固相萃取-氣相色譜串級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水產(chǎn)品中的多氯聯(lián)苯

楊梅

摘 要：本文研究了固相萃取-氣相色譜串級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用方法測(cè)定食品中多氯聯(lián)苯的方法。用二氯甲烷和石油醚從食品中提取，固相萃取凈化7種多氯聯(lián)苯，運(yùn)用GC-MS/MS進(jìn)行分析。以內(nèi)標(biāo)法定量，加標(biāo)濃度分別為2、5、50 ?g·kg-1時(shí)，回收率范圍為70.37%～108.98%。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.81%～9.85%，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均符合要求。方法檢出限為2 μg·kg-1，用該方法可實(shí)現(xiàn)對(duì)水產(chǎn)品中多氯聯(lián)苯的檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：固相萃取;氣相色譜串級(jí)質(zhì)譜;多氯聯(lián)苯

Abstract：An analytic method was developed for determination of PCBs in Food by SPE-GC-MS-MS. It adopts a new pretreatment technology， and abstract PCBs from food with from Tea with Dichloromethane and Petroleum Ether

（v/v=1/1）， Seven kinds of polychlorinated biphenyls were purified by solid phase extraction， then analysis by GC-MS-MS. It was quantified by the internal standard method. When PCBs in sample at the concentrations of 2， 5， 50 ?g·kg-1， the ?recoveries were in the range of 70.37%～108.98%. The relative standard deviation was 2.81% ～ 9.85%， and the recovery rate and relative standard deviation were in line with the requirements. The limits of detection were 2 ?g·kg-1. It was confirmed that the proposed method can be applied in Food analysis.

Key words：SPE; GC-MS-MS; PCBs

中圖分類號(hào)：TS254.7

多氯聯(lián)苯（Polychlorinated biphenyls，簡(jiǎn)稱PCBs），

是斯德哥爾摩公約中優(yōu)先控制的12種污染物之一[1-2]。多氯聯(lián)苯屬于致癌物質(zhì)，容易累積在脂肪組織，造成腦部、皮膚及內(nèi)臟疾病，并影響神經(jīng)、生殖及免疫系統(tǒng)。PCBs化學(xué)性質(zhì)極為穩(wěn)定，難以被生物降解，能夠通過食物鏈富集，通常在生物樣品和環(huán)境樣品中同時(shí)存在，可以通過水體中生物食物鏈的富集作用，在魚類體內(nèi)濃度累積到幾萬甚至幾十萬倍[1]。生物體中的PCBs含量的高低往往能反映其所處環(huán)境相應(yīng)污染的水平，全球環(huán)境檢測(cè)系統(tǒng)/食品規(guī)劃部分中規(guī)定了7種指示性PCBs單體（PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB180）作為檢測(cè)PCBs污染情況的指標(biāo)[3]。美國(guó)食品藥品管理局（FDA）建議水產(chǎn)品種PCBs最大允許濃度為2 mg·kg-1[3]。除了職業(yè)暴露外，食物的攝入是人類接觸PCBs的主要途徑，占人體接觸量的90%以上，其中動(dòng)物性食品是最主要的來源[4]，因此監(jiān)測(cè)食品中的PCBs對(duì)于控制其危害十分重要。

由于PCBs對(duì)環(huán)境的污染日益引起全球性的關(guān)注，而且PCBs殘留濃度低、干擾物質(zhì)多且組分復(fù)雜，因此對(duì)其分析測(cè)試提出了更高的要求。國(guó)內(nèi)外關(guān)于多氯聯(lián)苯測(cè)定的報(bào)道較多[1-3，5]，目前樣品的前處理主要有索氏萃取、超聲萃取、微波輔助萃取、超臨界流體萃取及加速溶劑萃取幾種方法;樣品的凈化技術(shù)主要有化學(xué)法和柱層析法;分析方法主要采用氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。用氣相色譜法和液相色譜法測(cè)定多氯聯(lián)苯時(shí)，存在基質(zhì)干擾大，容易誤判或錯(cuò)判的問題，氣相色譜質(zhì)譜法在定性方面雖然優(yōu)于氣相色譜，但由于基質(zhì)產(chǎn)生的碎片離子有時(shí)也會(huì)對(duì)目標(biāo)分析物產(chǎn)生干擾，在定性方面也存在一定問題;氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法具有高靈敏度和準(zhǔn)確度可以彌補(bǔ)GC和GC-MS法在確證方面的不足，且具有基質(zhì)影響小、凈化要求低等特點(diǎn)。本文采用毛細(xì)管氣相色譜串級(jí)質(zhì)譜法（GC/MS/MS）檢測(cè)食品中7種多氯聯(lián)苯含量，方法選擇PCB198作為內(nèi)標(biāo)物，試樣經(jīng)提取、凈化、濃縮及毛細(xì)管氣相串級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量測(cè)定食品中多氯聯(lián)苯的含量。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

