不同餌料對(duì)輪蟲(chóng)繁殖速率的影響

呂軍 丁茂昌

[摘 要] 在同等生物量下，蛋白核小球藻培養(yǎng)的褶皺臂尾輪蟲(chóng)最先抱卵，平均帶卵量最高，輪蟲(chóng)增長(zhǎng)量也最多，其次是單體角毛藻、多體角毛藻。試驗(yàn)前后小球藻密度減少1/2，單體角毛藻密度幾乎不變，多體角毛藻密度略有增長(zhǎng)，說(shuō)明小球藻培養(yǎng)輪蟲(chóng)效果最理想，其次是單體角毛藻、群體角毛藻。

[關(guān)鍵詞] 輪蟲(chóng);小球藻;角毛藻;繁殖速率

[中圖分類(lèi)號(hào)] S963 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1674-7909（2020）26-103-3

輪蟲(chóng)（Rotifera）是輪形動(dòng)物門(mén)的一群小型多細(xì)胞動(dòng)物，一般體長(zhǎng)0.1～0.5 mm，最長(zhǎng)不超過(guò)1.0 mm，輪蟲(chóng)生活時(shí)纖毛帶和纖毛環(huán)上的纖毛不斷協(xié)調(diào)旋轉(zhuǎn)擺動(dòng)，似轉(zhuǎn)動(dòng)著的輪子，故名為輪蟲(chóng)[1]。輪蟲(chóng)對(duì)水質(zhì)的適應(yīng)性較強(qiáng)，廣泛分布于江河湖海、溝渠塘堰等各類(lèi)水體中[2]。輪蟲(chóng)因營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、繁殖速率快、幾乎能被所有魚(yú)類(lèi)的幼體吞食而成為大多數(shù)經(jīng)濟(jì)水生動(dòng)物幼體的優(yōu)質(zhì)餌料。山東省日照市水產(chǎn)研究所開(kāi)展的試驗(yàn)表明，利用混合植物（藻類(lèi)）、混合動(dòng)物、動(dòng)植物混合、鹵蟲(chóng)幼體和輪蟲(chóng)5種餌料飼養(yǎng)對(duì)蝦幼體時(shí)，輪蟲(chóng)飼養(yǎng)效果最佳[3]。

從20世紀(jì)二三十年代開(kāi)始，日本等國(guó)就開(kāi)始進(jìn)行輪蟲(chóng)工廠化培養(yǎng)技術(shù)研究，近年來(lái)該技術(shù)日趨成熟，輪蟲(chóng)產(chǎn)量逐漸提高，室內(nèi)水泥池培養(yǎng)密度在1 000個(gè)/mL以上。我國(guó)從20世紀(jì)50年代開(kāi)始引進(jìn)日本工廠化輪蟲(chóng)培養(yǎng)技術(shù)，但由于其投資大、費(fèi)用高，在我國(guó)廣泛推廣尚存在困難。20世紀(jì)80年代，李永函等利用水體沉積物中輪蟲(chóng)休眠卵，采取人工措施促其萌發(fā)，繁衍成種群，為淡水魚(yú)苗培養(yǎng)開(kāi)辟了一個(gè)新的餌料途徑[4]。但輪蟲(chóng)培養(yǎng)的高峰期持續(xù)較短，產(chǎn)量較低，而且餌料停留在池中發(fā)生什么藻就用什么藻、發(fā)生多少就喂多少的雜藻培養(yǎng)狀態(tài)，輪蟲(chóng)培養(yǎng)數(shù)量隨意性較大、質(zhì)量不可控。同時(shí)，何種藻類(lèi)能使輪蟲(chóng)數(shù)量與質(zhì)量都保持在一個(gè)較高的水平，不得而知。為了尋找輪蟲(chóng)最適餌料，更好地服務(wù)于公司生態(tài)苗的培養(yǎng)，筆者就地取材，選用小球藻、單體角毛藻、群體角毛藻3種個(gè)體差異明顯的藻類(lèi)作為輪蟲(chóng)培養(yǎng)餌料，為公司生態(tài)苗輪蟲(chóng)專(zhuān)池培養(yǎng)提供理論參考。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)和輪蟲(chóng)來(lái)源

2019年5月，在河南省固始縣海昌蝦苗標(biāo)粗場(chǎng)開(kāi)展輪蟲(chóng)培育試驗(yàn)。褶皺臂尾輪蟲(chóng)（Brachionus plicatilis），由海南海昌對(duì)蝦繁育有限公司提供的褶皺臂尾輪蟲(chóng)冬卵孵化所得。

1.2 餌料藻類(lèi)

蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidesa）、單體角毛藻、群體角毛藻，均由海昌蝦苗場(chǎng)提供。

