基于青海弧菌Q67的鍍鋅廢水土壤污染的生物毒性效應(yīng)

（1.中國科學(xué)院大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，北京 100049；2.滄州科技事務(wù)司法鑒定中心，河北 滄州 061000）

電鍍工藝在機(jī)械工業(yè)、輕工業(yè)等行業(yè)承擔(dān)著重要的角色，其中鍍鋅工藝在生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛。鍍鋅層具有致密、沉積均勻、相對便宜的優(yōu)勢，該鍍種在電鍍行業(yè)所占比例高達(dá)45%～65%[1]。但在鍍鋅過程中，會(huì)產(chǎn)生大量含有鋅、鉻等物質(zhì)的有毒廢水[2]。鍍鋅企業(yè)排放的重金屬廢水污染土壤，也可以通過滲透到地下水和大氣沉降[3]等途徑威脅環(huán)境安全，導(dǎo)致健康問題，使污染區(qū)人群的疾病發(fā)生率和死亡率明顯升高[4]。

在公益訴訟司法實(shí)踐中，對生態(tài)環(huán)境損害鑒定的技術(shù)需求包含“現(xiàn)場采樣-快速檢測-篩查定性”等諸多環(huán)節(jié)，其中對于快速定性、篩查主導(dǎo)污染物（對毒性貢獻(xiàn)大的污染物）技術(shù)的要求日益凸顯。目前對重金屬污染場地進(jìn)行的鑒定主要依靠化學(xué)分析手段。當(dāng)某些場地?zé)o法明確主導(dǎo)污染物時(shí)，僅依靠化學(xué)分析無法對污染物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)作出準(zhǔn)確評價(jià)，可能會(huì)出現(xiàn)化學(xué)指標(biāo)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)但是生物指標(biāo)依然顯示高毒[5]，或化學(xué)指標(biāo)濃度下降而毒性仍然增長的情況[6]，此時(shí)污染物形態(tài)變化復(fù)雜且難以區(qū)分。而生物毒性水平可以更直觀地反映污染物在遷移、轉(zhuǎn)化及降解過程中引起的毒性變化過程，體現(xiàn)污染物對各級(jí)生物的毒性效應(yīng)，同時(shí)能夠追蹤污染物的代謝毒性變化，更加直接、快速、綜合地反映場地污染狀況。欒曉等[7]將快速檢測遺傳毒性的發(fā)光細(xì)菌Acinetobactersp.RecA應(yīng)用于溢油污染海水樣品的毒性評價(jià)，發(fā)現(xiàn)將發(fā)光細(xì)菌菌株加入全細(xì)胞生物傳感器，可快速判定原油泄漏事故中污染海水樣品的遺傳毒性，并獲得污染海水毒性隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化。ZHOU等[8]利用發(fā)光細(xì)菌測試，評估農(nóng)業(yè)土壤中抗生素降解前后的生態(tài)毒性并定量降解效率，為控制農(nóng)業(yè)土壤污染提供了一種可選方法。HALMI等[9]利用熱帶發(fā)光菌株P(guān)hotobacterium.sp.開發(fā)了快速發(fā)光細(xì)菌測試，并應(yīng)用于馬來西亞多個(gè)重金屬污染地點(diǎn)的現(xiàn)場試驗(yàn)工作，證明該發(fā)光細(xì)菌測試可以應(yīng)用于水環(huán)境中重金屬的早期檢測。因此，在環(huán)境損害鑒定中，將化學(xué)分析方法與生物毒性試驗(yàn)相結(jié)合，獲取環(huán)境損害的綜合信息，成為新的研究熱點(diǎn)。本研究將構(gòu)建一種針對土壤的快速生物急性毒性診斷方法，一方面基于化學(xué)檢測結(jié)果對污染因子含量、來源進(jìn)行分析，另一方面測定樣品急性生物毒性，探究污染因子與生物毒性的相關(guān)性并解析出主導(dǎo)污染物，為污染土壤急性毒性鑒定提供新的思路和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 采樣點(diǎn)分布與樣品采集

