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    腹主動(dòng)脈部分縮窄大鼠模型體外心臟的電生理特點(diǎn)

    2020-10-15 09:04:25楊陽
    健康大視野 2020年12期

    楊陽

    【摘要】 目的:探究腹主動(dòng)脈部分縮窄大鼠的體外心臟電生理特點(diǎn)。方法:選擇日齡30d的雄性SD大鼠30只,按照簡單隨機(jī)分組的方法分為三組,分為正常組6只、假手術(shù)組12只、模型組12只,假手術(shù)組與模型組中,按照造模時(shí)間的不同分為造模4周組與造模8周組各6只,造模4周與8周,將大鼠心臟剪取后進(jìn)行左心室的測量,對左室心肌質(zhì)量指數(shù)進(jìn)行計(jì)算;造模8周將心臟取下進(jìn)行體外灌流,對單相動(dòng)作電位進(jìn)行記錄,比較模型組與假手術(shù)組的零相上升最大速度、動(dòng)作電位最大幅度、有效不應(yīng)期以及動(dòng)作電位復(fù)極20%、50%、90%時(shí)間。結(jié)果:(1)造模4周、8周,模型組大鼠的左心室心肌質(zhì)量指數(shù)高于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(2)模型組的左心室有效不應(yīng)期長于假手術(shù)組,APD20、APD50、APD90長于假手術(shù)組,有效不應(yīng)期/APD90小于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(3)模型組不同心臟部位的有效不應(yīng)期離散度與APD90離散度均高于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:壓力負(fù)荷引起大鼠左心室由正常過渡為向心性肥厚并發(fā)展為向心性肥厚與離心性肥厚混合的狀態(tài)。心臟不同部位離散度增加、左心房單相動(dòng)作電位復(fù)極時(shí)間延長促進(jìn)折返形成,這些都是引起心肌肥厚大鼠出現(xiàn)心律失常的原因。

    【關(guān)鍵詞】 大鼠;電生理;體外心臟

    【中圖分類號(hào)】R453【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1005-0019(2020)12-222-02

    當(dāng)前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn),心血管事件的發(fā)生危險(xiǎn)因素之一就是左室肥厚。心臟負(fù)荷增加引起心肌肥厚以及肥厚性心肌病患者發(fā)生猝死的風(fēng)險(xiǎn)要明顯高于健康群體。幾乎所有的猝死發(fā)張都與惡性室性心律失常存在相關(guān)性,電重構(gòu)時(shí)常引起室性心律失常。本次研究通過對大鼠腹主動(dòng)脈進(jìn)行部分緊縮的方法來引起大鼠心肌肥厚,建立動(dòng)物模型,聯(lián)合使用體外心臟電生理實(shí)驗(yàn)與朝上檢測的方法來探討心室肥厚的心臟心律失常的發(fā)生機(jī)制,這對指導(dǎo)心律失常的防治具有一定應(yīng)用價(jià)值,報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    選擇日齡30d的雄性SD大鼠30只,按照簡單隨機(jī)分組的方法分為三組,分為正常組6只、假手術(shù)組12只、模型組12只,假手術(shù)組與模型組中,按照造模時(shí)間的不同分為造模4周組與造模8周組各6只。常溫、常濕下飼養(yǎng)。大鼠的體質(zhì)量為150-170g。

    1.2 方法

    制作動(dòng)物模型:將模型組大鼠稱重后給予戊巴比妥鈉(50mg/kg,10g/L)腹腔注射麻醉。仰臥位固定,手術(shù)區(qū)域備皮后消毒,鋪巾。腹中線左側(cè)0.5cm將肌肉與皮膚切開,將腎動(dòng)脈與腹主動(dòng)脈分離后,腎動(dòng)脈上方1cm的腹主動(dòng)脈采用7號(hào)注射針頭與主動(dòng)脈平行緊貼,采用4號(hào)手術(shù)絲線結(jié)扎主動(dòng)脈與注射針頭后將注射針頭抽出。逐層縫合。給予青霉素50000IU持續(xù)7d。假手術(shù)大鼠除了不結(jié)扎腹主動(dòng)脈外其余同模型組;正常組僅常規(guī)飼養(yǎng)[1]。

