嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-1 在肺癌合并哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況及對(duì)癥處理研究△

韓月玲，方宇，羅永剛，劉文慧

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合ICU，鄭州4500520

肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，最早起源于支氣管黏膜，多發(fā)生于40 歲以上的男性，發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。最新的報(bào)道表明，肺癌最早是由支氣管哮喘引發(fā)而來的[3]。支氣管哮喘屬于慢性炎癥疾病，其發(fā)病由嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞參與，其中，嗜酸性粒細(xì)胞是最主要的效應(yīng)細(xì)胞，尤其在肺功能損傷方面起著重要作用[4]。嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-1（eotaxin-1，Eot-1）的主要作用是激活嗜酸性粒細(xì)胞。目前，關(guān)于支氣管哮喘與肺癌之間關(guān)系的研究較少。前期研究發(fā)現(xiàn)Eot-1 能夠在一定程度上提高嗜酸性粒細(xì)胞的趨化程度，且其趨化程度與哮喘的嚴(yán)重程度有關(guān)[5]。另有研究發(fā)現(xiàn)，哮喘的嚴(yán)重程度可能與Eot-1 的基因多態(tài)性存在相關(guān)性[6]。肺癌合并支氣管哮喘患者常表現(xiàn)為胸部、背部出現(xiàn)疼痛或咯血等臨床癥狀，好發(fā)于老年，而老年患者的身體機(jī)能較弱，并發(fā)癥發(fā)生率較高，在一定程度上增加了治療難度。因此，對(duì)于此類患者，除了予以相關(guān)的治療措施外，必要的護(hù)理亦是關(guān)鍵。常規(guī)護(hù)理措施存在一定的局限性，其以“疾病”為中心，缺乏個(gè)性化，護(hù)理效果不太理想。本研究基于前期研究及其他研究成果，對(duì)患者采用基于常規(guī)護(hù)理的對(duì)癥處理措施，并予以針對(duì)性的呼吸道護(hù)理，具有一定的創(chuàng)新性，旨在為肺癌合并支氣管哮喘患者的臨床護(hù)理提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2018 年4 月至2019 年3 月于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的252 例肺癌合并哮喘患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷根據(jù)診斷性介入肺臟病學(xué)共識(shí)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[7]，即腫瘤直徑≥5 cm，或根據(jù)計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）檢查結(jié)果顯示，確診存在肺門縱隔淋巴結(jié)腫大；②未合并其他惡性腫瘤；③凝血功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有精神類疾??；②伴有免疫系統(tǒng)、代謝性疾病。252 例肺癌合并哮喘患者中，重度哮喘和輕中度哮喘患者各126 例。輕中度哮喘患者中，男76 例，女50 例；年齡49～77 歲，平均（62.75±2.56）歲；腫瘤類型：鱗狀細(xì)胞癌46 例，腺癌48 例，腺鱗癌21 例，其他11 例；手術(shù)類型：肺葉切除術(shù)92 例，全肺切除術(shù)12 例，其他22 例。重度哮喘患者中，男79 例，女47 例；年齡50～78 歲，平均（62.39±2.38）歲；腫瘤類型：鱗狀細(xì)胞癌50 例，腺癌44 例，腺鱗癌19 例，其他13 例；手術(shù)類型：肺葉切除術(shù)89 例，全肺切除術(shù)16 例，其他21 例。兩組患者的性別、年齡、腫瘤類型和手術(shù)類型比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05），具有可比性。根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法將126 例肺癌合并重度哮喘患者分為觀察組和對(duì)照組，各63 例。對(duì)照組采用常規(guī)護(hù)理措施，觀察組在常規(guī)護(hù)理的基礎(chǔ)上予以有針對(duì)性的負(fù)性心理護(hù)理干預(yù)。本研究經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過，所有患者均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 干預(yù)方法

