新輔助化療乳腺癌對ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)的影響及意義

黃湘秦

【摘要】 目的：探討乳腺癌患者行新輔助化療對癌組織ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)的影響。方法：擇取2015年6月-2019年6月本院66例乳腺癌外科手術(shù)病例，全部患者術(shù)前均接受新輔助化療?；熐按┐袒顧z，術(shù)后病理組織學(xué)檢查，測定患者癌組織ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白，比較觀察陽性表達(dá)情況。結(jié)果：ER、PR、HER-2新輔助化療前后陽性率比較（47.62% vs 49.21%、63.49% vs 65.08%、79.37% vs 77.78%），差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（字2=1.754、1.622、2.315，P>0.05）。Ki-67新輔助化療后陽性率（65.08%）明顯低于化療前（77.78%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（字2=3.452，P<0.05）。結(jié)論：乳腺癌患者行新輔助化療基本不會改變癌組織ER、PR、HER-2表達(dá)，但會造成Ki-67表達(dá)水平降低，可用于預(yù)測乳腺癌新輔助化療效果。

【關(guān)鍵詞】 乳腺癌 新輔助化療 雌激素受體 孕激素受體 陽性表達(dá)

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.26.019 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2020）26-00-03

Effects and Significance of Neoadjuvant Chemotherapy for Breast Cancer on ER， PR， HER-2， Ki-67 Expression/HUANG Xiangqin. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（26）： -54

[Abstract] Objective： To explore the effect of neoadjuvant chemotherapy on the expression of ER， PR， HER-2， Ki-67 in breast cancer. Method： From June 2015 to June 2019， 66 cases of breast cancer surgery in our hospital were selected. All patients received neoadjuvant chemotherapy before operation. The expression of ER， PR， HER-2， Ki-67 protein in cancer tissue were measured and compared. Result： There were no statistically significant differences in the positive rates of ER， PR and HER-2 before and after neoadjuvant chemotherapy （47.62% vs 49.21%， 63.49% vs 65.08%， 79.37% vs 77.78%; 字2=1.754， 1.622， 2.315; P>0.05）. The positive rate of Ki-67 after neoadjuvant chemotherapy （65.08%） was significantly lower than that before chemotherapy （77.78%）， the difference was statistically significant （字2=3.452， P<0.05）. Conclusion： The expression of ER， PR and HER-2 in breast cancer tissues will not be changed by neoadjuvant chemotherapy， but the expression level of Ki-67 will be decreased， which can be used to predict the effect of neoadjuvant chemotherapy.

[Key words] Breast cancer Neoadjuvant chemotherapy Estrogen receptor Progesterone receptor Positive expression

First-authors address： Fujian Provincial Jinshan Hospital， Fuzhou 350001， China

乳腺癌是常見惡性腫瘤，臨床以女性多見，占比達(dá)99.0%。WHO下屬國際癌癥研究中心（IARC）數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌發(fā)病率位列世界女性癌癥之首，年齡標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)病率達(dá)43.1/10萬人，占女性新發(fā)腫瘤的35.3%。國內(nèi)癌癥中心發(fā)布數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌發(fā)病率與死亡率分別位居女性癌癥的第1位和第6位，而且受生活方式改變、環(huán)境改變等因素影響，分別以每年約3.9%和1.1%的速率持續(xù)增長，是嚴(yán)重威脅女性生命安全的重大疾病[1]?；熓侨橄侔┲匾委熓侄?，特別是新輔助化療的臨床應(yīng)用，可以降低腫瘤分期，為乳腺癌局部治療創(chuàng)造了有利條件，提高手術(shù)治療率，在改善進(jìn)展期乳腺癌患者預(yù)后方面發(fā)揮了重要價值[2]。雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、人表皮生長因子受體2（HER-2）、增殖細(xì)胞核抗原Ki-67是反映乳腺癌生物學(xué)特性的重要標(biāo)志物，可用于明確乳腺癌與激素關(guān)系、了解腫瘤細(xì)胞增殖活性、判斷乳腺癌進(jìn)展等，可以為指導(dǎo)臨床治療、預(yù)測療效及評估預(yù)后提供重要生物學(xué)依據(jù)[3]。目前，臨床對于乳腺癌新輔助化療是否影響ER、HR、HER-2、Ki-67表達(dá)仍存在爭議，本研究現(xiàn)擇取本院近年收治病例進(jìn)行分析探討，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2015年6月-2019年6月本院腫瘤科收治的乳腺癌患者中擇取66例為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）病理組織學(xué)檢查證實乳腺癌，TNM分期ⅡA～ⅢB期;（2）女性;（3）初治病例;（4）符合2019CSCO乳腺癌診療指南術(shù)前新輔助治療標(biāo)準(zhǔn)，以EC-T化療方案進(jìn)行治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）治療方法禁忌或不耐受;（2）臨床資料不全。年齡27～69歲，平均（52.18±13.64）歲。未絕經(jīng)患者36例，絕經(jīng)患者30例。腫瘤最大徑0.9～5.6 cm，平均（2.71±1.54） cm。病理類型：浸潤性導(dǎo)管癌54例，浸潤性小葉癌9例，其他3例。TNM分期：ⅡA期9例，ⅡB期25例，ⅢA期20例，ⅢB期12例。分化程度：高分化34例，中分化19例，低分化13例。本研究患者簽署知情同意書，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意。

