雙蛋白營(yíng)養(yǎng)干預(yù)促進(jìn)腸-肝-脾軸免疫互作

王 靖 張婧婕 韓 迪 閆文杰 朱 宏 韓 娟 梁克紅 仇 菊

（1 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部食物與營(yíng)養(yǎng)發(fā)展研究所 北京100081 2 北京聯(lián)合大學(xué)應(yīng)用文理學(xué)院保健食品功能檢測(cè)中心 北京100083）

白血病是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病以兒童和青年居多[1]。異基因造血干細(xì)胞移植（Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo -HSCT）是一種廣泛應(yīng)用于白血病患者的治療方法，治愈率高。然而，患者移植后將會(huì)面臨駕馭和管理宿主免疫狀態(tài)極端變化的挑戰(zhàn)。移植前需進(jìn)行大劑量放、化療和抗體介導(dǎo)的骨髓細(xì)胞清除過(guò)程，從而為移植進(jìn)體內(nèi)的造血干細(xì)胞提供空間。然而，隨之而來(lái)的嚴(yán)重免疫缺陷、免疫重建延遲和并發(fā)癥的發(fā)生，常常伴有生命危險(xiǎn)，是移植相關(guān)疾病發(fā)生率和死亡率增加的重要因素[2-3]。移植后，供體免疫系統(tǒng)可以攻擊受體或“宿主”，即移植物抗宿主病（Graft versus host disease，GVHD），是異基因造血干細(xì)胞移植的主要且常見(jiàn)的并發(fā)癥，癥狀包括發(fā)熱、肝脾腫大、腹瀉、感染等，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡[4]。如何促進(jìn)免疫重建（預(yù)防感染等并發(fā)癥和防止癌癥復(fù)發(fā)），同時(shí)避免GVHD等并發(fā)癥，是臨床上亟需解決的課題。

1 器官免疫互作與腸-肝-脾軸（ILS Axis）

allo-HSCT 后的免疫重建和GVHD 的發(fā)生、發(fā)展都與免疫系統(tǒng)密切相關(guān)。目前研究顯示，除了脾臟、胸腺、骨髓等免疫器官外，小腸、肝臟等組織作為非專職免疫器官，同樣參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)。其中肝臟、腸道和脾臟之間存在緊密的免疫互作。

在胚胎學(xué)方面，肝臟在發(fā)育過(guò)程中直接從前腸出芽；出生后早期脾臟中發(fā)現(xiàn)的部分B 細(xì)胞來(lái)自胎肝。在解剖學(xué)和生理學(xué)方面，下腸系膜靜脈主要收集大腸血液后注入脾靜脈，然后和主要收集小腸血液的上腸系膜靜脈匯合形成肝門(mén)靜脈，進(jìn)入肝臟；循環(huán)系統(tǒng)中的血液通過(guò)肝動(dòng)脈進(jìn)入肝臟；而肝總管與膽囊管匯合成膽總管，開(kāi)口于十二指腸[5-6]。此外，肝臟、腸道、脾臟之間可通過(guò)體循環(huán)進(jìn)行相互作用。

生物學(xué)功能方面，三者之間同樣關(guān)系密切。首先，腸道微生物與宿主在腸道中以共生的方式存在，在消化中起重要作用，并且是黏膜免疫系統(tǒng)的一部分。正常情況下，除了小腸吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，腸道中大量細(xì)菌的抗原和微生物產(chǎn)物可進(jìn)入血液，隨門(mén)靜脈進(jìn)入肝臟，調(diào)節(jié)肝臟免疫耐受。疾病狀態(tài)下，微生物組成的變化或腸道通透性的改變會(huì)促進(jìn)微生物易位到門(mén)脈循環(huán)中，導(dǎo)致微生物細(xì)胞壁成分（來(lái)自革蘭氏陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素和來(lái)自真菌的β-葡聚糖）和DNA等產(chǎn)物通過(guò)血液輸送到肝臟，被肝細(xì)胞上的免疫受體所識(shí)別，這些受體啟動(dòng)最終導(dǎo)致肝臟損傷的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[7]。腸道內(nèi)定植細(xì)菌還會(huì)影響脾臟的發(fā)育成熟。新生兒腸道被廣泛的細(xì)菌物種定植的過(guò)程，誘導(dǎo)了脾臟中胎肝來(lái)源B 細(xì)胞的快速增殖，同時(shí)伴隨著脾臟邊緣區(qū)（Marginal zone，MZ）B 細(xì)胞和IgM 漿細(xì)胞的快速發(fā)育，從而使得機(jī)體能夠?qū)Σ≡w產(chǎn)生適應(yīng)性免疫應(yīng)答[8]。