場地位于某農(nóng)村平房旁，該平房為小型鍍鋅生產(chǎn)廠房，面積約170m2，生產(chǎn)廢水由一根直徑為160mm的管道引入旁邊洼地。目前洼地表面無明顯污染跡象，初步判斷管口為污染起始點(diǎn)，即圖1中的點(diǎn)9。

采用網(wǎng)格布點(diǎn)采樣法，對場地內(nèi)傾倒點(diǎn)附近的疑似污染區(qū)域進(jìn)行重點(diǎn)布點(diǎn)。如圖1所示，現(xiàn)場共布設(shè)13個(gè)土壤采樣點(diǎn)，其中遠(yuǎn)離傾倒點(diǎn)的點(diǎn)13為背景點(diǎn)。每個(gè)采樣點(diǎn)采集表層土500 g，將采集的樣品裝入密封袋，冷藏運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室中，進(jìn)行風(fēng)干研磨后過100目篩，待用。

圖1 采樣點(diǎn)分布示意圖Fig.1 Schematic of sampling point distribution

1.2 有效態(tài)金屬檢測

考慮鍍鋅廢水可能產(chǎn)生生物毒性的主要組分是污染場地土壤的有效態(tài)金屬，因此本研究重點(diǎn)對有效態(tài)金屬進(jìn)行分析。有效態(tài)金屬是指土壤中易被植物吸收的重金屬部分[10]，也稱為“可提取態(tài)”。

采用浸提法提取污染土壤中的污染物用于測定土壤有效態(tài)金屬含量，同時(shí)制備細(xì)菌的暴露溶液：按50 mL去離子水∶10 g土壤樣品混合至50 mL離心管中，超聲提取15min后放入BHO-402A型恒溫振蕩器（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）中振蕩6 h，再超聲提取15 min[11]。超聲-振蕩處理后靜置2 h，取上清液用0.22 μm水系濾膜過濾，使用iCAPTMQ ICP-MS系統(tǒng)（美國Thermo Fisher Scientific公司）測定濾液中的金屬含量。

用高濃度人工模擬土壤溶液（high-concentration artificial soil solution，HAS）[12]將土壤中提取的暴露溶液以100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、5%、1%濃度梯度稀釋，共12個(gè)梯度。實(shí)驗(yàn)過程中，使用空白對照樣品和土壤標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品（GSS-5，中國計(jì)量科學(xué)研究院）進(jìn)行全過程質(zhì)量控制。分析所用試劑均為優(yōu)級(jí)純，實(shí)驗(yàn)用水均為去離子水。

1.3 基于青?；【鶴67的發(fā)光細(xì)菌法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)菌種

發(fā)光細(xì)菌法主要利用發(fā)光細(xì)菌對污染物的生物發(fā)光響應(yīng)來確定污染物的生物毒性。其中淡水發(fā)光菌——青?；【鶴67（Vibrio qinghaiensissp.-Q67）和明亮發(fā)光桿菌T3均為國內(nèi)外常用的發(fā)光細(xì)菌，青海弧菌Q67具有無鹽度干擾、適用pH值范圍廣、不改變污染物形態(tài)等特點(diǎn)，在環(huán)境保護(hù)、生物等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用[13]。

本實(shí)驗(yàn)采用的青?；【鶴67購自北京濱松光子股份有限公司，培養(yǎng)基成分為：胰胨0.50%，酵母膏0.50%，甘油0.30%，MgCl20.32%，KBr 0.02%，CaSO40.01%，NaCl 0.40%，KCl 0.40%，pH 8.5±0.5[14]。實(shí)驗(yàn)時(shí)將4℃保存的青海弧菌Q67轉(zhuǎn)移到新鮮斜面上，倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中于22℃培養(yǎng)24 h后，再從中挑取菌落接種于新鮮斜面培養(yǎng)基上，相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)24h獲得第二代菌種。繼續(xù)重復(fù)以上過程至第三代，然后將培養(yǎng)好的第三代菌種置于4℃冰箱中備用。使用前將培養(yǎng)好的菌種接種到50 mL液體培養(yǎng)基中，在22℃下培養(yǎng)12～16h。

