化妝品原料鬼針草提取物的制備工藝研究*

文皓頲 饒印保 陳建維 袁海銘 鐘小群#

（1 江西江中安可科技有限公司 南昌330096；2 江西省醫(yī)療器械檢測中心 南昌330029）

鬼針草屬植物的藥用歷史最早記載于唐代陳藏器《本草拾遺》中，名為鬼釵草，因著人衣如針，故亦名為鬼針[1]。鬼針草具有清熱解毒、祛風除濕、活血消腫之功效，主要成分為黃酮，包括查爾酮甙類、黃酮類及苷類、橙酮類、聚炔苷類等成分，還含有酯類、酸類成分等[2]。三葉鬼針草（BIDENS PILOSA）提取物收載在《已使用化妝品原料名稱目錄》（2015 年版）上，是可用化妝品原料。其提取工藝研究多采用水、醇提取，樹脂純化，溶劑萃取等方法[3～9]，常以總黃酮含量為指標，對外觀、溶化性沒有做要求。然而作為化妝品原料，總黃酮含量只是要求之一，還需要有良好的感官評價及穩(wěn)定性。因此，本研究以鬼針草為原料，以提取物的色澤、總黃酮含量、提取率、水復溶性等為指標，優(yōu)選了其提取、純化、精制工藝，測定了其在不同化妝品原料中的溶解度?，F(xiàn)報道如下：

1 儀器與試藥

1.1 儀器 UV-2550 型紫外分光光度計（日本島津公司）；80-2B 型高速離心機（上海安亭科學儀器廠）；KQ-250DE 型超聲波清洗器（昆山市超聲波儀器有限公司）；PB203-N 分析天平（梅特勒-托利多公司）；Sartorius ME5 微量電子分析天平（德國賽多利斯公司）。

1.2 試藥 蘆丁對照品（批號0080-9705，中國藥品生物制品檢定所）；鬼針草采集于江西省贛州市石城縣，均經(jīng)江西省醫(yī)療器械檢測中心朱良輝研究員鑒定為Bidens pilosa L.，割取地上部分，切段，曬干，備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 鬼針草經(jīng)不同溶劑提取結(jié)果 稱取6 份鬼針草粗段，每份250 g，分別用8 倍量的水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇作為溶劑，回流提取3 次，每次1 h，合并提取液，回收溶劑并濃縮至每1 毫升含1 g 生藥的藥液，冷藏24 h，分取上清液，濃縮并減壓干燥，粉碎，過80 目篩，備用。測定黃酮含量，計算干膏得率、轉(zhuǎn)移率，觀察固體物色澤、水復溶性、水溶液色澤、10%氫氧化鈉中溶解性，結(jié)果顯示，鬼針草經(jīng)以上不同的溶劑提取后，各指標有比較大的差異，提取物顏色深，不適宜直接用作化妝品原料，因此，以黃酮轉(zhuǎn)移率最高的70%乙醇為初步提取溶劑。見表1。

表1 鬼針草經(jīng)不同溶劑提取結(jié)果

2.2 純化工藝的選擇

2.2.1 藥材提取液制備 采用2.1 中黃酮轉(zhuǎn)移率最高的提取溶劑70%乙醇提取20 kg 藥材，濃縮至約1 g/ml 的濃度，250 ml 為一份，備用。

2.2.2 鬼針草提取液經(jīng)大孔吸附樹脂純化處理結(jié)果 藥液分別加入至已預處理好的大孔吸附樹脂D101、D201、D301、HPD-100、AB-8、HP-20，樹脂用量均為80 g，柱長/直徑約為12.5:1，控制流速為4 ml/（min·kg），均先用1 個柱體積量的水洗脫，再依次用1 個柱體積量的30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇洗脫，收集3 種乙醇洗脫液，濃縮，干燥，粉碎，過篩，稱定重量。采用AB-8 樹脂進行純化效果最佳。見表2。

表2 鬼針草提取液經(jīng)大孔吸附樹脂純化處理結(jié)果

2.3 乙酸乙酯萃取不同次數(shù)萃取結(jié)果 取2.2.1 項下的藥材提取液（1 g/ml），采用優(yōu)選出來的純化工藝純化，并濃縮成2 g/ml 的溶液，50 ml 為一份，分別用同體積的乙酸乙酯萃取1、2、3、4、5、6、7 次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，減壓干燥，粉碎，過篩，稱定重量，測定黃酮含量，計算干膏得率、純化轉(zhuǎn)移率、總轉(zhuǎn)移率。結(jié)果顯示，乙酸乙酯萃取次數(shù)4 次及以上時，干膏得率及提取物黃酮含量均相近，沒有顯著性差異，因此確定精制方法為乙酸乙酯萃取4 次。見表3。

表3 乙酸乙酯萃取不同次數(shù)萃取結(jié)果

2.4 提取物溶解度的初步測定

2.4.1 提取物的制備 取2.2.1 項下的藥材提取液（1 g/ml），用優(yōu)選的精制工藝制備提取物備用。

2.4.2 鬼針草提取物溶解度初步測定結(jié)果 精密稱取提取物細粉1 g 數(shù)份，分別記錄初始重量，在室溫為20℃條件下，逐漸加入至盛有5 ml 水、1%鹽酸、1%氫氧化鈉、95%乙醇、無水乙醇、甘油、丙二醇、異丙醇、正丁醇、水溶性霍霍巴油、聚乙二醇400（PEG400）、二甲基亞砜、吐溫80、司盤80、油酸、肉豆蔻酸異丙酯中，每隔5 min 強力振搖30 s，觀察30 min 內(nèi)的溶解情況。視溶解情況逐漸加入粉末，如無目視可見的溶質(zhì)顆粒，即為完全溶解，稱定剩余的細粉，計算已經(jīng)溶解的粉末量，并計算初步的溶解量。見表4。

表4 鬼針草提取物溶解度初步測定結(jié)果

3 討論

鬼針草藥材質(zhì)地松脆，易干燥、切割、粉碎，因此本研究采用單因素多水平法詳細考察了不同提取溶劑、不同型號的大孔吸附樹脂、不同萃取溶劑的提取和純化效果，最終確定工藝為：以70%乙醇為溶劑，回流提取3 次，每次1 h，提取液濃縮至1 g/ml，加到已經(jīng)預處理好的AB-8 大孔吸附樹脂，柱長/直徑約為12.5:1，先用1 個柱體積量的水洗脫，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮成2 g/ml 的溶液，用乙酸乙酯萃取4 次，合并萃取液，回收溶劑，濃縮，減壓干燥，粉碎，過80 目篩，即得。

植物提取物的溶解性能直接影響化妝品的成型、外觀、穩(wěn)定性及效果，但有關(guān)中藥提取物溶解性能的報道極少。本研究參照中國藥典制劑通則顆粒劑溶化性檢查方法[10]，采用定量溶劑溶解法，測定了鬼針草提取物在16 種常用化妝品溶劑中的溶解度，找到了其溶解特性，并觀察其在各溶液的色澤及狀態(tài)外觀，結(jié)果該提取物在堿性溶劑中的溶解度比較大，能得到色澤和外觀都比較宜人的溶液。