1.2 方法

新輔助化療前，全部患者均行超聲引導(dǎo)乳腺腫塊穿刺活檢，以彈射式空心針獲取2～3條組織標(biāo)本，測定ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況。新輔助化療采用EC-T方案，表柔比星（瑞輝制藥，國藥準(zhǔn)字H20000496）90 mg/m2+環(huán)磷酰胺（山西普德藥業(yè)，國藥準(zhǔn)字H14023683）600 mg/m2+序貫多西他賽（齊魯制藥，國藥準(zhǔn)字H20041129）75 mg/m2，均為靜脈注射3周。后擇期行乳腺癌改良根治術(shù)或保乳根治術(shù)。取術(shù)后大體標(biāo)本行病理組織學(xué)檢查，同法測定上述指標(biāo)。

ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白檢測采用免疫組化EnVision兩步法，檢測所用試劑及單克隆抗體均購自DAKO公司。樣本組織以酒精梯度脫水，石蠟包埋制成組織塊，6 μm層厚連續(xù)切片備用。取切片樣本脫蠟至水，PBS緩沖液沖洗3次，每次3 min。滴加3%雙氧水室溫孵育10 min，滅活內(nèi)源性酶，同法PBS沖洗。滴加一抗，室溫下孵育60 min或4 ℃過夜，PBS緩沖液沖洗。滴加二抗，37 ℃孵育30 min，PBS緩沖液沖洗。滴加配制的DAB溶液顯色，鏡下觀察3～5 min，待特定部位陽性表達(dá)，自來水沖洗，蘇木素復(fù)染。酒精梯度脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1.3 觀察指標(biāo)與評價標(biāo)準(zhǔn)

參照WHO實體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)，評價患者新輔助化療效果。完全緩解：所有靶病灶消失;部分緩解：靶病灶長徑之和較前減少≥30%;進(jìn)展：出現(xiàn)新病灶，或靶病灶長徑之和較前增加≥20%;穩(wěn)定：介于部分緩解與疾病進(jìn)展之間[4]。臨床緩解率=（完全緩解+部分緩解）/總例數(shù)×100%。

鏡下觀察組織標(biāo)本ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白染色情況。結(jié)果判讀：以細(xì)胞核內(nèi)可見清晰的棕黃色著色為陽性，根據(jù)著色的陽性細(xì)胞數(shù)分級，陽性細(xì)胞數(shù)占觀察總細(xì)胞數(shù)百分率<10%為陰性（-），10%～25%為弱陽性（+），26%～75%為中等度陽性（++），>75%為強(qiáng)陽性（+++）[5]。比較觀察新輔助化療前穿刺活檢測定的指標(biāo)陽性表達(dá)與術(shù)后病理組織學(xué)測定的指標(biāo)陽性表達(dá)差異性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)新輔助化療，患者臨床完全緩解12例（18.18%），其中病理完全緩解（pCR）3例（4.55%），部分緩解26例（39.39%），穩(wěn)定20例（30.30%），進(jìn)展8例（12.12%），臨床緩解率57.58%（38/66）。3例病理完全緩解者無法獲得有效病理樣本行免疫組化檢查，未參與評價，其余患者新輔助化療前后ER、PR、HER-2、Ki-67表達(dá)情況見表1。

化療后ER陽性表達(dá)減弱1例，轉(zhuǎn)陰1例，陽性率（47.62%）較化療前（49.21%）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（字2=1.754，P=0.069）;PR陽性表達(dá)增強(qiáng)1例，陽性表達(dá)轉(zhuǎn)陰1例，化療后陽性率為63.49%，化療前為65.08%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（字2=1.622，P=0.074）;HER-2陽性表達(dá)增強(qiáng)2例，陰性表達(dá)轉(zhuǎn)陽1例，陽性率（79.37%）高于化療前（77.78%），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（字2=2.315，P=0.055）;Ki-67陽性表達(dá)下降9例，陽性表達(dá)轉(zhuǎn)陰8例，化療后陽性率（65.08%）低于化療前（77.78%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（字2=3.452，P=0.043）。

