湛江市生豬肺臟病變的研究情況探析

李曉波 范紅霞

摘 ?要：對于生豬肺臟病變的相關研究，目前在國內外發(fā)展研究中逐漸增多，但是對于屠宰生豬肺臟病變的研究還在進行延伸，為了對屠宰生豬肺臟檢疫進行相關性檢疫工作，在實驗中對湛江地區(qū)大量屠宰生豬肺臟病變進行觀察研究，對病變部位通過切片染色觀察。對屠宰生豬肺臟的病變數(shù)量和類型進行對比，對分析生豬肺臟病變起到輔助性作用，更為生豬屠宰檢疫工作提供了保障。

關鍵詞：生豬;肺臟;病變

1豬肺臟的解剖結構

健康生豬的肺粉紅色，質輕而軟，富有彈性，分為左右兩肺。通常右肺比較大。肺門是支氣管、肺動脈、肺靜脈和神經(jīng)等出入肺臟的地方。這些通道組織被結締組織包圍在一起稱為肺根。左右肺都有三個面：肋面接觸胸腔側壁，有肋骨壓跡。縱隔面接觸縱隔，有心臟、食管，血管壓跡。膈面和橫膈膜接觸。肺臟的分葉：豬的肺臟左三右四共分七葉。左肺三葉：尖葉、心葉、隔葉;右肺四葉：尖葉、心葉、膈葉和內側的副葉。肺臟表面的漿膜是肺胸膜，肺胸膜的結締組織將肺臟分成若干錐體形小葉，底部朝向表面，頂部朝向肺門。

2.屠宰生豬肺臟病變的觀察

生豬的養(yǎng)殖階段，呼吸系統(tǒng)是比較容易發(fā)生疾病的系統(tǒng)，特別是肺臟和胸膜，在近幾年來，因呼吸道問題導致的疾病讓養(yǎng)殖戶越發(fā)的頭疼，從而給農(nóng)戶帶來很大的損失。而在生豬屠宰過程中也發(fā)現(xiàn)許多肺臟的病變，由于傳染性疾病很多都會通過肺部的病變表現(xiàn)出來，所以作為檢疫人員能否快速的通過觀察肺臟的病理特征，做出相應的檢疫處理至關重要。

2.1材料與方法

2.1.1儀器和試劑

輪轉式切片機：德國萊卡公司;顯微鏡：Nikon公司。

采樣工具：采樣袋、手術剪刀、鑷子、解剖刀、酒精燈、酒精棉、一次性無菌橡膠手套等。無水乙醇;氯化鈉;甲醛;二甲苯;生物切片石蠟;蘇木精;伊紅;中性樹膠。

2.1.2樣品采集記錄

在2013-5至2014-5期間，對某地區(qū)兩所生豬屠宰場屠宰的30個生豬畜群共計6000頭生豬進行采樣，其中4000頭生豬來自1號屠宰場的20個畜群，2000頭生豬來自2號屠宰場的10個畜群的。所有生豬均完成標準免疫程序，且體重大于120kg，年齡約7—8月齡。共采集有效的肺臟樣品5850份。在屠宰場檢疫崗位上，采集1×1cm的不同病變肺臟組織塊。快速將組織用紗布包好固定于10%中性甲醛液（5—10倍于組織體積），用于組織切片以及病理學觀察。

2.2病理剖檢

2.2.1懸掛觀察檢驗

從氣管環(huán)之間掛起肺臟器官，觀察肺的表面色澤、形態(tài)、大小有無異常，觸摸兩肺實質，檢查有無結節(jié)或硬變。

2.2.2剖檢左右支氣管淋巴結

用檢驗鉤鉤住靠近主動脈弓的左支氣管部分，稍向左拉，右手用刀切開動脈弓和氣管間的脂肪組織直到左支氣管分叉處，剖檢左支氣管淋巴結;在用檢驗鉤鉤住右肺尖葉，向左側拉，使其翻轉，在肺的尖葉和氣管之間緊靠氣管切開并檢查。有時還要剖檢縱隔淋巴結。

2.2.3對生豬進行平案檢查

先將肺放在檢驗臺上，肺臟的隔面向上，左肺在檢驗人員左側。用左手拇指和食指提起主動脈靠近支氣管部分，其余三指托住左肺隔面，然后稍向外翻，就可以按懸掛檢驗方法剖檢左支氣管淋巴結。然后再用左手拇指和食指抓住右肺尖葉的基部，其余手指和手掌托住肺心葉隔面，提起肺臟并向內翻轉，就可以使得尖葉，右肺隔葉基部和支氣管分叉處露出。

