孫群群,張興奇,姚志輝,金暻湜
(1.黔南民族師范學(xué)院體育學(xué)院,貴州 都勻 558000;2.韓國湖西大學(xué)一般大學(xué)院,韓國 牙山 31499)
膳食纖維不能被人體消化[1],但卻是人體健康所必要的物質(zhì),是平衡膳食結(jié)構(gòu)的必要營養(yǎng)素之一。正常人每人每天需要攝入25 g~30 g的膳食纖維,才能夠保持人體消化系統(tǒng)的健康[2]。
銀耳(Tremella fuciformis) 是一種常見的真菌,其通體潔白柔軟有彈性,看起來像菊花一層層的花瓣,新鮮的銀耳呈半透明的天然膠狀形態(tài)[3]。銀耳的功效很多,歷代皇家貴族均把銀耳當(dāng)成營養(yǎng)滋補、延年益壽的佳品,深受大眾喜愛[4]。銀耳除了含有蛋白質(zhì)和和多種氨基酸礦物質(zhì)等豐富的營養(yǎng)成分外,還含有膳食纖維,可以幫助胃腸蠕動,促進消化,防止便秘[5]。銀耳不僅能通便,還能止瀉,因為銀耳富含植物膠質(zhì)對腸胃的不正常蠕動有一定的抑制作用[6]。
膳食纖維(dietary fiber)一詞是由Hipsley提出的,最早的膳食纖維定義為植物細(xì)胞壁中的抗消化性組成成分[7]。1972~1976年間,Towell等[8]又將膳食纖維的定義進行了更準(zhǔn)確的描述,認(rèn)為膳食纖維即“不被人體消化吸收的多糖類碳水化合物與木質(zhì)素”。1985年,美國職業(yè)分析化學(xué)家協(xié)會(associa-tion of official analytical chemists,AOAC) 確定了分析總膳食纖維的方法 AOAC 985.29[9]。1991年,AOAC確定了食品中可溶性膳食纖維的分析方法AOAC 991.42[10]。1994年,AOAC對復(fù)雜碳水化合物的概念及膳食纖維的生理學(xué)定義與組分進行確定,指出膳食纖維包括可食的非淀粉多糖、木質(zhì)素及不能被人體消化酶消化的其他相關(guān)物質(zhì),并將AOAC 985.29作為膳食纖維的分析方法[11]。1998年,AOAC委派科學(xué)委員會重新評定膳食纖維的定義,將膳食纖維分為2類,非水溶性纖維是指不被人體消化酶消化且不溶于熱水的以纖維素、半纖維素、木質(zhì)素為主的膳食纖維[12]。
每100克銀耳干品中,膳食纖維含量約為30 g,其主要組成成分是纖維素、半纖維素、果膠和木質(zhì)素等[13]。其中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素是銀耳細(xì)胞壁的主要組成成分,纖維素是具有均一組成的單糖組成的一種多糖分子;而半纖維素則是由不同單糖連接而成的雜多糖,且不同來源的半纖維素其單糖的種類、組成也不相同,主要是由木聚糖組成。木質(zhì)素則是一種復(fù)雜的天然高分子物質(zhì),主要有3種基本,分別為紫丁香基、愈創(chuàng)木基和對羥基苯基,不屬于多糖類化合物;而果膠則是一種多糖類高分子化合物,主要是由α-D-吡喃半乳糖醛酸以1,4糖苷鍵連接而成的長鏈。銀耳中含有果膠是其形成半透明狀凝膠的主要因素。
試驗主要試劑有:硝酸、95%乙醇,均為分析純,購自開封市旭信化工有限公司。
試驗主要儀器設(shè)備有:YHTCP 180×150氧化鋯錘式破碎機,鶴壁市銀河分析儀器化工有限公司;WBZ-S801-7鼓風(fēng)電熱烘箱,蘇州王品工業(yè)烘箱設(shè)備有限公司;PHS-3C型酸度計,溫州百恩儀器有限公司;JIDI-20D臺式多用途高速離心機,廣州吉迪儀器有限公司;F-P2000高能行星式球磨儀,湖南弗卡斯實驗儀器有限公司;DFY-30L低溫恒溫反應(yīng)浴,日本東京理化器械株式會社;TCS10型恒溫混勻儀,杭州瑞誠儀器有限公司;7200型小鼠柔性灌胃針,上海玉研科學(xué)儀器有限公司。
新鮮銀耳購自當(dāng)?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場,經(jīng)洗凈、烘干、粉碎、將銀耳粉末過80目篩后備用。將銀耳粉末在純凈水中浸泡30 min后洗滌,操作2次以去除其中的可溶性糖類、灰塵以及其他雜質(zhì)。預(yù)處理后的銀耳粉末按料液比為1∶20加入一定體積的純凈水,采用硝酸作為酸解試劑調(diào)pH至2.0,在90℃溫度下浸提2 h后抽濾,濾渣干燥備用,濾液真空濃縮至原體積的1/3左右,加入濃縮液1倍~4倍體積的95%乙醇,沉析1 h,放入離心機于3 000 r·min-1的條件下離心15 min,收集的沉淀物加入一定量的水復(fù)溶,離心去除不溶物,上清液濃縮,濃縮液再加入3倍體積的95%乙醇,沉析后離心,收集沉淀,干燥后即得銀耳可溶性膳食纖維粗提物。