肝臟是人體內(nèi)臟里最大的器官，以代謝功能為主。肝臟富含各種常駐先天免疫細(xì)胞，包括自然殺傷（Natural killer，NK）細(xì)胞、枯否細(xì)胞（Kupffer cells，KCs）、淋巴細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞等。肝臟中的炎性巨噬細(xì)胞，占體內(nèi)固定組織巨噬細(xì)胞總數(shù)的80%～90%。血漿脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）含量顯著增加時(shí)，可通過(guò)刺激肝臟免疫細(xì)胞上的Toll 樣受體4（Toll-like receptors 4，TLR4）引發(fā)全身炎癥，從而引發(fā)其它先天免疫細(xì)胞快速募集到肝臟。此外，核因子κB（Nuclear factor kappa-B，NF-κB）信號(hào)傳導(dǎo)還會(huì)導(dǎo)致肝組織內(nèi)KCs 和巨噬細(xì)胞的活化，從而導(dǎo)致肝臟組織進(jìn)一步受損[6]。恒定自然殺傷T（Invariant nature killer T，iNKT）細(xì)胞存在于肝臟內(nèi)并且與許多肝臟疾病的發(fā)展有關(guān)，在被活化后，iNKT 細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致肝損傷。肝臟功能異常會(huì)影響小腸功能[9]。從肝臟分泌到膽汁中的膽紅素進(jìn)入膽管系統(tǒng)并流入腸道進(jìn)行排泄，在那里它被微生物分解代謝到腸腔中成為膽素。在對(duì)患非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的小鼠檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，負(fù)責(zé)將膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)到肝細(xì)胞中的溶質(zhì)載體家族10 成員1（Slc10a1）和溶質(zhì)載體有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員Slco1a1 和Slco1b2 的表達(dá)被顯著抑制，且膽汁酸與促炎細(xì)胞因子之間存在關(guān)聯(lián)[10]。膽紅素對(duì)尿膽酸的分解代謝可以調(diào)節(jié)腸道中的細(xì)菌的門(mén)或亞種。血清膽紅素水平已顯示與結(jié)直腸癌呈負(fù)相關(guān)[11]。肝臟功能異常同樣會(huì)導(dǎo)致脾臟發(fā)生變化。肝硬化等晚期病例的脾臟體積增加，與門(mén)靜脈壓力梯度增加和門(mén)靜脈高壓癥有關(guān)，同時(shí)脾臟腫大常見(jiàn)于脂肪肝等肝臟疾病患者[12]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化患者的脾腫大、纖維化和脾臟僵硬等癥狀與肝臟免疫紊亂有關(guān)，其機(jī)制主要是由于巨噬細(xì)胞受到干擾，并分泌促炎和促纖維化細(xì)胞因子[13]。

脾臟的主要功能是通過(guò)清除循環(huán)凋亡細(xì)胞和維持外周耐受，進(jìn)而維持免疫穩(wěn)態(tài)。脾臟的白髓區(qū)存在高水平的特化T 細(xì)胞和B 細(xì)胞，用于產(chǎn)生新的免疫細(xì)胞和抗體；并且它作為循環(huán)單核細(xì)胞的儲(chǔ)庫(kù)，能夠被快速募集到各種炎癥部位。脾臟能夠產(chǎn)生大量促炎和抗炎細(xì)胞因子，包括腫瘤壞死因子α（Tumor Necrosis Factor，TNF-α）和白介素-6（Interleukin 6，IL-6）等，通過(guò)門(mén)靜脈直接流入肝臟，從而增強(qiáng)肝臟中自然殺傷細(xì)胞活性[6]。脾臟同樣參與腸道免疫調(diào)節(jié)。脾臟可充當(dāng)免疫細(xì)胞儲(chǔ)庫(kù)，遷移到抗原入口的位點(diǎn)。體外抗原刺激后的抗原特異性脾IgM+B 細(xì)胞能夠遷移到受體小鼠的腸中，主要轉(zhuǎn)換為IgA+漿細(xì)胞。此外，口服霍亂病毒可促進(jìn)小鼠脾B 細(xì)胞向腸內(nèi)遷移，進(jìn)而轉(zhuǎn)換為IgA+漿細(xì)胞并增殖。去除腸系膜淋巴結(jié)（Mesenteric lymph nodes，mLN）會(huì)導(dǎo)致脾B 細(xì)胞更高水平活化[14]。

