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    淺談犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析

    2022-04-18 18:53:34王婷
    中國(guó)動(dòng)物保健 2022年4期
    關(guān)鍵詞:包蟲(chóng)抗原分析

    王婷

    摘要:在現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展進(jìn)程中,養(yǎng)殖業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展速度越來(lái)越快,綜合發(fā)展水平顯著提升,但是仍舊存在一定的致病菌和寄生蟲(chóng),會(huì)給人畜的身體健康造成嚴(yán)重影響,其中包蟲(chóng)病也稱棘球蚴病,可以直接感染人畜,對(duì)動(dòng)物及人體的危害尤為嚴(yán)重?;诖耍疚闹饕接懭S中包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)性檢測(cè)及分析,首先對(duì)包蟲(chóng)進(jìn)行概述,其次分析了包蟲(chóng)疾病的流行原因和惡性影響,最后有針對(duì)性的探討犬糞包蟲(chóng)抗原檢測(cè)及結(jié)果分析并提出一定防治措施,希望能夠?qū)θS中包蟲(chóng)的檢測(cè)技術(shù)水平提高提供必要參考。

    關(guān)鍵詞:犬糞;包蟲(chóng);抗原;實(shí)驗(yàn)室檢測(cè);分析

    在全世界范圍內(nèi),我國(guó)屬于包蟲(chóng)病流行嚴(yán)重的國(guó)家之一,這主要是由于我國(guó)畜牧業(yè)的飛速發(fā)展,特別是很多農(nóng)戶在養(yǎng)殖牲畜的過(guò)程中并沒(méi)有過(guò)多的重視包蟲(chóng)病的防治,并導(dǎo)致人畜之間交叉感染,嚴(yán)重危及了人民群眾和牲畜的健康,同樣也會(huì)在一定程度上阻礙地區(qū)畜牧業(yè)的正常發(fā)展,因此包蟲(chóng)此類寄生蟲(chóng)疾病的抗原檢測(cè)和有效防治至關(guān)重要,直接關(guān)乎我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展水平,因此本文主要從犬糞中分析包蟲(chóng)抗原并進(jìn)行深入的探討,以期能夠進(jìn)一步促進(jìn)包蟲(chóng)抗原檢測(cè)綜合水平的提高。

    1 包蟲(chóng)病概述

    包蟲(chóng)病主要可以分為棘球蚴病和泡球蚴病兩種類型,能夠直接影響牲畜健康和人體健康,同時(shí)也會(huì)對(duì)地區(qū)的畜牧業(yè)發(fā)展造成嚴(yán)重影響。此類地方性疾病在我國(guó)流行廣泛,其中我國(guó)的包蟲(chóng)病流行區(qū)在我國(guó)整體陸地面積中占據(jù)4成,眾多人口始終受到包蟲(chóng)病的影響和流行危害,例如我國(guó)新疆、青海、西藏等畜牧業(yè)相對(duì)發(fā)達(dá)的地區(qū),同樣也是包蟲(chóng)病的特高流行區(qū)。除了牛羊此類家畜以外,犬類、狐貍、狼類等動(dòng)物,同樣也更加容易感染棘球絳蟲(chóng),并在與人的互動(dòng)和生活過(guò)程中直接將此類包蟲(chóng)病傳染給人。

    2 包蟲(chóng)疾病的流行原因和惡性影響

    包蟲(chóng)病傳染的根源在于牲畜和犬類的糞便,對(duì)于家犬而言,其生長(zhǎng)環(huán)境和體制環(huán)境更加容易被包蟲(chóng)寄生,此類包蟲(chóng)往往會(huì)寄生于家犬的小腸部位,在7~14d左右蟲(chóng)卵成熟。包蟲(chóng)為無(wú)性繁殖壽命相對(duì)較長(zhǎng),同時(shí)并不會(huì)受到外界自然生態(tài)環(huán)境的影響,在不同牲畜之間傳染率和患病率較高,包蟲(chóng)同樣也會(huì)對(duì)人體造成感染,此類感染往往在于無(wú)意識(shí)的感染狀態(tài),主要來(lái)源于人體與家犬或其他牲畜之間的親密接觸。也正因如此,包蟲(chóng)病的最嚴(yán)重災(zāi)區(qū)往往在農(nóng)牧場(chǎng)等牲畜較多的地區(qū),如果家中飼養(yǎng)的家犬有舔肛門(mén)的習(xí)慣,那么飼養(yǎng)者需要切實(shí)觀察家犬是否存在包蟲(chóng)蟲(chóng)卵,避免與其進(jìn)行接觸,減少家犬體內(nèi)包蟲(chóng)傳染到人體的可能性。