1.3 主要器材

顯微鏡（奧林巴斯CX21），實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)（PHS-25型），實(shí)驗(yàn)室用鹽度計(jì)，48 μm生物網(wǎng)、25 μm生物網(wǎng)、鐵架臺(tái)、堿性滴定管、血球計(jì)數(shù)板、10 mL移液管、120 mL溶氧瓶和青霉素瓶等。

2 試驗(yàn)條件與方法

2.1 輪蟲(chóng)冬卵孵化

取一勺輪蟲(chóng)冬卵放入鹽度24‰的海水中，充分?jǐn)噭蚝笾糜谑覝胤趸?2 h。

2.2 餌料藻類(lèi)采樣

將采樣所需器皿經(jīng)碘液消毒后進(jìn)行采樣，具體操作見(jiàn)表1。

2.3 餌料藻類(lèi)密度調(diào)配與理性指標(biāo)測(cè)定

運(yùn)用顯微鏡目微尺量出餌料藻類(lèi)長(zhǎng)度，根據(jù)生物量近似相等，兼顧鹽度、pH值相近的原則，計(jì)算出試驗(yàn)用餌料藻類(lèi)密度，參照所采餌料藻類(lèi)密度，稀釋或濃縮餌料藻類(lèi)，用血球計(jì)數(shù)法[5]測(cè)定餌料藻類(lèi)試驗(yàn)密度，并測(cè)定基本理性指標(biāo)，包括pH值、鹽度、DO值（見(jiàn)表2）。

2.4 移取藻液與添加輪蟲(chóng)

取15個(gè)青霉素瓶，用移液管移取5 mL藻液至瓶中，之后在顯微鏡下挑選5個(gè)無(wú)明顯差異的輪蟲(chóng)，用細(xì)口吸管移入相應(yīng)青霉素瓶中，并做好標(biāo)記（見(jiàn)表3），每種餌料藻液做5個(gè)平行組。

2.5 結(jié)果觀察與數(shù)據(jù)記錄

每間隔24 h取一個(gè)平行組用魯氏試液固定，在顯微鏡下計(jì)數(shù)輪蟲(chóng)數(shù)量、最大帶卵量和平均帶卵量，試驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定最后一個(gè)平行組中各餌料藻類(lèi)密度。

3 結(jié)果與分析

3.1 輪蟲(chóng)增長(zhǎng)量

試驗(yàn)48 h時(shí)各組輪蟲(chóng)量均未見(jiàn)增長(zhǎng)，72 h時(shí)小球藻組輪蟲(chóng)量開(kāi)始急劇增長(zhǎng)，直至96 h時(shí)輪蟲(chóng)已經(jīng)從試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的5個(gè)增加至26個(gè);單體角毛藻組在72 h時(shí)輪蟲(chóng)量開(kāi)始有所增長(zhǎng)，至96 h時(shí)輪蟲(chóng)量已有10個(gè)，增長(zhǎng)速率明顯低于小球藻組;而群體角毛藻組在整個(gè)試驗(yàn)區(qū)間輪蟲(chóng)量未見(jiàn)增長(zhǎng)（見(jiàn)圖1）。

3.2 輪蟲(chóng)帶卵情況

3.2.1 最大帶卵量。比較試驗(yàn)區(qū)間各餌料藻類(lèi)中輪蟲(chóng)的帶卵情況，可發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)開(kāi)始后48 h內(nèi)各餌料藻類(lèi)組輪蟲(chóng)均未抱卵，48 h時(shí)鏡檢發(fā)現(xiàn)小球藻組和單體角毛藻組輪蟲(chóng)開(kāi)始抱卵，且小球藻組輪蟲(chóng)抱卵量明顯高于單體角毛藻組;而群體角毛藻組72 h時(shí)輪蟲(chóng)才開(kāi)始抱卵，抱卵時(shí)間晚于小球藻組和單體角毛藻組，而且整個(gè)試驗(yàn)區(qū)間其最大帶卵量?jī)H為1個(gè)，明顯低于其他兩組（見(jiàn)圖2）。

3.2.2 平均帶卵量。對(duì)比整個(gè)試驗(yàn)區(qū)間，可發(fā)現(xiàn)小球藻組輪蟲(chóng)的平均帶卵量明顯高于其他兩組，其平均帶卵量最高時(shí)達(dá)到平均一個(gè)輪蟲(chóng)帶2個(gè)卵，最低時(shí)平均一個(gè)輪蟲(chóng)帶0.47個(gè)卵，而其他兩組整個(gè)試驗(yàn)區(qū)間平均一個(gè)輪蟲(chóng)帶卵量均小于0.47（見(jiàn)圖3）。