對(duì)照組采取常規(guī)護(hù)理，護(hù)理內(nèi)容包括體位、引流管和生命體征的護(hù)理。具體如下：①體位護(hù)理。當(dāng)患者未清醒時(shí)，相關(guān)的護(hù)理人員幫助患者采取平臥位姿勢(shì)，密切觀察，待患者恢復(fù)意識(shí)后，檢測(cè)患者的血壓是否正常；當(dāng)患者完全清醒后，相關(guān)護(hù)理人員囑患者采取半臥位姿勢(shì)，有利于患者呼吸和胸膜腔引流等。護(hù)理人員每隔3 個(gè)小時(shí)幫助患者更換臥位姿勢(shì)，避免由于長(zhǎng)時(shí)間壓迫造成的血液不循環(huán)。②引流管護(hù)理。相關(guān)護(hù)理人員觀察手術(shù)過程中麻醉的方法以及患者的麻醉情況等，監(jiān)測(cè)患者手術(shù)結(jié)束后的生命體征等需要注意的事項(xiàng)，詳細(xì)記錄手術(shù)情況及引流管、引流瓶的情況，保障其通暢。③密切觀察血容量情況。在手術(shù)過程中，若患者的出血量較大，則患者術(shù)后極易因循環(huán)血量不足而出現(xiàn)低血壓、心率快等情況，相關(guān)護(hù)理人員可通過調(diào)整輸液的速度避免上述情況的發(fā)生。④保持呼吸道通暢。在患者的意識(shí)尚未恢復(fù)時(shí)，護(hù)理人員可以采用吸引器將患者咽部的痰液、唾液等吸除，以避免嘔吐等癥狀發(fā)生。當(dāng)患者恢復(fù)意識(shí)后，囑患者深呼吸，以利于呼吸道的暢通和排痰等，一定程度上可避免相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生。對(duì)于排痰較困難的患者，相關(guān)護(hù)理人員可輕拍其背部，也可采用布地奈德氣霧劑霧化吸入；另外，在排痰的過程中，注意密切觀察患者的面部、呼吸等是否正常。護(hù)理人員將濕化器以及近端的氣道溫度適當(dāng)控制在32 ℃左右，溫度控制在40 ℃以下，注意將氣體的濕度合理控制在60%左右；另外，將氣囊壓控制在15 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）左右。⑤口腔護(hù)理。采用含有適量復(fù)方氯己定溶液的棉球依次擦洗患者的牙齒、上顎等位置，再予以適量的冰硼酸溶液，每天2 次。

觀察組在常規(guī)護(hù)理的基礎(chǔ)上，對(duì)出現(xiàn)不同程度負(fù)性心理的患者進(jìn)行有針對(duì)性的心理護(hù)理干預(yù)。護(hù)理人員與患者耐心交流，向其解釋手術(shù)操作和疾病相關(guān)情況，并向患者介紹相關(guān)的成功案例，緩解其焦慮、緊張等負(fù)性情緒。

1.3 氣道上皮細(xì)胞的采集及培養(yǎng)

氣道上皮細(xì)胞的采集：通過氣管鏡下毛刷刷檢取患者的主氣道上皮組織，再將毛刷置于含有工作液的容器中，緩慢攪拌；再次在氣管鏡下，采用毛刷輕輕刷取患者病變位置處的氣道上皮細(xì)胞，然后取出毛刷，再次將毛刷置于含有工作液的容器中，輕輕攪拌，保存于-70 ℃的冰箱中。所有標(biāo)本均采用蘇木精-伊紅溶液進(jìn)行染色處理。氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)：取直徑約為10 cm 的培養(yǎng)皿，定期更換培養(yǎng)基，密切觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，當(dāng)細(xì)胞的融合達(dá)到80%左右時(shí)，開始進(jìn)行細(xì)胞接種。在開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的前1 天，將氣道上皮細(xì)胞接種于含6 孔板的培養(yǎng)板中，注意每孔的細(xì)胞數(shù)目，細(xì)胞數(shù)目不超過4×105個(gè)。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)

觀察并比較Eot-1 在肺癌合并不同程度哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況。輕度哮喘：患者每周均出現(xiàn)不同程度的喘息、氣急、胸悶和咳嗽等癥狀；中重度哮喘：患者每周均出現(xiàn)不同程度的喘息、氣急、胸悶和咳嗽等癥狀，同時(shí)常伴有呼吸困難、呼氣流量下降的表現(xiàn)。護(hù)理后第6 天，比較兩組患者的排痰量、痰液黏稠度、呼吸困難評(píng)分、急性生理學(xué)及慢性健康狀況評(píng)分系統(tǒng)Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ，APACHEⅡ）評(píng)分及肺部感染的發(fā)生率。

1.4.1 檢測(cè)Eot-1 基因的表達(dá) 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）檢測(cè)Eot-1 基因的表達(dá)情況。提取總RNA，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)的具體操作要求進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。反應(yīng)條件：95 ℃10 min，1 個(gè)循環(huán)；95 ℃15 s，60 ℃60 s，40個(gè)循環(huán)。以β-actin 為內(nèi)參，采用2-??Ct法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。引物序列：β-actin 的上游引物為5'-CTGTATTCCGTCTCCTTGGTTC-3'，下 游 引 物 為5'-CTGTATTCCTTGGTCCGTCTTC-3'，引物長(zhǎng)度為126 bp；Eot-1 的上游引物為5'-CTGTATTCTTGCCGTCTCGTTC-3'，下游引物為5'-CTGTATCCTTGGTCGTTCTCTC-3'，引物長(zhǎng)度為355 bp。