目前國(guó)際上把腸道和肝臟之間通過(guò)膽道、門(mén)靜脈和體循環(huán)進(jìn)行雙向連接的交流稱為 “腸-肝軸”（見(jiàn)圖1），把肝臟與脾臟功能上的相互關(guān)聯(lián)稱為“肝-脾軸”（見(jiàn)圖2）。當(dāng)前研究顯示，脾臟和腸道之間也存在著相互聯(lián)系（見(jiàn)圖3）。因此，作者團(tuán)體提出，機(jī)體存在腸-肝-脾軸（Intestine-Liver-Spleen Axis，ILS Axis），通過(guò)腸道屏障（腸道微生態(tài)）免疫調(diào)節(jié)，肝臟維持免疫耐受，脾臟調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫，即通過(guò)腸-肝-脾軸維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)。

2 雙蛋白促進(jìn)allo-HSCT 患者免疫重建

2.1 allo-HSCT 移植后影響造血及免疫重建的因素

allo-HSCT 前大劑量放、化療不僅嚴(yán)重?fù)p傷腸道、肝臟、脾臟等器官，而且患者的腸-肝-脾軸被破壞，加劇器官損傷和機(jī)體免疫紊亂?；颊咭浦埠竺媾R造血重建和免疫重建，重建延遲則會(huì)造成患者免疫功能低下，感染風(fēng)險(xiǎn)增加，是移植相關(guān)疾病發(fā)生率和死亡率增加的重要因素[2-3]。

allo-HSCT 移植后造血重建依賴于供體造血干細(xì)胞的自我更新能力。炎癥信號(hào)分子、腸道微生物群數(shù)量和種類的減少等因素會(huì)抑制造血干細(xì)胞增殖分化[2，17-19]。造血生長(zhǎng)因子、抗細(xì)胞凋亡細(xì)胞因子和抗氧化劑可改善造血干細(xì)胞的增殖更新[20]。

圖1 腸肝軸—腸和肝之間的雙向交流Fig.1 Intestine-liver axis：bidirectional communication between the intestine and liver

圖2 肝脾軸—肝臟和脾臟的雙向交流Fig.2 Liver-spleen axis：bidirectional communication between liver and spleen

圖3 腸道和脾臟的雙向交流Fig.3 Two-way communication between the intestine and spleen

GVHD是免疫重建過(guò)程中主要且潛在的嚴(yán)重并發(fā)癥，是影響T 細(xì)胞免疫重建的主要因素。急性GVHD 主要影響皮膚、腸道和肝臟，慢性GVHD 表現(xiàn)出與各種自身免疫疾病相似的多器官浸潤(rùn)[21]，延遲機(jī)體免疫重建，增加機(jī)體感染風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和生存期。腸道微生物變化和屏障功能損傷可通過(guò)TLR4等途徑調(diào)節(jié)GVHD 誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。破壞機(jī)體輔助性T 細(xì)胞17（Helper T cell 17，Th17）和FoxP3+CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory T cells，Tregs）的平衡，被認(rèn)為在GVHD 的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用[22-25]。Th17 細(xì)胞通過(guò)釋放促炎因子IL-17 和TNF-α等，促進(jìn)T 細(xì)胞激活和刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生IL-6等炎性因子，誘發(fā)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)GVHD；Tregs 主要通過(guò)釋放IL-10 和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（Transforming growth factor β，TGF-β）抑制T 細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖活化，同時(shí)促進(jìn)IgA等抗體分泌，抑制GVHD[26]。脾臟Tregs 細(xì)胞增加能夠減輕GVHD[27]。臨床研究顯示，allo-HSCT 移植后患者IgA 水平經(jīng)常降低數(shù)月，之后患者開(kāi)始恢復(fù)正常的IgA 水平，然而，急性或慢性GVHD 患者仍然缺乏IgA[18]。研究顯示，短期給藥可通過(guò)減少機(jī)體內(nèi)氧化應(yīng)激降低肝臟中GVHD 相關(guān)細(xì)胞因子和趨化因子基因表達(dá)、循環(huán)IL-17 水平，減輕肝臟炎癥和結(jié)腸潰瘍，從而減輕急性GVHD[28]。

