植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的防控效果評(píng)價(jià)

關(guān)鍵詞：荔枝蒂蛀蟲(chóng)；植物源甘油酯；觸殺；產(chǎn)卵拒避

中圖分類號(hào)：S436.67 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

荔枝蒂蛀蟲(chóng)（Conopomorpha sinensis Bradley）屬于鱗翅目（Lepidoptera）細(xì)蛾科（Gracilariidae），又稱爻紋細(xì)蛾，是危害荔枝、龍眼的主要害蟲(chóng)之一[1]。荔枝蒂蛀蟲(chóng)幼蟲(chóng)孵化后會(huì)蛀入寄主果核為害。幼蟲(chóng)老熟時(shí)鉆出寄主后會(huì)在附近的葉片或枯枝落葉上結(jié)繭化蛹[2]。該蟲(chóng)危害隱蔽，防治困難，嚴(yán)重時(shí)荔枝、龍眼蟲(chóng)果率達(dá)60%～90%[3-4]，目前對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的防治主要以化學(xué)防治為主，如52.25%農(nóng)地樂(lè)乳油、毒死蜱、氯蟲(chóng)苯甲酰胺等[5-7]。但化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期、過(guò)量使用，顯著增加了荔枝蒂蛀蟲(chóng)的抗藥性，同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致荔枝、龍眼果實(shí)農(nóng)藥殘留超標(biāo)，嚴(yán)重影響了相關(guān)產(chǎn)品的內(nèi)銷與出口，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[8-9]。因此，尋找荔枝蒂蛀蟲(chóng)的新型、安全的防治措施，降低農(nóng)藥的使用，減少對(duì)荔枝和龍眼的農(nóng)藥殘留，對(duì)荔枝和龍眼產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展至關(guān)重要。

農(nóng)用噴灑油（agricultural spray oils）是一類具有特定結(jié)構(gòu)和組分的憎水性長(zhǎng)鏈碳?xì)浠衔铮饕糜诜揽伢w型微小的害蟲(chóng)，如蚜蟲(chóng)、葉螨、薊馬、介殼蟲(chóng)等[10-11]。根據(jù)其主要成分的不同來(lái)源，主要分為礦物源、植物源和動(dòng)物源。已有研究表明，農(nóng)用噴灑油對(duì)害蟲(chóng)的作用機(jī)理主要為噴灑油分子在害蟲(chóng)體表形成油膜或進(jìn)入氣門堵塞呼吸系統(tǒng)導(dǎo)致害蟲(chóng)窒息死亡[12]；油分子穿透害蟲(chóng)組織后溶解、破壞細(xì)胞膜，擾亂害蟲(chóng)的正常生理，或呼吸系統(tǒng)受堵導(dǎo)致害蟲(chóng)緩慢死亡[13]；以直接或間接干擾害蟲(chóng)的寄主定位和產(chǎn)卵選擇等[14]。農(nóng)用噴灑油的殺蟲(chóng)機(jī)理表明其不易使害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性，目前尚未發(fā)現(xiàn)農(nóng)用噴灑油引起的害蟲(chóng)抗藥性問(wèn)題，且農(nóng)用噴灑油還具有制作成本低、低毒、對(duì)人畜及環(huán)境安全等優(yōu)點(diǎn)。目前，農(nóng)用噴灑油已廣泛應(yīng)用于蔬菜、花卉等價(jià)值高且敏感的植物蟲(chóng)害的防控中。其中礦物油乳劑在農(nóng)用噴灑油中使用最為廣泛，聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織（2023）統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，近30 年來(lái)，國(guó)內(nèi)礦物油乳劑年均用量已接近48 000 t。然而我國(guó)高等級(jí)礦物油乳劑的基礎(chǔ)油，目前全部依賴進(jìn)口[15-16]。歐陽(yáng)革成等[17]、劉慧等[18]以中國(guó)大宗特色食品生產(chǎn)有機(jī)固廢提取物為原料，研發(fā)出一種植物源噴灑油，經(jīng)測(cè)試對(duì)害蟲(chóng)的觸殺作用和行為拒避效果與國(guó)外生產(chǎn)的高等級(jí)礦物油乳劑相當(dāng)。該成果由廣州歐聯(lián)生物科技有限公司轉(zhuǎn)化，產(chǎn)品為歐豐連?農(nóng)用植物油，對(duì)柑橘木虱[Diaphorina citri （Kuwayama）]、黃曲條跳甲[Phyllotreta striolata （Fabricus）]、柑桔紅蜘蛛[Panonychus citri （McGregor）]等體型微小的害蟲(chóng)具有良好觸殺作用和行為拒避效果[18-20]。鑒于植物源甘油酯的諸多優(yōu)點(diǎn)，其是否能夠用于果園荔枝蒂蛀蟲(chóng)的防控仍缺乏相關(guān)報(bào)道。

