犬糞包蟲(chóng)抗原檢測(cè)試劑盒應(yīng)用效果報(bào)告

趙志剛，楊繼元，李國(guó)平，顧冬花，張才旦 卓瑪，杜梅卓，蔡金山，趙全邦，李 靜，胡廣衛(wèi)，張 俊，汪永洲

（1.青海省大通縣畜牧獸醫(yī)站 810100；2.青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 810000；3.青海省雜多縣獸醫(yī)站 815300）

包蟲(chóng)病又叫棘球蚴病， 是由棘球?qū)俳{蟲(chóng)的幼蟲(chóng)——棘球蚴寄生于人和動(dòng)物的肝、 肺等組織器官而引起的一種重要的人獸共患寄生蟲(chóng)病，嚴(yán)重危害人和家畜健康，是影響社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重大動(dòng)物疫病之一。 包蟲(chóng)病呈世界性分布，我國(guó)是世界上包蟲(chóng)病高發(fā)國(guó)家之一。 區(qū)域性流行是我國(guó)包蟲(chóng)病的流行特點(diǎn)，高發(fā)流行地區(qū)相連成片， 形成我國(guó)廣大草原畜牧業(yè)地帶一種特有的地方病流行。2009 年衛(wèi)生部、農(nóng)業(yè)部（現(xiàn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部）將其列入人畜共患病防控名錄，農(nóng)業(yè)部（現(xiàn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部）、衛(wèi)生部等14 個(gè)部委聯(lián)合印發(fā)了《防治包蟲(chóng)病行動(dòng)計(jì)劃（2010 年-2015 年）》，國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃和青海省中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃都將包蟲(chóng)病防治列為優(yōu)先防治的動(dòng)物疫病， 其防治關(guān)鍵之一在于陽(yáng)性犬的篩查和糞便的無(wú)害化處理。 因此，于2017 年7 月至2018 年9 月進(jìn)行了犬糞包蟲(chóng)抗原試劑檢測(cè)效果評(píng)價(jià)，現(xiàn)就其檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 青海省大通縣農(nóng)戶購(gòu)買(mǎi)的5 條犬。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)室 大通縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

糞包蟲(chóng)抗原檢測(cè)前， 先用患棘球蚴病的牛羊臟器飼喂犬，喂養(yǎng)5 周后，用糞抗原檢測(cè)試劑每周檢查一次，至第三周飼喂犬中有2 條糞抗原呈陽(yáng)性，3 條呈陰性。 然后將5 條犬依糞抗原檢測(cè)結(jié)果分為陽(yáng)性組和陰性組，采集糞便備用，陽(yáng)性犬仍然用患包蟲(chóng)病臟器飼喂，陰性犬改為犬糧。 至17 周宰殺5 條犬，檢查小腸內(nèi)蟲(chóng)體感染情況。

1.2.1 犬糞 采集的所有犬糞置于-70℃以下低溫冰柜中滅活、備用。

1.2.2 檢測(cè)試劑 犬糞包蟲(chóng)抗原的檢測(cè)試劑盒購(gòu)自深圳市康百得生物科技有限公司，批號(hào)20161109。 置于冷藏柜2℃～8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2 犬糞抗原ELISA 檢測(cè)方法

2.1 檢測(cè)步驟

按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作和結(jié)果的判定。

3 結(jié)果

3.1 糞抗原重復(fù)檢測(cè)和剖檢結(jié)果

從下表5 條犬各重復(fù)11 次的糞抗原檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，1、3 號(hào)犬糞抗原一直呈陰性，2 號(hào)犬除第三次檢測(cè)糞抗原呈現(xiàn)陽(yáng)性外均呈陰性，4 號(hào)犬除第7 次檢測(cè)呈陰性外均呈陽(yáng)性，5 號(hào)犬糞抗原均呈陽(yáng)性。 剖檢結(jié)果與糞抗原重復(fù)檢測(cè)多次呈陽(yáng)性的結(jié)果非常一致。 該結(jié)果說(shuō)明犬糞包蟲(chóng)抗原檢測(cè)試劑盒在確診犬是否感染棘球絳蟲(chóng)的檢測(cè)結(jié)果是可靠的，只不過(guò)多次檢測(cè)后才能確診。

表1 犬糞重復(fù)檢測(cè)結(jié)果

3.2 不同組犬糞抗原陰陽(yáng)性概率

表2 不同組犬糞抗原檢測(cè)出陰陽(yáng)性概率

4 討論與分析

4.1 表2 檢測(cè)結(jié)果可以看出，重復(fù)檢查中陽(yáng)性組糞抗原呈現(xiàn)陰性的概率是4.55%，呈陽(yáng)性的概率是95.45%，陰性組糞抗原呈陽(yáng)性的概率是3.03%， 呈陰性的概率是96.97%， 總符合率為93.36%。另外，在剖檢中2、3 號(hào)犬檢出了勾首蛔蟲(chóng)，1 號(hào)犬小腸內(nèi)未檢出蟲(chóng)體，4、5 號(hào)犬小腸內(nèi)檢出了大量棘球絳蟲(chóng)。

4.2 剖檢結(jié)果與糞抗原重復(fù)檢測(cè)多次呈陽(yáng)性的結(jié)果非常一致。 說(shuō)明目前使用的犬糞包蟲(chóng)抗原檢測(cè)試劑盒具有良好的特異性和敏感性， 用該試劑多次重復(fù)檢測(cè)可以確診犬是否感染棘球絳蟲(chóng)。

4.3 用患包蟲(chóng)病的牛羊內(nèi)臟飼喂犬，所有飼喂犬不一定在同一時(shí)間感染棘球絳蟲(chóng)，所以在做后期驗(yàn)證試驗(yàn)時(shí)每份樣品至少重復(fù)做6 次，計(jì)算符合率最終確定結(jié)果。