2.2 allo-HSCT 患者面臨嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題

受免疫重建和并發(fā)癥等影響，allo-HSCT 患者消耗增大，營(yíng)養(yǎng)需求比常人增加30%～50%。allo-HSCT 患者每天需補(bǔ)充1.5～2.0 g/kg 體重的蛋白質(zhì)和至少146.5 kJ/kg 體重的卡路里來(lái)滿足機(jī)體營(yíng)養(yǎng)需求[29-30]。allo-HSCT 患者移植前及移植過(guò)程中身體質(zhì)量指數(shù)（Body Mass Index，BMI）值低于正常水平的患者，即偏瘦患者，其生存率明顯降低[31]。

雖然醫(yī)療工作者會(huì)對(duì)allo-HSCT 患者進(jìn)行詳細(xì)的營(yíng)養(yǎng)評(píng)估和補(bǔ)充，但是高劑量放化療及藥物副作用等造成的嚴(yán)重胃腸道損傷會(huì)在很大程度上限制口服攝入，導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)吸收不良；而且移植期間對(duì)患者飲食要求十分嚴(yán)格，稍有不慎會(huì)導(dǎo)致腸道感染甚至嚴(yán)重的GVHD。基于上述原因，患者經(jīng)過(guò)異基因造血干細(xì)胞移植治療后，會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的蛋白質(zhì)能量營(yíng)養(yǎng)不良，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量及生存率[32]。allo-HSCT 患者營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題成為移植過(guò)程中一大困境。

2.3 蛋白營(yíng)養(yǎng)與機(jī)體免疫

當(dāng)前研究顯示，蛋白營(yíng)養(yǎng)狀況與機(jī)體免疫力密切相關(guān)。

1）蛋白營(yíng)養(yǎng)不良會(huì)導(dǎo)致免疫細(xì)胞數(shù)量的顯著下降，尤其是T 細(xì)胞的數(shù)量下降。小鼠饑餓8 h后胸腺細(xì)胞和脾細(xì)胞計(jì)數(shù)與正常攝食組相比顯著下降。蛋白缺失飼料組小鼠與正常攝食組相比顯示出脾萎縮和T 細(xì)胞數(shù)量下降[33]。人群試驗(yàn)顯示出類似的結(jié)果。營(yíng)養(yǎng)不良兒童與營(yíng)養(yǎng)良好兒童相比，全血中CD4+和CD8+細(xì)胞數(shù)量顯著降低[34]。

2）蛋白營(yíng)養(yǎng)不良會(huì)降低感染病毒后免疫應(yīng)答。小鼠在感染流感病毒時(shí)，低蛋白飼料組小鼠的病毒特異性抗體應(yīng)答和流感核蛋白特異性CD8+T 細(xì)胞數(shù)量均顯著低于蛋白充足飼料組小鼠。低蛋白飼料組小鼠感染流感病毒后病毒作用的持久性，遷移至肺部的炎癥細(xì)胞種類和致死率等指標(biāo)顯著高于蛋白充足飼料組小鼠。將低蛋白飼料更換為蛋白充足飼料則能顯著增加病毒清除率[35]。嬰兒歷什曼蟲(chóng)感染小鼠，蛋白營(yíng)養(yǎng)不良會(huì)使促進(jìn)T 細(xì)胞從胸腺遷移的分子功能失調(diào)[36-37]。

3）蛋白營(yíng)養(yǎng)干預(yù)能夠抑制炎癥反應(yīng)，提高機(jī)體免疫水平。膳食亮氨酸可影響幼年鈍嘴鯛的血漿補(bǔ)體成分3（C3）、免疫球蛋白M（IgM）含量等血漿免疫參數(shù)，并通過(guò)調(diào)節(jié)IL-1β，白介素8（Interleukin 8，IL-8）來(lái)降低促炎因子的肝胰腺基因表達(dá)[38]。臨床試驗(yàn)研究顯示，癌癥化療患者給予乳清蛋白能夠增加患者血清白蛋白和IgG 水平[39]。老年人的蛋白攝入推薦量是1.0～1.5 g/kg/d，然而多數(shù)老年人不能達(dá)到這個(gè)膳食蛋白攝入量，老年肌少癥人群補(bǔ)充乳清蛋白和維生素D 能夠減輕慢性低級(jí)炎癥[40]。以上研究提示，可通過(guò)蛋白臨床營(yíng)養(yǎng)干預(yù)解決allo-HSCT 患者蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良問(wèn)題。