本研究以荔枝蒂蛀蟲(chóng)為研究對(duì)象，初步測(cè)試植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)卵、蛹、成蟲(chóng)的觸殺及產(chǎn)卵拒避作用，以及其在田間條件下對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的防治效果，并對(duì)比植物源甘油酯、植物源甘油酯與果園常規(guī)使用殺蟲(chóng)劑混配減量、果園常規(guī)殺蟲(chóng)劑之間的防控差異。研究結(jié)果可為使用農(nóng)用噴灑油對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的綠色防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

荔枝蒂蛀蟲(chóng)：采集廣州增城區(qū)東林果業(yè)荔枝園（113.764168°E， 23.246451°N）的落果，置于室內(nèi)待其化蛹，溫度為（26±1）℃、相對(duì)濕度為（80±5）%、光周期為14 L∶10 D），每天收集蟲(chóng)蛹，待成蟲(chóng)羽化后， 置于養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)（50 cm×50 cm×50 cm），以5%蜂蜜水飼養(yǎng)。

荔枝蒂蛀蟲(chóng)蟲(chóng)卵收集：將荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)（雌∶雄=1∶1）置于上述養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)，并將由凸凹形產(chǎn)卵紙包裹的新鮮荔枝放入養(yǎng)蟲(chóng)籠中，使荔枝蒂蛀蟲(chóng)在產(chǎn)卵紙上產(chǎn)卵，每天取出并更換產(chǎn)卵紙。

供試藥劑：93%植物源甘油酯乳劑，由廣州歐聯(lián)生物科技有限公司生產(chǎn)，廣東省科學(xué)院動(dòng)物研究所監(jiān)制的歐豐連?農(nóng)用植物油產(chǎn)品（專利：ZL201810995471.9）[17]。

荔枝園常規(guī)管理用藥：除蟲(chóng)脲（上海生農(nóng)生化制品股份有限公司）、阿維菌素（先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司）、阿維·高氯（河北農(nóng)信生物科技有限責(zé)任有限公司）、噻蟲(chóng)·高氯氟（上海滬聯(lián)生物藥業(yè)股份有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)3種蟲(chóng)態(tài)的防治效果測(cè)定 （1）對(duì)卵的毒力測(cè)定。采用噴霧法，用手持噴霧器將3 mL 濃度為9.10、4.55、2.88、1.14 g/L 植物源甘油酯藥液（0.1% Tween-20 水溶液配置）均勻噴施到有30 粒卵的大小相同的產(chǎn)卵紙（15 cm×15 cm）上。晾干后置于直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中。以0.1% Tween-20 水溶液為對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)3 次。隨后每天觀察并記錄卵的存活情況，連續(xù)觀察10d。

（2）對(duì)蛹的毒力測(cè)定。用手持噴霧器將3 mL上述4 種濃度的植物源甘油酯溶液按上述噴霧法均勻噴施到荔枝蒂蛀蟲(chóng)已化蛹的荔枝葉片上。以0.1% Tween-20 水溶液為對(duì)照，每個(gè)處理20 頭蟲(chóng)蛹，每天記錄蛹的羽化數(shù)量，持續(xù)8 d，每個(gè)處理重復(fù)3 次。