3 討論

新輔助化療是乳腺癌重要全身治療方法，指在局部治療前予以腫瘤患者全身性細(xì)胞毒性治療，可以縮小癌灶，降低分期，為局部治療創(chuàng)造條件、提供可能，同時殺滅轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞，提高治療敏感性。

根據(jù)腫瘤細(xì)胞生長、增殖是否受內(nèi)分泌調(diào)控影響，乳腺癌可分為激素依賴性和非激素依賴性兩種，其判斷標(biāo)準(zhǔn)為正常乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生癌變時，ER和PR有無保留和缺失[6]。其中，細(xì)胞仍保留ER和PR的激素依賴性乳腺癌腫瘤生長較為緩慢，全身轉(zhuǎn)移相對少且晚，靶細(xì)胞受體含量較高，對內(nèi)分泌治療多有療效反應(yīng)，預(yù)后相對理想，ER和PR出現(xiàn)部分和全部缺失的非激素依賴性乳腺癌則腫瘤生長相對較快，對內(nèi)分泌干預(yù)療效反應(yīng)低，更易出現(xiàn)全身轉(zhuǎn)移，預(yù)后相對欠理想[7]。因此明確乳腺癌ER和PR表達(dá)情況，對評估乳腺癌病情、指導(dǎo)內(nèi)分泌治療、評估療效及判斷預(yù)后具有重要價值。對于新輔助化療對乳腺癌組織ER、PR表達(dá)的影響，臨床研究存在較大爭議，尚無定論。有研究表明，乳腺癌新輔助化療后不會對ER和PR的陽性表達(dá)造成明顯影響[8]。本研究中，新輔助化療后ER和PR陽性率較前差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與文獻(xiàn)報道結(jié)論一致。不過也有研究顯示，新輔助化療會造成ER、PR受體明顯變化，但具體變化趨勢在不同的文獻(xiàn)報道中也表現(xiàn)出差異性。而且，目前臨床尚不明確化療改變ER表達(dá)的內(nèi)在機(jī)制，有研究認(rèn)為與化療殺滅了大量ER陰性細(xì)胞有關(guān)，但具體尚有待進(jìn)一步認(rèn)證[9]。另有研究認(rèn)為，新輔助化療前后ER、PR表達(dá)改變可能與標(biāo)本取樣不同有關(guān)，是否受新輔助化療影響，尚缺乏證據(jù)

支持[10]。

HER-2是具有絡(luò)氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與分化的作用，其表達(dá)狀態(tài)與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展、對化療敏感性及預(yù)后均密切相關(guān)，是研究證實的乳腺癌化療耐藥與預(yù)后差的預(yù)測因子。本研究中，新輔助化療后患者HER-2陽性率無明顯變化，提示HER-2表達(dá)與新輔助化療療效無明顯相關(guān)性。另有研究指出，新輔助化療后患者HER-2陽性表達(dá)明顯降低，與本文研究結(jié)論不一致，考慮與該研究使用赫賽汀靶向治療，與本研究用藥存在差異有關(guān)[11]。Ki-67是乳腺癌熱門研究生物指標(biāo)之一，表達(dá)水平同乳腺癌病理分期和組織學(xué)分級有關(guān)，常被用于檢測腫瘤細(xì)胞增殖活性，其高表達(dá)多提示腫瘤惡性程度高，侵襲性強(qiáng)，預(yù)后不良。有研究指出，Ki-67表達(dá)水平能反映腫瘤細(xì)胞浸潤程度，可以用預(yù)測到乳腺導(dǎo)管原位癌預(yù)后[12]。對于Ki-67陽性表達(dá)的患者，目前研究多認(rèn)為行新輔助化療療效更好。國外有研究證實，新輔助化療有效緩解的乳腺癌患者Ki-67表達(dá)陽性率顯著高于穩(wěn)定和進(jìn)展病例[12]。另有研究顯示，新輔助化療前后Ki-67陽性下降或轉(zhuǎn)陰達(dá)55.6%，本研究中患者新輔助化療后Ki-67陽性表達(dá)明顯下降，與文獻(xiàn)[13]報道結(jié)論一致。研究認(rèn)為，Ki-67表達(dá)水平下降常提示腫瘤細(xì)胞化療敏感及自身數(shù)量減少，利于患者預(yù)后。

綜上，乳腺癌患者行新輔助化療基本不會改變癌組織ER、PR、HER-2表達(dá)，但會造成Ki-67表達(dá)水平降低，可用于預(yù)測乳腺癌新輔助化療療效。不過，造成新輔助化療前后生物學(xué)因子改變的因素有很多，本研究結(jié)論可能存在一定片面性，有待深入研究，進(jìn)一步完善。

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（收稿日期：2020-04-01） （本文編輯：何玉勤）