它們在發(fā)情期所產(chǎn)生的食欲降低現(xiàn)象。

大熊貓每年的發(fā)情時間主要集中在3—5月，少數(shù)在1—2月和6月。本文中“妙音”的初次發(fā)情發(fā)生在2月，與正常時間相比略早，分析原因可能有兩點：首先，溫度會對大熊貓的發(fā)情時間有著一定的影響[1]，而東北地區(qū)冬季采取集中供暖，室內溫度較高，可能促使其發(fā)情時間提前。其次，由于“妙音”是初次發(fā)情，生殖器官還未完全成熟，激素水平尚未穩(wěn)定，因此對其發(fā)情時間產(chǎn)生了影響。最后，光照對于雌性大熊貓發(fā)情行為也會產(chǎn)生影響[1]，過強的光照會抑制雌性大熊貓的發(fā)情行為，云層覆蓋度達到75%以上時最適合大熊貓發(fā)情。而緯度高的地區(qū)，2月的光照強度相對最弱，最符合大熊貓發(fā)情時所需的光照條件。本文還對大熊貓發(fā)情期間的外陰等變化進行了研究，通過了解這些變化，能夠幫助我們判斷，其是否發(fā)情以及其所處的發(fā)情階段，對于準確地掌握人工授精時間具有一定的幫助[3]。

對大熊貓“妙音”假妊娠期間的行為研究發(fā)現(xiàn)假孕期采食行為和活動行為的時間分配要少于正常時期的采食行為和活動行為，而休息行為則要多于正常時期。根據(jù)黃祥明等的研究[12]，大熊貓在妊娠及假妊娠時期行為的時間分配及變化趨勢都很相似，但由于“妙音”并未受孕，故無法對二者進行比較，但假孕期間的行為變化與他們的研究類似。大熊貓假孕現(xiàn)象的報道有很多[4]，但大多是對已交配的大熊貓的研究，而對于未交配而出現(xiàn)假孕現(xiàn)象研究則較少。除了大熊貓“妙音”之外，大連地區(qū)另一只雌性大熊貓飛云在初次發(fā)情之后，也同樣出現(xiàn)了疑似假孕的現(xiàn)象，因此當年群體的假妊娠率達到100%，由于相關文獻較少，所以目前尚不明確假孕現(xiàn)象在未交配大熊貓群體中發(fā)生的幾率，因此暫時無法確定大連地區(qū)雌性大熊貓假妊娠現(xiàn)象的發(fā)生是否具有特殊性，仍有待于進一步的研究。

本文對大熊貓“妙音”發(fā)情期和假孕期的行為觀察得出，發(fā)情期活動時間變長(中期伴有咩叫)，食欲減退，外陰有明顯的變化。“妙音”未經(jīng)過受孕，卻發(fā)生了妊娠行為(稱為假孕期)，發(fā)情期和假孕期相比，活動行為、休息行為和蹭陰行為在時間分配上差異性極其顯著。本文旨在指導遇到類似問題的飼養(yǎng)機構以及之后大連熊貓館的飼養(yǎng)管理，通過行為的變化來預判大熊貓是否發(fā)情與假孕，做進一步的診斷以及修改飼養(yǎng)管理方案，確保大熊貓的健康。