CK-MB、CT-1、cTnT在新生兒缺氧損傷心肌細(xì)胞中的表達(dá)水平及其臨床意義

胡雪梅，張彩云，王 敏

新生兒窒息(NA)是指胎兒由于缺氧而發(fā)生宮內(nèi)窘迫、娩出過程中發(fā)生呼吸系統(tǒng)障礙所導(dǎo)致的生后1 min內(nèi)無自主呼吸或未能建立規(guī)律呼吸的兒科常見危急重癥，NA發(fā)生后心功能受到損害而導(dǎo)致心排出量減少，最后可引起多器官損害及功能障礙，是引起圍產(chǎn)兒死亡的重要因素[1-2]。故早期診斷NA患兒出現(xiàn)心肌損害的程度，并給予積極搶救和正確處理，是降低新生兒死亡率及預(yù)防遠(yuǎn)期后遺癥的關(guān)鍵。心肌損害可以通過檢測缺氧損傷的心肌細(xì)胞中血漿標(biāo)志物的表達(dá)水平進(jìn)行早期診斷和評估[3]。常見的心肌細(xì)胞血漿標(biāo)志物包括血漿肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌營養(yǎng)素-1(CT-1)、心肌肌鈣蛋白T(cTnT)等，但現(xiàn)有研究多是關(guān)于其中1種或兩種聯(lián)合其他指標(biāo)對NA患兒的影響，關(guān)于三者聯(lián)合檢測對NA患兒影響的研究報(bào)道甚少[4-5]。本研究以河南省煤炭總醫(yī)院心內(nèi)科就診的90例NA患兒以及90例在河南省煤炭總醫(yī)院分娩的足月健康新生兒為研究對象，進(jìn)一步探究CK-MB、CT-1、cTnT在缺氧損傷的心肌細(xì)胞中的表達(dá)水平及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 將2017年6月—2019年3月在河南省煤炭總醫(yī)院心內(nèi)科就診的90例NA患兒納入缺氧心肌損傷組，男47例，女43例；胎齡36～42(38.92±1.04)周；剖宮產(chǎn)54例，自然分娩36例；體重3.03～3.90(3.52±0.32)kg。將患兒按照心肌損傷程度標(biāo)準(zhǔn)[6]分為輕度窒息心肌損傷組(28例)、中度窒息心肌損傷組(32例)、重度窒息心肌損傷組(30例)，按照是否存活分為死亡組(15例)、存活組(75例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《實(shí)用新生兒學(xué)》《實(shí)用兒科學(xué)》中關(guān)于NA以及心肌損傷的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7-8]；②心肌損傷經(jīng)超聲心動圖檢查確診；③無營養(yǎng)不良；④無圍產(chǎn)期缺氧缺血病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①宮內(nèi)感染、全身感染等感染性疾病者；②合并水、電解質(zhì)、激素代謝紊亂者；③伴有先天性心臟病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形等器質(zhì)性疾病者；④母親有感染性、代謝性疾病者。另選取90例在我院分娩的足月健康新生兒作為對照組，查體無任何疾病或生理異常，其中男50例，女40例；胎齡37～41(38.42±1.31)周；剖宮產(chǎn)52例，自然分娩38例；體重3.44～4.16(3.62±0.40)kg。各組患兒的性別、胎齡、分娩方式、體重等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有患兒家屬均對本研究知情同意，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。

1.2 檢測方法

1.2.1 血液樣本制備 分別于出生第1天、第3天、第5天抽取缺氧心肌損傷組患兒及對照組健康新生兒的清晨空腹靜脈血3 mL，置于乙二胺四乙酸抗凝管抗凝，采用離心機(jī)(型號：KL05A，湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司)進(jìn)行離心分離，3 000 r/min、5 min，留取血漿，-20 ℃保存待測。