Bruker TQ氣相色譜-串級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用儀;水浴振蕩器;分析天平;固相萃取儀;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;離心機(jī)。

1.1.2 試劑

水（Millipore系統(tǒng)超純水）;二氯甲烷（色譜純）;正己烷（色譜純）;無水硫酸鈉（分析純）;氯化鈉（分析純）;氮?dú)猓?9.99%）;氦氣（99.999%），氬氣（99.999%），SPE固相萃取柱（Alumina-B，2 g/6 mL）。

1.1.3 標(biāo)準(zhǔn)品

2，4，4'-三氯聯(lián)苯（PCB28，CAS：7012-37-5），2，2'，5，5'-四氯聯(lián)苯（PCB52，CAS：35693-99-3），2，2'，4，5，5'-五氯聯(lián)苯（PCB101，CAS：37680-73-2），五氯聯(lián)苯（PCB118，CAS：31508-00-6），2，2，3，4，4，5-六氯聯(lián)苯（PCB138，CAS：35065-28-2），六氯聯(lián)苯（PCB153，CAS：35065-27-1），2，2，3，4，4，5，5-七氯聯(lián)苯（PCB180，CAS：35065-29-3），內(nèi)標(biāo)：PCB198。

1.2 試樣的制備與保存

樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，混勻，在適宜的溫度下密封保存，待測(cè)。

1.3 試樣的前處理

1.3.1 提取

稱取5.00～10.00 g樣品，置于離心管中，加入定量?jī)?nèi)標(biāo)PCB198后，以30 mL正己烷∶二氯甲烷（1∶1，體積比）為提取溶液，于水浴振蕩器上提取2 h，水浴溫度40 ℃，振蕩速度為200 r·min-1。離心后，將提取液收集在雞心瓶中，重復(fù)提取一次，合并兩次提取液。將提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至約1 mL，待凈化。

1.3.2 凈化

在堿性氧化鋁固相萃取柱中加入一層無水硫酸鈉，約2 cm高，加入提取液之前，先用10 mL正己烷預(yù)淋洗固相萃取柱，棄去流出液。移入1.3.1提取液，用6 mL二氯甲烷+正己烷（5+95）分3次洗滌樣液瓶，合并將洗滌液移入柱中，再用適量二氯甲烷+正己烷（5+95）洗滌堿性氧化鋁柱，收集所有流出物于雞心瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干，正己烷定容至1 mL，過濾膜后用于GC-MS-MS測(cè)定。

1.4 儀器條件

1.4.1 色譜條件

色譜柱：DB-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm;載氣：氦氣;柱流速：1 mL·min-1;進(jìn)樣口溫度：240 ℃;進(jìn)樣方式：Spiltless;進(jìn)樣量：1 μL;程序升溫：起始溫度90 ℃（保留1 min），30 ℃·min-1至200 ℃（保留3 min），5℃·min-1至250 ℃（保留2 min），30 ℃·mi-1n至280 ℃（保留2 min）。

1.4.2 質(zhì)譜條件

進(jìn)樣口溫度：280 ℃;碰撞氣：高純氬氣（≥99.999%）;接口溫度：280 ℃;離子源：EI;掃描模式：MRM;檢測(cè)器溫度：250 ℃

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件的確定

利用上述儀器條件，各個(gè)多氯聯(lián)苯的保留時(shí)間，定性離子對(duì)、定量離子對(duì)及碰撞能見表1，按照上述程序升溫，得到7種多氯聯(lián)苯的色譜圖，如圖1。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

本次方法開發(fā)中的校準(zhǔn)曲線共取了6個(gè)點(diǎn)，其中根據(jù)檢測(cè)限分別包括：1、5、10、20、50 mg·L-1和100 mg·L-1。標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性見圖2。

2.3 方法的準(zhǔn)確度和精密度實(shí)驗(yàn)

本實(shí)驗(yàn)中采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)做回收率的測(cè)定方法評(píng)價(jià)分析方法的準(zhǔn)確度，精密度用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。

由表2知，本項(xiàng)目采用對(duì)魚類樣品加標(biāo)，加標(biāo)濃度分別為2、5、50 mg·kg-1?；厥章史秶鸀?0.37%～108.98%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.81%～9.85%，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均符合要求。其中2 mg·kg-1魚類產(chǎn)品的加標(biāo)譜圖見圖3。

2.4 實(shí)際樣品的檢測(cè)

按以上前處理方法處理的樣品經(jīng)上述氣相色譜條件測(cè)試能達(dá)到各組分完全分離的要求。圖4和圖5分別為海菜和魚中多氯聯(lián)苯含量測(cè)試色譜圖。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)將固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)相結(jié)合，建立了測(cè)定水產(chǎn)品多氯聯(lián)苯的分析方法。該方法方便快速、靈敏準(zhǔn)確，能夠滿足水產(chǎn)品種多氯聯(lián)苯的檢測(cè)要求，利用所建立的方法可以對(duì)水產(chǎn)品中的多氯聯(lián)苯進(jìn)行檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)：

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