1.3.2 菌懸液的配制

培養(yǎng)好的菌體以12 850×g離心10 min后收集固體部分，用配制好的HAS作為背景溶液將菌體制成菌懸液。調(diào)整菌懸液的密度，使其發(fā)光強(qiáng)度在6×104相對光單位（relative light unit，RLU）左右。

1.3.3 急性毒性試驗(yàn)

以標(biāo)準(zhǔn)的白色不透明96孔板（美國Corning公司）為載體，每排12個(gè)孔，共8排。為避免96孔板在酶標(biāo)儀中的邊緣效應(yīng)，周圍的36個(gè)孔分別加入200 μL超純水。在第2、6、7、11列的微孔中加入100μL HAS作為空白對照組（b），在第3、4、5、8、9、10列的微孔中加入100 μL配制好的不同濃度梯度的土壤浸提液作為樣品組（c），如圖2所示[15]。用12道移液器移取100 μL配制好的菌懸液于b組和c組中，在Synergy H1多功能酶標(biāo)儀（美國BioTek公司）中振蕩20min后測定每個(gè)孔的RLU。

圖2 青?；【鶴67毒性測試中的微孔板實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Fig.2 Experimental design of microplates in Vibrio qinghaiensis sp.-Q67 toxicity test

以空白對照組的RLU均值（I0）和各濃度的3個(gè)平行樣品的RLU均值（I）計(jì)算待測樣品對發(fā)光菌發(fā)光的相對發(fā)光率[relative luminous rate，X（%）][16]和發(fā)光抑制率[luminous inhibition rate，E（%）][17]：

每塊板重復(fù)檢測3次以減少隨機(jī)誤差。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理與分析采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行，繪圖采用OriginPro 8.6軟件（美國OriginLab公司）。

標(biāo)準(zhǔn)差由公式3得出，變異系數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)差與平均值之比。

其中，S為樣本標(biāo)準(zhǔn)差，xi為金屬i的實(shí)測值，為金屬的平均濃度。

瑞典科學(xué)家HAKANSON提出潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)法[18]，即將土壤中污染物的含量折算成生物毒性風(fēng)險(xiǎn)，用于評價(jià)受污染土壤的潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。本研究針對重金屬共存情況，通過加和方式衡量，計(jì)算方法如下：

相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.01。

主成分分析（principal component analysis，PCA）使用SPSS 24.0軟件的因子分析模塊進(jìn)行分析。

多元逐步回歸是回歸分析模型中的一種方法，能夠區(qū)分解釋變量（對毒性影響大的污染組分）和干擾變量（對毒性影響小或無影響的污染組分），并由大到小將解釋變量逐個(gè)引入進(jìn)行回歸以得到對因變量（本研究中為青?；【鶴67表征的毒性大小）貢獻(xiàn)較大的解釋變量。采用SPSS 24.0軟件中的線性回歸模型進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

2.1 土壤有效態(tài)金屬含量及源解析

2.1.1 土壤有效態(tài)金屬含量分析及潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)

檢測結(jié)果顯示，該場地土壤中有金屬18種，描述性統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1。

表1 有效態(tài)金屬含量及潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)Tab.1 Concentration of available metals and potential ecological risk index （n=12）

Co、Cr、Se和Ni總體含量較低，該場地土壤有效態(tài)金屬平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)順序?yàn)椋篜b＞Fe＞Zn＞Sn＞Th＞Al＞U＞Cd＞Mn＞Bi＞V＞Li＞Cu＞As＞Ni＞Se＞Cr＞Co，66.7%的采樣點(diǎn)金屬檢出率為100%，該場地存在嚴(yán)重污染，Zn的最高質(zhì)量分?jǐn)?shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他金屬。