（1）組織塊的修整和沖洗：將固定好的肺臟組織用外科手術刀片將組織塊分別切成厚約5mm左右的薄塊，把修整好的肺臟組織塊放到大燒杯中并用紗布包緊瓶口，在紗布中央切開一小口放入橡皮管，橡皮管的另一端與水龍頭連接來沖洗，時間約12h左右，之后放到各級濃度酒精中進行組織的脫水。

（2）載玻片的處理：1.清洗，將載玻片放于含有洗衣粉的自來水中浸泡2h，用擦鏡紙清洗表面，晾干后在酸缸中浸泡24h。自來水沖洗數(shù)次后，用蒸餾水洗三次，再置于無水乙醇中浸泡24h，最后再用蒸餾水清洗三次，用干凈的紗布擦干即可，2.粘片劑包被，用彎嘴鑷子將擦干凈的載玻片小心垂直放入盛有50倍丙酮稀釋的APES溶液中，停留20s，取出，放入盛有蒸餾水的燒杯中，上下提拉，直至提出玻片時蒸餾水從玻片兩邊聚集到中間成一條線流下，然后將載玻片取出放入37℃溫箱晾干即可。

（3）組織塊的脫水和透明：組織塊每前移一次，都先將組織上的殘留液體用干凈的吸水濾紙吸干，以免影響酒精和二甲苯的濃度。根據(jù)肺臟組織的特性，二甲苯透明時間約在7min左右。透明時間太短二甲苯無法完全滲透組織，時間太長容易使組織變脆，切片的時候，容易把組織切碎，無法切出完整的組織形態(tài)結構。

（4）肺臟組織塊的浸蠟與包埋：將已透明好的肺臟組織塊移入熔化的石蠟內，置于58℃的電熱恒溫干燥箱內，并使其溫度保持恒溫，然后將透明好的的肺臟組織塊放入蠟杯。將包埋盒放在已經(jīng)加熱的溫臺上，從溫箱中取出盛放純凈石蠟的蠟杯，倒入包埋盒中，迅速輕輕地將組織平放于紙盒底部，用鑷子把組織排列整齊。等石蠟完全凝固后即可取出蠟塊進行切片。

（5）石蠟切片的制作：切片前先修整蠟塊，切去組織周圍過多的石蠟，留下約3mm寬度。將修整好的蠟塊固定在木塊上，調整石蠟塊與刀口之間的角度與位置，刀片與石蠟切片約成巧度左右。切片厚度為5 m。調整好后勻速轉動把手，進行切片。切出完整的蠟片后用毛筆將其放入溫水浴展片機內展開，取一片蒸餾水清洗過的載玻片，一端放入水中慢慢靠近展好的蠟片使其貼在載玻片上。然后把載玻片放在平盤上編好記號，置于65℃烤片機溫箱中烘干，每個組織塊撈片2——3張，1一1.5h干燥后取出存放于切片盒待染。

（6）將染完色的組織切片從（二甲苯II）中取出，用吸水濾紙或紗布擦去材料周圍多余的二甲苯。在材料中央滴一小滴中性加拿大樹膠，然后，用鑷子加蓋蓋玻片從樹膠的一側傾斜放入蓋玻片，以便避免樹膠中產(chǎn)生氣泡，影響組織鏡檢觀察。切片封好后，放在切片托盤上自然干燥24h后，用普通光學顯微鏡觀察。

3.結果

3.1肺臟病變統(tǒng)計

對8850頭生豬肺臟樣品進行觀察，記錄，統(tǒng)計，病變肺臟數(shù)量是3215頭，占到總數(shù)的36.3%;類型主要有氣腫，淤血，出血，混合感染（肉變），水腫和不同類型的肺炎等。其中肺炎占病變肺臟的最大比例，比例為42.5%，肺出血次之，比例為35.7%。

3.2剖檢病變

圖A為正常肺臟，顏色正常，邊緣清晰，無壞死，出血。圖B：兩側肺臟尖葉、心葉、隔葉散在分布著多個斑塊狀、大小不一紅的病灶，病灶與周圍正常組織界限分明，外觀呈紅褐色，質地變實。圖C：兩側肺隔葉可見大面積病灶，呈橘紅色，有的呈暗紅色，病灶呈實變狀。圖D：肺臟紫紅色，體積增大，質地變韌，重量增加，肺臟的表面有散在的出血點。圖E：肺腫大，間質增寬，質地實在，有明顯的肝變區(qū)，肺胸膜附有纖維素薄膜，呈淡黃色。