    當(dāng)前包蟲(chóng)病、棘球蚴病的最終宿主往往為犬科動(dòng)物,因此對(duì)于犬類以及犬糞中棘球絳蟲(chóng)的感染性進(jìn)行診斷,往往需要通過(guò)解剖檢驗(yàn)方法或直接檢測(cè)犬科動(dòng)物糞便中的蟲(chóng)卵含量、采取氫溴酸檳榔堿瀉下法、血清抗體檢測(cè)方法等多種方法,但是在現(xiàn)有的檢測(cè)方法中廣泛使用的方法仍舊為氫溴酸檳榔堿瀉下法以及解剖檢測(cè)法,其中以解剖檢測(cè)方式最為直觀,檢測(cè)結(jié)果更為準(zhǔn)確。但是不容忽視的是,在針對(duì)犬類感染包蟲(chóng)情況進(jìn)行抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí),如果一味使用解剖檢測(cè)法,則會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物的死亡或難以挽回的傷害,因此在對(duì)犬類感染包蟲(chóng)病的情況進(jìn)行檢查時(shí),可以采取氫溴酸檳榔堿瀉下法。

    3 犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析

    3.1 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

    在針對(duì)犬糞中所含有的包蟲(chóng)進(jìn)行抗原檢測(cè)中,應(yīng)用酶聯(lián)免疫方法進(jìn)行吸附實(shí)驗(yàn),提高檢測(cè)的基礎(chǔ)性。在犬糞的收集過(guò)程中,可以率先保證實(shí)驗(yàn)犬的空腹,隨后應(yīng)用氫溴酸檳榔堿瀉下法讓犬類能夠排出糞便,同時(shí)將此類犬糞進(jìn)行有效收集,為隨后開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)提供保障。如果所檢測(cè)的犬糞樣品中已經(jīng)含有包蟲(chóng)抗原,那么可以將其與包蟲(chóng)抗體進(jìn)行酶標(biāo)結(jié)合物特異性融合,其次在間接融合過(guò)程中也可以根據(jù)包被板上的顯色情況進(jìn)一步判斷犬糞樣品中是否含有包蟲(chóng)抗原。

    1)樣品采集與處理

    在此次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中主要應(yīng)用新鮮犬糞進(jìn)行測(cè)試和實(shí)驗(yàn),主要實(shí)驗(yàn)儀器為酶標(biāo)儀、恒溫箱、移液器以及電子天平等等。首先需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)需要,提前采集犬糞樣品。在樣品采集過(guò)程中要做好采樣人員的防護(hù),避免受到犬糞中所含有的包蟲(chóng)卵影響。樣品采集完成之后需要應(yīng)用蒸餾水進(jìn)行洗滌液稀釋,可以按照1:10的比例進(jìn)行混勻待用。隨后可以將待檢測(cè)的犬糞樣品置于低溫環(huán)境之下冷凍一周以上,此種低溫要盡量保持在零下70℃左右的溫度,通過(guò)此類長(zhǎng)時(shí)間的低溫冷凍能夠有效消滅犬糞中的包蟲(chóng)活卵。在檢測(cè)過(guò)程中可以在犬糞樣品中應(yīng)用電子天平稱取1g糞便并加入1mL的稀釋液進(jìn)行攪拌混勻,將混合溶液靜置10min以后應(yīng)用離心機(jī)離心10min,提取清液進(jìn)行后續(xù)檢驗(yàn)[1]。

    2)樣品檢測(cè)

    犬糞包蟲(chóng)抗原檢驗(yàn)首先需要做好加樣反應(yīng),在樣品孔中加入待檢樣品,額外添加空白對(duì)照和陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔,根據(jù)不同的對(duì)照組需要加入適合的對(duì)照樣品。全部添加完成之后,需要蓋好封板膜,在常溫環(huán)境之下避光反應(yīng)30min,甩去孔內(nèi)其他液體并注入洗滌液洗板,重復(fù)6次之后可以隨后開(kāi)展加酶反應(yīng)。加酶反應(yīng)開(kāi)展過(guò)程中,除了原有設(shè)定好的空白對(duì)照孔以外,需要對(duì)其他各孔添加酶結(jié)合物100μL并蓋好封板膜,讓其充分進(jìn)行顯色反應(yīng),最后應(yīng)用酶標(biāo)儀器,讀取OD值。

    3)檢測(cè)注意事項(xiàng)

    在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中要特別注意犬糞樣品試劑從冷藏環(huán)境中拿出之后需要放置到室溫狀態(tài)之后才能進(jìn)行啟用,避免過(guò)冷的環(huán)境對(duì)犬糞樣品造成影響。如果在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在未應(yīng)用的試劑組,也重新放回5℃左右的溫度進(jìn)行密封保存。在添加試劑之前,需要針對(duì)不同類型的試劑進(jìn)行輕搖和混勻,避免試劑混合不均而影響檢測(cè),減少犬糞的腐敗幾率。做好個(gè)人防護(hù),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所應(yīng)用的各類器具和防護(hù)用品都要進(jìn)行統(tǒng)一的無(wú)害化處理或焚燒,避免成分中含有的包蟲(chóng)卵蔓延滋生。