不同采樣點(diǎn)間金屬質(zhì)量分?jǐn)?shù)的標(biāo)準(zhǔn)差結(jié)果顯示，金屬質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化程度存在空間差異，其中Pb和Zn的空間分布差異最大，質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍跨度最大，這與該場地主要污染物為鍍鋅廢水的情況一致。

從變異系數(shù)來看，Zn、Pb、Bi 3種重金屬的變異系數(shù)超過100%，存在較大差異，說明其來自人為污染的可能性較大。而其余金屬的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變異系數(shù)都小于1，說明各采樣點(diǎn)這些金屬含量的差異不大。

表1顯示，潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)最高的2種重金屬為Cd和Zn，尤其是Cd，質(zhì)量分?jǐn)?shù)相對不高但潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)最高，說明單一化學(xué)含量分析在評價(jià)生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)時(shí)不夠全面。不同采樣點(diǎn)間的綜合潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)差異較大。

2.1.2 源解析及特征污染物的變化

本研究分析了不同污染物、不同離子含量之間的相關(guān)性，結(jié)果如圖3所示。Zn與Mn、Pb、Bi和Cd的相關(guān)系數(shù)分別為0.89、0.94、0.94和0.67；Pb和Cd的相關(guān)系數(shù)為0.80；Ca與SO42-、Mg的相關(guān)系數(shù)分別為0.90和0.83。這些污染物之間存在正相關(guān)性（P＜0.01）。相關(guān)性較高的污染物具有相似的來源，但有些污染物間的相關(guān)性較差，如Cu、Sn與其他污染物均無顯著相關(guān)，這些污染物分別具有其獨(dú)特的污染源。

圖3 不同污染物含量與相對發(fā)光率的相關(guān)系數(shù)Fig.3 Correlation coefficients of different pollutants and relative luminous rate

對所檢測出的污染物成分進(jìn)行主成分分析，提取出5個(gè)主成分，如圖4所示。

主成分1來自生產(chǎn)廢水排放，載荷較高的組分有Mn、Zn、Pb和Bi，主成分1解釋了總方差的24.4%。主成分2為土壤本身來源，其中SO42-、Mg、Ca、Li這些地殼元素的載荷較高，解釋了總方差的18.8%。主成分3來自生產(chǎn)金屬鍍件碎屑，載荷較高的組分是Ni、Cu、As、Cd、Cr和V，解釋了總方差的18.0%。主成分4中Cl-、Na+的載荷因子較高，代表了土壤鹽分，解釋了總方差的9.3%。主成分5中載荷較高的組分包括溶解有機(jī)碳（dissolved organic carbon，DOC）、Th，代表了土壤有機(jī)物來源及地殼元素，解釋了總方差的8.2%。

圖4 污染土壤的主成分分析Fig.4 Principal component analysis of polluted soil

2.2 鍍鋅廢水污染土壤對發(fā)光細(xì)菌的急性毒性效應(yīng)

由于每個(gè)采樣點(diǎn)金屬含量不同，所以青海弧菌Q67的急性毒性表現(xiàn)也不相同[20]。本研究測得每個(gè)采樣點(diǎn)的相對發(fā)光率如圖5所示，毒性分級(jí)參照文獻(xiàn)[18]。由圖可知，各點(diǎn)位的相對發(fā)光率與綜合潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)（Pearson系數(shù)為-0.74，P＜0.01）。

由圖5～6可知，該場地中采樣點(diǎn)9的相對發(fā)光率為26.8%，即發(fā)光抑制率接近75%，表現(xiàn)出明顯的抑制效應(yīng)，也是唯一的“高毒”級(jí)別。點(diǎn)9距離廢水排放點(diǎn)最近，其水提樣品呈淺黃色，表明該點(diǎn)污染嚴(yán)重。點(diǎn)9兩側(cè)的點(diǎn)7和點(diǎn)11的毒性表現(xiàn)為中毒。點(diǎn)1、點(diǎn)2、點(diǎn)3等的毒性效應(yīng)接近，都呈現(xiàn)低毒。無毒性的點(diǎn)12呈現(xiàn)了明顯的低劑量毒物刺激效應(yīng)，相對發(fā)光率的最大值為其對照的111.0%。