（3）對(duì)成蟲(chóng)的毒力測(cè)定。將10 頭2 日齡荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)接入一次性塑料杯（直徑為9 cm，高為9.6 cm）中，用手持噴霧器將1.500 mL 濃度為9.100、4.550、2.880、1.140、0.608 g/L 的植物源甘油酯藥液（0.1% Tween-20 水溶液配置）均勻噴施到塑料杯內(nèi)，用紗布封口。以0.1% Tween-20水溶液為對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)3 次。處理3 h 后統(tǒng)計(jì)成蟲(chóng)死亡數(shù)。

1.2.2 雌蟲(chóng)產(chǎn)卵偏好性測(cè)定 分別測(cè)定植物源甘油酯濃度為9.10、4.55 g/L 時(shí)對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)產(chǎn)卵的影響，以0.1% Tween-20 水溶液為對(duì)照。將各供試藥液用手持噴霧器分別均勻噴施于大小一致的5 個(gè)荔枝鮮果上，待其充分晾干后（約30 min）將對(duì)照組和處理組呈對(duì)角線排列置于紗網(wǎng)籠（70 cm×70 cm×70 cm）中，并在每個(gè)紗網(wǎng)籠中央處釋放已交配且處于產(chǎn)卵期的30 頭雌成蟲(chóng)，分別于釋放1、2 d 后用體式顯微鏡統(tǒng)計(jì)荔枝果上的卵粒數(shù)，每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.2.3 田間藥效測(cè)定 試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在廣東省廣州市增城麻車新果場(chǎng)荔枝園實(shí)驗(yàn)地，荔枝樹(shù)（樹(shù)齡10 a）為統(tǒng)一種植和栽培管理的妃子笑品種。田間試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理：常規(guī)殺蟲(chóng)劑處理區(qū)（T），殺蟲(chóng)劑使用按照荔枝園常規(guī)管理用藥；4.55 g/L 植物源甘油酯+常規(guī)殺蟲(chóng)劑用量減半處理區(qū)（T）；4.55 g/L 植物源甘油酯處理區(qū)（T）。噴施等量無(wú)菌水，作為空白對(duì)照（CK），其他水肥管理一致。分別于2022 年4 月5 日、4 月19 日、4 月30 日、5 月18 日、5月28日、6 月7 日各噴1 次藥劑。每個(gè)處理設(shè)置4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 株荔枝樹(shù)。待荔枝果實(shí)收獲時(shí)，在每株樹(shù)的東、南、西、北、中5 個(gè)方位各隨機(jī)采收鮮果50 顆，剖開(kāi)果實(shí)統(tǒng)計(jì)蟲(chóng)蛀果實(shí)數(shù)，計(jì)算蛀果率和防治效果。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS22.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并計(jì)算死亡率和校正死亡率、擬合毒力回歸方程、LC50 及其95%置信區(qū)間等參數(shù)；利用單因素方差分析對(duì)校正死亡率、卵校正孵化抑制率進(jìn)行分析，并應(yīng)用Duncan’s 新復(fù)極差法比較處理之間的差異顯著性。

采用以下公式計(jì)算相關(guān)指標(biāo)：卵孵化抑制率=未孵化的卵數(shù)/處理總卵數(shù)×100%；卵校正孵化抑制率=（處理組卵的孵化抑制–對(duì)照組卵孵化抑制率）/（1–對(duì)照組卵孵化抑制率）×100%；蛹羽化率=孵化蛹數(shù)/總蛹數(shù)×100%；成蟲(chóng)死亡率=死亡蟲(chóng)數(shù)/供試總蟲(chóng)數(shù)×100%；成蟲(chóng)校正死亡率=（處理組死亡率–對(duì)照組死亡率）/（1–對(duì)照組死亡率）×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)3 種蟲(chóng)態(tài)的防控效果

2.1.1 卵的孵化 為了明確植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)卵的影響，分別測(cè)試不同濃度植物源甘油酯對(duì)不同日齡卵的孵化抑制效果（圖1）。結(jié)果顯示，植物源甘油酯對(duì)不同日齡荔枝蒂蛀蟲(chóng)卵的孵化均具有抑制效果，且抑制效率隨著植物源甘油酯濃度的增加而增大，其中，9.10 g/L 植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)1 日齡卵孵化的校正抑制率達(dá)40%以上。