試驗選用昆明SPF級小鼠,雌雄各半,體重(20±3)g,由遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司提供。試驗前適應(yīng)性喂養(yǎng)分籠飼養(yǎng)一周,每籠10只。正常投喂飼料,記錄每日小鼠的飲水量,并計算出平均每天的飲水量M。適應(yīng)性喂養(yǎng)結(jié)束后開始建立小鼠便秘模型:限制小鼠的飲水但不禁食,在試驗開始前的1 d、2 d給小鼠飲用M/3的水量,3 d、4 d給小鼠飲用M/6的水量,5 d、6 d、7 d給小鼠飲用M/12的水量,觀察小鼠排便發(fā)現(xiàn)質(zhì)地逐漸變干、大便顆粒變小變硬,證明便秘模型建立成功。
便秘模型建立后小鼠可自由飲水進食,按體重分成4組,每組10只。其中第1組為對照組,每日1次定時經(jīng)口按2 g·kg-1劑量灌胃小鼠純凈水;試驗1組、試驗2組和試驗3組每日定時經(jīng)口按2 g·kg-1劑量,分別灌胃小鼠濃度為20%、50%和80%的銀耳可溶性膳食纖維粗提物,連續(xù)3 d。最后一次灌胃1 h后,用柔性灌胃針給每只小鼠灌胃0.8 mm的彩色塑料顆粒10粒,5 h后無菌收集各組小鼠的糞便,清洗后找出彩色塑料顆粒并計數(shù)。試驗期間小鼠自由飲水進食。
首次灌胃前,無菌采集各組小鼠30 min內(nèi)的新鮮糞便,立即稱取5 g糞便與200 mL生理鹽水混合,在恒溫混勻儀中振蕩混勻15 min使糞便完全混合均勻,稀釋10倍后,在培養(yǎng)皿中采用乳酸菌檢測專用的乳酸菌培養(yǎng)基(MRS)上進行接種,每組3個平行樣本。將培養(yǎng)皿倒置于(37±1)℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)72 h,統(tǒng)計菌落數(shù)。末次灌胃24 h后,采用上述試驗方法再次采集小鼠糞便檢測菌落數(shù)并記錄。
試驗結(jié)果如表1所示。
表1 灌胃銀耳膳食纖維對小鼠腸道推進運動的影響Tab.1 Effects of dietary fiber from Tremella fuciformis on intestinal propulsion in mice
由表1可知,與對照組相比,3個劑量組都可以有效促進小鼠排出塑料顆粒;而且平均排出塑料顆粒的數(shù)量與銀耳膳食纖維灌胃的濃度成正比,有明顯的量效關(guān)系。試驗1組、試驗2組、試驗3組平均排出數(shù)量為4.42個,與對照組相比提高了近2倍;而最高排出數(shù)量的試驗3組與對照組相比提高了2.6倍。這表明銀耳膳食纖維對小鼠腸道運動有顯著的促進作用,具有提高小鼠腸道的運動能力,加速了腸道運動代謝。
試驗前后小鼠糞便中乳桿菌群數(shù)量變化結(jié)果如表2所示。
表2 灌胃銀耳膳食纖維前后小鼠糞便中乳桿菌數(shù)量變化Tab.2 Changes of lactobacilli in mice feces before and after intragastric administration of Tremella fuciformis dietary fiber
由表2可知,與對照組相比,試驗1組、試驗2組、試驗3組的小鼠在灌胃銀耳膳食纖維后乳桿菌數(shù)量均有所增加。其中試驗1組較對照組乳桿菌數(shù)量高出了一個數(shù)量級還多;試驗2組較對照組乳桿菌數(shù)量也高出了2個數(shù)量級;試驗3組較對照組乳桿菌數(shù)量高出了3個數(shù)量級。這說明以上3個灌胃銀耳膳食纖維的試驗組均促進了小鼠腸道內(nèi)乳桿菌的繁殖。銀耳膳食纖維具有調(diào)節(jié)腸道菌群、增強腸道運動代謝功能的作用。
采用小鼠腸道推進運動試驗來檢測銀耳膳食纖維對胃腸運動代謝的作用,通過測定小鼠糞便乳桿菌群數(shù)量來檢測銀耳膳食纖維對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用,評價其對腸道運動代謝功能影響。2個試驗結(jié)果均顯示出了銀耳的膳食纖維可以促進腸道蠕動、有潤滑腸道、刺激排便的功效。
分析銀耳膳食纖維對腸道運動代謝的促進作用原理。一方面銀耳膳食纖維中的水溶性纖維,水溶性纖維可減緩消化速度,延長食物在腸道的吸收時間,從而使食物消化更加充分,減輕了腸道消化的負(fù)擔(dān)。從運動代謝的機理上來說,銀耳膳食纖維可以增加腸道內(nèi)大便的體積,增加大便與腸道的接觸面積,刺激腸道產(chǎn)生便意,減少大便停留在腸道的時間,從而促進腸道運動代謝。另一方面主要是腸道內(nèi)的有害菌群(如大腸桿菌、腸球菌等)大量繁殖和異常發(fā)酵,導(dǎo)致大便水分蒸發(fā),大便變干變硬。而銀耳膳食纖維能夠促進腸道內(nèi)的益生菌繁殖,這從小鼠糞便中乳桿菌數(shù)量變化情況可以看出。
綜上所述,通過小鼠腸道推進運動試驗和小鼠糞便乳桿菌群檢測試驗表明,銀耳膳食纖維能夠有效促進腸道運動代謝,并通過血液循環(huán)來對人體的其它運動代謝進行調(diào)節(jié)。