圖5 各個(gè)采樣點(diǎn)的相對發(fā)光率和綜合潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)Fig.5 Relative luminous rate and comprehensive potential ecological risk index of each sampling position

圖6 該場地土壤毒性分級(jí)分布Fig.6 Graded distribution of soil toxicity at the site

2.3 鍍鋅廢水污染土壤主導(dǎo)污染物

2.3.1 鍍鋅廢水污染土壤污染因子與生物毒性相關(guān)性分析

各污染物含量與相對發(fā)光率的相關(guān)性分析結(jié)果見圖3。DOC、Zn、Bi、Pb、Mn、Cd、Ni、Cu、As等與相對發(fā)光率都呈負(fù)相關(guān)，隨著含量的升高，這些污染物會(huì)抑制發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光過程，說明其對細(xì)菌有毒害作用。其中，Zn、Mn、Cd以及DOC等污染物含量與相對發(fā)光率的相關(guān)系數(shù)更高，青?；【鶴67對Zn、Mn、Cd以及DOC等的響應(yīng)高于其他污染因子。

2.3.2 主導(dǎo)污染物鑒別

為了進(jìn)一步理清研究區(qū)土壤污染組分與青?；【鶴67相對發(fā)光率所表征的毒性關(guān)系，對不同污染因子和相對發(fā)光抑制率進(jìn)行逐步多元線性回歸，以獲知對毒性貢獻(xiàn)大的污染物組分，即鑒別出主導(dǎo)污染物。

回歸結(jié)果如表2所示。各采樣點(diǎn)中，Zn、Al和Cu對相對抑制率水平有顯著影響，其回歸方程可以解釋71%的發(fā)光抑制量（調(diào)整后R2為0.71），Zn對相對抑制率水平的影響更大，其次是Al，之后是Cu。由圖4可知，Zn是主成分1的組成元素，主成分1可能是工廠廢水的直接排放，因此發(fā)光細(xì)菌發(fā)光率降低的主要貢獻(xiàn)來自工廠廢水的排放。Al在主成分1和主成分3中都有較高的因子載荷，Cu在主成分3中是主要組成部分之一，而主成分3被認(rèn)為來自工廠廢水排放和金屬鍍件碎屑。因此，通過逐步多元回歸分析，推斷該場地的主導(dǎo)污染物主要是Zn、Al和Cu，即來自工廠廢水的直接排放和金屬鍍件碎屑。

表2 該場地土壤中化學(xué)組分與青海弧菌Q67相對發(fā)光抑制率間的逐步多元線性回歸Tab.2 Stepwise multiple linear regression between the chemical composition of soil in the study area and the relative luminous inhibition rate of Vibrio qinghaiensis sp.-Q67

3 討 論

3.1 鍍鋅廢水污染土壤有效態(tài)金屬含量及源解析

由表1可以看出，背景點(diǎn)Pb質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于部分采樣點(diǎn)，Pb是交通源的特征物，所以認(rèn)為背景點(diǎn)在一定程度上受交通源的影響較大。

提取的主成分1中，鍍鋅企業(yè)在生產(chǎn)過程中往往排放Zn、Pb等污染物。Bi最常用于替代Pb、Cd作為黃色噴漆以及與Pb、Sn組成合金[1]，在有氯離子的酸性溶液中被淋洗出來，代表了工廠生產(chǎn)廢水排放，尤其是原料或者輔料的偷排。

主成分2中載荷較高組分來源于土壤本身。值得注意的是Fe的載荷也比較高，代表了土壤和廢液污染的混合來源。

主成分3中，設(shè)備落后陳舊的鍍鋅生產(chǎn)過程中會(huì)釋放Cr、Ni等重金屬元素，因此，主成分3來源于工廠的生產(chǎn)廢水排放，更多是生產(chǎn)過程中金屬鍍件的磨損碎屑釋放。

主成分4中，考慮到該場地土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)少，因此來自土壤本身的鹽分[21]。