2.1.2 蟲(chóng)蛹的羽化 根據(jù)荔枝蒂蛀蟲(chóng)幼蟲(chóng)的化蛹習(xí)性，測(cè)試不同濃度植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)蛹羽化的影響，結(jié)果表明，噴施植物源甘油酯后，藥液分布于荔枝葉表面，隨后匯集于葉尖蒂蛀蟲(chóng)化蛹部位（圖2A）。顯微觀察蟲(chóng)蛹后發(fā)現(xiàn)，植物源甘油酯能夠浸潤(rùn)和滲透荔枝蒂蛀蟲(chóng)蛹膜（圖2B）。與CK 相比，噴施植物源甘油酯后荔枝蒂蛀蟲(chóng)蛹的羽化率顯著降低，并且隨著使用濃度的增大，蟲(chóng)蛹的羽化率逐漸降低，在濃度為4.55 g/L 時(shí)荔枝蒂蛀蟲(chóng)蛹的羽化率降至20%以下（圖2C）。

2.1.3 成蟲(chóng)的觸殺作用 為了測(cè)定不同濃度植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)的觸殺作用，測(cè)試了植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)的毒力，結(jié)果顯示，荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)的校正死亡率隨著植物源甘油酯濃度的升高而顯著增加，處理3 h 時(shí)植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)的致死中濃度（LC50）為0.764 g/L（95%置信區(qū)間為0.130～1.105 g/L）。并且植物源甘油酯濃度為4.55 g/L 時(shí)，荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)的死亡率可達(dá)100%（表1）。

2.2 植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的產(chǎn)卵拒避作用

對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)雌蟲(chóng)產(chǎn)卵拒避作用的測(cè)試濃度為9.10、4.55 g/L 植物源甘油酯，結(jié)果表明，使用9.10、4.55 g/L 植物源甘油酯處理后，在1 d 時(shí)植物源甘油酯處理的荔枝蒂蛀蟲(chóng)的產(chǎn)卵數(shù)量顯著低于CK（P<0.05， F=19.768），但在2 d 時(shí)，這種拒避效果逐漸減弱并消失（圖3）。

2.3 植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的田間防效

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，選定濃度為4.55g/L植物源甘油酯用于果園荔枝蒂蛀蟲(chóng)的防控測(cè)定，并比較其與常規(guī)殺蟲(chóng)劑減量混配及常規(guī)殺蟲(chóng)劑單獨(dú)使用時(shí)三者防治效果的差異。結(jié)果表明，使用4.55g/L 植物源甘油酯（T）處理后荔枝的蛀果率顯著低于CK，與常規(guī)殺蟲(chóng)劑（T1）使用后的防效相當(dāng)，且配合減半殺蟲(chóng)劑（T）處理后，則進(jìn)一步降低果園中荔枝的蛀果率（圖4）。

3 討論

荔枝是廣東農(nóng)業(yè)的傳統(tǒng)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)。隨著綠色農(nóng)業(yè)的興起，利用新型害蟲(chóng)防控措施、降低化學(xué)農(nóng)藥的使用已成為提高荔枝品質(zhì)、增加荔枝園經(jīng)濟(jì)收入的必要技術(shù)手段。為此，本研究測(cè)定了植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)卵、蛹和成蟲(chóng)的防控效果，并在果園初步測(cè)定了噴施植物源甘油酯、植物源甘油酯與常規(guī)農(nóng)藥減量混配以及常規(guī)農(nóng)藥后荔枝的蛀果率，以期為利用農(nóng)用噴灑油對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)進(jìn)行綠色防控提供研究基礎(chǔ)。