1.2.2 血漿CK-MB、CT-1、cTnT檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血漿CK-MB、CT-1、cTnT水平，所用儀器為DNM-9606酶標(biāo)分析儀(北京普朗醫(yī)療器械公司)，CK-MB試劑盒均購自北京科美生物技術(shù)有限公司，CT-1試劑盒均購自上海心語生物科技有限公司，cTnT試劑盒均購自海將來實(shí)業(yè)股份有限公司。操作過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 各組新生兒CK-MB水平比較 對照組出生第1天、第3天、第5天血漿CK-MB水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。出生第1天、第3天重度窒息心肌損傷組、中度窒息心肌損傷組血漿CK-MB水平高于輕度心肌損傷組及對照組，而出生第3天輕度窒息心肌損傷組血漿CK-MB水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。出生第5天對照組、輕度窒息心肌損傷組與中度窒息心肌損傷組血漿CK-MB水平恢復(fù)至正常水平，而重度窒息心肌損傷組血漿CK-MB水平仍高于其余各組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 各組新生兒血漿CK-MB水平比較 (±s) 單位：ng/mL

2.2 各組新生兒cTnT水平比較 對照組出生第1天、第3天、第5天血漿cTnT水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。出生第1天、第3天重度窒息心肌損傷組、中度窒息心肌損傷組血漿cTnT水平高于輕度窒息心肌損傷組及對照組，而輕度窒息心肌損傷組血漿cTnT水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。出生第5天重度窒息心肌損傷組血漿cTnT水平仍高于其余各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 各組新生兒血漿cTnT水平比較 (±s) 單位：pg/mL

2.3 各組新生兒CT-1水平比較 對照組出生第1天、第3天、第5天血漿CT-1水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。出生第1天、第3天重度窒息心肌損傷組、中度窒息心肌損傷組血漿CT-1水平高于輕度心肌損傷組及對照組，而輕度心肌損傷組血漿CT-1水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。出生第5天輕度窒息心肌損傷組、中度窒息心肌損傷組血漿CT-1水平恢復(fù)至正常水平，而重度窒息心肌損傷組血漿CT-1水平仍高于其余各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 各組新生兒血漿CT-1水平比較 (±s) 單位：ng/L

2.4 住院期間NA患兒預(yù)后情況比較 90例NA患兒住院期間死亡15例，均為重度窒息心肌損傷患兒，死亡患兒血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平高于存活患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表4。

表4 住院期間NA患兒預(yù)后情況比較 (±s)

3 討 論

NA是出生后最常見的緊急情況，主要病理、生理改變?yōu)榈脱跹Y、高碳酸血癥和酸中毒，可導(dǎo)致多器官及系統(tǒng)缺氧損傷，其并發(fā)心肌損害的概率高達(dá)40%～70%，NA并發(fā)心肌損害者病死率則高達(dá)30%[9-10]。心肌細(xì)胞以有氧代謝為主，對缺氧非常靈敏，NA發(fā)作后，心肌供氧量下降，其能量供應(yīng)主要依靠葡萄糖無氧代謝，會大量產(chǎn)生乳酸，出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)酸中毒，導(dǎo)致心肌功能下降，三磷酸腺苷(ATP)減少，Na+-K+-ATP酶供能障礙，導(dǎo)致心肌損傷，最終可引起心力衰竭而危及患兒生命。由于新生兒心肌細(xì)胞修復(fù)和再生能力較強(qiáng)，若及時診斷并進(jìn)行早期干預(yù)，可改善器官血供，修復(fù)受損心肌細(xì)胞[11-12]。心肌損害標(biāo)志物檢測是重要的診斷指標(biāo)，本研究發(fā)現(xiàn)血漿CK-MB、CT-1、cTnT與NA的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，對照組出生第1天、第3天、第5天血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而缺氧心肌損傷組出生第3天血漿CK-MB、CT-1水平達(dá)到峰值，出生第1天、第3天重度窒息心肌損傷組、中度窒息心肌損傷組血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平高于輕度窒息心肌損傷組及對照組。出生第5天重度窒息心肌損傷組血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平仍高于其余各組，說明隨著NA患兒病情加重，血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平逐漸升高，三者均可在一定程度上反映NA患兒心肌損害的嚴(yán)重程度。其中，CK-MB屬于肌酸激酶(CK)的一種，主要存在于心肌細(xì)胞胞質(zhì)中，與細(xì)胞內(nèi)能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、ATP再生等均有直接關(guān)系，心肌損傷患兒缺氧造成細(xì)胞代謝功能和結(jié)構(gòu)異常，致其水平升高[13]?？追擦岬萚14]研究亦得到了與本研究相似的結(jié)果，但值得注意的是，也有部分研究指出，在急、慢性骨骼損傷疾病中或劇烈運(yùn)動后CK-MB水平仍可升高，臨床易出現(xiàn)假陽性升高，應(yīng)當(dāng)在患兒無骨骼損傷或劇烈行動時才能以其作為心肌損傷程度的特異性指標(biāo)[15]。cTnT同樣只以游離和復(fù)合物的形式存在于心肌細(xì)胞中，尤其適用于NA心肌損傷的早期診斷和追蹤，在不同年齡、性別人群中cTnT水平都比較穩(wěn)定，當(dāng)心肌發(fā)生缺氧或缺血后，心肌細(xì)胞損傷，細(xì)胞膜受到損害，cTnT即可釋放入血，使血漿cTnT水平升高，既往研究亦指出其在心肌損害的早期診斷中敏感性和特異性均較高[16]。CT-1則是一種對心臟具有保護(hù)作用的血漿標(biāo)志物，主要存在于心臟組織中，刁玉巧等[17]研究中提到，窒息可導(dǎo)致大鼠心肌及外周血漿CT-1水平明顯升高，這與本研究結(jié)果一致。NA發(fā)生后患兒由于缺氧、酸性中毒等，容易刺激交感神經(jīng)，促進(jìn)去甲腎上腺素及血管緊張素的分泌，進(jìn)一步促使CT-1釋放，心肌損傷越嚴(yán)重，血漿CT-1水平越高[18]。

