氣相色譜法快速測定花椰菜中12種有機磷農(nóng)藥殘留

楊珍燕 曾丹丹

摘 要：本文建立了快速測定花椰菜中12種有機磷農(nóng)藥殘留的毛細管柱氣相色譜法。樣品用乙腈提取，經(jīng)QuEChERS法凈化，以毛細管色譜柱（DB-17）分離，F(xiàn)PD火焰光度檢測器檢測，外標法定量。結(jié)果表明，12種有機磷農(nóng)藥的標準曲線相關(guān)系數(shù)（R2）均達到0.995 7以上，在0.02～0.50 μg/mL具有較好的線性關(guān)系，方法檢出限均為0.01 mg/kg。

在加標濃度分別為0.02、0.10、0.20 mg/kg的添加水平下，目標物平均加標回收率為80.7%～95.9%，相對標準偏差為4.8%～9.3%。該方法簡單高效、節(jié)省試劑用量，精密度良好、回收率高，可應用于大批量樣品有機磷農(nóng)殘的測定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜;有機磷;農(nóng)藥殘留;QuEChERS法;花椰菜

近年來，隨著人們對食品安全問題越來越重視，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)殘的檢測任務(wù)也越來越重。有機磷農(nóng)藥作為一種高效、廣譜的殺蟲劑被廣泛運用于農(nóng)產(chǎn)品的種植過程中，如何更高效且準確的對大批量的農(nóng)產(chǎn)品中有機磷農(nóng)殘進行檢測成為亟需解決的問題[1]。本文參考NY/T761-2008中第一部分方法二果蔬中有機磷農(nóng)殘檢測方法[2]，把花椰菜作為空白基底，采用改進后的前處理方法，通過氣相色譜儀檢測[3]可同時測定花椰菜中敵敵畏等12種有機磷農(nóng)藥殘留。該方法效率高、回收率高、有機試劑使用量小，適用于測定大批量樣品的有機磷農(nóng)殘項目。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

乙腈、乙酸乙酯（均為色譜純;無水硫酸鈉、氯化鈉（均為分析純，使用前用馬弗爐在650 ℃灼燒4 h）;濃度均是100 μg/mL的敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷等12種有機磷單一標準溶液，購自北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

配有FPD火焰光度檢測器的GC-2010PLUS氣相色譜儀（SHIMADZU公司）;DTF-A300電子天平（福州志華科學儀器有限公司）;Centrisartg-16C高速冷凍離心機（賽多利斯科學儀器有限公司）;Auto EVA-20 plus氮吹儀（?？苾x器有限公司）;破壁料理機（美的）;全自動漩渦振蕩器（德國heidolph公司）;QuEChERS分散試劑盒（美國Agilent公司）。

1.2 配制標準溶液

1.2.1 配制標準混合儲備液

規(guī)格為10 mL的玻璃容量瓶中先加入少量乙酸乙酯，再準確移取12種有機磷標準溶液各0.50 mL加入其中，最后用乙酸乙酯定容到10.0 mL，配制成有機磷混合標準儲備液，濃度為5.0 μg/mL，于-18 ℃冰箱貯存，有效期為3個月。

1.2.2 配制純?nèi)軇藴使ぷ饕?/p>

臨用時把有機磷混合標準儲備液分別稀釋成0.02、0.05、0.10、

0.20 μg/mL和0.50 μg/mL共5個濃度梯度的純?nèi)軇┗旌蠘藴使ぷ饕海靡宜嵋阴ザㄈ荨?/p>

1.2.3 配制基質(zhì)匹配標準工作液

將陰性花椰菜樣品按照1.3的步驟進行提取凈化后氮吹至近干，用1.2.2中的標準工作液復溶，配制成5個濃度梯度的基質(zhì)匹配標準工作液，濃度分別是0.02、0.05、0.10、0.20 μg/mL和0.50 μg/mL。

1.3 樣品的前處理方法

用破壁機攪碎花椰菜樣品，稱取5 g（精確至0.01 g）花椰菜于50 mL塑料離心管中，準確移取10.0 mL乙腈加入離心管中，用全自動旋渦振蕩器提取5 min，然后加入2.0 g氯化鈉進行鹽析分層，振蕩1 min，離心5 min（5 000 r/min），取出上層清液待凈化。

取約2 mL上述上清液至10 mL

離心管中，此離心管已預先加入QuEChERS分散試劑盒吸附劑（含有150.0 mg無水硫酸鎂，50.0 mg乙二胺-N-丙基硅烷（PSA），50.0 mg C18，7.5 mg石墨炭黑（GCB）漩渦振蕩2 min，5 000 r/min離心2 min，再精確移取1.0 mL上層清液于5 mL玻璃氮吹小管中，氮吹至近干，用乙酸乙酯定容至0.5 mL，移入進樣小瓶中，按1.4條件上機檢測。

1.4 色譜條件

色譜柱：規(guī)格為30 m×0.32 mm×

0.25 μm的DB-17毛細管色譜柱;汽化室溫度：230 ℃;色譜柱升溫程序：初始溫度60 ℃保持2 min，25 ℃/min升到200 ℃，再以5 ℃/min升到255 ℃保持5 min;FPD檢測器溫度：280 ℃;載氣是高純氮氣，純度≥99.999%;吹掃流量為5.0 mL/min;高純氫氣，純度≥99.999%，流量為60.0 mL/min;干燥空氣流量為90.0 mL/min;進樣量：1.0 μL;進樣模式：不分流。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取試劑的選擇

大部分有機磷農(nóng)藥具有中等極性或弱極性，依據(jù)相似相溶原理，可以選擇乙腈、丙酮、石油醚等作為提取溶劑[4]。由于丙酮毒性較高，沸點低易揮發(fā)，除雜能力較弱。石油醚具有麻醉效果，對實驗操作者存在一定的安全風險。而乙腈具有極性強、溶解能力強、提取雜質(zhì)較少的優(yōu)點，所以相比之下，選擇乙腈作為提取溶劑較為合適。

2.2 提取方式的選擇

本方法用破壁機攪碎樣品，加入乙腈提取液后電動振蕩處理，代替NY/T761-2008中的勻漿機處理樣品。因為勻漿法每次只能處理單個樣品，提取效率低。而采用可以同時振蕩20個樣品的電動振蕩機則更適合處理大批量樣品。而且破壁機可以破除蔬菜樣品的細胞壁結(jié)構(gòu)，使殘留的有機磷農(nóng)殘更充分的被乙腈提取出來[5]。

2.3 凈化條件的選擇

QuEChERS吸附劑凈化法[6-8]被越來越廣泛用于有機磷農(nóng)殘的前處理過程中，本試驗選擇的QuEChERS分散試劑盒的吸附劑粉末由乙二胺-N-丙基硅烷（PSA），C18，石墨炭黑（GCB），無水硫酸鎂混合組成。PSA可去除碳水化合物、脂肪酸、有機酸、酚類等雜質(zhì)，C18可以有效去除脂類大分子物質(zhì)，GCB的作用是去除色素，無水硫酸鎂是除水劑。與傳統(tǒng)樣品凈化方法相比較，本方法消耗試劑少、污染少、操作簡便、分析速度快，乙腈加到離心管后立即密封，減少試驗人員與有機試劑的接觸，適用于大批量樣品高效檢測。