植物源甘油酯符合國(guó)內(nèi)外有機(jī)食品生產(chǎn)允許使用的農(nóng)藥范圍，且成本比礦物源乳劑和其他植物源乳劑低，能對(duì)木虱、粉虱等小型害蟲(chóng)和一些葉面微生物病害的防控起一定作用[18-20]。本研究的室內(nèi)測(cè)試結(jié)果表明，植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)具有較高的觸殺效果，且隨著植物源甘油酯濃度的增加而增大，在濃度為4.55 g/L 時(shí)，植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)成蟲(chóng)有完全殺滅的效果。這與用植物源甘油酯防治柑橘木虱成蟲(chóng)和黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防治效果相似[18-19]。研究還發(fā)現(xiàn)植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)卵的孵化具有顯著的抑制效果，這可能是由于植物源甘油酯堵塞蟲(chóng)卵的氣門，致其缺氧窒息或生命力下降而亡[21]。此外，在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，植物源甘油酯可浸潤(rùn)并滲透蛹膜，干擾蛹的發(fā)育，使其無(wú)法正常羽化而死亡，但具體的原因仍需進(jìn)一步探究。

已有研究顯示，農(nóng)用噴灑油還具有很強(qiáng)的展著性，寄主植物完全被噴灑油覆蓋變干后對(duì)害蟲(chóng)的行為特性產(chǎn)生影響，如干擾害蟲(chóng)的寄主定位、取食、產(chǎn)卵行為等[19， 22]。在本研究中還發(fā)現(xiàn)，植物源甘油酯在短時(shí)間內(nèi)可引起荔枝蒂蛀蟲(chóng)雌蟲(chóng)拒避選擇荔枝鮮果產(chǎn)卵，與蓖麻油田間防治小菜蛾[Plutella xylostella （Linnaeus）]的結(jié)果類似，均可拒避雌蟲(chóng)產(chǎn)卵[23]。因此，在噴施植物源甘油酯的短時(shí)間內(nèi)，與性信息素等引誘劑聯(lián)合應(yīng)用，構(gòu)成拒避-誘殺系統(tǒng)，對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)實(shí)行推拉防控策略。

此外，油乳劑與化學(xué)農(nóng)藥混配可增加化學(xué)藥劑的展著性和滲透性，彌補(bǔ)油乳劑在持效性能方面的不足，以減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量并提高防治效果[20， 24] 。孫泉良等[25] 研究發(fā)現(xiàn)懷農(nóng)特（WETCIT）TM 高效植物油助劑對(duì)吡蚜酮防治褐飛虱[Nilaparvata lugens （Stal）]具有增效作用，可使吡蚜酮的速效性、最大防治效果和持效性等方面得到改良；陽(yáng)廷密等[26]研究發(fā)現(xiàn)在防治柑橘紅蜘蛛時(shí)，一定濃度的甲基化植物油、d-檸檬烯對(duì)螺螨酯懸浮劑具有明顯的增效減量作用。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，植物源甘油酯與常規(guī)殺蟲(chóng)劑減量混合使用時(shí)，其防控效果略低于殺蟲(chóng)劑和植物源甘油酯單施區(qū)，與孫泉良等[25]將懷農(nóng)特TM 高效植物油助劑與吡蚜酮混配對(duì)褐飛虱的防治效果相似，均達(dá)到增效減量的作用。這表明植物源甘油酯作助劑與荔枝園常規(guī)殺蟲(chóng)劑混用，不僅能夠控制果園內(nèi)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的蛀果率，同時(shí)能夠降低化學(xué)農(nóng)藥的使用量，達(dá)到增效減量的目的，該方法還可起到延緩蒂蛀蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性的作用，降低對(duì)環(huán)境的污染。

植物源甘油酯是一種新型的農(nóng)用噴灑油藥劑，對(duì)環(huán)境安全友好，且不會(huì)使害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性，但對(duì)其殺蟲(chóng)能力的評(píng)價(jià)仍較少。本研究發(fā)現(xiàn)植物源甘油酯對(duì)荔枝蒂蛀蟲(chóng)具有較好的防治效果，可有效降低果園內(nèi)荔枝蒂蛀蟲(chóng)的蛀果率，還能顯著減少化學(xué)農(nóng)藥的使用。植物源甘油酯對(duì)荔枝果園內(nèi)其他害蟲(chóng)是否也具有防治效果及其作用機(jī)理，仍需進(jìn)一步探究。