正常情況下心肌細(xì)胞主要靠分解游離脂肪酸獲取能量，NA發(fā)生后，心肌細(xì)胞缺氧、缺血，抑制脂肪酸分解，ATP產(chǎn)生減少，體內(nèi)能源匱乏，加劇無氧代謝，可誘發(fā)代謝性酸中毒；還可能出現(xiàn)水腫而導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能降低，心肌灌注水平降低，冠狀動脈微血管阻力增加，粥樣斑塊破裂形成微血栓，阻塞遠(yuǎn)端心肌微血管，加劇心肌壞死，進(jìn)一步影響心臟正常的收縮和擴(kuò)張，降低心臟泵血功能，心搏出量逐漸降低，甚至引起循環(huán)衰竭，嚴(yán)重影響患兒的預(yù)后[19]。本研究結(jié)果顯示，90例NA患兒中住院期間死亡15例，均為重度窒息心肌損傷患兒，NA死亡患兒血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平高于存活患兒，提示血漿CK-MB、cTnT、CT-1水平越高，預(yù)后越差。因心肌缺氧導(dǎo)致鈉泵和鈣泵功能障礙，機(jī)體水、鈉大量潴留，心肌細(xì)胞鈣內(nèi)流增多，再加上無氧代謝導(dǎo)致能量供應(yīng)不足，核蛋白從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫落引起蛋白質(zhì)和酶等物質(zhì)合成減少，細(xì)胞膜通透性大大升高，屏障和轉(zhuǎn)運(yùn)功能喪失，CK-MB、cTnT、CT-1心肌損傷標(biāo)志物大量釋放入血，致其在血漿中的水平升高，因此，特異性和敏感性較好的心肌損傷標(biāo)志物在缺氧損傷心肌細(xì)胞中表達(dá)水平檢測對NA合并心肌損傷的早期診斷具有重要價(jià)值，對于改善預(yù)后至關(guān)重要[20-22]。

綜上所述，早期檢測缺氧損傷的心肌細(xì)胞中血漿CK-MB、cTnT、CT-1表達(dá)水平有助于對NA患兒心肌損傷嚴(yán)重程度及預(yù)后進(jìn)行有效評估，且臨床應(yīng)用價(jià)值較高。