2.4 雙蛋白應(yīng)用于allo-HSCT 患者臨床營(yíng)養(yǎng)干預(yù)

雙蛋白是以大豆蛋白等植物蛋白和以牛奶蛋白等動(dòng)物蛋白為代表的天然優(yōu)質(zhì)蛋白，按照量效關(guān)系和精準(zhǔn)互作獲得的食用蛋白源。2017年7月，國(guó)務(wù)院辦公廳印發(fā) 《國(guó)民營(yíng)養(yǎng)計(jì)劃（2017—2030年）》，指出：針對(duì)不同人群的健康需求，著力發(fā)展雙蛋白食物等新型營(yíng)養(yǎng)健康食品。強(qiáng)化雙蛋白工程等重大項(xiàng)目的實(shí)施力度。以優(yōu)質(zhì)動(dòng)物蛋白、植物蛋白為主要營(yíng)養(yǎng)基料，加大力度創(chuàng)新基礎(chǔ)研究與加工技術(shù)工藝，開(kāi)展雙蛋白工程重點(diǎn)產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化推廣。此外，雙蛋白已納入國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)2019，2020年《國(guó)民營(yíng)養(yǎng)計(jì)劃》的重點(diǎn)工作。

前期動(dòng)物功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)顯示，雙蛋白在增加骨骼肌力量，促進(jìn)支鏈氨基酸釋放，增強(qiáng)抗疲勞能力等方面顯著優(yōu)于單一蛋白[41-44]。為解決allo-HSCT 患者蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)嚴(yán)重缺乏問(wèn)題，從2016年3月開(kāi)始，本研究團(tuán)隊(duì)與陸道培醫(yī)院合作開(kāi)展為期4年多的Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期雙蛋白臨床營(yíng)養(yǎng)干預(yù)，雙蛋白干預(yù)組樣本量目前已達(dá)40 余例。采用隨機(jī)對(duì)照研究方法進(jìn)行雙蛋白作用效果及機(jī)制研究，統(tǒng)計(jì)分析雙蛋白干預(yù)組和未干預(yù)組患者干預(yù)前、后自身指標(biāo)變化以及組間變化。I 期干預(yù)結(jié)果表明：在移植前給予雙蛋白干預(yù)1.5 g/d，干預(yù)4 周后，雙蛋白依從性良好的患者從移植后到出倉(cāng)提前4～5 d；從出倉(cāng)到出院提前10 d。對(duì)依從性良好的患者出院追蹤3 個(gè)月，尚無(wú)患者因治療需要返院。雙蛋白營(yíng)養(yǎng)干預(yù)在提高病床周轉(zhuǎn)率和抗感染方面取得較顯著成果。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，雙蛋白預(yù)干預(yù)可顯著提高白血病患者的血清白蛋白、球蛋白和總蛋白含量，明顯緩解患者蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良狀況，提高肌肉水平，縮短平均植活時(shí)間，降低移植后感染發(fā)生率。此研究成果于2017年發(fā)表于Nutrition Research[45]。由此可見(jiàn)，血液病患者進(jìn)行allo-HSCT 時(shí)，良好基礎(chǔ)狀態(tài)需要合理營(yíng)養(yǎng)支持，是治療順利進(jìn)行的重要前提。臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，雙蛋白可以明顯改善骨髓移植患者基礎(chǔ)狀態(tài)和生活質(zhì)量，對(duì)降低感染等并發(fā)癥的發(fā)生起到重要作用[31，45]。

3 雙蛋白促進(jìn)造血和免疫重建的潛在作用機(jī)制

本研究建立小鼠骨髓移植動(dòng)物模型進(jìn)行動(dòng)物功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)，并結(jié)合臨床營(yíng)養(yǎng)干預(yù)試驗(yàn)，對(duì)雙蛋白促進(jìn)造血、免疫重建的機(jī)制進(jìn)行初步研究[41，45-47]。結(jié)果顯示，雙蛋白除提供氨基酸等營(yíng)養(yǎng)素外，可通過(guò)與腸道、肝臟、脾臟等器官的協(xié)同作用改善機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，促進(jìn)造血干細(xì)胞植入，加速造血重建和免疫重建，降低感染風(fēng)險(xiǎn)，減少GVHD等并發(fā)癥發(fā)生率和死亡率。

圖4 骨髓移植過(guò)程對(duì)腸-肝-脾軸的損傷和雙蛋白對(duì)腸-肝-脾軸潛在作用機(jī)制圖Fig.4 Injury of the bone marrow transplantation process on the intestine-liver-spleen axis and the potential mechanism of dual-protein on the intestine-liver-spleen axis