    3.2 檢測(cè)結(jié)果分析

    通過(guò)對(duì)260份犬糞樣品進(jìn)行包蟲(chóng)抗原檢測(cè),共有4份樣品檢測(cè)出陽(yáng)性反應(yīng),此類結(jié)果顯示了該地區(qū)家養(yǎng)犬類在一定程度上有感染包蟲(chóng)的幾率。在對(duì)犬類進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)之前,抗原感染率達(dá)3%左右,而對(duì)犬類進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)之后,其感染包蟲(chóng)的幾率會(huì)降到0.5%左右,感染率的大幅度下降也在一定程度上說(shuō)明了對(duì)犬類進(jìn)行藥物驅(qū)蟲(chóng)能夠有效治療犬類的包蟲(chóng)疾病。在對(duì)犬類進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)之后重復(fù)檢測(cè)犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)則得到的感染率為0,所以犬糞樣品的采集時(shí)間與是否進(jìn)行犬類藥物驅(qū)蟲(chóng)有很大程度的關(guān)系;另一方面,如果包蟲(chóng)在犬體內(nèi)滋生破裂,會(huì)導(dǎo)致感染率上升,如果卵體尚不成熟,則感染率會(huì)顯示為陰性[2]。

    除此之外,如有需要也可以對(duì)參與進(jìn)行犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行解剖檢測(cè),以進(jìn)一步判斷包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的有效性和精準(zhǔn)度。在應(yīng)用解剖檢測(cè)法時(shí),可以將實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行解剖,并從其內(nèi)臟中分離出小腸,將小腸內(nèi)的各類物質(zhì)全部置于盆中,隨后應(yīng)用生理鹽水進(jìn)行漂洗沉淀,棄去上清,多次之后可以應(yīng)用平皿進(jìn)行逐一檢查;也可以直接將實(shí)驗(yàn)犬的腸管應(yīng)用剪刀進(jìn)行剪開(kāi),并使用生理鹽水沖洗腸壁,通過(guò)肉眼觀察的形式或采取放大鏡觀察方法,檢測(cè)實(shí)驗(yàn)犬腸道內(nèi)側(cè)是否存在棘球絳蟲(chóng)情況,如有棘球絳蟲(chóng)則需要進(jìn)行計(jì)數(shù)。不同類型的檢測(cè)方法,在犬類感染棘球絳蟲(chóng)精準(zhǔn)度方面差別明顯,特別是不同類型的檢測(cè)方法在操作可行度以及適用性等方面各不相同,因此在針對(duì)犬類感染包蟲(chóng)病情況進(jìn)行有針對(duì)性的診斷中,需要綜合應(yīng)用多種方法實(shí)現(xiàn)檢測(cè)形式的有效互補(bǔ),最大程度上彌補(bǔ)不同方法的缺陷與問(wèn)題,提高檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)度和科學(xué)性效果。

    在針對(duì)犬糞所進(jìn)行的抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中,可以進(jìn)一步分析犬糞包蟲(chóng)抗原效果同時(shí),也可以切實(shí)提高犬類包蟲(chóng)病的防治效果。在進(jìn)行包蟲(chóng)病篩查和犬糞包蟲(chóng)篩查過(guò)程中要真正實(shí)現(xiàn)分類指導(dǎo)和因地制宜,嚴(yán)格控制各類傳染源,切實(shí)掐斷包蟲(chóng)蟲(chóng)卵的傳播途徑。通過(guò)綜合性的防治策略和防治手段,全面開(kāi)展家畜包蟲(chóng)病的有針對(duì)性防治,進(jìn)一步減少包蟲(chóng)病的危害。在早期包蟲(chóng)病發(fā)生和診斷過(guò)程中,可以應(yīng)用藥物治療方法進(jìn)行治療,同時(shí)在犬類飼養(yǎng)過(guò)程中要避免應(yīng)用已經(jīng)感染了包蟲(chóng)的動(dòng)物腎臟或肝臟等組織器官喂養(yǎng)犬類,也可以在飼養(yǎng)過(guò)程中對(duì)犬只進(jìn)行定期驅(qū)蟲(chóng),驅(qū)蟲(chóng)完成之后的糞便要統(tǒng)一進(jìn)行焚燒或其他類型的無(wú)害化處理;日常養(yǎng)犬過(guò)程中要注意喂養(yǎng)的衛(wèi)生條件和飲水衛(wèi)生,避免出現(xiàn)犬糞污染問(wèn)題。

    4 結(jié)語(yǔ)

    綜上所述,在新時(shí)代發(fā)展背景之下,我國(guó)需要進(jìn)一步提高對(duì)各類寄生蟲(chóng)病的防治和檢測(cè)措施,避免多種類型的寄生蟲(chóng)病對(duì)人體造成嚴(yán)重的影響。本文從犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析入手,不僅探索了犬類包蟲(chóng)病的流行因素和主要感染源,同樣也圍繞實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和檢測(cè)結(jié)果、具體的防治措施進(jìn)行全面論述,希望能夠?qū)ξ覈?guó)包蟲(chóng)病的檢疫和畜牧業(yè)的發(fā)展奠定良好基礎(chǔ)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]宋育娟.剛察縣犬糞包蟲(chóng)抗原實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析[J].青海農(nóng)牧業(yè),2018(4):3.

    [2]鄭雪瑩,張啟龍,陳會(huì)玲,等.北京市某區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況與風(fēng)險(xiǎn)因素分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2020,56(3):99-101+139.

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