3.3 藻密度對(duì)比

觀察試驗(yàn)前后餌料藻類(lèi)密度變化情況可發(fā)現(xiàn)，小球藻組試驗(yàn)后藻密度為170萬(wàn)個(gè)/mL，僅為試驗(yàn)前藻密度的1/3;單體角毛藻密度試驗(yàn)后為150萬(wàn)個(gè)/mL，與試驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)密度154萬(wàn)個(gè)/mL差異不大;群體角毛藻試驗(yàn)前密度58萬(wàn)個(gè)/mL，試驗(yàn)后密度71萬(wàn)個(gè)/mL，密度略有上漲（見(jiàn)表4）。

4 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，小球藻組輪蟲(chóng)增長(zhǎng)量明顯高于單體角毛藻組和群體角毛藻組，同時(shí)小球藻組輪蟲(chóng)帶卵情況也明顯優(yōu)于其他兩組，并且對(duì)比試驗(yàn)前后餌料藻類(lèi)密度發(fā)現(xiàn)，僅有小球藻密度急劇減少，說(shuō)明在這3種餌料中輪蟲(chóng)最喜食小球藻。同時(shí)，由于單體角毛藻組輪蟲(chóng)數(shù)量有所增長(zhǎng)，而群體角毛藻輪蟲(chóng)量幾乎無(wú)變化，可得出小球藻是輪蟲(chóng)培養(yǎng)最理想的餌料，其次是單體角毛藻、群體角毛藻，與Caric等的浮游植物的單體培養(yǎng)物是褶皺臂尾輪蟲(chóng)最適餌料[6]這一研究結(jié)果基本吻合。分析其原因，筆者認(rèn)為主要是在于以下4個(gè)方面。

一是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。小球藻細(xì)胞含有豐富的蛋白質(zhì)（約占為細(xì)胞干質(zhì)量的50%）[1]，蛋白質(zhì)中含有的8種必需氨基酸可達(dá)23.35%，接近優(yōu)質(zhì)魚(yú)粉、啤酒酵母，高于絕大多數(shù)植物性蛋白，是優(yōu)良的單細(xì)胞蛋白源[7]。此外，小球藻碳水化合物含量為5.7%～38.0%，一般不少于20.0%[8]。同時(shí)，小球藻細(xì)胞中脂類(lèi)含量4.5%～86.0%，不飽和脂肪酸含量明顯高于許多植物[9]，且含有二十二碳六烯酸（DHA）。

二是適口性好。輪蟲(chóng)一般體長(zhǎng)0.1～0.5 mm，最大不超過(guò)1.0 mm，濾食最適直徑10 μm左右[1]。本試驗(yàn)中所用小球藻直徑經(jīng)測(cè)量為2.86 μm，符合輪蟲(chóng)最適濾食范圍，適口性較好。而單體角毛藻細(xì)胞直徑雖為4.60 μm，但其含角毛直徑15～30 μm不等，明顯超過(guò)輪蟲(chóng)最適濾食范圍，適口性不好。單體角毛藻組輪蟲(chóng)量仍有所增加，筆者推測(cè)是由于單體角毛藻在分裂時(shí)部分角毛脫落或未長(zhǎng)出而被輪蟲(chóng)濾食，而群體角毛藻組個(gè)別輪蟲(chóng)帶卵則是輪蟲(chóng)濾食脫落單體角毛藻的緣故。

三是可獲得性大。輪蟲(chóng)一般在水層中分布比較均勻[3]，活動(dòng)比較緩慢，運(yùn)動(dòng)速度小于0.02 cm/s。而小球藻無(wú)鞭毛，不會(huì)運(yùn)動(dòng)，水中均勻分布[10]，因而小球藻相對(duì)于其他同等大小的鞭毛藻類(lèi)更易被輪蟲(chóng)濾食。

四是水質(zhì)環(huán)境改良。小球藻葉綠素含量4%～6%，是自然界中葉綠素含量最高的植物，高于已商業(yè)化的脫水紫苜蒿葉綠素含量（0.2%）[11]。小球藻能通過(guò)光合作用提取細(xì)菌分解有機(jī)物產(chǎn)生的CO2，釋放部分O2，有利于細(xì)菌對(duì)有機(jī)物的進(jìn)一步分解，有改良水環(huán)境的作用[12]。同時(shí)，在大型水體中，小球藻能通同顫藻屬、席藻屬、柵藻屬等藻類(lèi)以某些菌類(lèi)在自然水體組成生物薄膜，可以吸附水體中有機(jī)物并可以直接利用有機(jī)物作為碳源和氮源，分解一部分有機(jī)物[13]。

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