    體外心臟電生理實(shí)驗(yàn):造模8周,戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,開胸分離后進(jìn)行心臟提取,主動(dòng)脈逆向灌流心臟。室溫29℃下,將Krebs-Henseleit生理液作為灌流液,pH調(diào)整為7.2-7.4,實(shí)驗(yàn)中,將0.95的氧氣與0.05的二氧化碳混合氣體以2L/min的流量通氣[2]。

    測定電生理指標(biāo):記錄電極為吸附于體外心臟的左心室的2根吸附電極,刺激器發(fā)出脈沖電頻刺激,強(qiáng)度為1.5倍閾值,脈寬2ms,周期250ms。采用生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(BL-420E+)對固定頻率刺激15min內(nèi)的左右心室電生理指標(biāo)進(jìn)行連續(xù)記錄。指標(biāo)包括零相上升最大速度、動(dòng)作電位最大幅度、有效不應(yīng)期、動(dòng)作電位復(fù)極20%(APD20)、50%(APD50)、90%(APD90)時(shí)間。測量有效不應(yīng)期:在心室壁或者心房上部按照1mm的間距安放雙極刺激電極后啟動(dòng)刺激程序,連續(xù)測量3次后計(jì)算平均值。測量單相動(dòng)作電位:其目的在于了解心肌復(fù)極相關(guān)信息,連續(xù)測定8個(gè)頻率穩(wěn)定波形的單相動(dòng)作電位數(shù)值,計(jì)算平均值[3-4]。

    測定左室質(zhì)量:造模4周、8周減取大鼠心臟,生理鹽水沖洗后將殘余液體擠出,電子天平稱量。

    1.3 觀察指標(biāo)

    觀察模型組和假手術(shù)組的同期左心室心肌質(zhì)量指數(shù)以及體外心臟電生理指標(biāo)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    本次研究獲得的數(shù)據(jù)錄入數(shù)據(jù)庫中后,采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,對符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用“均數(shù)(標(biāo)準(zhǔn)差/(x±s)”的方式表示,進(jìn)行t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,當(dāng)P<0.05時(shí),提示數(shù)據(jù)的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 比較模型組與假手術(shù)組的同期左心室心肌質(zhì)量指數(shù)

    造模4周、8周,模型組大鼠的左心室心肌質(zhì)量指數(shù)[(28.89(2.56)g/m2]、[(31.19(2.87)g/m2]高于假手術(shù)組[(15.12(1.48)g/m2]、[(16.88(2.30)g/m2],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    2.2 比較模型組與假手術(shù)組的左心室電生理參數(shù)

    模型組的左心室有效不應(yīng)期[(75.74(13.32)ms]長于假手術(shù)組[(60.55(7.16)ms],APD20[(14.46(2.44)ms]、APD50[(35.66(5.82)ms]、APD90[(131.64(13.51)ms]長于假手術(shù)組[(10.65(1.67)ms]、[(26.81(4.45)ms]、[(90.64(7.65)ms],有效不應(yīng)期/APD90[(0.59(0.08)]小于假手術(shù)組[(0.68(0.09)],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    2.3 比較模型組與假手術(shù)組的不同心臟部位離散度

    模型組有效不應(yīng)期離散度(左心室-右心室)[(25.46(1.15)ms]、APD90離散度(左心室-右心室)[(25.46(1.15)ms]均高于假手術(shù)組[(5.22(0.83)ms]、[(18.77(4.15)ms],P<0.05。

    3 討論

    心肌肥厚屬于心衰早期心肌細(xì)胞應(yīng)對室襞應(yīng)力增加而產(chǎn)生的一種代償性、適應(yīng)性反應(yīng),心肌肥厚的發(fā)生可以在一段時(shí)間內(nèi)滿足機(jī)體對心排出量的需求而不引起心力衰竭癥狀發(fā)生,但是心肌肥厚狀態(tài)下,肥大心肌需氧量增加,冠狀動(dòng)脈時(shí)常無法滿足心肌對供血量的要求,這造成心肌缺血缺氧,長此以往心肌收縮力減退,心源性猝死、心功能惡化的風(fēng)險(xiǎn)增加。建立動(dòng)物模型對研究心肌肥厚具有重要作用,本次研究通過腹主動(dòng)脈部分縮窄來增加SD大鼠的外周循環(huán)阻力,引起壓力超負(fù)荷心肌肥厚,其與臨床具有良好的相關(guān)性。