1.4.2 檢測(cè)Eot-1 蛋白的表達(dá) 采用酶聯(lián)免疫試劑盒（購自上海晶抗生物工程有限公司）檢測(cè)Eot-1 蛋白的表達(dá)，嚴(yán)格按照說明書的步驟操作。以Eot-1多克隆抗體包被酶標(biāo)板，在酶標(biāo)板的每孔中加入100 μl蛋白樣品，檢測(cè)抗體、四甲基聯(lián)苯二胺顯色液，分別在450 nm 和620 nm 的雙波長(zhǎng)下檢測(cè)其吸光度值。每個(gè)樣本均設(shè)置2 個(gè)重復(fù)孔，采用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution，PBS）作為陰性對(duì)照。

1.4.3 呼吸困難評(píng)分 采用世界衛(wèi)生組織制定的生存質(zhì)量測(cè)定簡(jiǎn)式量表對(duì)呼吸困難進(jìn)行評(píng)分[8]。采用10 分制，分值越高表明呼吸困難越嚴(yán)重。信度系數(shù)為0.865，效度系數(shù)為0.848。

1.4.4 痰液黏稠度 痰液的黏稠度主要分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度。Ⅰ度：痰液呈現(xiàn)泡沫樣，經(jīng)過相關(guān)的吸痰處理后，玻璃接頭位置無明顯的痰液殘留；Ⅱ度：痰液較Ⅰ度的痰液濃稠，經(jīng)過相關(guān)的吸痰處理后，玻璃接頭位置存在少量痰液；Ⅲ度：痰液較Ⅱ度的痰液濃稠，經(jīng)過相關(guān)的吸痰處理后，玻璃接頭位置存在大量痰液。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)。以P﹤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺癌合并不同程度哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中Eot-1 的表達(dá)情況

肺癌合并重度哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中Eot-1蛋白和基因的的相對(duì)表達(dá)量分別為（16.78±1.23）、（0.74±0.23），分別明顯高于肺癌合并輕中度哮喘患者的（12.12±1.11）、（0.34±0.21），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=28.126、12.843，P﹤0.01）。

2.2 排痰情況的比較

護(hù)理前，對(duì)照組和觀察組患者的排痰量分別為（5.15±0.47）、（5.27±0.53），兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）。護(hù)理后第6天，觀察組患者的排痰量為（10.85±0.34）ml，對(duì)照組患者的排痰量為（8.23±0.53）ml，兩組患者的排痰量均多于本組護(hù)理前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=77.992、31.345，P﹤0.05）；觀察組患者的排痰量明顯多于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=33.026，P﹤0.01）。護(hù)理后第6天，觀察組患者Ⅰ度痰液黏稠度的發(fā)生率高于對(duì)照組，Ⅲ度痰液黏稠度的發(fā)生率低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；兩組患者Ⅱ度痰液黏稠度的發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）（表1）。

表1 兩組患者護(hù)理后第6 天痰液黏稠度的比較[n（%）]

2.3 呼吸困難、APACHEⅡ評(píng)分及肺部感染發(fā)生率的比較

護(hù)理后，兩組患者呼吸困難、APACHEⅡ評(píng)分均低于本組護(hù)理前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；護(hù)理后，觀察組患者的呼吸困難、APACHEⅡ評(píng)分均明顯低于對(duì)照組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=20.980、18.487，P﹤0.01）（表2）。護(hù)理后，觀察組患者肺部感染的發(fā)生率為1.59%（1/63），明顯低于對(duì)照組的14.29%（9/63），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.952，P﹤0.01）。

表2 兩組患者護(hù)理前后呼吸困難、APACHEⅡ評(píng)分的比較（±s）

表2 兩組患者護(hù)理前后呼吸困難、APACHEⅡ評(píng)分的比較（±s）

注：a與本組護(hù)理前比較，P<0.05；b與對(duì)照組護(hù)理后比較，P<0.01

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3 討論

目前，關(guān)于肺癌合并支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。在哮喘患者發(fā)病的過程中，其氣道上皮細(xì)胞的慢性炎癥易導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)育障礙等，從而可能進(jìn)一步發(fā)展為相關(guān)的腫瘤細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，在住院期間的哮喘患者中，肺癌的發(fā)生率異常增加[9]。一項(xiàng)對(duì)非小細(xì)胞肺癌合并哮喘患者進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，肺癌的發(fā)生、發(fā)展與哮喘的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性：肺癌較嚴(yán)重者的哮喘相關(guān)癥狀較重；治療效果較好的肺癌患者，其哮喘癥狀明顯改善[10]。由此表明，肺癌與哮喘之間存在明顯的相關(guān)性。Eot-1在肺癌合并哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況如何；治療和護(hù)理干預(yù)后，該類患者哮喘等臨床癥狀是否得到明顯的改善，這些均是臨床研究中亟待解決的問題。