主成分5中，Th在我國土壤中的含量較高[22]，DOC來源于土壤中的有機(jī)物，例如腐殖質(zhì)等。因此，主成分5可能是土壤本身的有機(jī)物及地殼元素。

3.2 鍍鋅廢水污染土壤生態(tài)毒理效應(yīng)評估與生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評估的相關(guān)性

青?；【鶴67對于Zn的響應(yīng)較強(qiáng)，在馬曉妍[23]的研究中，將Zn2+作為青?；【鶴67的標(biāo)準(zhǔn)毒性物質(zhì)用于青海弧菌Q67急性毒性檢測過程的優(yōu)化，表明Zn2+對青?；【鶴67有良好的響應(yīng)關(guān)系；張博文等[24]的研究證明水體中所測得的Mn、Zn、Cu、As、Pb、Cd等重金屬與青?；【鶴67接觸的急性毒性存在S型劑量-效應(yīng)關(guān)系，Zn對這些因子的響應(yīng)值較高，因此本研究的測量結(jié)果印證了以Zn為主的復(fù)合重金屬污染的生物敏感性，表明本研究所建立的發(fā)光細(xì)菌法適用于含Zn的重金屬污染土壤。

圖5顯示，相對發(fā)光率越低的點(diǎn)位綜合潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)越大，青?；【鶴67的相對發(fā)光率和潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)法對于重金屬污染土壤的風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)具有一致性。在這種情況下，青海弧菌Q67可以用于重金屬污染土壤的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)。

3.3 不同表征方法的主導(dǎo)污染物鑒別

本研究結(jié)果表明，基于潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)鑒別風(fēng)險(xiǎn)最大的元素為Cd和Zn，其中Cd質(zhì)量分?jǐn)?shù)不高，但風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)較高，這與牛計(jì)偉等[25]的研究結(jié)果一致。造成這種情況的原因是Cd的元素釋放系數(shù)很高，所以在指數(shù)計(jì)算時(shí)，Cd的毒性系數(shù)是As的3倍、Pb的6倍、Zn的10倍[19]，因此Cd的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他元素。基于發(fā)光細(xì)菌法的主導(dǎo)污染物依次為Zn、Al和Cu，其中“Zn+Cu”體系對發(fā)光細(xì)菌的毒性具有協(xié)同作用[26]。

根據(jù)生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)（ecological risk assessment，ERA）程序，對該污染場地進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)綜合性評價(jià)，包括利用生物毒性評價(jià)污染物的暴露效應(yīng)和采用潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)評估生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。本研究發(fā)現(xiàn)，在評價(jià)的一致性上，發(fā)光細(xì)菌法與綜合潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)呈顯著相關(guān)，但在主導(dǎo)污染物的鑒別上秉持不同的篩選原則，即發(fā)光細(xì)菌法相較于潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)法，受到更多其他因素的影響，例如污染物之間的聯(lián)合作用等。因此生物毒性可以更綜合地反映土壤的實(shí)際生態(tài)毒性。與傳統(tǒng)的化學(xué)方法相比，發(fā)光細(xì)菌法可更綜合、快速地定量土壤的損害程度。

3.4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以鍍鋅廢水污染土壤為例進(jìn)行生物毒性效應(yīng)研究，結(jié)果表明，該污染場地存在重金屬復(fù)合污染，主要由生產(chǎn)廢水排放、金屬鍍件碎屑等污染因子造成?；诨瘜W(xué)濃度分析計(jì)算出的潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)和本研究所建立的發(fā)光細(xì)菌法在評價(jià)鍍鋅廢水污染土壤的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)方面具有一致性，但是發(fā)光細(xì)菌法能更加快速地評價(jià)污染場地的毒性水平和生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)排查出對毒性影響最大的主導(dǎo)污染物（Zn、Al和Cu）。發(fā)光細(xì)菌法有望在司法鑒定實(shí)踐中替代傳統(tǒng)化學(xué)方法，對鍍鋅廢水或其他重金屬污染土壤的生物急性毒性鑒定提供新的手段和思路。