    本次研究中,通過體外灌流心臟電生理的方法來進(jìn)行電生理的檢測,這在最大程度上減少了心臟受到神經(jīng)、體液的影響,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性與可靠性。當(dāng)前尚缺乏受到廣泛認(rèn)同的超聲測量大鼠左心室質(zhì)量的方法,因此本次研究采用了左心室的質(zhì)量與體表面積比值來對左室心肌質(zhì)量指數(shù)進(jìn)行計(jì)算。左心室重構(gòu)包括:同心性重構(gòu)、同心性肥大以及離心性肥大,同心性重構(gòu)的發(fā)生與壓力負(fù)荷有關(guān),僅表現(xiàn)為左室室壁厚度增加,未見左室心肌質(zhì)量指數(shù)增加;同心性肥大的發(fā)生與持續(xù)壓力負(fù)荷有關(guān),表現(xiàn)為左室心肌質(zhì)量指數(shù)與左室室襞同時(shí)增加;離心性肥大是持續(xù)容積負(fù)荷造成的,表現(xiàn)為左室容積增加,而未見室壁厚度增加。本次研究中,造模4周后,此時(shí)模型大鼠的左心室表現(xiàn)為向心性肥厚;造模8周,此時(shí)大鼠的左室內(nèi)腔增加,左室心肌質(zhì)量指數(shù)也增加,同時(shí)伴有心室腔擴(kuò)大與室襞增厚,屬于混合型左室肥厚[3]。

    當(dāng)心肌肥厚發(fā)生時(shí),心臟電重構(gòu)也時(shí)常隨之出現(xiàn)。本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證實(shí),心肌肥厚的大鼠左室心肌動(dòng)作電位復(fù)極的APD20、50、90均顯著延長。當(dāng)前研究也已經(jīng)發(fā)現(xiàn),無論左心室屬于向心性肥厚或離心性肥厚,Ito電流密度都降低,平臺(tái)期與復(fù)極Ⅰ期的電流都受到Ito的影響,隨之激活的AP所有電流也會(huì)受到影響,因此可能是由于Ito降低而造成APD20、50延長。復(fù)極3期主要受到Iks電流密度的影響,當(dāng)前也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)左室肥厚的動(dòng)物模型中Iks電流密度下降,失活時(shí)程與電壓依賴性激活并未受到影響。Iks電流密度降低引起3期復(fù)極被延長,因此APD50被延長。Ik1為內(nèi)向整流鉀電流,其同時(shí)具有作用于復(fù)極后期與維持靜息膜電位的作用,心室肥厚時(shí),Ik1電流密度降低而延遲動(dòng)作電位后期復(fù)極,ADP延長,這些原因引起心肌肥厚的大鼠左心室ADP90被延長。

    綜上所述,心臟不同部位離散度增加、左心房單相動(dòng)作電位復(fù)極時(shí)間延長促進(jìn)折返形成,這是引起心律失常的原因。

    參考文獻(xiàn)

    [1]黃涯,何天麥,吳愛明,等.穩(wěn)心顆粒干預(yù)心肌缺血大鼠電生理重構(gòu)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J].世界中醫(yī)藥,2019,14(10):2557-2562.

    [2]王阿妮,盧慧芳,王梁,等.利拉魯肽對急性心肌梗死大鼠左室肌電活動(dòng)穩(wěn)定性質(zhì)的影響[J].中國心臟起搏與心電生理雜志,2019,33(04):339-342.

    [3]趙桂香,劉志強(qiáng),古麗扎爾·吐爾遜.截肢手術(shù)創(chuàng)傷對大鼠心臟電生理、心功能及eNOS通路的影響[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2019,29(08):79-87.

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