3.1 雙蛋白促進(jìn)免疫重建機(jī)制

由于大劑量放療和抗生素等藥物的大量使用，異基因造血干細(xì)胞移植的過(guò)程通常伴隨腸道菌群失衡和多樣性減少[46]。腸道菌群的多樣性與移植后Tregs 數(shù)量、GVHD等并發(fā)癥的發(fā)生率和死亡率呈負(fù)相關(guān)，腸球菌等腸道菌的相對(duì)豐度與之呈正相關(guān)[44]。收集雙蛋白干預(yù)前、后allo-HSCT 患者大便，進(jìn)行腸道菌群16S rDNA 測(cè)序及其組成分析，結(jié)果顯示，雙蛋白能夠明顯改善腸道菌群的組成，提高患者腸道菌群的多樣性，降低腸球菌比例[47]，改善腸道屏障功能，減輕腸道炎癥反應(yīng)，減少炎癥因子的生成和釋放，降低GVHD等并發(fā)癥的發(fā)生率。其次，動(dòng)物模型顯示，雙蛋白與單一蛋白相比，能顯著提高大鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性，降低丙二醛（MDA）水平，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力[41]，可改善放、化療后氧化應(yīng)激性肝臟損傷，促進(jìn)肝臟的蛋白合成。臨床試驗(yàn)顯示，雙蛋白顯著改善allo-HSCT 患者肝臟功能，提高血清白蛋白水平[45]。此外，雙蛋白顯著促進(jìn)骨髓移植小鼠外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量恢復(fù)，增加脾臟NK 細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞數(shù)量，增強(qiáng)IgM等免疫球蛋白的分泌，促進(jìn)脾臟恢復(fù)和免疫重建（另文發(fā)表）。

3.2 雙蛋白與腸-肝-脾軸

根據(jù)當(dāng)前試驗(yàn)結(jié)果，作者團(tuán)隊(duì)推測(cè)，雙蛋白通過(guò)調(diào)節(jié)腸-肝-脾軸來(lái)促進(jìn)allo-HSCT 后機(jī)體免疫重建（見(jiàn)圖4）。雙蛋白營(yíng)養(yǎng)干預(yù)一方面通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，抑制腸道炎癥反應(yīng)和炎癥因子分泌，抑制小腸細(xì)胞凋亡，保護(hù)腸道屏障功能，抑制腸道菌群易位和內(nèi)毒素入血；另一方面雙蛋白改善腸道微生態(tài)，增加有益菌的種類和數(shù)量，通過(guò)線粒體等途徑增加Tregs 的數(shù)量和活性，促進(jìn)IL-10和TGF-β等抗炎細(xì)胞因子分泌，抑制Th17 細(xì)胞的活化，增強(qiáng)腸道的免疫耐受，抑制腸道GVHD反應(yīng)。腸道功能改善可以減輕肝臟的炎癥損傷和免疫激活，同時(shí)通過(guò)調(diào)節(jié)Tregs 和Th17 細(xì)胞比例改善脾臟功能，促進(jìn)脾臟B 細(xì)胞發(fā)育成熟，向腸道聚集，并分泌IgA等抗體；腸道免疫耐受增強(qiáng)能夠減少脾臟炎癥因子的分泌，從而減少肝臟免疫系統(tǒng)的激活，減輕肝損傷，改善膽汁酸的分泌，維持腸道微生物的穩(wěn)態(tài)，減輕GVHD，促進(jìn)造血重建和T 細(xì)胞免疫重建，加速患者恢復(fù)。

4 結(jié)語(yǔ)

雙蛋白食物作為新型營(yíng)養(yǎng)健康食品，可明顯改善allo-HSCT 患者基礎(chǔ)狀態(tài)及生存質(zhì)量，縮短治療時(shí)間，降低感染率和死亡率，減少醫(yī)療費(fèi)用，干預(yù)效果顯著。結(jié)合雙蛋白動(dòng)物功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)和臨床營(yíng)養(yǎng)干預(yù)結(jié)果，作者團(tuán)隊(duì)首次提出機(jī)體可能存在“腸-肝-脾軸” 的免疫互作以及雙蛋白調(diào)節(jié)腸-肝-脾軸促進(jìn)免疫重建的潛在作用機(jī)制，目前正在開(kāi)展進(jìn)一步驗(yàn)證工作。