4.討論

4.1不同肺臟病變的鑒別

在D圖中，從眼觀上看肺臟呈紫紅色，體積變大，質地變韌，重量增加，胸膜由于緊張而變得閃光，切面的氣管和組織內混有泡沫血液的樣品。說明該病變可能是肺出血或是肺淤血的病變。若是肺淤血，則有可能發(fā)生于左心功能不全，導致肺靜脈血回流左心房時受到阻礙而滯留在肺臟，使得肺臟體積變大呈紫紅色。若是肺出血，則有可能是由寄生蟲、電麻、豬瘟等傳染病這三個原因引起。寄生蟲移行到肺部引起的出血，如：蛔蟲，細頸囊尾蝴，肺絲蟲等。電麻引起的肺出血導致肺臟的尖葉，心葉，隔葉的背側緣被摸下出血新鮮的出血點，并且支氣管淋巴結也會出血。豬瘟等傳染性疾病引起的肺出血表現(xiàn)為肺臟漿膜面出血斑或噴血狀的出血，而且在尖葉，心葉，隔葉有發(fā)生肺炎。

在E圖中，從肉眼看肺臟腫大，間質增寬，質地實在，有明顯的肝變區(qū)，肺胸膜附有纖維素薄膜，呈淡黃色。從形態(tài)上可以分為四個時期：充血期、紅色肝變期、灰色肝變區(qū)、消散期。而該圖中的病變應該是處于紅色肝變區(qū)。若是充血期，肺臟顏色是暗紅色，腫大，硬度適中，在顯微鏡下觀察只有少量紅細胞，肺泡壁也沖血，肺泡內有粉紅色液體。若是灰色肝變區(qū)，肺臟顏色已轉為灰紅或灰色，呈顆粒狀外表，切面干燥，在顯微鏡下，肺泡壁的充血程度就較輕微，肺抱內有團狀纖維素，而中性粒細胞和紅細胞已經(jīng)消失，由于充血的減輕和出血消失才導致灰色肝變。若是消散期，此時的肺臟灰黃色，質軟，呈半透明，顯微鏡下，肺泡壁血管己經(jīng)恢復通血，上皮再生，肺泡腔內的纖維素開始溶解，白細胞和巨噬細胞溶解，氣體進入肺泡。

4.2造成病變假象的可能人為因素

4.2.1加工引起出血性變化與病理性出血變化

肺臟嗆血是指在刺殺放血過程中，血液被豬吸進肺臟，發(fā)生在一側或兩側肺的背側緣有時限于肺的尖葉，嗆血區(qū)大小不一，暗紅色，有彈性，切面鮮紅或暗紅，支氣管內有凝血塊。嗆血部位水中不下沉。支氣管淋巴結一般不腫大。電麻出血是由于電麻的電壓過高或者電麻時間過長，引起的全身多個器官出血，其中肺臟比較明顯。在肺臟的胸膜下以及實質中，散在大小不一的鮮紅色出血點。如果同時吸入燙毛池的污水，出血點色澤變暗。而病理性出血則是散在肺的表面，出血點數(shù)量一般不多，但豬瘟出血點大或出血性浸潤，支氣管淋巴結出血，其他臟器也會出血病變。

4.2.2加工引起水腫變化與肺水腫、肺炎性水腫

豬在刺殺放血以后處于瀕死期被投入燙毛池熱水中，湯池中的臟水被吸入或者壓入肺臟稱為嗆水。嗆水多墮積于尖葉或其他肺葉下垂部分，呈淺灰色或黃褐色，透明，濕潤。切開流出多量溫熱渾濁液體，可能混有湯池雜物，支氣管無異常變化。而肺水腫在各個肺葉都能發(fā)生，肺臟膨大，蒼白，同時存在淤血呈暗紅色，被摸光亮濕潤，間質增寬，膠樣浸潤，切面流出泡沫狀液體。支氣管淋巴結充血，水腫。而肺炎常對稱性發(fā)生在尖葉心葉、中間葉和隔葉前緣，主要見于急性氣喘病。肉眼觀察病區(qū)紫色，質地較硬，外觀半透明，膠樣浸潤狀，支氣管淋巴結顯著腫大，切面多汁質地較硬，可有出血。

參考文獻

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