為了抵御外來病菌等的侵襲，在機(jī)體與環(huán)境接觸的過程中存在多道防線，其中，氣道上皮細(xì)胞屬于第一道防線，能夠在一定程度上預(yù)防微生物、氣體等[11]。氣道上皮細(xì)胞通過某種作用活化后，能夠分泌多種趨化因子，如趨化因子CC 型家族等，其中，嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子屬于CC 家族中的一員[12]。哮喘患者的主要病理特征是嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)及其嚴(yán)重程度與嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量存在一定的關(guān)系[13]。本研究中以氣管黏膜刷片的方式收集肺癌合并哮喘患者的氣道上皮細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Eot-1在肺癌合并哮喘患者中呈高表達(dá)，其中，在重度哮喘患者中的相對(duì)表達(dá)量明顯高于輕中度哮喘患者（P﹤0.01），提示，Eot-1 的表達(dá)情況一定程度上與肺癌合并哮喘患者的疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。本研究認(rèn)為，在哮喘發(fā)病的過程中，機(jī)體吸入的過敏原能夠?qū)C(jī)體中肺部的肥大細(xì)胞以及相關(guān)的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生活化作用，從而產(chǎn)生相關(guān)的炎性因子，如白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-4、IL-13 等。以上炎性因子進(jìn)一步對(duì)機(jī)體肺上皮細(xì)胞產(chǎn)生刺激作用，從而分泌大量的Eot-1；Eot-1 再通過選擇性作用與相關(guān)受體結(jié)合，進(jìn)一步誘導(dǎo)炎性因子的產(chǎn)生，從而增加支氣管黏膜的浸潤(rùn)程度，進(jìn)一步增加組織的損傷程度，最終加深相關(guān)疾病的嚴(yán)重程度[14-15]。

本研究對(duì)對(duì)照組患者給予常規(guī)護(hù)理，對(duì)觀察組患者在給予常規(guī)護(hù)理的基礎(chǔ)上還注重關(guān)注患者的疼痛情況、有無負(fù)性情緒，從而施行有針對(duì)性的護(hù)理措施。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者在常規(guī)護(hù)理的基礎(chǔ)上予以疼痛關(guān)注和心理疏導(dǎo)護(hù)理等措施后，患者第6 天的排痰情況、呼吸困難以及肺部感染情況均得到明顯改善。提示在常規(guī)護(hù)理的基礎(chǔ)上予以心理護(hù)理措施能夠更好地輔助患者緩解臨床不適，對(duì)于改善肺癌合并哮喘患者呼吸困難等癥狀的效果優(yōu)于對(duì)照組。分析原因是肺癌合并哮喘患者在進(jìn)行胸部手術(shù)后，大部分患者的呼吸功能均受到一定程度的影響，尤其是肺葉切除手術(shù)患者。這類患者或因手術(shù)后疼痛，或?qū)κ中g(shù)及治療存在不了解而對(duì)預(yù)后存有懷疑、擔(dān)心、恐懼等心理，因此，可能伴有焦慮、抑郁等負(fù)性情緒。另外，肺癌合并哮喘好發(fā)于老年患者，而大部分老年患者的心肺功能降低，肺容量下降，并且大部分患者可能伴有其他基礎(chǔ)疾病，因此，肺葉切除手術(shù)后易出現(xiàn)肺部相關(guān)并發(fā)癥。因此，此類患者的心理狀態(tài)不穩(wěn)定。可見，對(duì)患者予以合理的護(hù)理是預(yù)后的關(guān)鍵。常規(guī)護(hù)理方式具有一定的護(hù)理效果，但缺乏針對(duì)性，其內(nèi)容主要是對(duì)癥處理措施，如緩解呼吸道困難、排痰等。而本研究中，在常規(guī)護(hù)理基礎(chǔ)上，根據(jù)觀察組患者的病情及心理狀況予以相關(guān)的疼痛關(guān)注和心理護(hù)理等針對(duì)性的護(hù)理措施，提高了患者的心理健康水平，使其能更好地恢復(fù)身體和配合醫(yī)護(hù)完成診治內(nèi)容，因此其效果更理想。

綜上所述，Eot-1 在肺癌合并哮喘患者的氣道上皮細(xì)胞中呈高表達(dá)，進(jìn)行針對(duì)性的呼吸道護(hù)理措施可明顯緩解患者呼吸困難的癥狀，降低肺部感染的發(fā)生率，值得推廣。